專利名稱：一種從牛蒡子中制備牛蒡子苷元的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從牛蒡子中制備牛蒡子苷元的方法，尤其是一種采用膜分離，復(fù)
合酶解等工序制備牛蒡子苷元的方法。
背景技術(shù)：
牛蒡子苷元(arctigenin)
化學(xué)名 (3R， 4R)_4_[(3， 4-Dimethoxyphenyl)methyl]dihydro_3_[(4_hydroxy_3_methox
yphenyl)methyl]_2(3H)-furanone 分子式C21H2406 分子量372. 41 分子結(jié)構(gòu) 物理性質(zhì)無(wú)色、無(wú)味晶體；難溶于水，易溶于甲醇、氯仿等有機(jī)溶劑。
牛蒡子苷元在抗炎、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等方面表現(xiàn)出較強(qiáng)的藥理活性；同
時(shí)可以作為一種新型的熱休克反應(yīng)抑制調(diào)節(jié)劑，對(duì)過(guò)高體溫表現(xiàn)的癌癥的治療有幫助作
用。此外還具有抗老年性癡呆的作用和抑制K+攣縮的作用。 牛蒡子苷元是木脂素類化合物，主要來(lái)源于菊科植物牛蒡(Arctium l即pa L.)的 果實(shí)，牛蒡子中牛蒡子苷元含量較低，僅含O. 19%。多從牛蒡子苷水解得來(lái)。
牛蒡子苷 化學(xué)名4_[ (3， 4一dimethoxyphenyl)methyl] _3_[ [4_ ( P -D—glucopy屋osyloxy)
一、、
頻!4
-3-methoxyphenyl]methyl]dihydro
分子量534.55
分子結(jié)構(gòu)
<formula>formula see original document page 4</formula>
物理性質(zhì)易溶于甲醇、乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑，難溶于水。 目前用牛蒡子制備牛蒡子苷元的方法，多是醇提酶解。酶解過(guò)程緩和，收率高，成 本低。也有超臨界流體萃取，提取率低。徐非一等公開(kāi)發(fā)表的"微生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化牛蒡子的研 究"和白家峰發(fā)表的"牛蒡子微生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化的研究"文獻(xiàn)都公開(kāi)了酶發(fā)酵轉(zhuǎn)化，但酶解條 件純化工藝不夠理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種從牛蒡子中制備牛蒡子苷元的方法。該方法
生產(chǎn)產(chǎn)品成本低，收率高，便于工業(yè)化操作。 為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提取技術(shù)方案如下 —種從牛蒡子中制備牛蒡子苷元的方法，其特征在于包含以下步驟 1)提取將牛蒡子粉碎10-40目，加甲醇回流提取2-3次，合并提取液加活性炭脫
色，得脫色液； 2)膜分離上述脫色液通過(guò)微濾膜濾過(guò)，再通過(guò)超濾膜超濾，收集透過(guò)液；酶解轉(zhuǎn) 化將上述透過(guò)液濃縮無(wú)醇，調(diào)節(jié)PH，加入復(fù)合酶酶解； 3)結(jié)晶將上述酶解液離心，離心物氯仿回流溶解放置結(jié)晶，濾過(guò)，得粗結(jié)晶物；
4)重結(jié)晶上述粗結(jié)晶物，甲醇溶解結(jié)晶，干燥即得產(chǎn)品。
原料選用牛蒡子。優(yōu)選牛蒡子中牛蒡子苷4%_5%的原料。 所述的提取條件為甲醇為75% _90%甲醇，提取時(shí)間1-2小時(shí)，活性炭加入為提 取液量的0. 5_1%，脫色時(shí)間1-2小時(shí)。 所述膜分離條件超濾膜為截留分子量10000-6000的中空復(fù)合膜，壓力 0. 4-0. 8Mpa 所述酶為纖維素酶、13 -葡聚糖苷酶和木聚糖酶的混合酶，酶活力不低于2萬(wàn)單 位，優(yōu)選酶活力單位io萬(wàn)的酶。所述調(diào)節(jié)ra的酸可選鹽酸、硫酸或磷酸中一種。 所述酶解轉(zhuǎn)化條件為保溫溫度為45-55°C， ra調(diào)節(jié)為4-6，加酶量為原料量的
1-2%。，攪拌速度20-30轉(zhuǎn)/分，酶解時(shí)間20-26小時(shí)。 所述重結(jié)晶條件依次用90%甲醇和99%甲醇回流溶解結(jié)晶。 綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點(diǎn) 1)利用牛蒡子提取牛蒡子苷，再轉(zhuǎn)化為苷元，可以提高牛蒡子苷元產(chǎn)量。
2)利用膜分離可以除去大分子物質(zhì)，減少酶用量，提高酶解效率和產(chǎn)品含量。
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 : 取牛蒡子，粉碎到30目，取10kg，加80L80X甲醇回流提取2小時(shí)，提取2次，合并 得140L提取液，加入800g活性炭脫色1小時(shí)，將脫色液通過(guò)微濾膜濾過(guò)，濾液再通過(guò)截留 分子量為6000-10000的中空超濾膜，在壓力0. 8Mpa超濾，將透過(guò)液濃縮至無(wú)醇，濃縮液放 出鹽酸調(diào)節(jié)ra至5，加入20g復(fù)合酶，5(TC下保溫，以30轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢杳附?4小時(shí)，離心酶解 液，離心物用氯仿回流溶解，濾過(guò)，放置結(jié)晶，得牛蒡子苷元粗結(jié)晶物423g，含量73X ;粗結(jié) 晶物依次用90%和99%甲醇回流溶解，靜置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，干燥得牛蒡子苷元248g，含 量99%。 