專利名稱：細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明于細(xì)胞間超凈臺(tái)中細(xì)胞培養(yǎng)液及其他液體的無(wú)菌轉(zhuǎn)移設(shè)施。
背景技術(shù)：
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常進(jìn)行洗細(xì)胞、消化細(xì)胞及更換培養(yǎng)液等操作，以保證細(xì)胞 的正常生長(zhǎng)與傳代培養(yǎng)，對(duì)其無(wú)菌要求很嚴(yán)格。目前的方法是每次換液時(shí)，需用新滅菌的玻 璃吸管將細(xì)胞洗液及舊培養(yǎng)液吸出，再更換無(wú)菌的吸管吸取新培養(yǎng)液到培養(yǎng)瓶，且吸出的 液體要暫時(shí)放入超凈臺(tái)中廢液缸，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后再將其帶出來(lái)，傾倒處理后放回超凈臺(tái)。這種 傳統(tǒng)的操作方法繁瑣費(fèi)時(shí)，而且由于玻璃吸管其吸嘴的限制會(huì)導(dǎo)致液體吸取不干凈，反復(fù) 傾倒廢液缸也容易產(chǎn)生人為的污染等弊端。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種細(xì)胞培養(yǎng)液及其他液體的無(wú)菌移液裝置， 該裝置能簡(jiǎn)化吸取細(xì)胞液操作過程，并且能使該操作過程更為準(zhǔn)確、方便、高效。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的提出以下技術(shù)方案一種細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移 液裝置，它的特點(diǎn)是用膠管先連接槍頭連接器、再分別連接從瓶塞上插入廢液收集瓶的兩 支插管的上管口，之后連接氣體分流裝置以及氣泵。它的槍頭連接器的前端收縮變細(xì)，以便 插入細(xì)長(zhǎng)的槍頭。它的氣體分流裝置為y字形結(jié)構(gòu)的三通管，在y字形長(zhǎng)劃的中下部與短 劃中部分別設(shè)有尖角一致朝上截面為V形的可閉合彈性膜瓣。這種氣體分流裝置為y字形 結(jié)構(gòu)的三通管，y字形長(zhǎng)劃與短劃之間的夾角一般為30 60°，最好為45°。采用上述技術(shù)方案的細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置，使液體吸取過程更加準(zhǔn)確、 高效、操作時(shí)簡(jiǎn)單快捷，液體的吸取干凈徹底，消除了人為污染等弊端。


現(xiàn)結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做詳細(xì)說明圖1為本發(fā)明細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置系統(tǒng)示意2為圖1中序2零件的放大3為圖1中序7零件的放大圖
具體實(shí)施例方式如圖1所示本發(fā)明的培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置，它用膠管1先連接槍頭連接器 2、再分別連接從瓶塞3上塞入廢液收集瓶6的管4與管5的上口，然后連接氣體分流裝置 7以及氣泵8。膠管1是醫(yī)用乳膠管，其長(zhǎng)度可視具體要求而定。它的槍頭連接器2前端收縮變 細(xì)，以便插入細(xì)長(zhǎng)的槍頭。槍頭連接器2可以用普通的金屬管制作。其前端尖嘴處可在酒 精燈火焰處灼燒，然后連接滅菌的細(xì)長(zhǎng)槍頭，用來(lái)伸進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶吸取液體。槍頭的吸嘴相比傳統(tǒng)的玻璃吸管細(xì)小而且尖銳，因此消除了用以往的方法液體吸取不干凈的現(xiàn)象。除槍 頭連接器及部分膠管可放置在超凈臺(tái)，其余各部均在可置于超凈臺(tái)外。廢液收集瓶6為5L 的三角瓶。它的氣體分流裝置7為y字形結(jié)構(gòu)的三通管，管壁的材質(zhì)可以選用金屬、陶瓷、 玻璃等，一般選玻璃管。在y字形長(zhǎng)劃的中下部與短劃中部，分別設(shè)有尖角一致朝上截面為 V形的可閉合彈性膜瓣9與10。它們相當(dāng)于管道系統(tǒng)里的逆止閥。這種氣體分流裝置為y 字形結(jié)構(gòu)的三通管，y字形長(zhǎng)劃與短劃之間的夾角一般為30 60°，最好為45°。插入橡膠瓶塞3里的管4上端與廢液導(dǎo)出膠管1連接，另一管5的上端與氣泵8 通過膠管1連接。氣泵8與氣體分流裝置7用膠管1連接好，就可以進(jìn)行操作。當(dāng)踩腳踏 氣泵后，通往外界的V型瓣10會(huì)打開，氣體排出；腳離開腳踏氣泵，通向外界的V型瓣10會(huì) 閉合。由于這時(shí)整個(gè)系統(tǒng)內(nèi)形成負(fù)壓，這導(dǎo)致另一個(gè)分支里的V型瓣9打開，液體被吸進(jìn)槍 頭，經(jīng)槍頭連接器2——膠管1——插管4進(jìn)入廢液收集瓶6中。