專利名稱：：一種調節(jié)核酸分子活性的方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及試劑，其調節(jié)(例如，抑制或者逆轉)核酸分子(例如，適體(D或者L)，siRNAs，microRNAs，反義RNAs，包括上述分子的修飾形態(tài)(例如，2'F，2'0Me，2'B，2'1，2'NH等等))的藥理學活性。更具體地說，本發(fā)明涉及試劑，其以不依賴于序列的方式結合治療性或者診斷性核酸分子并且調節(jié)(例如，抑制或者逆轉)它們的活性。本發(fā)明也涉及包括上述試劑的組合物及其使用方法。本發(fā)明的目標以及優(yōu)點將在下面清楚地描述。圖IA和圖IB:在APTT分析中魚精蛋白逆轉因子IXa適體以及因子X適體的活性。魚精蛋白(2.5iig)對于使用針對人因子IXa(圖1A)的適體("Ch-9.3t")或者使用針對人因子Xa(圖IB)的適體("llf7t")進行抗凝結處理的人血槳的凝固時間的影響。圖2:魚精蛋白逆轉兩種適體的活性。圖3:PPA-DPA逆轉VonWillebrandR9.3適體的活性。圖4A-圖4C:在豬抗凝結模型中魚精蛋白逆轉因子IXa適體。具體實施例方式本發(fā)明涉及試劑("通用解毒劑")(UAs)，其能調節(jié)核酸分子(NAMs)的藥理學活性，包括治療的以及診斷的NAMs。本發(fā)明更進一步地涉及通過對人或者非人哺乳動物施用這樣的UAs以調節(jié)(例如，逆轉/抑制)NAMs藥理學作用的方法。另外，本發(fā)明涉及使用本發(fā)明的UAs以評估NAMs活性的方法。藥理學的NAMs包括但不局限于，適體、siRNAs、microRNAs、反義RNAs、適體-siRNA嵌合體、mRNAs、核糖酶以及antagomirs，其結合想要的耙分子。適體靶分子一般地包括肽，蛋白質，糖蛋白，聚糖以及核酸，還有小分子量(有機)化合物。更具體地說，適體靶分子可以包括酶(例如，蛋白酶，包括因子VIIa，IXa，Xa，XIa，凝血酶以及蛋白質C)以及其酶原。適體靶分子也包括激素，受體(包括血小板受體，例如，糖蛋白(gp)IIbIIIa，GPIb-IX-V，GPVI，P2Y12，以及PARs)，粘著分子(例如，vonWillebrand因子以及膠原)代謝物，輔助因子(例如，組織因子，或者凝血因子Va以及VIIIa)，過渡狀態(tài)同型物，以及藥物，染料和毒素?？梢允褂肧ELEX方法制造適體(參見，例如，USPs5，270，163、5，817，785、5，595，887、5，496，938、5，475，096、5，861，254、5，958，691、5，962，219、6，013，443、6，030，776、6，083，696、6，110，900、6，127，119和6，147，204，也參見公開的美國申請?zhí)?0030083294和其中引用的文獻))。特異性針對于各式各樣的靶分子的適體目前是可得到的(參見，例如，Gold等人，Ann.Rev.Biochem.64:763(1995)，Nimjee等人，An皿.Rev.Med.56:555-83(2005))。例如siRNAs，microRNAs以及反義RNAs等產(chǎn)品的細節(jié)以及在修飾基因表達中使用這些應s的方法已被描述，例如，見Dorsett和Tuschl，NatRevDrugDiscov.3(4):318-29(2004)，F(xiàn)ire等人，Nature391(6669):806-11(1998)，Grishok等人，Cell106(1):23-34(2001)，Lagos-Quintana，等人，Rna9(2):175-9(2003)，Leaman等人，Cel1121(7):1097-108(2005)，Martinez等人，Cell110(5):563-74(2002)，Meister等人，Rnal0(3):544-50(2004)，Meister和Tuschl，Nature431(7006):343-9(2004)，Pfeffer等人，Science304(5671):734-6(2004)，Tuschl，NatBiotechnol.20(5):446-8(2002)，Tuschl和Borkhardt，MolInterv.2(3):158-67(2002)。