專利名稱：一種菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，及含有該菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑的菠蘿蛋白酶組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
菠蘿蛋白酶是從菠蘿皮和菠蘿莖中提取到的一種蛋白酶，菠蘿蛋白酶的生產(chǎn)可解決菠蘿產(chǎn)業(yè)中大量廢料被丟棄造成的環(huán)境污染和資源浪費(fèi)問(wèn)題，還可使菠蘿產(chǎn)品高值化利用。由于菠蘿蛋白酶對(duì)環(huán)境條件的敏感性，在其生產(chǎn)過(guò)程中活性易丟失，使得生產(chǎn)效率降低。早在1892年Chittenden, R. H.就已發(fā)現(xiàn)菠蘿汁中含有能夠水解蛋白質(zhì)的物質(zhì)，隨著研究的深入，菠蘿蛋白酶的性質(zhì)和功能被進(jìn)一步認(rèn)識(shí)。菠蘿蛋白酶在食品、制藥、啤酒、化工、養(yǎng)殖等領(lǐng)域都具有廣泛的應(yīng)用，并且由于其獨(dú)特的醫(yī)療作用，成為蛋白酶研究中的熱點(diǎn)。近年菠蘿蛋白酶的需求量日益提高，市場(chǎng)前景良好。菠蘿蛋白酶來(lái)源于菠蘿皮和菠蘿莖，我國(guó) 每年菠蘿生產(chǎn)時(shí)副產(chǎn)60萬(wàn)噸菠蘿皮和菠蘿莖，只有少數(shù)菠蘿皮經(jīng)過(guò)榨汁后被干燥成飼料，而菠蘿皮汁只能丟棄，造成環(huán)境污染和資源浪費(fèi)。利用這些物料提取菠蘿蛋白酶是農(nóng)產(chǎn)品廢棄物高值化利用的好方法。在菠蘿蛋白酶的生產(chǎn)中，干燥工段是重要工段。因菠蘿酶對(duì)熱敏感、易被氧化等特性，大部分廠家通常選用冷凍干燥作為干燥工藝，但冷凍干燥工藝能耗高、投資高、效率低、生產(chǎn)成本高，嚴(yán)重制約著菠蘿酶工業(yè)的應(yīng)用與發(fā)展。在菠蘿酶生產(chǎn)中，有部分企業(yè)嘗試了噴霧干燥技術(shù)，但未取得成功，主要是酶活得率低，往往只有10 %的得率。有鑒于此，提供一種新型的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問(wèn)題，能夠保持菠蘿蛋白酶在生產(chǎn)過(guò)程中的穩(wěn)定性，尤其是噴霧干燥和熱泵干燥工藝中的穩(wěn)定性，提高產(chǎn)物的酶活得率，是本領(lǐng)域技術(shù)人員亟待解決的技術(shù)問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明所解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，能夠保持菠蘿蛋白酶在生產(chǎn)過(guò)程中的穩(wěn)定性，克服菠蘿蛋白酶對(duì)熱敏感、易氧化的缺點(diǎn)，適用于菠蘿蛋白酶產(chǎn)品的噴霧干燥或者熱泵干燥工藝，能夠顯著提高產(chǎn)物的酶活得率。為此，本發(fā)明提供的一種菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，用于菠蘿蛋白酶產(chǎn)品的噴霧干燥或者熱泵干燥工藝，其特征在于，包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂10 50%，
蔗糖2% 30%，
糊精10% 70%，
脫脂奶粉5% 50%。優(yōu)選地，本發(fā)明的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂30 50%，蔗糖10% 20%，
糊精30% 50%，
脫脂奶粉20% 40%。更優(yōu)地，本發(fā)明的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂40%，
鹿糖10%,
糊精30%，
脫脂奶粉20%。 另一方面，本發(fā)明所解決的技術(shù)問(wèn)題還在于提供一種菠蘿蛋白酶組合物，該組合物配方中的菠蘿蛋白酶具有良好的穩(wěn)定性，通過(guò)噴霧干燥或者熱泵干燥工藝制得的該組合物具有極高的酶活得率。為此，本發(fā)明提供的一種菠蘿蛋白酶組合物，該組合物通過(guò)噴霧干燥或者熱泵干燥工藝制得，該組合物中含有占組合物質(zhì)量109^30%的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂10 50%，
蔗糖2% 30%，
糊精10% 70%，
脫脂奶粉5% 50%。優(yōu)選地，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂30 50%，
蔗糖10% 20%，
糊精30% 50%，
脫脂奶粉20% 40%。更優(yōu)地，該組合物中含有占組合物質(zhì)量20%的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂40%，
鹿糖10%,
糊精30%，
脫脂奶粉20%。再則，本發(fā)明所解決的技術(shù)問(wèn)題還在于提供一種菠蘿蛋白酶組合物的制備方法，通過(guò)向菠蘿蛋白酶濃縮液中添加入本發(fā)明的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，并合理地控制好干燥工藝參數(shù)，顯著地提高了產(chǎn)物的酶活得率。作為方案之一，本發(fā)明的提供的一種菠蘿蛋白酶組合物的制備方法，包含預(yù)先制備菠蘿蛋白酶濃縮液，而后測(cè)定菠蘿蛋白酶濃縮液中固體物質(zhì)的含量，并根據(jù)此固體物質(zhì)的含量加入占最終菠蘿蛋白酶組合物質(zhì)量109^30%的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，再將此添加有菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑的濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度180°C，出風(fēng)溫度80°C，噴霧壓力14KPa ；