氣泵8是普通常見的充抽 雙功能腳踏充氣泵，相比動(dòng)力氣泵操作簡(jiǎn)易、不消耗電能、無(wú)污染。為進(jìn)一步闡述本發(fā)明，下面列舉三個(gè)具體實(shí)施例來(lái)介紹本發(fā)明的使用方法。實(shí)施例1進(jìn)行懸浮細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)第一步灼燒槍頭連接器的尖嘴，待溫度降下來(lái)插上無(wú)菌的槍頭，懸空放置。第二步將細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞用吸管轉(zhuǎn)移到15ml離心管，離心使細(xì)胞沉淀。腳 踩氣泵，松開，槍頭伸進(jìn)離心管液體，液體回抽進(jìn)廢液收集瓶。第三步吸取一定量PBS緩沖液到離心管，吹吸細(xì)胞若干次，離心后，槍頭連接器 更換槍頭后按以上操作抽取液體到廢液收集瓶。第四步吸取新鮮培養(yǎng)液到離心管，輕輕吹打混勻，然后平均分到兩個(gè)培養(yǎng)瓶。表1采用傳統(tǒng)方法與本發(fā)明進(jìn)行懸浮細(xì)胞傳代培養(yǎng)效果比較
使用玻璃吸管 數(shù)使用槍頭數(shù)是否存在殘余液 體傳統(tǒng)方法30存在本方法22不存在實(shí)施例2進(jìn)行貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)時(shí)第一步灼燒槍頭連接器的尖嘴，待溫度降下來(lái)插上無(wú)菌的槍頭，懸空放置。第二步腳踩氣泵，松開，槍頭伸進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶液體中，液體回抽進(jìn)廢液收集瓶。第三步吸取一定量PBS緩沖液到培養(yǎng)瓶，輕輕吹洗若干次，槍頭連接器更換槍頭 后按以上操作抽取液體到廢液收集瓶。重復(fù)此步驟，確保胰酶消化時(shí)血清的影響減少到最第四步吸取少量胰酶消化液到培養(yǎng)瓶，消化1分鐘后吸取新鮮培養(yǎng)液到培養(yǎng)瓶 終止胰酶的作用，以防傷害細(xì)胞。輕輕吹打，移至15ml離心管，離心，槍頭連接器更換槍頭 后按以上操作抽取液體到廢液收集瓶。第五步吸取新鮮培養(yǎng)液到離心管，輕輕吹打混勻，然后平均分到兩個(gè)培養(yǎng)瓶。表2采用傳統(tǒng)方法與本發(fā)明進(jìn)行貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)效果比較
權(quán)利要求
1.一種細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置，其特征在于用膠管(1)先連接槍頭連接器 O)、再分別連接從瓶塞C3)插入廢液收集瓶(6)的插管(4)與(5)的上管口，之后連接氣 體分流裝置(7)以及氣泵(8)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置，其特征在于所述的槍頭連 接器( 前端收縮變細(xì)并插入細(xì)長(zhǎng)的槍頭。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置，其特征在于所述的氣體分 流裝置(7)為y字形結(jié)構(gòu)的三通管，在y字形長(zhǎng)劃的中下部與短劃中部，分別設(shè)有尖角一致 朝上截面為V形的可閉合彈性膜瓣(9)與(10)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置，其特征在于所述的氣體分 流裝置(7)為y字形結(jié)構(gòu)的三通管，所述y字形長(zhǎng)劃與短劃之間的夾角為30 60°。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置，其特征在于所述的氣體分 流裝置(7)為y字形結(jié)構(gòu)的三通管，所述y字形長(zhǎng)劃與短劃之間的夾角最好為45°。
全文摘要
一種細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置，它的特點(diǎn)是用膠管先連接槍頭連接器、再分別連接從瓶塞上插入廢液收集瓶的兩支插管的上管口，之后連接氣體分流裝置以及氣泵。它的槍頭連接器的前端收縮變細(xì)，以便插入細(xì)長(zhǎng)的槍頭。它的氣體分流裝置為y字形結(jié)構(gòu)的三通管，在y字形長(zhǎng)劃的中下部與短劃中部分別設(shè)有尖角一致朝上截面為V形的可閉合彈性膜瓣。這種氣體分流裝置為y字形結(jié)構(gòu)的三通管，y字形長(zhǎng)劃與短劃之間的夾角一般為30～60°，最好為45°。這種細(xì)胞培養(yǎng)液無(wú)菌簡(jiǎn)易移液裝置，使液體吸取過程更加準(zhǔn)確、高效、操作時(shí)簡(jiǎn)單快捷，液體的吸取干凈徹底，消除了人為污染等弊端。
文檔編號(hào)C12M1/00GK102061252SQ20101056384
公開日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2010年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月29日
發(fā)明者李文哲, 王旭 申請(qǐng)人:大連大學(xué)