專利名稱：一種玉米活性小肽醒酒劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以玉米蛋白中提取的玉米肽為活性成分的醒酒劑，該玉米肽是分子量主要分布在200-1000Da的玉米活性小肽。
背景技術(shù)：
玉米蛋白粉是玉米生產(chǎn)淀粉的主要副產(chǎn)物，約含60%的蛋白質(zhì)，是一種資源豐富、 成本低廉的天然植物蛋白原料。我國每年可生產(chǎn)玉米蛋白粉數(shù)百萬噸，但由于玉米蛋白溶解性差、滋味不佳，目前多用作飼料，附加值極低。近年來，隨著生物技術(shù)的發(fā)展，作為玉米加工工業(yè)的副產(chǎn)品，玉米蛋白粉逐漸得到開發(fā)和利用。研究發(fā)現(xiàn)，玉米蛋白經(jīng)水解產(chǎn)生的玉米活性肽具有醒酒護(hù)肝、恢復(fù)體力、抗氧化等生理活性，可廣泛應(yīng)用于食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域， 具有較高的附加值。特別是分子量IOOODa以下的玉米活性小肽，富含谷氨酸、丙氨酸、脯氨酸和人體生命活動(dòng)所必需而自身不能合成的重要氨基酸等，在低熱高能飲品及保健食品領(lǐng)域也具有極高的實(shí)用價(jià)值。但目前國內(nèi)對玉米活性肽制備和應(yīng)用的研究幾乎都是停留在多肽的水平，而多肽與小肽相比，其吸收性和生理活性都有一定的差距。由于玉米活性小肽的制備工藝相對復(fù)雜、成本高，目前多停留在實(shí)驗(yàn)室階段，較難實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)，受到生產(chǎn)技術(shù)和成本等方面的制約，目前市售的具備明顯的解酒效果的玉米活性小肽飲品寥寥無幾。目前，玉米活性肽制備中難以克服的問題主要是1)玉米蛋白質(zhì)構(gòu)型空間較小， 結(jié)構(gòu)緊密且有較強(qiáng)的疏水性，不利于蛋白酶對其進(jìn)行水解。2、玉米蛋白粉中殘留了部分玉米油脂和大量色素，在生產(chǎn)過程中附著在設(shè)備上易發(fā)生堵塞，且最后獲得的玉米活性肽顏色較深，影響產(chǎn)品的質(zhì)量?；矛F(xiàn)行技術(shù)多為實(shí)驗(yàn)室自制的蛋白酶，需要經(jīng)過微生物培養(yǎng)和提取等復(fù)雜的步驟獲得，還有的需要固定化及激活等工藝，成本高，不利于玉米活性肽制劑的規(guī)?；a(chǎn)。4)現(xiàn)行方法提取的玉米活性肽分子量多為IOOODa以上，其吸收性和活性都不及分子量更小的玉米活性小肽(分子量200-1000Da)。5)玉米活性肽的口感偏苦，會(huì)降低大眾對飲料口感的接受。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種玉米活性小肽醒酒劑，它以特有工藝提取的納米玉米活性小肽作為活性組分，易被人體吸收，具有較高的醒能功能，克服現(xiàn)有玉米肽飲料存在的缺陷。本玉米活性小肽醒酒劑以玉米活性小肽為活性成分，含有調(diào)味劑或不含調(diào)味劑， 含有調(diào)味劑或不含調(diào)味劑，另含輔料，所述的玉米活性小肽中，分子量< IOOODa的小肽分子占70%以上，該玉米活性小肽來自用以下方法制得的玉米活性小肽濃縮液1)水洗玉米蛋白粉加10-15倍重量水，攪拌均勻，用食用小蘇打調(diào)節(jié)至pH 8. 5-9. 5，離心取沉淀，沉淀物加入15-20倍重量水，攪拌均勻，再離心，取沉淀物，即為經(jīng)水洗處理的玉米蛋白粉；
