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一株乳桿菌種、含有該乳桿菌的微生態(tài)制劑的制備方法以及其應用的制作方法

文檔序號:521428閱讀:201來源:國知局

專利名稱::一株乳桿菌種、含有該乳桿菌的微生態(tài)制劑的制備方法以及其應用的制作方法
技術領域
:本發(fā)明涉及一株乳桿菌、含有該乳桿菌的微生態(tài)制劑以及其在動物生產中的應用,屬于生物
技術領域
。
背景技術
:飼料添加劑是飼料的核心問題,自從發(fā)現(xiàn)詞用抗生素可以通過影響腸道微生物初期在宿主體內的定植,從而起到促生長的作用之后,抗生素的應用在畜牧業(yè)方面產生了巨大的經(jīng)濟效益。但是由于抗生素的大量使用,隨之出現(xiàn)的負面效應也曰益突出,表現(xiàn)為病原微生物產生耐藥性和藥物在動物產品中殘留,從而對人類的健康產生潛在的危害。因此,抗生素替代品益生菌、酶制劑、酸制劑等的研究與開發(fā)成為近年來綠色詞料添加劑的熱點,其中益生菌備受關注。乳酸菌是微生態(tài)制劑中最重要的一類,可以促進營養(yǎng)的消化吸收,產生乳酸等物質抑制腸道腐敗菌、致病菌的繁殖,抑制腸道感染,解除腹瀉,并具有免疫活等作用。但是一般乳酸菌對干燥、高溫、胃酸和膽汁等不良環(huán)境因子的抗性差,能活著進入腸道的乳酸菌種類和數(shù)量不多,目前市場上發(fā)部分產品都存在活菌數(shù)衰減的問題。作為益生菌的一種,芽孢桿菌由于具有抗逆性強、耐高溫高壓、易貯存等特點,其在動物生產中的作用是畜牧業(yè)的科研和生產人員所關注的焦點。但是我國飼料行業(yè)微生態(tài)制劑的生產的菌種比較落后,急需要篩選出更多種繁殖力強、性能穩(wěn)定等特點的菌種以供生產應用。
發(fā)明內容本發(fā)明的第一個目的是提供一種乳桿菌,該乳桿菌耐酸、耐受一定的高溫,可以對大腸桿菌的生長和繁殖產生抑制作用。本發(fā)明的第二個目的是提供一種含有上述乳桿菌的微生態(tài)制劑,該制劑可有效替代抗生素作為動物飼料的添加劑,甚至其作用效果超過抗生素。本發(fā)明的第三個目的是提供一種含有上述乳桿菌微生態(tài)制劑的動物飼料,該飼料對調節(jié)畜禽腸胃微生物群落,維持腸道菌群平衡,提高生產性能等方面具有良好的促進作用。本發(fā)明的第四個目的是提供上述乳桿菌、乳桿菌微生態(tài)制劑在動物飼料方面的應用。為實現(xiàn)本發(fā)明的第一個目的提供一種乳桿菌,該乳桿菌為于2008年4月1日保藏在《中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心》的乳桿菌丄acto6,7/^^.,保藏中心登記入冊編號CGMCCNo.2427。所述的乳桿菌(Za"o6acz7/w;y平)CGMCCNo.2427為革蘭氏陽性桿菌,在肉汁培養(yǎng)基上的菌落為扁平、邊緣不整齊、白色、表面粗糙皺褶,24h后菌落直徑為3mm。細胞形態(tài)和排列呈桿狀、單生,細胞內無聚-e-羥基丁酸鹽(PHB)顆粒,細胞大小為0.8pmx(1.53.5^m。產生近中生的橢圓狀芽孢,孢囊稍膨大。本菌有動力,可利用葡萄糖產生乳酸。本發(fā)明提供的乳桿菌(丄actokc77/w平)CGMCCNo.2427除具有上述特征之外,還具有耐酸、耐高溫等生物學特性1)該乳桿菌在pH二3的環(huán)境中,在4小時以內存活率達到90%以上。一般地,動物胃液的pH在24,這種酸性環(huán)境條件對有益菌的致死率是困擾益生菌篩選的主要問題,而本發(fā)明的乳桿菌在這種酸性條件下,存活率很高。2)該乳桿菌在95'C處理10min的時候,存活率在50%以上。幼齡動物飼料一般要經(jīng)過制粒,以提高動物的生產性能,在制粒過程中,溫度通常在608(TC,而大多數(shù)的微生物很難在如此高溫下生存,而本發(fā)明提供乳桿菌在較高溫度下能生存,具有耐高溫性。