專利名稱：一種分離精子的裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種分離精子的裝置。
背景技術(shù)：
受精是精子與卵子結(jié)合在一起的過(guò)程，是一種重要的生命現(xiàn)象。哺乳動(dòng)物的精子 剛射出后不能與卵子結(jié)合，必須在雌性動(dòng)物生殖管道停留一段時(shí)間后，或者在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng) 液中培養(yǎng)一定時(shí)間后，才具有與卵子結(jié)合的能力，這個(gè)過(guò)程稱為獲能。獲能是自然生殖的一 個(gè)非常關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。目前，獲能機(jī)制尚未闡明，大多數(shù)資料是在體外用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中培養(yǎng) 精子所獲得的。小鼠和大鼠是研究獲能使用較多的動(dòng)物，一般取小鼠或大鼠附睪尾部的精 子進(jìn)行獲能機(jī)制研究?，F(xiàn)在存在的問(wèn)題有兩個(gè)。1.從附睪尾部取精子時(shí)，附睪表面的小血 管難以完全剔除，得到的精子溶液中總有部分血細(xì)胞。2.精子溶液中有少量死亡或運(yùn)動(dòng)能 力很差的精子。血細(xì)胞、死亡的精子和運(yùn)動(dòng)能力很差的精子對(duì)精子獲能機(jī)制的研究有一定 影響。為了去除精子培養(yǎng)液中的血細(xì)胞、死亡的精子和運(yùn)動(dòng)能力很差的精子，一般采用上游 法(swim up)，即將精子放置在離心管中37°C 5% CO2培養(yǎng)一定時(shí)間，然后取上層培養(yǎng)液中 的精子。用常規(guī)上游法處理精子后，有時(shí)上層培養(yǎng)液中仍存在部分血細(xì)胞，有運(yùn)動(dòng)能力精子 的百分率一般在80-90%。已公開的分離精子的發(fā)明裝置還有“一種雙管式浮游篩選精子管”(專利號(hào) 200920019260. 8)，包括兩根立管，第一立管通過(guò)橫管與第二立管聯(lián)通，第一立管的下部側(cè) 壁上設(shè)置環(huán)形凸塊，環(huán)形凸塊的凸塊側(cè)壁與水平面的夾角是0，60度< α <85度，第一立 管和第二立管的直徑相等，都是D，橫管的直徑是d，2d = D，此裝置的制作比本發(fā)明裝置復(fù) 雜，不實(shí)用。為了獲得高質(zhì)量的精子，我們?cè)O(shè)計(jì)了一種簡(jiǎn)單實(shí)用的分離精子的裝置，而且摸 索出了分離效果很好的操作程序，獲得的精子中有運(yùn)動(dòng)能力精子的百分率在95%左右，收 集液中一般沒(méi)有血細(xì)胞。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型的目的在于提供一種簡(jiǎn)單、快速分離精子的裝置，該裝置特別適合于 小鼠和大鼠精子的篩選，為精子獲能機(jī)制的研究提供高質(zhì)量的精子。一種分離精子的裝置，所述的裝置由1.5ml Eppendorff離心管、分離管和橡皮圈 組成，所述的分離管處于離心管內(nèi)部，且呈上下相通的漏斗形，其底部開口的內(nèi)徑為2mm，頂 部開口的內(nèi)徑為6mm，分離管的長(zhǎng)度為14-16mm，所述的橡皮圈纏繞于分離管的外壁上并與 分離管底部的距離為分離管總長(zhǎng)度的1/3-1/2，橡皮圈緊貼于離心管的內(nèi)壁使所述的分離 管的外壁以及底部和離心管的內(nèi)壁均留有空隙。本分離裝置由1. 5ML Eppendorff離心管、分離管和橡皮圈組成，橡皮圈緊貼于離 心管的內(nèi)壁使所述的分離管的外壁以及底部和離心管的內(nèi)壁均留有空隙。放置在離心管底 部的精子只有進(jìn)入分離管底部開口，向上穿過(guò)分離管，才能到達(dá)由分離管外壁、離心管內(nèi)壁 和橡皮圈圍成的空隙。