2)水解按固液比9% -13%的比例加入水，以玉米蛋白粉中所含的蛋白量計(jì)為底物的量， 按底物重量4-5%的加入Alcalase堿性蛋白酶，在pH 8_9、溫度50_60°C條件下進(jìn)行一段水解反應(yīng)150-180min ；然后pH 7-8，按所述底物重量1-3%加入Flavourzyme風(fēng)味蛋白酶和 Protamex復(fù)合蛋白酶，40_50°C下進(jìn)行二段水解反應(yīng)120_150min ；3)離心分離水解產(chǎn)物取上清液。先以1500rpm離心取上清液，再以15000rpm離心，取清液；4)超濾膜分離清液通過平均孔徑為0. 1 0. 2 μ m的聚丙烯中空纖維膜進(jìn)行第一級超濾膜分離， 控制超濾壓力0. 1-0. 15Mpa，回流比8-10 1，收集過膜液;將第一級超濾過膜液通過平均孔徑為0. 01 0. 02 μ m的改性聚砜中空纖維膜進(jìn)行第二級超濾膜分離，控制超濾壓力0.15-0. 25MPa，回流比8-10 1，收集過膜液，所得過膜液中主要為200-1000Da的玉米活性小肽分子；5)濃縮將得到的過膜液蒸發(fā)濃縮，得到肽含量為50_80g/L的玉米活性小肽濃縮液。所述Flavourzyme風(fēng)味蛋白酶與ftOtamex復(fù)合蛋白酶按重量比1 10-15組合復(fù)配。本發(fā)明所述玉米活性小肽醒酒劑是液體飲料劑，每100重量份飲料劑中，含有玉米活性小肽濃縮液20-60重量份，調(diào)味劑天然蘋果汁10-20重量份、輔料穩(wěn)定劑高甲氧基果膠0. 2-1重量份及檸檬酸鈉0. 2-1重量份，采用生產(chǎn)飲料的常規(guī)方法進(jìn)行加工和滅菌而得。所述飲料劑還含有調(diào)味劑檸檬酸0. 1-0. 3重量份、蘋果酸0. 1-0. 2重量份和/或 VcO. 05-0. 1 重量份。所述玉米活性小肽醒酒劑是軟膠囊劑，其中含有玉米活性小肽粉2-4重量份，輔料玉米胚芽油5-7重量，按軟膠囊劑常規(guī)制備方法制得；所述玉米活性小肽粉是由所述玉米活性小肽濃縮液經(jīng)噴霧干燥而得。所述軟膠囊劑還含有?；撬?-2重量份。所述玉米活性小肽醒酒劑是顆粒沖劑，顆粒沖劑含有玉米活性小肽粉2-5重量份、輔料環(huán)糊精4-7重量份和糖粉1-2重量份，按顆粒沖劑常規(guī)制備方法制得；所述玉米活性小肽粉是由玉米活性小肽濃縮液經(jīng)噴霧干燥而得。本發(fā)明醒酒劑中的活性成分是采用特有工藝提取的玉米活性小肽，分子量主要集中在200-1000Da，肽組成為以2_9肽為主，平均4_5肽，為納米級分子，分子直徑小于1納米，長度約十幾納米，可以在30秒內(nèi)迅速進(jìn)入血液發(fā)揮活性。本發(fā)明用這種納米級分子的玉米活性小肽富含解酒主要有效成分一丙氨酸和亮氨酸，制成飲料、顆粒劑或膠囊作為醒酒劑，可在飲酒后或飲酒前服用，小肽分子能迅速進(jìn)入血液，醒酒快速見效；除醒酒作用外， 本醒酒劑還具有護(hù)肝健身，恢復(fù)疲勞功能，可作為保健品長期飲(服)用，飲料劑口感好，顆粒劑和膠囊劑則便于外出時(shí)攜帶。本發(fā)明在玉米活性小肽的提取工藝中，先對玉米蛋白粉進(jìn)行兩次水洗和離心處理，洗去脂類、淀粉和部分殘留的色素等，玉米活性肽濃縮液顏色透亮，不會(huì)發(fā)黑發(fā)粘，調(diào)制出的飲料透明清涼，而且分離掉這些吸附性很強(qiáng)的殘留油脂，可避免后續(xù)步驟中濾布或超濾膜堵塞的現(xiàn)象。小蘇打(NaHCO3)不僅用于調(diào)節(jié)水洗后蛋白的堿性環(huán)境，并且可與玉米蛋白中的脂類形成絡(luò)合物，漂浮于上清表層，從而破壞玉米蛋白致密的空間結(jié)構(gòu)，使玉米蛋白與脂類、淀粉等組分結(jié)合力變?nèi)?，大部分玉米蛋白裸露出來，增加玉米蛋白的溶解性，可使下一步蛋白酶水解的水解度提?0%左右(由30%提高到40%左右)。水解產(chǎn)物采用兩級超濾，第一級超濾膜可將10萬Da以上的多肽分子全部被去除，只有少量10萬 5萬Da 之間的分子會(huì)殘留下來。第二級超濾膜直接截留除去6千Da以上的分子，只有小于6千Da 的分子進(jìn)入過膜濾液中，且其中以IOOODa以下的玉米小肽分子為主。采用兩級超濾可提高水解效率，并大大減小濾膜的負(fù)荷。本方法設(shè)備投資小，操作簡單，見效快，適于大規(guī)模生產(chǎn)和普及。