所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂10 50%，蔗糖2% 30%，
糊精10% 70%，
脫脂奶粉5% 50%。優(yōu)選地，菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑占最終菠蘿蛋白酶組合物質(zhì)量的20%，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂40%，
鹿糖10%,
糊精30%，
脫脂奶粉20%。作為方案之二，本發(fā)明提供的一種菠蘿蛋白酶組合物的制備方法，包含預(yù)先制備菠蘿蛋白酶濃縮液，而后測(cè)定菠蘿蛋白酶濃縮液中固體物質(zhì)的含量，并根據(jù)此固體物質(zhì)的含量加入占最終菠蘿蛋白酶組合物質(zhì)量109^30%的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，再將此添加有菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑的濃縮液進(jìn)行熱泵干燥，熱泵干燥條件為40°C，干燥8h ；
所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂10 50%，
蔗糖2% 30%，
糊精10% 70%，
脫脂奶粉5% 50%。優(yōu)選地，菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑占最終菠蘿蛋白酶組合物質(zhì)量的20%，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分
溶血卵磷脂40%，
鹿糖10%,
糊精30%，
脫脂奶粉20%。相比于現(xiàn)有技術(shù)，采用本發(fā)明的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，能夠保持菠蘿蛋白酶在生產(chǎn)過(guò)程中的穩(wěn)定性，克服菠蘿蛋白酶對(duì)熱敏感、易氧化的缺點(diǎn)，適用于菠蘿蛋白酶產(chǎn)品的噴霧干燥或者熱泵干燥工藝，能夠顯著提高產(chǎn)物的酶活得率；另外，本發(fā)明的菠蘿蛋白酶組合物的制備方法，通過(guò)向菠蘿蛋白酶濃縮液中添加入本發(fā)明的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)齊IJ，并合理地控制好干燥工藝參數(shù)，顯著地提高了產(chǎn)物的酶活得率。通過(guò)借助以下實(shí)施例將更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，需要指出地是，以下實(shí)施例僅是說(shuō)明性的，本發(fā)明并不受這些實(shí)施例的限制。
具體實(shí)施方式
:
實(shí)施例一制備菠蘿蛋白酶濃縮液
先將新鮮菠蘿置于4 °C預(yù)冷；然后進(jìn)行切塊并榨汁，榨汁迅速放入冰浴冷卻，將榨汁在8 000 r/min下離心5 min ;取上清液使用2 u m孔徑濾膜進(jìn)行預(yù)過(guò)濾得到粗酶液。使用100 k超濾膜包過(guò)濾粗酶液除去大分子蛋白；使用10 k超濾膜包進(jìn)行超濾濃縮，所得濃縮液-20 °C冷凍備用。其中，所用新鮮菠蘿來(lái)源于市售普通菠蘿，以八成熟的新鮮菠蘿為佳。所用設(shè)備10 k、100 k超濾膜包Pall公司；SD-1000噴霧干燥機(jī)EYELA公司；UV_2100紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)=UNIC公司。需要說(shuō)明的是，在本發(fā)明的各實(shí)驗(yàn)中所設(shè)計(jì)到的酶活的測(cè)定方法依據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)粵Q/ WS -1050-82《菠蘿蛋白酶》，以酪蛋白為底物，經(jīng)過(guò)菠蘿酶水解10 min后用三氯乙酸溶液終止反應(yīng)，并在275 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)水解產(chǎn)物酪氨酸的含量，從而計(jì)算出菠蘿蛋白酶的活力。而酶活得率的計(jì)算，則測(cè)定干燥前菠蘿酶濃縮液的比活力U。及干燥后酶粉的比活力Ud，并按下式進(jìn)行計(jì)算得出酶活得率
酶活得率=U0AJdXlOO %。另外，還需測(cè)定菠蘿蛋白酶濃縮液中固體物質(zhì)的含量，定量稱取菠蘿蛋白酶濃縮液于稱量瓶中在烘箱中以105 °C干燥3 h后在干燥器中冷卻，稱重，對(duì)比干燥前后重量變化算出菠蘿蛋白酶的含水量。以便在后續(xù)的干燥工藝中確定需在菠蘿蛋白酶濃縮液中添加的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑的用量。 實(shí)施例二菠蘿蛋白酶濃縮液的干燥
向菠蘿蛋白酶濃縮液中添加的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，并通過(guò)干燥工藝制得菠蘿蛋白酶組合物成品，以占最終菠蘿蛋白酶組合物質(zhì)量百分比計(jì)，按照表一中所列配方向菠蘿蛋白酶濃縮液中添加的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑。表一