本發(fā)明涉及調節(jié)(例如，逆轉或者抑制)NAM活性的方法，例如，通過改變它的構造并且因此改變它的功能和/或在空間上阻礙NAM與其靶分子的結合。根據(jù)本發(fā)明，UA可以和目標NAM接觸，例如，在如此條件下以致它與NAM結合起來并且修飾NAM和其靶分子之間的相互作用。UA還可以通過電荷交互作用妨礙NAM與其靶分子的結合。對NAM和其靶分子之間相互作用的修飾可以源于，例如，作為被UA結合的結果而導致的對NAM結構的修飾。該UA可以結合游離的NAM和/或與其耙分子結合起來的NAM。本發(fā)明的UAs包括制藥上可接受的一組帶正電荷的化合物成員，包括蛋白質，脂質，和天然合成的多聚物，其可以在，例如，生物學流體中結合NAM。魚精蛋白是一組蛋白質，其在水解反應中產(chǎn)生堿性的氨基酸而且在魚的，例如鮭魚的，精液中與核酸發(fā)生結合。魚精蛋白可溶于水，通過加熱不會凝結，并且包含精氨酸，丙氨酸和絲氨酸(大部分也包含脯氨酸和纈氨酸，并且許多包含甘氨酸和異亮氨酸)。幾十年來，純化形態(tài)的魚精蛋白已經(jīng)被用于中和肝素的抗凝血劑作用。本發(fā)明的UAs也包括魚精蛋白變體(例如，+1810變體(Wakefield等人，J.Surg.Res.63:280(1996))以及魚精蛋白的修飾形式，包括那些在公開的美國申請?zhí)?0040121443中描述的。本發(fā)明另外的UAs包括魚精蛋白片段，例如那些在USP6，624，141以及美國公開的申請?zhí)?0050101532中描述的。一般地，本發(fā)明的UAs也包括調節(jié)肝素、其他的葡糖氨基聚糖類或者蛋白聚糖類(參見，例如USP5，919，761)的活性的肽。本發(fā)明更進一步地包括上述UAs在制藥上可接受的鹽，例如適當?shù)陌蛩猁}。本發(fā)明UAs的例子可以包括在表1中描述的化合物類型，其中好幾個包含了陽離子-NH基團，其確保了與磷酸二酯主鏈之間穩(wěn)定的電荷-電荷相互作用。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>本發(fā)明白々TheProtamines禾口原(Kossel，.Chem.330:J某些UAs，例如，魚精蛋白，可以分離自天然的來iHistories(Longmans,NY(1928);Felix等人，Z.Physiol205(1963);Ando等人，Int.J.Prot.Res.1:221(1969);Felix，Adv.Prot.Chem.15:1(1960)。另外地，可以重組地、化學地或者合成地生產(chǎn)蛋白質性質的UAs。表l中描述的UAs是商業(yè)上可獲得的和/或是使用本領域已知技術生產(chǎn)的。標準的結合分析，例如，可用于篩選本發(fā)明優(yōu)選的UAs(例如，使用BIACORE以及等溫的微量熱檢定分析法)。也就是說，試驗化合物(例如，魚精蛋白片段或者變體或者魚精蛋白的修飾形態(tài))可以在有利于結合的條件下和目標NAM(例如，適體，等等)接觸，并且測定試驗化合物實際上是否結合NAM。那些被發(fā)現(xiàn)能夠結合NAM的試驗化合物因此能在恰當?shù)纳飳W測定(其取決于NAM以及它的靶分子)中被分析，以便決定是否該試驗化合物可以影響NAM與其靶分子的結合和/或調節(jié)(例如，逆轉)NAM的活性，或者在功能性測定中修飾NAM以及它的活性。