專利名稱：一種防治辣椒疫病的短芽孢桿菌及生物制劑的制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物農(nóng)藥防治技術(shù)，特別涉及一種防治辣椒疫病的短芽孢桿菌及生物制劑的制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
辣椒疫病是由辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)引起的一種世界性土傳病害， 發(fā)病較輕的田塊病株率為15 30%，造成產(chǎn)量損失為20 25%，嚴(yán)重的田塊損失在50% 以上，甚至絕收。近年來(lái)隨著保護(hù)地辣椒種植面積的增加，辣椒疫病的發(fā)生有逐年加重的趨勢(shì)。目前生產(chǎn)中尚無(wú)理想的抗病品種，病害的防治主要依賴于化學(xué)藥劑，長(zhǎng)期單一使用甲霜靈等同類藥劑，使辣椒疫霉的藥劑抗藥性顯著提高，且化學(xué)農(nóng)藥對(duì)生態(tài)環(huán)境和人類健康造成危害，生防菌及其次生代謝產(chǎn)物對(duì)環(huán)境友好，有利于農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展成為防治植物病害的重要手段。從辣椒疫霉生存的土壤環(huán)境中分離和篩選生防菌株是辣椒疫病生物防治技術(shù)產(chǎn)品開發(fā)的主要途徑。短芽孢桿菌屬(Brevibacillus)的一些菌株，如短短芽孢桿菌 (Brevibacillusbrevs)具有廣譜抗菌活性，其分泌的抗菌物質(zhì)包括短桿菌肽S、脂肽類、磷脂類、多烯類和氨基酸類等多種化合物，它們具有抑制真菌、細(xì)菌、病毒和菌原體等作用，是植物病害生防功能的重要組成部分，其抑菌機(jī)理包括拮抗、競(jìng)爭(zhēng)、溶菌、誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性等。目前關(guān)于短短芽孢桿菌生物防治的研究主要處于分離篩選及離體抑菌活性測(cè)定階段，尚無(wú)用于辣椒生產(chǎn)的生防菌制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，提供一種防治辣椒疫病的細(xì)菌。本發(fā)明的另一目的在于提供包含上述防治辣椒疫病的細(xì)菌的發(fā)酵液干燥物的生物制劑及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種防治辣椒疫病的細(xì)菌，名稱為短芽孢桿菌Brevibacillus sp. 26-13，于2011年1月8日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心 (CCTCC，湖北武漢大學(xué)內(nèi))，保藏編號(hào)為CCTCC M 2011009 ；所述的短芽孢桿菌26-13的形態(tài)及生理生化特性桿狀，(0. 7 0. 9) μ mX (3 5) μπι，革蘭氏陽(yáng)性，以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)，在膨大孢囊內(nèi)含橢圓形芽孢，菌落平、光滑、黃灰色、 無(wú)可溶性色素，可使淀粉水解，氧化酶和硝酸鹽還原為陰性，可利用葡萄糖、半乳糖、甘露糖和蔗糖。所述的短芽孢桿菌26-13的16S rDNA序列在GeneBank與Brevibacillus sp. DYJL-F比對(duì)，同源率100%，系統(tǒng)發(fā)育樹與Brevibacillus sp. DYJL-F聚為一枝，但其形態(tài)有一定的差異；
所述的短芽孢桿菌26-13根據(jù)其形態(tài)、生理生化特征及16S rDNA序列分析，故命名為 Brevibacillus sp. 26-13 ；一種防治辣椒疫病的生物制劑，含有上述短芽孢桿菌沈-13的發(fā)酵液干燥物；該發(fā)酵液干燥物包括短芽孢桿菌26-13的菌體和代謝物；


所述防治辣椒疫病的生物制劑還含有載體和保護(hù)劑；
所述的載體為滑石粉、高嶺土、粘土、膨潤(rùn)土、硅藻土或陶土中的至少一種；
所述的保護(hù)劑為可溶性淀粉、糊精、蔗糖或谷氨酸中的至少一種；
