專利名稱：不對稱還原制備(r)-1,3-丁二醇的方法及菌株的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株產(chǎn)羰基還原酶新菌株一克魯斯假絲酵母(CandidakruseDZJB 09162，及其在催化不對稱還原4-羥基-2- 丁酮制備(R) _1，3- 丁二醇中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
(R)-l，3_ 丁二醇，又可記作(R)-1，3_BD0 (結(jié)構(gòu)見式(I))，是一種無色粘稠狀，帶甜味液體，能與水、乙醇、丙酮、丁酮等混溶。(R)_l，3-丁二醇是一種具有廣泛用途的重要手性砌塊，如在醫(yī)藥領(lǐng)域用于合成碳青霉烯類抗生素母核氮雜環(huán)丁酮，在農(nóng)藥領(lǐng)域用于合成殺蟲劑和信息激素，同時它也是合成一大類香料的重要中間體。因此，開展(R)_l，3-丁二醇合成研究具有重要的實際應(yīng)用價值。
權(quán)利要求
1.一株產(chǎn)羰基還原酶菌株一克魯斯假絲酵母(Candida krusei)ZJB 09162，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址中國，武漢，武漢大學(xué)，430072，保藏編號CCTCC No =M 2010335，保藏日期2010年12月6日。
2.如權(quán)利要求1所述的克魯斯假絲酵母ZJB09162在不對稱還原4-羥基-2-丁酮制備(R)-l，3-丁二醇中的應(yīng)用。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述應(yīng)用為以4-羥基-2-丁酮為底物，以克魯斯假絲酵母ZJB 09162經(jīng)培養(yǎng)獲得的含酶菌體細(xì)胞為催化劑，在20 45°C下，于pH 6. 0 9. 0的緩沖液中進(jìn)行不對稱加氫還原反應(yīng)8 36h，反應(yīng)結(jié)束后反應(yīng)液經(jīng)分離純化得到所述(R)-1，3-丁二醇。
4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述緩沖液中還添加有20 100g/L緩沖液的輔助底物，所述輔助底物為下列之一①葡萄糖、②乳糖、③蔗糖、④木糖、⑤果糖、⑥麥芽糖、⑦異丙醇、⑧乙醇、⑨丙三醇。
5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述緩沖液為下列之一pH6. 0 6. 6的檸檬酸緩沖液、pH 6. 5 7. 8的磷酸鹽緩沖液或pH 7. 4 9. 0的Tris-HCl緩沖液。
6.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述緩沖液中底物初始濃度為5 30g/L。
7.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述含酶菌體細(xì)胞由如下方法獲得將克魯斯假絲酵母ZJB 09162接種至發(fā)酵培養(yǎng)基，在25 43°C、100 300rpm下培養(yǎng)M 72h，得到發(fā)酵液離心分離，即得到所述含酶菌體細(xì)胞；所述發(fā)酵培養(yǎng)基終濃度組成如下葡萄糖 10 60g/L，酵母膏 10 50g/L, MgSO4O. 2 1. 5g/L, (NH4)2HPO4O. 5 3. 5g/L, KH2PO4O. 5 3. 5g/L，溶劑為水，pH 5. 5 8. 5。
全文摘要
本發(fā)明提供了一株產(chǎn)羰基還原酶新菌株——克魯斯假絲酵母(Candida krusei)ZJB 09162，及其在催化不對稱還原4-羥基-2-丁酮制備(R)-1，3-丁二醇中的應(yīng)用。該菌株保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址中國，武漢，武漢大學(xué)，430072，保藏編號CCTCC NoM 2010335，保藏日期2010年12月6日。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在提供了一種產(chǎn)4-羥基-2-丁酮羰基還原酶的新菌種，通過該菌種可制備高光學(xué)純度的(R)-1，3-丁二醇，轉(zhuǎn)化率＞90％，光學(xué)純度＞99％；使用本發(fā)明的不對稱還原工藝，反應(yīng)條件溫和，節(jié)能，環(huán)保，更重要的是顯著提高了過程的原子經(jīng)濟(jì)性，具有很好的工業(yè)應(yīng)用前景。
文檔編號C12R1/72GK102154133SQ20111003066
公開日2011年8月17日 申請日期2011年1月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月27日
發(fā)明者沈寅初, 邱照寬, 鄭仁朝, 鄭裕國 申請人:浙江工業(yè)大學(xué)