本發(fā)明的UAs可用于，例如，逆轉NAMs(例如，適體，等等)的抗凝血劑以及抗血栓形成作用，這些NAMs靶向至凝結途徑的組分，特別是組織因子(TF)/因子VIIa(FVIIa)、因子VIIIa(FVIIIa)/因子IXa(FIXa)、因子Va(FVa)/因子Xa(Fxa)酶復合物以及血小板受體，例如GPIIb-IIIa以及GPVI，涉及促進血小板活化的因子，例如Gas6，vonWillebrand因子，膠原，涉及促進或者維持血纖維凝結形成的因子，例如PAI-l(血纖蛋白溶酶原激活物抑制劑1)或者組織凝血活酶XIIIa(FXIIIa)，以及涉及促進或者阻止血纖維凝結形成的附加因子，例如ATIII(抗凝血酶III)，凝血酶或者凝固作用因子XIa(FXIa)的拮抗劑。以足夠調節(jié)(例如，逆轉)NAM活性的劑量施用本發(fā)明的UAs。存在好幾個臨床情況，其中能夠迅速地逆轉抗血栓形成的NAM活性或者抗凝血劑NAM的活性是合乎需要的。第一種情況是當抗凝血劑或者抗血栓形成的治療導致出血時，包括顱內的或者胃腸的出血。第二種情況是當已經(jīng)接受抗血栓形成治療的病人需要的緊急手術時。在需要緊急冠狀動脈旁路移植術并處于GPIIb/IIIa抑制劑有效作用之下進行經(jīng)皮的冠狀動脈介入的病人中，這些臨床情況以低的百分率出現(xiàn)。在這些情況中，當前的實踐將允許化合物(如小分子拮抗劑，例如依替巴肽)的清除，其可能費時2-4個小時，或者血小板輸注(用于阿昔單抗治療)。第三種情況是在心肺轉流術期間使用抗凝血劑NAM。轉流術病人傾向于發(fā)生外科手術之后的流血。在所有情況下，通過解毒劑(例如，本發(fā)明的蛋白質調節(jié)劑)對于化合物的抗凝血劑作用的急性反轉允許改善的、以及很可能的更安全的、對于抗凝血劑或者抗血栓形成化合物的藥物控制。同樣地，在處于抗血栓形成的病人巻入意外傷害或者遭受顱內出血以及失血而不能被停止的時候，本發(fā)明的UAs可被使用。本發(fā)明的UAs可被用于想要控制NAM活性的任何情況。耙向至抗血栓形成的和抗凝血劑NAMs僅僅是一個例子。本發(fā)明的UAs還可以用于，例如，調節(jié)(例如，逆轉)那些靶向至白細胞介素的NAMs的免疫抑制作用，例如，在易受傳染的病人中。該UAs可用于，例如，逆轉那些靶向至處于自身免疫性發(fā)展風險中的病人體內的CTLA4的NAMs的免疫剌激作用。本發(fā)明的UAs還可以用來抑制那些激活免疫系統(tǒng)的NAMs。如果，例如，由于NAMs與免疫激活細胞結合起來而導致的過度激活免疫反應，病人因此進入全身性休克，本發(fā)明的UAs可用于逆轉該效果。本發(fā)明的UAs可用于調節(jié)(例如，逆轉)NAMs的效用，該NAMs靶向至涉及在骨骼肌和/或自主神經(jīng)節(jié)(例如，煙堿的乙酰膽堿或者煙堿性膽堿功能受體)進行神經(jīng)沖動傳送的受體?？梢陨a(chǎn)這樣的NAMs，以便在麻醉期間引起肌肉松弛或者癱瘓。那些阻礙乙酰膽堿受體活性的試劑(那些產(chǎn)生神經(jīng)肌肉阻抑的試劑)通常用在外科手術期間，最好是用在病人在外科手術之后，使肌肉機能可以盡快徹底恢復，以便減少并發(fā)癥，并且改善病人在手術場地的周轉。因此，已經(jīng)做出了許多努力去生產(chǎn)具有可預測的藥物動力學的試劑，以使試劑活性持續(xù)時間與外科手術操作的預期持續(xù)時間相匹配。另外地，本發(fā)明的UAs可用于對神經(jīng)肌肉阻斷劑活性提供所期望的控制，并且因此減少對于病人生理機能的依賴以提供神經(jīng)肌肉阻滯劑的反轉。本發(fā)明的UAs可用于調節(jié)(例如，逆轉)那些耙向至生長因子(例如PDGF或者VEGF)的NAMs的效用。這樣的NAMs可被用于治療腫瘤以及治療炎癥性增生性的疾病。既然生長因子在正常細胞生存以及增殖中具有系統(tǒng)性作用，如果不緊密地調控，NAM治療可以導致健康的組織被破壞(例如，接受靶向至血管生成素I的NAM的病人容易出血)。