專利名稱：一種與抗蟲相關(guān)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種與抗蟲相關(guān)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
當前在世界范圍內(nèi)，由于昆蟲侵害對農(nóng)作物造成的產(chǎn)量損失是非常巨大的。傳統(tǒng) 上控制昆蟲侵害最普遍采用的途徑是大量施用化學殺蟲劑?；瘜W殺蟲劑的使用在取得了一 定經(jīng)濟效益的同時，也帶來了農(nóng)藥殘毒、環(huán)境污染、生態(tài)破壞、害蟲抗藥性和再猖獗等嚴重 問題。為適應(yīng)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展、環(huán)境保護和人類安全的需要，大力加強農(nóng)業(yè)生物性災害的可 持續(xù)控制研究，是人類共同面臨的問題，也是該領(lǐng)域科學研究面臨的嚴峻挑戰(zhàn)。因此，研究 和利用植物的自身抗性基因從而有效控制農(nóng)業(yè)蟲害成為人類孜孜以求的目標。在長期的進化過程中，植物為了抵抗來自昆蟲的捕食，建立起了復雜多樣的抗性 反應(yīng)機制。而植物激素茉莉酸在調(diào)控植物對昆蟲侵害、病原物入侵及機械傷害等生物性和 非生物性脅迫的防御性反應(yīng)中起重要作用。茉莉酸在調(diào)控植物對病蟲抗性方面的作用發(fā)現(xiàn) 于上世紀90年代初，此后人們經(jīng)過十多年的努力，在模式植物擬南芥和番茄中研究茉莉酸 的生物合成和信號轉(zhuǎn)導方面都取得了重要進展。目前人們認識到的茉莉酸信號途徑包括3 個在擬南芥和番茄中都保守的重要信號轉(zhuǎn)導元件C0I1，JAZ蛋白和轉(zhuǎn)錄因子MYC2。C0I1編 碼一個F-box蛋白，在體內(nèi)形成SCFam泛素連接酶復合體，最近的研究表明COIl是活性茉 莉酸(JA-Ile)的受體。遺傳和生化證據(jù)表明JAZ家族蛋白是SCFam泛素連接酶復合體的 底物，在茉莉酸誘導的基因表達中起到抑制因子的作用。茉莉酸誘導的基因表達受到MYC2 和其它轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控。在正常情況下，JAZ蛋白抑制MYC2的轉(zhuǎn)錄激活活性，茉莉酸信號 途徑處于關(guān)閉狀態(tài)；而在病原菌或昆蟲侵害的情況下，活性茉莉酸促進COIl和JAZ蛋白的 相互作用并把后者降解，進而釋放MYC2的功能而誘導相關(guān)基因的表達。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種與植物抗蟲相關(guān)的蛋白及其編碼基因。本發(fā)明所提供的與植物抗蟲相關(guān)的蛋白的編碼基因，名稱為S1NAC072，來源于番 前屬番前(Solanum lycopersicon)。本發(fā)明所提供的與植物抗蟲相關(guān)的蛋白是具有下述氨基酸殘基序列之一的蛋 白DSEQ ID NO 2所示的蛋白質(zhì)；2)將SEQ ID NO :2所示的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/ 或缺失和/或添加且與植物抗蟲性相關(guān)的由1)衍生的蛋白質(zhì)。本發(fā)明所提供的與植物抗蟲相關(guān)的蛋白的編碼基因是如下1)-4)中任一所述的 基因1) SEQ ID NO 1 所示的 DNA 分子；2) SEQ ID NO 1中第28-1077位核苷酸所示的DNA分子；
3)在嚴格條件下與1)或2)限定的DNA分子雜交的DNA分子；4)與1)或2)限定的DNA分子具有90%以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。所述嚴格條件為用0. IXSSPE(或0. 1XSSC)，0. IXSDS的溶液，在65°C下雜交 并洗膜。為了使蛋白S1NAC072便于純化，可在SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列組成的蛋白 質(zhì)的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標簽。表1.標簽的序列
權(quán)利要求
1.一種蛋白，是如下1)或幻的蛋白質(zhì)1)由SEQID NO :2所示氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；2)將SEQID NO :2所示的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或 缺失和/或添加且與植物抗蟲性相關(guān)的由1)衍生的蛋白質(zhì)。
2.權(quán)利要求1所述的蛋白的編碼基因。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的編碼基因，其特征在于所述編碼基因為如下1)-4)中任一 所述1)SEQ ID NO 1所示的DNA分子；2)SEQ ID NO 1中第觀-1077位核苷酸所示的DNA分子；3)在嚴格條件下與1)或2)限定的DNA分子雜交的DNA分子；4)與1)或2)限定的DNA分子具有90%以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。
4.含有權(quán)利要求2或3所述編碼基因的重組載體、表達盒、轉(zhuǎn)基因細胞系或重組菌。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的重組載體，其特征在于所述重組載體為在 PCAMBIA2300-35S-0CS的多克隆位點間插入權(quán)利要求2或3所述編碼基因得到的重組表達 載體。
6.擴增權(quán)利要求2或3所述編碼基因中任一片段或其全長的引物。
7.一種培育抗蟲性增強的轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將權(quán)利要求2或3所述的編碼基因轉(zhuǎn) 入出發(fā)植物中，得到抗蟲性強于所述出發(fā)植物的轉(zhuǎn)基因植物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于權(quán)利要求2或3所述的編碼基因是通過 權(quán)利要求4或5所述的重組表達載體導入所述出發(fā)植物中。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其特征在于所述出發(fā)植物為雙子葉植物；所述雙 子葉植物為番茄。
10.根據(jù)權(quán)利要求7或8或9所述的方法，其特征在于所述蟲為昆蟲；所述昆蟲為棉 鈴蟲。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種與抗蟲相關(guān)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。該蛋白是如下1)或2)的蛋白質(zhì)1)SEQ ID NO2所示的蛋白質(zhì)；2)將SEQ ID NO2所示的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物抗蟲性相關(guān)的由1)衍生的蛋白質(zhì)。本發(fā)明培育轉(zhuǎn)基因植物的方法具有重要的理論及實際意義，可用于農(nóng)牧業(yè)和生態(tài)環(huán)境治理所需的抗蟲植物品種的培育與鑒定。
文檔編號C12N15/29GK102146126SQ201110002809
公開日2011年8月10日 申請日期2011年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月7日
發(fā)明者李傳友, 杜敏敏, 王保, 蔣紅玲, 趙久海 申請人:中國科學院遺傳與發(fā)育生物學研究所