培養(yǎng)液液面高度只高于分離管頂部1mm，使得從分離管頂部開口進(jìn)入空隙內(nèi)的精子不易返回分離管內(nèi)。分離管底部開口較小，內(nèi)徑為2mm，沒(méi)有運(yùn)動(dòng)能力的精子 不易進(jìn)入分離管底部開口，分離管呈上下相通的漏斗形，漏斗形使得精子容易向上運(yùn)動(dòng)而 不容易向下運(yùn)動(dòng)。本發(fā)明裝置操作簡(jiǎn)單，分離精子效果好，獲得的精子中有運(yùn)動(dòng)能力精子的 百分率在95%左右，比使用現(xiàn)有技術(shù)的裝置高出5-10%，而且收集液中一般沒(méi)有血細(xì)胞。

圖1為本實(shí)用新型的裝置示意圖；圖中1為離心管；2為分離管，3為橡皮圈。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本實(shí)用新型，而非限制本實(shí)用新型。實(shí)施例1本實(shí)用新型的分離精子的裝置，由1.5 ml Eppendorff離心管1、分離管2和橡皮 圈3組成，分離管2處于離心管1內(nèi)部，且呈上下相通的漏斗形，其底部開口的內(nèi)徑為2mm， 頂部開口的內(nèi)徑為6mm，橡皮圈3纏繞于分離管2的外壁上并與分離管2底部的距離為分離 管2總長(zhǎng)度的1/3-1/2，橡皮圈3緊貼于離心管1的內(nèi)壁使所述的分離管2的外壁以及底部 和離心管1的內(nèi)壁均留有空隙。采用上述裝置進(jìn)行分離精子的過(guò)程如下(1)按常規(guī)方法取0. 2ml精子溶液放置在1. 5ml的EppendorfT離心管底部。(2)將精子分離管放在離心管中，分離管上的橡皮圈與離心管內(nèi)壁要貼緊。(3)將培養(yǎng)液通過(guò)分離管口加至離心管中，培養(yǎng)液液面高度約高于分離管頂部 Imm0(4)輕輕蓋住離心管蓋，將離心管置于37°C 5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15min。(5)將分離管外壁與離心管之間的培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至新離心管中，300g離心lOmin，棄 上清，用培養(yǎng)液重懸精子，調(diào)節(jié)精子至合適濃度。獲得的精子中有運(yùn)動(dòng)能力精子的百分率在 95%左右，收集液中一般沒(méi)有血細(xì)胞。
權(quán)利要求一種分離精子的裝置，其特征在于，所述的裝置由1.5ml Eppendorff離心管、分離管和橡皮圈組成，所述的分離管處于離心管內(nèi)部，且呈上下相通的漏斗形，其底部開口的內(nèi)徑為2mm，頂部開口的內(nèi)徑為6mm，分離管的長(zhǎng)度為14 16mm，所述的橡皮圈纏繞于分離管的外壁上并與分離管底部的距離為分離管總長(zhǎng)度的1/3 1/2，橡皮圈緊貼于離心管的內(nèi)壁使所述的分離管的外壁以及底部和離心管的內(nèi)壁均留有空隙。
專利摘要本實(shí)用新型公開了一種簡(jiǎn)單、高效的分離精子的裝置。所述的裝置由1.5ml Eppendorff離心管、分離管和橡皮圈組成，分離管處于離心管內(nèi)部，且呈上下相通的漏斗形，其底部開口的內(nèi)徑為2mm，頂部開口的內(nèi)徑為6mm，分離管的長(zhǎng)度為14-16mm；橡皮圈纏繞于分離管的外壁上并與分離管底部的距離為分離管總長(zhǎng)度的1/3-1/2，橡皮圈緊貼于離心管的內(nèi)壁使所述的分離管的外壁以及底部和離心管的內(nèi)壁均留有空隙。采用該裝置獲得的精子中有運(yùn)動(dòng)能力精子的百分率在95％左右，收集液中一般沒(méi)有血細(xì)胞，適合于體外獲能實(shí)驗(yàn)。
文檔編號(hào)C12M1/24GK201695034SQ201020199269

公開日2011年1月5日 申請(qǐng)日期2010年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月21日
發(fā)明者曾海濤, 李潔, 胡維新 申請(qǐng)人:中南大學(xué)