所述的防治辣椒疫病的生物制劑，更優(yōu)選為包含以下按質(zhì)量百分比計(jì)的成分
短芽孢桿菌沈-13的發(fā)酵液干燥物 3. 0 6. 0%
可溶性淀粉0.5 1.0%
糊精1 2%
蔗糖1 2%
谷氨酸鈉0.2 0.5%;
所述的短芽孢桿菌26-13的發(fā)酵液干燥物的制備方法包括以下步驟 (1)菌種活化在滅菌的NA培養(yǎng)基中接入短芽孢桿菌26-13進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)；搖瓶培養(yǎng)條件如下30 32°C，轉(zhuǎn)速為160 200轉(zhuǎn)/min、培養(yǎng)時(shí)間為12 18小時(shí)；得到活化的菌種；NA培養(yǎng)基的組成為每升含有牛肉膏3g、酵母膏l(xiāng)g、蛋白胨5g、葡萄糖10g，水定容至 IOOOmL, pH 為 7. 2 7. 4 ；(2)菌體的大量繁殖連續(xù)放大發(fā)酵，首先將步驟(1)得到的活化的菌種按接種量為發(fā)酵培養(yǎng)基體積的8 10%接種入100L發(fā)酵罐，發(fā)酵16 20h后，將100L發(fā)酵罐的短芽孢桿菌沈-13發(fā)酵液轉(zhuǎn)至1000L發(fā)酵罐中，補(bǔ)充發(fā)酵培養(yǎng)基，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)M 30h ；整個(gè)發(fā)酵過(guò)程的發(fā)酵條件為發(fā)酵培養(yǎng)基為L(zhǎng)A培養(yǎng)基，裝液量為發(fā)酵罐體積的70%，泡敵量為0. 05 0. 1 %，初始pH為7. 0 7. 2，發(fā)酵溫度30 32°C ；LA培養(yǎng)基的組成為每升含有玉米淀粉3g、大豆蛋白粉15g、玉米漿25g、MnSO4 0. 0308mg、K2HPO4 3g、KH2PO4 1. 5g、MgSO4 0. 5g、FeSO4 0. lg、CaCO3Ig,水定容至 lOOOmL， pH7. 0 ；(3)短芽孢桿菌沈-13的發(fā)酵液干燥物的制備將步驟( 得到的發(fā)酵液進(jìn)行噴霧干燥，得到發(fā)酵液干燥物。步驟(3)中所述的噴霧干燥的優(yōu)選條件為溫度為60 70 、ν$= 14 16m3/ min 禾口 V噴嘴=43 ；所述防治辣椒疫病的生物制劑的制備方法，包括以下步驟將短芽孢桿菌 Bacullices sp. 26-13發(fā)酵液干燥物與載體和保護(hù)劑混和得到；更優(yōu)選混合后干燥至水分相對(duì)濕度小于10%、粉碎，得到防治辣椒疫病的生物制劑。所述防治辣椒疫病的生物制劑的使用方法可以是拌種或淋施，也可以是噴霧；所述防治辣椒疫病的生物制劑的使用時(shí)期是辣椒苗期和/或成株期。本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果(1)本發(fā)明所述的防治辣椒疫病的生物制劑對(duì)環(huán)境友好，無(wú)農(nóng)藥殘留問(wèn)題，成本較低，生產(chǎn)工藝先進(jìn)等特點(diǎn)；
(2)本發(fā)明所制成的防治辣椒疫病的生物制劑稀釋400X防治辣椒疫病的防治效果達(dá)到85%以上。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。實(shí)施例1(1)細(xì)菌的分離采用平皿稀釋法分離分離采自廣東廣州市天河區(qū)五山的菜地土壤的細(xì)菌，將土壤樣品用無(wú)菌水稀釋成川入川人川人川入川…梯度濃度。NA固體培養(yǎng)基(牛肉膏3g、酵母膏l(xiāng)g、蛋白胨5g、葡萄糖10g，瓊脂18g，水定容至1000mL，pH為7. 2 7. 4)滅菌后倒入9cm 平皿中(每皿約15mL)。用移液管每濃度移取0. Iml放入每皿中，用涂布棒均勻涂布，每濃度重復(fù)10皿，30-32°C下培養(yǎng)M-30h后，選取每皿生長(zhǎng)10-30個(gè)細(xì)菌菌落的平皿進(jìn)行挑取， 無(wú)菌操作抑制NA試管斜面，30-32 °C培養(yǎng)M_30h后保存?zhèn)溆谩?2)防治辣椒疫病的細(xì)菌的篩選將步驟(1)分離得到的細(xì)菌進(jìn)行篩選，采用對(duì)峙培養(yǎng)法。