圖1是超濾系統(tǒng)如圖。圖2是玉米活性小肽的液相色譜圖。圖3是未飲用本醒酒劑的試驗(yàn)組酒后酒精測試值隨時(shí)間變化圖。圖4是飲用本醒酒劑試驗(yàn)組酒后的酒精測試值隨時(shí)間變化圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施1玉米活性小肽濃縮液的提取①玉米蛋白粉40kg(玉米蛋白粉中含有玉米蛋白60%，即底物為Mkg)，經(jīng)粉碎， 加水60kg，攪拌均勻，加食用小蘇打調(diào)節(jié)至pH 9. 5，攪拌30min, 1500rpm離心15min，取沉淀，加入20倍水，攪拌30min，1500rpm離心30min，取沉淀即為經(jīng)水洗的玉米蛋白粉。②一段水解將水洗后的玉米蛋白粉加入反應(yīng)罐中，按照固液比13%的比例加水，調(diào)節(jié)溫度至55°C，pH = 8. 5，加入Alcalase AF 2. 4L食品級蛋白酶1. 1kg，進(jìn)行一段水解反應(yīng)180min。③二段水解通過夾套冷水循環(huán)的方式調(diào)整反應(yīng)罐內(nèi)溫度到50°C，pH = 7. 5，加入食品級蛋白酶0. 36kg(由Flavourzyme風(fēng)味蛋白酶與ftOtamex復(fù)合蛋白酶按重量比 1 10-15組合復(fù)配而成)，進(jìn)行二段水解反應(yīng)，水解120min;④采用三足式離心機(jī)，在1500rpm離心分離，取上清液；用泵將濾液導(dǎo)入管式離心機(jī)，15000rpm離心，取上清液。⑤兩級超濾分離一級超濾膜組件采用串聯(lián)8組KJ-ESUF9050超濾膜(平均孔徑為0. 1 0. 2 μ m)， 濾柱徑高比為1 10，循環(huán)模式為外壓式；二級超濾膜組件采用串聯(lián)8組KJ-UF6040超濾膜(平均孔徑為0.01 0.02 μ m)，濾柱徑高比為1 10，循環(huán)模式為內(nèi)壓式。超濾系統(tǒng)如圖1，一級原料液貯罐I內(nèi)貯有來自步驟④獲得的水解上清液(下稱一級原液)。在泵Bl作用下，貯罐I的一級原液通過閥F1、閥F2，進(jìn)入第一級超濾膜組件Cl， 控制超濾壓力0. 1-0. 15MPa ；第一級超濾膜組件Cl中的透過液通過閥F7、m匯聚到二級原料液貯罐II中；透余液通過閥F3、F4回流至一級原料液貯罐I，調(diào)節(jié)F4的開度，控制回流比為8-10 1。在原料泵B2作用下，二級原料液貯罐II中的液體(下稱二級原液)通過閥 KU K2進(jìn)入第二級超濾膜組件C2，控制超濾壓力0. 15-0. 25MPa，通過閥K3的出料口流出，流出液中的玉米肽主要為小于IOOODa的小肽分子；透余液通過閥K7、K4回流至貯罐II，調(diào)節(jié)Κ4的開度，控制回流比為8-10 1。F5、K5分別為排污閥，F(xiàn)6、K6分別為副線調(diào)節(jié)閥。⑥蒸發(fā)濃縮將最后獲得的過膜液導(dǎo)入三效降膜蒸發(fā)器內(nèi)進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液的肽含量達(dá)到 80g/L，獲得玉米活性小肽濃縮液200L。所得玉米活性小肽濃縮液用高效液相色譜法測試測試條件為使用凝膠層析柱，流動(dòng)相為乙腈-水-三氟乙酸(10 90 0.05)， 流速IOmL · mirT1，紫外檢測器于214nm測得洗脫圖譜如圖1所示。譜圖名色譜\T2000P_玉米活性小肽濃縮液；方法名面積歸一法。所測樣品對應(yīng)于圖1中不同的保留時(shí)間所得到的相對分子量列于表1。表 權(quán)利要求
1.一種玉米活性小肽醒酒劑，以玉米活性小肽為活性成分，含有調(diào)味劑或不含調(diào)味劑， 另含輔料，所述的玉米活性小肽中，分子量< IOOODa的小肽分子占70%以上，該玉米活性小肽來自用以下方法制得的玉米活性小肽濃縮液1)水洗玉米蛋白粉加10-15倍重量水，攪拌均勻，用食用小蘇打調(diào)節(jié)至pH 8. 