專利名稱：微生物檢測用四唑化合物、微生物檢測用試劑和微生物檢測方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種四唑化合物、含有該化合物的微生物檢測用試劑、以及微生物檢測方法。
背景技術：
以往的微生物檢驗，例如，按照如下所述來施行。首先，將粉末瓊脂培養(yǎng)基溶解、滅菌后保存在恒定的溫度下。將一定量的該瓊脂培養(yǎng)基，分注入于預先加入有一定量的食品懸浮液等檢驗試樣的滅菌皮氏培養(yǎng)皿等中進行混合稀釋。使混合稀釋后的瓊脂發(fā)生固化，通常培養(yǎng)24 48小時左右后，對生成的微生物的菌落數(shù)進行統(tǒng)計。如此地，以往的一般活菌檢驗方法，是需要提前配制培養(yǎng)基并在滅菌后保存在培養(yǎng)基不發(fā)生固化的溫度下備用等非常費時費力的方法。
另外，生產(chǎn)有對應各種目的而易于使用地制成的簡易培養(yǎng)基，例如，配制培養(yǎng)基省時省力的按壓類型(Stamp Type)(例如，參照專利文獻I)、過濾類型、膜(片)類型(例如，參照專利文獻2 4)、抑制微生物遷移而在培養(yǎng)器材表面形成菌落的類型(例如，參照專利文獻5)、試紙類型等。但是，對檢驗時間而言，與使用上述瓊脂培養(yǎng)基時相比沒有變化，需要24 48小時、或者在此以上的時間。另一方面，作為縮短檢驗時間的方法的例子，有如下方法對收集的菌進行短時間培養(yǎng)后，用表面活性劑、有機溶劑等從細胞中抽取來源于菌的腺苷三磷酸，并使其在熒光素酶的存在下與熒光素發(fā)生反應而發(fā)光，通過采用圖像分析器對其發(fā)光輝點進行檢測來測定活菌數(shù)(例如，參照專利文獻6)。但是，該方法需要特殊的測定設備，通常只能應用于不含固體物質(zhì)的液體試樣的檢驗中。作為無需特殊的測定設備的方法，公開了一種將培養(yǎng)的微生物、或生物試樣與色素原相接觸而通過色素原的顯色或者熒光信號來確認微生物存在的方法(例如，參照專利文獻7 9)。這種方法，若應用于例如食品中的微生物、血清、全血等生物試樣中的成分測定，則難以簡易且可靠地檢測作為對象的微生物、成分。其原因在于，未快速發(fā)生致使色素原得到顯色所必需的酶反應，或者有時會導致由色素原產(chǎn)生的色素的色與食品、生物試樣等色相似?，F(xiàn)有技術文獻專利文獻專利文獻I :日本特開平4-117299號公報專利文獻2 日本特公平2-49705號公報專利文獻3 :日本特開平3-15379號公報專利文獻4 :國際公開第2001/44437號小冊子專利文獻5 :國際公開第1997/24432號小冊子專利文獻6 :日本特開平4-30798號公報
專利文獻7 :日本特開2005-110638號公報專利文獻8 :日本特開2005-287452號公報專利文獻9 :日本特開2009-72136號公報
發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明要解決的課題在如上所述的狀況中，希望一種在用于無需特殊的設備而快速且可靠地檢測微生物的微生物檢測用試劑中使用的化合物、微生物檢測用試劑、以及微生物檢測方法。
解決課題的方法如下所述，本發(fā)明提供一種四唑化合物、含有四唑化合物的微生物檢測用試劑、以及微生物檢測方法。<1> 一種四唑化合物，其特征在于，其通過下式(I)表示，
權利要求
1.一種四唑化合物，其特征在于，其通過式(I)表示，
2.如權利要求I所述的四唑化合物，其中，在式(I)中，在R1和R2中的任一者是CV6烷氧基，并且另一者是氧。
3.如權利要求2所述的四唑化合物，其中，在式(I)中，R1是甲氧基，R2是氫，并且R3和R4中至少任一者是硝基。
4.如權利要求I所述的四唑化合物，其中，所述四唑化合物是2-(2-甲氧基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-苯基-四唑鹽、2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-苯基-四唑鹽、2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3，5 二苯基-四唑鹽、2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3- (4-甲氧基苯基)-5-苯基-四唑鹽或者2- (3-甲氧基苯基)-3- (4-硝基苯基)-5-苯基-四唑鹽。
5.一種微生物檢測用顯色試劑，其特征在于，其含有權利要求I至4中任一項所述的四唑化合物。
6.如權利要求5所述的微生物檢測用顯色試劑，其中，通過四唑化合物的還原而產(chǎn)生的甲臜色素的吸收波長范圍是400nm 420nm。
7.一種微生物檢測方法，其特征在于，其通過將權利要求5或6中任一項所述的顯色試劑與含有微生物的試樣相接觸而從四唑化合物產(chǎn)生甲臜色素，并根據(jù)該甲臜色素的顯色信號來檢測微生物。
8.如權利要求7所述的微生物檢測方法，其中，通過酶循環(huán)反應來增敏顯色信號。
全文摘要
本發(fā)明的課題在于提供一種在用于無需特殊設備而快速且可靠地檢測微生物的微生物檢測用試劑中使用的化合物、微生物檢測用試劑和微生物檢測方法。上述課題能夠采用下列通式(I)[式中的標記參照說明書中的定義]所示的四唑化合物、含有四唑化合物的微生物檢測用顯色試劑、或者使用了該顯色試劑的微生物檢測方法來解決，
文檔編號C12Q1/04GK102844308SQ20118001953
公開日2012年12月26日 申請日期2011年3月16日 優(yōu)先權日2010年4月19日
發(fā)明者恩地裕一, 牛山正志 申請人:Jnc株式會社