大腸桿菌是導致動物發(fā)生消化道疾病的主要微生物,所以抑制大腸桿菌的生長可以控制消化道疾病的發(fā)生,本發(fā)明所述的乳桿菌aa加^d/^平)CGMCCNo.2427可以對大腸桿菌的生長和繁殖產生抑制作用,大約從培養(yǎng)12-15小時開始出現(xiàn)的抑制作用,在18小時的時候達到最大值,并且一直保持該水平直到48小時之久,這也能說明抑菌物質比較穩(wěn)定,其抑菌半徑在l厘米左右。本發(fā)明的第二個目的提供一種乳桿菌微生態(tài)制劑,采用上述乳桿菌在培養(yǎng)基中經(jīng)過充分培養(yǎng)、發(fā)酵后得到的代謝產物與無機物混合,經(jīng)烘干、粉碎后得到微生態(tài)制劑。所述的乳桿菌微生態(tài)制劑包括如下步驟制備5乳桿菌aa"o6""7/w平)CGMCCNo.2427在培養(yǎng)基中經(jīng)過充分培養(yǎng)、發(fā)酵后得到的代謝產物與無機物混合,經(jīng)烘干、粉碎后得到微生態(tài)制劑。所述的培養(yǎng)、發(fā)酵過程包括將乳桿菌接種于斜面培養(yǎng)基進行培養(yǎng),得到的種子培養(yǎng)物再接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。所述的斜面培養(yǎng)基為適合乳桿菌培養(yǎng)的任何培養(yǎng)基,其優(yōu)選的培養(yǎng)基的配方為蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化鈉5g、葡萄糖2.5g、瓊脂15g以及蒸餾水1000ml。所述的液體培養(yǎng)基為合適乳桿菌培養(yǎng)的任何培養(yǎng)基,其優(yōu)選葡萄糖營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,更優(yōu)選培養(yǎng)基的配方為蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化鈉5g、葡萄糖2.5g以及蒸餾水1000ml。所述的培養(yǎng)過程為微生物培養(yǎng)、發(fā)酵常用的方法。其優(yōu)選,所述的培養(yǎng)是在溫度為3537'C的條件下,培養(yǎng)20-80小時。其優(yōu)選,乳桿菌接種于斜面培養(yǎng)基,在溫度為37'C恒溫箱中培養(yǎng)72小時,作為種子培養(yǎng)物;所述的種子培養(yǎng)物接種于葡萄糖營養(yǎng)肉湯,在溫度為37'C時,培養(yǎng)24小時。所述的乳桿菌進行培養(yǎng)、發(fā)酵的接種量為1%。接種量是指移入的種子的液體體積和接種后培養(yǎng)液體體積的比例。所述的無機物包括輕質碳酸鈣或白碳黑。所述的培養(yǎng)、發(fā)酵后得到的代謝產物與無機物混合時的重量比為1:1-8,根據(jù)該微生態(tài)制劑在不同動物飼料中需要的含量不同,本領域技術人員可以根據(jù)需要經(jīng)過有限次的試驗將代謝和無機物之間的比例進行調整。本發(fā)明的動物飼料包括動物日糧與本發(fā)明的乳桿菌微生態(tài)制劑,其中乳桿菌微生態(tài)制劑的添加量為動物飼料重量的0.005%0.5%,其優(yōu)選0.01%0.15%。所述的動物日糧,包括豬用日糧、雞用日糧、反芻動物用日糧或水產動物用曰糧,對于不同的動物,其日糧的配方各不相同,但是,現(xiàn)有技術公開的任何日糧可以作為本發(fā)明的動物飼料,其配方都是該領域的公知常識。本發(fā)明的乳桿菌、其微生態(tài)制劑作為添加劑用于制備動物飼料,其中動物包括但不限于豬、牛、羊、雞等動物,其優(yōu)選豬、雞。本發(fā)明的乳桿菌a""o6a"7/w";.)CGMCCNo.2427具有耐酸、耐高溫、抑制大腸桿菌生長等性能穩(wěn)定的菌株,該乳桿菌微生態(tài)制劑作為動物的飼料添加劑,其可以替代現(xiàn)有動物日糧中的抗生素,改善消化道微生物區(qū)系、能剌激腸道內有效微6生物的增生,提供營養(yǎng)因子,促進營養(yǎng)物的消化吸收、降低腹瀉、促進動物的生長、增加胸肌重量并改善飼料利用率,提高仔豬、雞等的生產性能。