本發(fā)明的UAs可用于提供必要的調控。本發(fā)明的UAs可用于調節(jié)(例如，逆轉)那些靶向至小分子，例如葡萄糖的NAMs的效用。使用本發(fā)明的調節(jié)劑可以避免在接受葡萄糖靶向的NAMs以便調節(jié)葡萄糖吸收的病人中的低血糖。該UAs還可以用來調節(jié)直接針對E2F家族成員的NAMs的活性，該家族中的某些是原增生性的，該家族中的某些是抑制性的。本發(fā)明的UAs可用于在細胞周期中想要的時刻"關掉"這樣的NAMs。本發(fā)明的UAs還可以用來逆轉帶有放射性的或者細胞毒素性部分的NAMs與耙組織(例如，腫瘤組織)的結合，例如，促進此類部分從病人組織中的清除。類似地，本發(fā)明的UAs可用于逆轉標記有可檢測的部分(使用在，例如，成像或者細胞分離或者分類)的NAMs與靶細胞或者組織的結合(參見，一般地，Hicke等人，J.Clin.Invest.106:923(2000);Ringquist等人，Cytometry33:394(1998))。這些反轉可用于加快可檢測的部分從病人組織中的清除。本發(fā)明的UAs還可以用于體外環(huán)境以便調節(jié)(例如，抑制)NAM(例如，適體，等等)對于靶分子的效用。例如，本發(fā)明的一種UA可用于調節(jié)(例如，逆轉)NAM對于存在于靶分子混合物中的一種特定靶分子的效用。本發(fā)明的UAs可以配制成為藥物組合物，其可以包括，除該UA之外，制藥上可接受的載體，稀釋劑或者賦形劑。該組合物的確切特性將依賴于，至少部分地，該UA的性質以及給藥途徑。本領域技術人員可以容易地確定其最恰當?shù)膭┝?，并且可以隨UA、病人以及所尋求的效果而變化。一般地，視情況而定該UA可以IV，IM，IP，SC，或者局部地形式給藥。此外，因為該解毒劑的活性是持久的，一旦達到了通過該解毒劑而對NAM調節(jié)的想要的水平，可以終止輸注該解毒劑，聽憑剩余的解毒劑凈化該人或者動物。如有需要，允許利用NAM對人或者動物作后續(xù)重復處理。引入包括編碼蛋白質性質UA的序列的構建體后，本發(fā)明的蛋白質性質的UAs還可以在活體內生產(chǎn)(Harrison,BloodRev.19(2):111-23(2005))。本發(fā)明的某些方式將在下面以非限制性例子的形式更加詳細地進行說明。說明APTT以及其它凝結測定的文獻:Quinn等人，J.Clin.Lab.Sci.13(4):229-238(2000)在此引用作為參考。這些綜述描述了各種各樣的凝結測定的參數(shù)以及生物化學機理，包括APTT、PT以及凝血酶時間測定，以及它們在診斷凝血病中的應用。實施例1數(shù)百萬的個體已經(jīng)接受了魚精蛋白，一組正電性的蛋白質，以便逆轉肝素的血液稀釋效果，特別是在心肺轉流術手術之后。關于一種結合人凝血酶的RNA適體的晶體結構的研究顯示，適體在類似的位置與凝血酶結合起來，正如同肝素一樣。既然肝素的活性可以利用魚精蛋白來逆轉，為了檢驗適體也許具有其他的類似于肝素的性質的假設，進行了一項研究以便確定是否適體活性可以用魚精蛋白來中和。為了檢驗這種可能性，利用兩個不同的適體對人血漿進行抗凝固處理，一個適體針對人因子IXa(命名為CH-9.3t(37nt，2'氟嘧啶修飾的ssRNA分子，并在5'末端上具有一個膽固醇部分，3'idt)9.3t(除沒有載體之外和CH-9.3t—樣))以及第二個適體針對人因子Xa(命名為11f7t(37nt長，2'氟嘧啶修飾的RNA分子))。如圖1所示，正如同在aPTT分析中測量到的，對人血槳添加適體(150nMCh9.3t和250nM11f7t)顯著地增加了凝固時間。就因子IXa適體來說，凝固時間從大約34秒的基線值增加到大約87秒(圖1A)。在已經(jīng)利用因子IXa的適體抗凝固之后，對血漿添加魚精蛋白(2.5iig)會在添加之后5分鐘內使凝固時間回復正常。這一逆轉至少維持一小時。