將滅菌好的V8固體培養(yǎng)基(V8固體培養(yǎng)基組分為美國(guó)進(jìn)口 V8蔬菜汁lOOmL，CaCO3 0. 2g，瓊脂18g，水定容至 IOOOmL)倒入9cm的平皿中(每皿約15mL)，冷卻后，將生長(zhǎng)的好的辣椒疫霉菌(辣椒抗疫病鑒定方法初探，天津農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，16 (5) =100-103)的瓊脂塊(6mm)放在平皿，2648°C 培養(yǎng)24h后，將分離得到的細(xì)菌用移植環(huán)挑取后點(diǎn)在距病菌瓊脂塊3cm處，2648°C培養(yǎng)培養(yǎng)7 后，觀察辣椒疫霉病菌的生長(zhǎng)情況。如細(xì)菌對(duì)病菌有抑制作用，則有明顯的抑菌帶； 如細(xì)菌對(duì)病菌無(wú)抑制作用，則無(wú)抑菌帶。篩選得到一株對(duì)辣椒疫病菌具有明顯的抑制作用，抑菌帶寬度為1. 72cm，稱為細(xì)菌 26-13o(3)形態(tài)及生理生化特征采用NA培養(yǎng)基平皿，將所述細(xì)菌26-13通過(guò)稀釋平皿法和劃線法進(jìn)行純化，與 32 35°C條件下培養(yǎng)1 Mh，并進(jìn)行革蘭氏染色及菌體形態(tài)和菌落特征觀察；參照張紀(jì)忠(1990)的方法進(jìn)行需氧試驗(yàn)、碳源利用試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)。
得到的觀察檢測(cè)結(jié)果為桿狀，0.7 0.9 μ mX3 5 μ m，革蘭氏陽(yáng)性，以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)，在膨大孢囊內(nèi)含橢圓形芽孢，菌落平、光滑、黃灰色、無(wú)可溶性色素，可使淀粉水解，氧化酶和硝酸鹽還原為陰性，可利用葡萄糖、半乳糖、甘露糖和蔗糖。(2) 16S rDNA 序列分析采用細(xì)菌通用16S rRNA 擴(kuò)增引物序列 27F (5，-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3，)、 1492R(5，-GGTTACCTTGTTACGACTT-3，)擴(kuò)增16S rRNA基因片段，擴(kuò)增產(chǎn)物由英濰捷基(上海)貿(mào)易有限公司測(cè)序后，將所測(cè)的16SrDNA(如下所示，1391bp)序列與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中所有已測(cè)定的原核生物16S rDNA序列進(jìn)行比較，得出細(xì)菌沈-13系統(tǒng)發(fā)育地位。1 AGTCGAGCGA GGGTCTTCGG ACCCTAGCGG CGGACGGGTG AGTAACACGT AGGCAACCTG61 CCTCTCAGAC TGGGATAACA TAGGGAAACT TATGCTAATA CCGGATAGGT TTTTGGATCG121 CATGATCCGA AAAGAAAAGA TGGCTTCGGC TATCACTGGG AGATGGGCCT GCGGCGCATT181 AGCTAGTTGG TGGGGTAACG GCCTACCAAG GCGACGATGC GTAGCCGACC TGAGAGGGTG
241ACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAAT
301TTTCCACAATGGACGAMGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAACGATGAAGGTCTTCGGA
361TTGTAAAGTTCTGTTGTTAGGGACGMTAAGTACCGTTCGAATAGGGCGGTACCTTGACG
421GTACCTGACGAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGG
481CMGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGCGGCTATGTAAGTCTGGTG
541TTAAAGCCCGGAGCTCMCTCCGGTTCGCATCGGMACTGTGTAGCTTGAGTGCAGAAGA
601GGAAAGCGGTATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACACCAGTGG
661CGAAGGCGGCTTTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAG
721GATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAGGTGTTGGGGGTTTCM
781TACCCTCAGTGCCGCAGCTAACGCAATAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGCTCGCAAGAG
841TGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTMTTCGA
901AGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCCGCTGACCGCTCTGGAGACAGAGCT
961TCCCTTCGGGGCAGCGGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATG
1021TTGGGTTAAGTCCCGCMCGAGCGCMCCCTTATCTTTAGTTGCCAGCATTCAGTTGGGC
1081ACTCTAGAGAGACTGCCGTCGACAAGACGGAGGAAGGCGGGGATGACGTCAAATCATCAT
1141GCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGTTGGTACAACGGGATGCTACCTC
1201GCGAGAGGACGCCAATCTCTTAAAACCAATCTCAGTTCGGATTGTAGGCTGCAACTCGCC
1261TACATGMGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCG
1321GGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCACGGGAGTTTGCAACACCCGAAGTCGGTGAGGT
1381AACCGCAAGGA
所述細(xì)菌 26-13 的 16S rDNA 序列在 GeneBank 與 Brevibacillus sp. DYJL-F 比
對(duì)，同源率100%，系統(tǒng)發(fā)育樹與Brevibacillus sp. DYJL-F聚為一枝，但其形態(tài)有一定的
差異；所述短芽孢桿菌沈-13根據(jù)其形態(tài)、生理生化特征及16S rDNA序列分析，故命名為短芽孢桿菌 Brevibacillus sp. 26-13。實(shí)施例2短芽孢桿菌沈-13生物制劑制備(1)菌種的活化配制NA培養(yǎng)基(每升的組成為牛肉膏3g、酵母膏l(xiāng)g、蛋白胨 5g、葡萄糖10g，水定容至1000mL，pH為7. 2 7. 4)后，每個(gè)規(guī)格為500mL的三角瓶中裝NA 培養(yǎng)基lOOmL，121滅菌15min。在滅菌的NA培養(yǎng)基中接入短芽孢桿菌沈_13進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)；搖瓶培養(yǎng)條件如下30 32°C，轉(zhuǎn)速為160 200轉(zhuǎn)/min、培養(yǎng)時(shí)間為15小時(shí)；得到活化的菌種；(2)菌體的大量繁殖，為連續(xù)放大發(fā)酵過(guò)程。首先應(yīng)用100L的發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵液為L(zhǎng)A培養(yǎng)基(每升的組成為玉米淀粉 3g、大豆蛋白粉 15g、玉米漿 25g、MnSO4 0. 0308mg、K2HPO4 3g、KH2PO4 1. 5g、MgSO4 0. 5g、 FeSO4 0. IgXaCO3 lg，水定容至1000mL，pH7. 0)，裝液量為70L，將步驟(1)得到的活化的菌液9L接種至100L發(fā)酵罐，泡敵量(體積百分比)為0. 08 %，初始pH為7. 2，發(fā)酵溫度30 32°C、發(fā)酵培養(yǎng)18小時(shí)；然后將100L發(fā)酵罐的短芽孢桿菌26-13發(fā)酵液轉(zhuǎn)至1000L發(fā)酵罐中，發(fā)酵溫度30 32 °C、發(fā)酵培養(yǎng)^h ；