5-9.5，離心取沉淀，沉淀物加入15-20倍重量水，攪拌均勻，再離心，取沉淀物，即為經(jīng)水洗處理的玉米蛋白粉；2)水解按固液比9% -13%的比例加入水，按玉米蛋白粉中玉米蛋白重量的4-5%加入 Alcalase堿性蛋白酶，在pH 8-9、溫度50-60°C條件下進(jìn)行一段水解反應(yīng)150-180min ；然后 PH 7-8，按所述玉米蛋白重量的1-3%加入Flavourzyme風(fēng)味蛋白酶和ftOtamex復(fù)合蛋白酶，40-50°C下進(jìn)行二段水解反應(yīng)120-150min ；3)離心分離水解產(chǎn)物離心，取上清液；4)超濾膜分離清液通過平均孔徑為0. 1 0. 2μπι的聚丙烯中空纖維膜進(jìn)行第一級超濾膜分離，控制超濾壓力0. 1-0. 15Mpa，回流比8-10 1，收集過膜液;將第一級超濾過膜液通過平均孔徑為0. 01 0. 02 μ m的改性聚砜中空纖維膜進(jìn)行第二級超濾膜分離，控制超濾壓力0.15-0. 25MPa，回流比8-10 1，收集過膜液，所得過膜液中主要為200-1000Da的玉米活性小肽分子；5)濃縮將得到的過膜液蒸發(fā)濃縮，得到肽含量為50-80g/L的玉米活性小肽濃縮液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玉米活性小肽醒酒劑，其特征是步驟幻所述Flavourzyme風(fēng)味蛋白酶與ftOtamex復(fù)合蛋白酶按重量比1 10-15組合復(fù)配。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玉米活性小肽醒酒劑，其特征是步驟幻中，離心分離包括先以1500rpm離心取上清液，再以15000rpm離心，取上清液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玉米活性小肽醒酒劑，其特征是液體飲料劑，每100重量份飲料劑中，含有玉米活性小肽濃縮液20-60重量份、調(diào)味劑天然蘋果汁10-20重量份、輔料穩(wěn)定劑高甲氧基果膠0. 2-1重量份及檸檬酸鈉0. 2-1重量份，采用生產(chǎn)飲料的常規(guī)方法進(jìn)行加工和滅菌而得。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的玉米活性小肽醒酒劑，其特征是所述飲料劑還含有調(diào)味劑檸檬酸0. 1-0. 3重量份、蘋果酸0. 1-0. 2重量份和/或VcO. 05-0. 1重量份。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玉米活性小肽醒酒劑，其特征是軟膠囊劑，其中含有玉米活性小肽粉2-4重量份，輔料玉米胚芽油5-7重量，按軟膠囊劑常規(guī)制備方法制得；所述玉米活性小肽粉是由所述玉米活性小肽濃縮液經(jīng)噴霧干燥而得。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的玉米活性小肽醒酒劑，其特征是還含有牛磺酸1-2重量份。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玉米活性小肽醒酒劑，其特征是顆粒沖劑，含有玉米活性小肽粉2-5重量份、輔料環(huán)糊精4-7重量份和糖粉1-2重量份，按顆粒沖劑常規(guī)制備方法制得；所述玉米活性小肽粉是由玉米活性小肽濃縮液經(jīng)噴霧干燥而得。
全文摘要
本發(fā)明一種玉米活性小肽醒酒劑，以玉米活性小肽為活性成分；玉米活性小肽中，分子量≤1000Da的小肽分子占70％以上，由玉米蛋白粉經(jīng)水洗、酶水解，水解產(chǎn)物離心，清液經(jīng)第一次膜分離除去10萬Da以上的多肽分子，第二次膜分離直接截留除去6千Da以上的分子，只有小于6千Da的分子進(jìn)入過膜濾液中，且其中以1000Da以下的玉米小肽分子為主，肽組成為以2-9肽為主，平均4-5肽，為納米級分子，分子直徑小于1納米，長度約十幾納米，可以在30秒內(nèi)迅速進(jìn)入血液發(fā)揮活性。飲酒后或飲酒前服用本醒酒劑，可快速見效。
文檔編號A23J3/14GK102172293SQ20111003753
公開日2011年9月7日 申請日期2011年2月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月14日
發(fā)明者趙利紅 申請人:南京肽谷生物工程有限公司