類似地，在aPPT分析中，因子Xa的適體(250nM)將正常人血漿的凝固時間從大約28秒增加到大約97秒。如圖1B所示，魚精蛋白(2.5iig)的給藥在5分鐘內完全地逆轉了因子Xa適體的活性(也參見圖2)。實施例2表2包括了源于UA對照適體實驗的數(shù)據(jù)摘要(參見上面的實施例l(Bi-9.3t)(37nt，2'氟嘧啶修飾的ssRNA，在5'末端上具有生物素))。表2-普通的解毒劑對比適體實驗<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>的變量敏感，大量研究顯示它對某些血小板受體缺陷(主要是GPIb-IX-V以及GPIIbIIIa)以及VWF缺陷最敏感(參見圖3)。實施例4實驗的細節(jié)將家豬(2.5-3.5kg)隨機地分配到治療組。對于所有組，通過氯胺酮(22mg/kg)以及乙酰丙嗪(1.lmg/kg)的肌肉注射誘發(fā)麻醉。將一個導管放入耳靜脈中，通過它使用芬太尼維持麻醉，首先使用100g/kg的快速注射，然后使用60gkg—1h—1的連續(xù)輸注。然后給豬插管并且機械地通氣。放置食道的或者直腸的溫度探針以及SP02監(jiān)視器之后，給股動脈以及靜脈插套管。動脈的管路用作平均值以便連續(xù)地監(jiān)視平均動脈血壓和心率，以及為了ACT的評估而除去血樣。在確定基線ACT值之后，靜脈管路用來施用因子IXa適體(0.5mg/kg)。在適體給藥之后5、15和30分鐘時從動脈的管路吸取血樣。利用HemochronJr.SignatureMicrocoagulationSystem(ITC，EdisonN.J.)測量ACT值。對于包括解毒劑給藥的實驗，在適體注射30分鐘之后通過股靜脈導管施用40毫克魚精蛋白(lOmg/mL)超過五分鐘。對于所有的動物，在適體給藥之后的35、40、55、60、75和90分鐘采集連續(xù)的血樣。所有的數(shù)據(jù)點在每個動物中重復做兩次。在實驗結束時，通過股靜脈使用正丁巴比妥(175mg/kg)對家豬實施安樂死。根據(jù)由國家健康研究中心出版的關心和利用實驗動物指南，所有的動物接受人道的治療，正如同Duke大學動物關心和利用委員會批準的那樣。題在一些心血管手術的操作期間，立即的抗凝作用和迅速的逆轉是必要的，最常見的是心肺轉流術(CPB)，這正如同在冠狀動脈旁路移植術(CABG)期間使用的。沒有有效的抗凝作用將會形成血液凝塊，并且血液不會在身體外的回路中循環(huán)。無論如何，經(jīng)過手術過程后，這些值必須回到治療前的水平，以便防止從外科手術位置的大出血。在體外利用APTT成功地確定魚精蛋白能逆轉因子IXa和因子Xa適體的活性至少60分鐘之后，在活體內檢驗了魚精蛋白逆轉適體抗凝作用的能力。如圖4A所示，使用0.5mg/kg的因子IXa適體成功地對家豬實施了抗凝固，這一點通過從105秒之后的ACT的一個立即的增加而證明。在沒有施用解毒劑的時候，抗凝作用的水平逐漸地減少，與分子的90-分鐘半衰期一致(Rusconi等人，Nat.Biotechnol.22(1):1423-1428(2004))。然而，施用10mg/kg的魚精蛋白(大約每只動物40mg)，在五分鐘之內由ACT測量的凝固時間迅速地回到治療前的基線水平，顯示出對抗凝作用的徹底逆轉(圖4B)。另外，這一逆轉在整個實驗時期內是持久的(至少一個小時)，逆轉后獲得的所有ACT值都低于足夠的抗凝作用所需要的水平(圖4C)。因此，因子IXa適體的快速注射導致立即的抗凝作用，其被魚精蛋白成功地逆轉。實施例5為了逆轉適體的功能，解毒劑不得不通過高度的親合力與適體結合而能與靶蛋白競爭。通過等溫的滴定量熱法(ITC)已經(jīng)研究了適體9.3t與大量聚合物和多陽離子分子的結合親合力。在測量中，UA溶液通過計算機控制的微量調節(jié)注射器在PBS中的298K滴定進入適體9.3t。結合常量以及一些熱力學參數(shù)概括在表3中。