專利名稱：利用納米磁性粒子改性細胞的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種細胞改性方法，特別涉及一種利用納米磁性粒子改性細胞的方法。
背景技術：
目前，利用納米粒子改性各種物質(zhì)從而獲得新的物理化學屬性而成為一種新的物 質(zhì)，比如納米粒子改性有機聚合物能使其帶有導電性，從而獲得豐富的具導電性能的材料。
在本發(fā)明之前，尚未有利用納米粒子改性活體細胞而使其帶有某種物理化學性質(zhì) 從而使其得以在動物實驗和人體醫(yī)學中具備新的應用屬性。其原因在于從事納米材料研究 領域的專家很少從事醫(yī)學研究，不能將二者結(jié)合，因此絕大多數(shù)研究集中在無機或有機材 料的納米改性而非活體細胞的改性，無法解決醫(yī)學領域內(nèi)對改性細胞的解決中的困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就在于克服上述缺陷，研究一種利用納米磁性粒子改性細胞的方 法。 本發(fā)明的技術方案是 利用納米磁性粒子改性細胞的方法，其主要技術步驟在于 (1)制備納米粒子以FeS04及醋酸鋅為反應物運用共沉淀法[2°2]，反應在比例為 1 : 3的乙醇、水混合溶劑中進行，加入質(zhì)量百分比為2%的甘油，制備得到醋酸亞鐵前驅(qū) 體； (2)將前驅(qū)體粉末灼燒，溫度為400°C ，灼燒后得到FeOx粉體； (3)將FeOx粉體在10000r/min速度下離心得到上下兩層不同粒徑FeOx粉末； (4)將FeOx粉末加入到細胞培養(yǎng)基中，并將該細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)置于磁場中； (5)將利用磁場篩選的磁性較強的細胞放入90%血清凍存液中凍存。 本發(fā)明的優(yōu)點和效果在于利用納米磁性粒子改性細胞使其帶有順磁性，從而具備
了新的物理化學屬性，而又不會干擾其正常的生物學性能，并發(fā)現(xiàn)其具備了一系列新的物
理化學和生物屬性。本發(fā)明使具備新的屬性的納米粒子改性活體細胞，該物質(zhì)有望為學科
交叉提供一種新的科學模型，該模型的應用將為物理化學手段應用于醫(yī)學治療提供一個良
好的研究對象。 本發(fā)明利用納米磁性粒子改性細胞使其帶有順磁性，從而具備了新的物理化學屬 性，而又不會干擾其正常的生物學性能，并發(fā)現(xiàn)其具備了一系列新的物理化學和生物屬性。
具體實施例方式
本發(fā)明通過制備FeO化合物納米粒子，并吸附于活性細胞構建改性活體細胞，并 鑒定其生物屬性和物理化學屬性的改變，發(fā)現(xiàn)該改性細胞生物屬性不受影響，但改變了其 物理化學屬性從而降低了其對電磁場類的生物耐受性。因此該技術能構建一種新型的改性
3細胞模型，有望為弱損傷物理手段的生物效應研究提供一個集物化與生命有機于一體的細 胞模型。 其具體實施過程 (1)制備納米粒子以FeS(^及醋酸鋅為反應物運用共沉淀法[2°2]，反應在比例為 1 : 3的乙醇、水混合溶劑中進行并加入質(zhì)量百分比為2%的甘油，制備得到醋酸亞鐵前驅(qū) 體，前驅(qū)體粉末灼燒溫度為400°C ，灼燒4h后得到Fe0x粉體，在10000r/min速度下離心得 到上下兩層不同粒徑粉末，經(jīng)SEM及XRD實驗確定其粒徑及成分組成；SEM及XRD實驗結(jié)果 表明兩種粒子的平均粒徑分別為37、70nm左右，粒子形狀為不規(guī)則球形。經(jīng)XRD實驗結(jié)果 證明粒子的粉體粒子中Fe、0兩種元素的比例為1 : 1.12。 (2)直接在細胞培養(yǎng)基中加入磁性納米粒子，利用細胞膜巨大的表面積吸附磁性 納米粒子；設計并制造巨型線圈，利用直流電產(chǎn)生靜磁場，通過調(diào)節(jié)電流改變磁場強度，強 度越強，定向富集磁性細胞越好；利用磁場收集篩選磁性較強的細胞，測磁感應強度，90%
血清凍存液中凍存?zhèn)溆谩?
(3)鑒定 普魯士藍染色鑒定納米粒子吸附率；胎盤蘭染色鑒定其存活率；觀察細胞增殖及 凋亡死亡率。鑒定該改性細胞膜電位的變化。鑒定其對極低頻電磁場的耐受性。鑒定發(fā)現(xiàn) 納米粒子改性細胞不影響細胞的正常存活以及增殖分裂，但是影響其細胞膜電位，且降低 細胞對極低頻電磁場的耐受性而導致電磁場下細胞凋亡率上升。 由此可見，根據(jù)本發(fā)明的方法得到的納米粒子改性細胞可以在眾多領域得到廣泛 應用。
權利要求
利用納米磁性粒子改性細胞的方法，其步驟在于(1)制備納米粒子以FeSO4及醋酸鋅為反應物運用共沉淀法[202]，反應在比例為1∶3的乙醇、水混合溶劑中進行，加入質(zhì)量百分比為2％的甘油，制備得到醋酸亞鐵前驅(qū)體；(2)將前驅(qū)體粉末灼燒，溫度為400℃，灼燒后得到FeOx粉體；(3)將FeOx粉體在10000r/min速度下離心得到上下兩層不同粒徑FeOx粉末；(4)將FeOx粉末加入到細胞培養(yǎng)基中，并將該細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)置于磁場中；(5)將利用磁場篩選的磁性較強的細胞放入90％血清凍存液中凍存。
2. 根據(jù)權利要求l所述的利用納米磁性粒子改性細胞的方法，其特征在于FeOx粉末中 Fe、0兩種元素的比例為1 : 1.12。
3. 根據(jù)權利要求1所述的利用納米磁性粒子改性細胞的方法，其特征在于上下兩層不 同粒徑FeOx粉末的平均粒徑分別為32-42nm、50-90nm。
4. 根據(jù)權利要求3所述的利用納米磁性粒子改性細胞的方法，其特征在于上下兩層不 同粒徑FeOx粉末的平均粒徑分別為37nm、70nm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種利用納米磁性粒子改性細胞的方法。本發(fā)明以FeSO4及醋酸鋅為反應物運用共沉淀法[202]，反應在比例為1∶3的乙醇、水混合溶劑中進行，加入質(zhì)量百分比為2％的甘油，制備得到醋酸亞鐵前驅(qū)體；將前驅(qū)體粉末灼燒，溫度為400℃，灼燒后得到FeOx粉體；將FeOx粉體在10000r/min速度下離心得到上下兩層不同粒徑FeOx粉末；將FeOx粉末加入到細胞培養(yǎng)基中，并將該細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)置于磁場中；將利用磁場篩選的磁性較強的細胞放入90％血清凍存液中凍存。解決了無機或有機材料的納米改性而非活體細胞的改性的缺陷。本發(fā)明利用納米磁性粒子改性細胞使其帶有順磁性，從而具備了新的物理化學屬性，而又不會干擾其正常的生物學性能。
文檔編號C12N13/00GK101768584SQ20101001764
公開日2010年7月7日 申請日期2010年1月11日 優(yōu)先權日2010年1月11日
發(fā)明者文劍, 趙偉 申請人:南京市第二醫(yī)院