(3)防治辣椒疫病的生物制劑的制備利用噴霧干燥儀將步驟(2)得到的發(fā)酵液進(jìn)行噴霧干燥(溫度為60 70°C、Vs ^= 14 16m7min和Veffi=中速)，得到發(fā)酵液干燥物，將發(fā)酵液干燥物、載體和保護(hù)劑進(jìn)行混和，具體組成為發(fā)酵液干燥物5% wt、可溶性淀粉0. 8% wt、糊精1. 5% wt、蔗糖1. 5% wt、谷氨酸鈉0. 4% wt、滑石粉20% wt和粘土 70. 8% Wt0然后干燥至水分相對(duì)濕度小于 10 %、粉碎，得到防治辣椒疫病的生物制劑。實(shí)施例3短芽孢桿菌沈-13生物制劑防治辣椒疫病試驗(yàn)(1)生物制劑實(shí)施例3獲得的生物制劑，菌體含量約為5X IO11CFU/克。(2)辣椒疫霉病菌游動(dòng)孢子懸浮液將辣椒疫霉病菌接種至V8培養(yǎng)液(V8蔬菜汁 IOOmLjCaCO3 0. 2g，水定容至IOOOmL)中，沈 培養(yǎng)5 7天，過(guò)濾菌絲得到孢子懸浮液，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)并稀釋至濃度800cfu/mL。(3)溫室試驗(yàn)在溫室08 30°C )培養(yǎng)辣椒苗，直至辣椒苗長(zhǎng)至3片葉。試驗(yàn)前 1天對(duì)供試?yán)苯访邕M(jìn)行充分灌水，保持基質(zhì)濕潤(rùn)。用實(shí)施例2獲得的短芽孢桿菌沈-13生物制劑400X、800X、1200X噴霧和淋根處理，以50%烯酰嗎啉可濕性粉劑2000倍液為對(duì)照藥劑，清水噴霧為空白對(duì)照(CK)，晾干，用辣椒疫病菌游動(dòng)孢子懸浮液(濃度為SOOcfu/ mL)進(jìn)行接種，接種時(shí)用針在幼苗莖接近基質(zhì)表面處刺小孔，將IOmL的游動(dòng)孢子懸浮液注入，接種后保濕12h，每處理為30棵苗，每處理重復(fù)三次，28-30°C培養(yǎng)7天后調(diào)查葉發(fā)病情況，記錄病株數(shù)、死株數(shù)或明顯枯萎的植株數(shù)，計(jì)算發(fā)病率和防治效果(表1)。表1短芽孢桿菌沈-13生物制劑防治辣椒疫病試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種防治辣椒疫病的細(xì)菌，其特征在于名稱為短芽孢桿菌 (BrevikiCilluSSp.U6-13，于2011年1月8日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為 CCTCC M 2011009。
2.一種防治辣椒疫病的生物制劑，含有權(quán)利要求1所述的短芽孢桿菌沈-13的發(fā)酵液干燥物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的防治辣椒疫病的生物制劑，其特征在于還含有載體和保護(hù)劑；所述的載體為滑石粉、高嶺土、粘土、膨潤(rùn)土、硅藻土或陶土中的至少一種；所述的保護(hù)劑為可溶性淀粉、糊精、蔗糖或谷氨酸中的至少一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的防治辣椒疫病的生物制劑，其特征在于包含以下按質(zhì)量百分比計(jì)的成分短芽孢桿菌沈-13的發(fā)酵液干燥物 3. 0 6. 0%可溶性淀粉0.5 1.0%糊精1 2%蔗糖1 2%谷氨酸鈉0.2 0.5%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的防治辣椒疫病的生物制劑，其特征在于所述的短芽孢桿菌 26-13的發(fā)酵液干燥物的制備方法包括以下步驟(1)菌種活化在滅菌的NA培養(yǎng)基中接入短芽孢桿菌26-13進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)；搖瓶培養(yǎng)條件如下30 32°C，轉(zhuǎn)速為160 200轉(zhuǎn)/min、培養(yǎng)時(shí)間為12 18小時(shí)；得到活化的菌種；NA培養(yǎng)基的組成為每升含有牛肉膏3g、酵母膏l(xiāng)g、蛋白胨5g、葡萄糖10g，水定容至 IOOOmL, pH 為 7. 