在所選定的聚合物之中，PAMAM樹枝狀聚合物，PPA-DPA30k以及PLL顯示了與適體9.3t顯著的親合力；然而，在8.47X105M—'條件下適體9.3t與PPA-DPA8k的結合常數(shù)是低得多的。沒有觀察到對于天然的聚胺、精胺以及亞精胺的顯著結合。這些結果與體外以及體內研究一致，這些研究顯示具有對于適體的強大親合力是通用解毒劑的基本的標準。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>通過利用來源于MicroCal，LLC的恒溫的以及完全電腦操作的MCS-ITC熱量計實施等溫的量熱法測量(ITC)。在298K下超過2個小時的時間內每5分鐘滴定10yL的等量部分進入量熱的單元。為了每個系統(tǒng)研究進行空白試驗，其中滴定劑被滴定入僅僅包含PBS的單元以便允許對于由于已造成的稀釋導致的熱效應進行校正。利用Origin5.0軟件包的定制化ITC模塊以及最小二乘法擬合程序進行數(shù)據(jù)分析以便使數(shù)據(jù)適合于恰當?shù)慕Y合模型。權利要求一種調節(jié)與靶分子結合并且引起藥理學功效的核酸分子(NAM)活性的方法，所述方法包括在通用解毒劑(UA)結合至所述NAM并且修飾所述NAM與所述靶分子之間的相互作用的條件下，使所述NAM與通用解毒劑(UA)接觸。2.根據(jù)權利要求l的方法，其中所述方法是逆轉或者抑制所述NAM的活性的方法。3.根據(jù)權利要求1的方法，其中所述NAM是適體、siRNA、microRNA、核糖酶或者antagomir。4.根據(jù)權利要求3的方法，其中所述NAM是適體。5.根據(jù)權利要求l的方法，其中所述靶分子是肽，蛋白質，糖蛋白，聚糖或者核酸。6.根據(jù)權利要求5的方法，其中所述靶分子是酶，激素，受體，粘著分子，代謝產(chǎn)物，或者輔助因子。7.根據(jù)權利要求5的方法，其中所述靶分子是因子VIIa，因子IXa，因子Xa，因子XIa，凝血酶或者蛋白質C。8.根據(jù)權利要求1的方法，其中所述UA是制藥上可接受的帶正電荷的蛋白質，脂質，或者天然的合成聚合物，或者其制藥上可接受的鹽。9.根據(jù)權利要求8的方法，其中所述UA是魚精蛋白或者其片段。10.根據(jù)權利要求1的方法，其中所述UA逆轉所述NAM的免疫系統(tǒng)激活效應。11.根據(jù)權利要求2的方法，其中所述UA逆轉所述NAM的抗凝血劑與抗凝血酶功效。12.根據(jù)權利要求2的方法，其中所述UA逆轉所述NAM的免疫抑制功效。13.根據(jù)權利要求2的方法，其中所述UA逆轉所述NAM的乙酰膽堿受體阻礙活性。14.根據(jù)權利要求l的方法，其中所述接觸是在活體內實施。15.根據(jù)權利要求14的方法，其中在對需要的病人給藥之后，所述UA是在活體內生產(chǎn)，其中構建體包括編碼所述UA的核酸序列。16.根據(jù)權利要求15的方法，其中所述UA是魚精蛋白，并且所述NAM是針對人因子IXa或者人因子Xa的適體。17.根據(jù)權利要求14的方法，其中所述接觸是在哺乳動物中實施的。18.根據(jù)權利要求17的方法，其中所述哺乳動物是人。19.一種篩選候選UA的方法，包括使試驗化合物與NAM接觸并且測定所述試驗化合物是否與所述NAM結合，其中與所述NAM結合的試驗化合物是候選UA。全文摘要本發(fā)明涉及試劑，其調節(jié)核酸分子的藥理學活性，特別地，該試劑以不依賴于序列的方式結合治療性或者診斷性核酸分子，并且調節(jié)(例如，抑制或者逆轉)它們的活性。本發(fā)明也涉及包括這樣的試劑的組合物及其用法。文檔編號C12N15/85GK101702917SQ200880017825公開日2010年5月5日申請日期2008年3月31日優(yōu)先權日2007年3月30日發(fā)明者凱姆·里恩,布魯斯·A·撒蘭格,湯·蘇特魯比·蘭姆,沙巴·昂尼申請人:杜克大學