實(shí)施例2 : 取牛蒡子，粉碎到40目，取10kg，加60L75X甲醇回流提取1小時(shí)，提取3次，合并 得160L提取液，加入900g活性炭脫色1. 5小時(shí)，將脫色液通過(guò)微濾膜濾過(guò)，收集透過(guò)液，濾 液再通過(guò)截留分子量為中空超濾膜，在壓力0. 4Mpa超濾，將透過(guò)液濃縮至無(wú)醇，收集濃縮 液，用鹽酸調(diào)節(jié)ra至5. 5，加入12g復(fù)合酶，55t:下保溫，以20轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢杳附?6小時(shí)，離心 酶解液，離心物用氯仿回流溶解，濾過(guò)放置結(jié)晶，得牛蒡子苷元粗結(jié)晶物413g，含量71 % ;粗 結(jié)晶物依次用90%和99%甲醇回流溶解，靜置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，干燥得牛蒡子苷元232g， 含量98. 6%。
實(shí)施例3: 取牛蒡子，粉碎到IO目，取10kg，加70L80X甲醇回流提取1小時(shí)，提取3次，合并 得190L提取液，加入1000g活性炭脫色2小時(shí)，將脫色液通過(guò)微濾膜濾過(guò)，濾液再通過(guò)超濾 膜，在壓力0. 6Mpa超濾，將透過(guò)液濃縮至無(wú)醇，收集濃縮液，用鹽酸調(diào)節(jié)ra至6，加入20g復(fù) 合酶，45t:下保溫，以25轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢杳附?0小時(shí)，離心酶解液，離心物用氯仿溶解，放置結(jié) 晶，得牛蒡子苷元粗結(jié)晶物418g，含量72X;粗結(jié)晶物依次用90%和99%甲醇回流溶解，靜 置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，干燥得牛蒡子苷元240g，含量98. 9% 。
實(shí)施例4 : 取牛蒡子，粉碎到20目，取20kg，加16L80X甲醇回流提取2小時(shí)，提取2次，合并 得280L提取液，加入2kg活性炭脫色1小時(shí)，將脫色液通過(guò)微濾膜濾過(guò)，濾液再通過(guò)截留分
子量為10000-6000的超濾膜超濾，將透過(guò)液濃縮至無(wú)醇，收集濃縮液，用鹽酸調(diào)節(jié)ra至5，
加入30g復(fù)合酶，5(TC下保溫?cái)嚢杳附?5小時(shí)，離心酶解液，離心物用氯仿回流溶解，放置 結(jié)晶，濾過(guò)，得牛蒡子苷元粗結(jié)晶物950g，含量73%;粗結(jié)晶物依次用90%和99%甲醇回流 溶解，靜置結(jié)晶，過(guò)濾，干燥得牛蒡子苷元489g，含量98. 5% 。
權(quán)利要求
一種從牛蒡子中制備牛蒡子苷元的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取將牛蒡子粉碎10-40目，加甲醇回流提取2-3次，合并提取液加活性炭脫色，得脫色液；2)膜分離上述脫色液通過(guò)微濾膜濾過(guò)，再通過(guò)超濾膜超濾，收集透過(guò)液；酶解轉(zhuǎn)化將上述透過(guò)液濃縮無(wú)醇，調(diào)節(jié)PH，加入復(fù)合酶攪拌酶解；3)結(jié)晶將上述酶解液離心，離心物氯仿回流溶解放置結(jié)晶，濾過(guò)，得粗結(jié)晶物；4)重結(jié)晶上述粗結(jié)晶物，甲醇溶解結(jié)晶，干燥即得產(chǎn)品。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的提取條件為甲醇為75_90%甲醇，提取時(shí)間1-2小時(shí)，活性炭加入為提取液量的0. 5-1%，脫色時(shí)間1-2小時(shí)。
3. 如權(quán)利要求所述的方法，其特征在于所述膜分離條件超濾膜為截留分子量10000-6000的中空復(fù)合膜，壓力0. 4-0. 8Mpa。
4. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述酶為纖維素酶、13 -葡聚糖苷酶和木聚糖 酶的混合酶，酶活力不低于2萬(wàn)單位。
5. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述調(diào)節(jié)PH的酸可選鹽酸、硫酸或磷酸中一種。
6. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于所述酶解轉(zhuǎn)化條件為保溫溫度為45-5t:，PH 調(diào)節(jié)為4-6，加酶量為原料量的1_2%。，攪拌速度20-30轉(zhuǎn)/分，酶解時(shí)間20-26小時(shí)。
7. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述重結(jié)晶條件依次用90%甲醇和99%甲醇回流溶解結(jié)晶。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從牛蒡子中制備牛蒡子苷元的方法，工藝以牛蒡子藥材為原料，粉碎，甲醇回流提取2-3次，活性炭脫色，微濾、超濾后濃縮至無(wú)醇，調(diào)節(jié)pH，加復(fù)合酶攪拌酶解，離心，氯仿溶解離心物，靜置結(jié)晶，粗結(jié)晶用90％和99％甲醇溶解重結(jié)晶。該工藝操作簡(jiǎn)單，周期短。
文檔編號(hào)C12P17/04GK101748169SQ201010017679
公開(kāi)日2010年6月23日 申請(qǐng)日期2010年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月12日
發(fā)明者劉東鋒, 張翼, 楊成東 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司