2 7. 4 ；(2)菌體的大量繁殖連續(xù)放大發(fā)酵，首先將步驟(1)得到的活化的菌種按接種量為發(fā)酵培養(yǎng)基體積的8 10%接種入100L發(fā)酵罐，發(fā)酵16 20h后，將100L發(fā)酵罐的短芽孢桿菌沈-13發(fā)酵液轉(zhuǎn)至1000L發(fā)酵罐中，補(bǔ)充發(fā)酵培養(yǎng)基，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)M 30h ；整個(gè)發(fā)酵過(guò)程的發(fā)酵條件為發(fā)酵培養(yǎng)基為L(zhǎng)A培養(yǎng)基，裝液量為發(fā)酵罐體積的70%，泡敵量為 0. 05 0. 1 %，初始pH為7. 0 7. 2，發(fā)酵溫度30 32°C ；LA培養(yǎng)基的組成為每升含有玉米淀粉3g、大豆蛋白粉15g、玉米漿25g、MnSO4 0. 0308mg、K2HPO4 3g、KH2PO4 1. 5g、MgSO4 0. 5g、FeSO4 0. lg、CaCO3Ig,水定容至 lOOOmL， pH7. 0 ；(3)短芽孢桿菌沈-13的發(fā)酵液干燥物的制備將步驟( 得到的發(fā)酵液進(jìn)行噴霧干燥，得到發(fā)酵液干燥物。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的防治辣椒疫病的生物制劑，其特征在于步驟(3)中所述的噴霧干燥的條件為溫度為60 701^5^= 14 16m7mir^nV_=中速。
7.權(quán)利要求2 6任一項(xiàng)所述防治辣椒疫病的生物制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟將短芽孢桿菌沈-13的發(fā)酵液干燥物與載體和保護(hù)劑混和得到。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于將短芽孢桿菌沈-13的發(fā)酵液干燥物與載體和保護(hù)劑混合后，干燥至水分相對(duì)濕度小于10 %、粉碎，得到防治辣椒疫病的生物制劑。
9.權(quán)利要求2 6任一項(xiàng)所述防治辣椒疫病的生物制劑的應(yīng)用，其特征在于所述防治辣椒疫病的生物制劑的使用方法為拌種、淋施或噴霧。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述防治辣椒疫病的生物制劑的使用時(shí)期是辣椒苗期和/或成株期。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種防治辣椒疫病的短芽孢桿菌及生物制劑的制備方法與應(yīng)用。該防治辣椒疫病的短芽孢桿菌為短芽孢桿菌26-13，于2011年1月8日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC NO:M2011009。將該短芽孢桿菌26-13進(jìn)行發(fā)酵，得到的發(fā)酵液干燥，再將發(fā)酵液干燥物與載體、保護(hù)劑混合，得到防治辣椒疫病的生物制劑。該生物制劑具有對(duì)環(huán)境友好，無(wú)農(nóng)藥殘留問(wèn)題，成本較低，生產(chǎn)工藝先進(jìn)等優(yōu)點(diǎn)，而且將其稀釋400×防治辣椒疫病的防治效果達(dá)到85％以上。
文檔編號(hào)C12R1/01GK102154178SQ201110030249
公開日2011年8月17日 申請(qǐng)日期2011年1月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月28日
發(fā)明者李培謙, 林壁潤(rùn), 沈會(huì)芳, 潘群英, 蒲小明 申請(qǐng)人:廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所