權(quán)利要求
1.一種菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，用于菠蘿蛋白酶產(chǎn)品的噴霧干燥或者熱泵干燥工藝，其特征在于，包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂10 50%， 蔗糖2% 30%， 糊精10% 70%， 脫脂奶粉5% 50%。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂30 50%， 蔗糖10% 20%， 糊精30% 50%， 脫脂奶粉20% 40%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂40%， 鹿糖10%, 糊精30%， 脫脂奶粉20%。
4.一種菠蘿蛋白酶組合物，其特征在于，該組合物通過(guò)噴霧干燥或者熱泵干燥工藝制得，該組合物中含有占組合物質(zhì)量109^30%的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂10 50%， 蔗糖2% 30%， 糊精10% 70%， 脫脂奶粉5% 50%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂30 50%， 蔗糖10% 20%， 糊精30% 50%， 脫脂奶粉20% 40%。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于，該組合物中含有占組合物質(zhì)量20%的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂40%， 鹿糖10%, 糊精30%， 脫脂奶粉20%。
7.一種菠蘿蛋白酶組合物的制備方法，其特征在于，包含預(yù)先制備菠蘿蛋白酶濃縮液，而后測(cè)定菠蘿蛋白酶濃縮液中固體物質(zhì)的含量，并根據(jù)此固體物質(zhì)的含量加入占最終菠蘿蛋白酶組合物質(zhì)量109^30%的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，再將此添加有菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑的濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度180°C，出風(fēng)溫度80°C，噴霧壓力 14KPa ； 所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂10 50%， 蔗糖2% 30%， 糊精10% 70%， 脫脂奶粉5% 50%。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑占最終菠蘿蛋白酶組合物質(zhì)量的20%，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂40%， 鹿糖10%, 糊精30%， 脫脂奶粉20%。
9.一種菠蘿蛋白酶組合物的制備方法，其特征在于，包含預(yù)先制備菠蘿蛋白酶濃縮液，而后測(cè)定菠蘿蛋白酶濃縮液中固體物質(zhì)的含量，并根據(jù)此固體物質(zhì)的含量加入占最終菠蘿蛋白酶組合物質(zhì)量109^30%的菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，再將此添加有菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑的濃縮液進(jìn)行熱泵干燥，熱泵干燥條件為40°C，干燥8h ； 所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂10 50%， 蔗糖2% 30%， 糊精10% 70%， 脫脂奶粉5% 50%。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑占最終菠蘿蛋白酶組合物質(zhì)量的20%，所述菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑包含質(zhì)量百分比如下的成分 溶血卵磷脂40%， 鹿糖10%, 糊精30%， 脫脂奶粉20%。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑及添加有該菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑的菠蘿蛋白酶組合物。該菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，用于菠蘿蛋白酶產(chǎn)品的噴霧干燥或者熱泵干燥工藝，其特征在于，包含質(zhì)量百分比如下的成分溶血卵磷脂10~50%、蔗糖2%~30%、糊精10%~70%、脫脂奶粉5%~50%。另外，本發(fā)明還公開(kāi)了上述菠蘿蛋白酶組合物的制備方法。本發(fā)明菠蘿蛋白酶穩(wěn)定化保護(hù)劑，能夠保持菠蘿蛋白酶在生產(chǎn)過(guò)程中的穩(wěn)定性，克服菠蘿蛋白酶對(duì)熱敏感、易氧化的缺點(diǎn)，適用于菠蘿蛋白酶產(chǎn)品的噴霧干燥或者熱泵干燥工藝，能夠顯著提高產(chǎn)物的酶活得率。
文檔編號(hào)C12N9/50GK102703410SQ20121021582
公開(kāi)日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2012年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月28日
發(fā)明者曹昱, 謝丹青 申請(qǐng)人:廣東彼迪藥業(yè)有限公司, 徐聞縣眾緣生物科技發(fā)展有限公司