本發(fā)明的乳桿菌及其微生態(tài)制劑對防治動物消化系統(tǒng)疾病起到保健作用,同時對幼年動物可刺激其胃腸道發(fā)育,降低卵黃囊炎癥引起的死亡率。本發(fā)明的乳桿菌及其微生態(tài)制劑無耐藥性和藥物在動物產品中殘留從而對人類的健康產生潛在的危害的可能,是一種有前途的詞料添加劑。保藏說明菌株乳桿菌ia"o6flc〃/iASjp.保藏日期2008年4月1日保藏單位中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏地址北京市朝陽區(qū)大屯路,中國科學院微生物研究所郵政編碼100101保藏編號CGMCCNo.2427具體實施例方式下面結合實施例詳細介紹本發(fā)明,所述的實施例用來理解而并非限制本發(fā)明。實施例1本實施例為保藏號為CGMCCNo.2427的乳桿菌的篩選過程,具體步驟如下(1)、出發(fā)菌種的初篩利用RogosaSL完全選擇性培養(yǎng)基對仔豬消化道不同位置的徼生物進行選擇行篩選,以獲得乳桿菌。其中RogosaSL完全選擇性培養(yǎng)基配方為現(xiàn)有技術,具體為胰蛋白胨10g,酵母浸粉5g,葡萄糖10g,阿拉伯糖5g,蔗糖5g,醋酸鈉15g,枸椽酸銨2g,磷酸二氫鉀6g,七水硫酸鎂0.58g,四水硫酸錳0.258,硫酸亞鐵0.03g,吐溫-80lg,瓊脂13g,蒸餾水1000mL,用醋酸調節(jié)pH至5.0。(2)、芽孢乳桿菌的復篩利用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基對初篩出的乳桿菌進行發(fā)酵,以在溫度為80攝氏度,5分鐘復篩;其中營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基配方為現(xiàn)有技術,具體為蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化鈉5g、葡萄糖2.5g、瓊脂15g以及蒸餾水1000ml。(3)、菌種的益生特性篩選利用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基對耐酸性較髙的乳桿菌進行乳酸產量的篩選以及對致病性大腸桿菌抑制性能的篩選,以獲得益生性能較好的乳桿菌。其中,乳酸產量篩選的標準是,在接種量為1.0%的條件下,經(jīng)過20小時培養(yǎng)后,培養(yǎng)基中乳酸的含量要達到5-6%以上。對治病性大腸桿菌抑制性能的篩選的標準為乳桿菌對致病性大腸桿菌K88、K99或987P的抑菌直徑要達到l.Ocm左右。經(jīng)過篩選,得到一株乳桿菌Za"o^"7/^^.,2008年4月1日保藏于《中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心》,保藏號為CGMCCNo.2427。該菌菌落為扁平、邊緣不整齊、白色、表面粗糙皺褶,24h后菌落直徑為3mm。細胞形態(tài)和排列呈桿狀、單生,細胞內無聚-e-羥基丁酸鹽(PHB)顆粒,細胞大小為0.8pmx(1.53.5)pm。產生近中生的橢圓狀芽孢,孢囊稍膨大。本菌有動力,可利用葡萄糖產生乳酸。該乳桿菌在pH-3的環(huán)境中,在4小時以內存活率達到90%以上。該乳桿菌在95'C處理10min的時候,存活率在50%以上。對大腸桿菌的生長和繁殖產生抑制作用,大約從培養(yǎng)12-15小時開始出現(xiàn)的抑制作用,在18小時的時候達到最大值,并且一直保持該水平直到48小時之久,其抑菌半徑在1厘米左右。實施例2將實施例l得到的乳桿菌aa"oZwc/〃M取)保藏號CGMCCNo.2427接種于斜面培養(yǎng)基中,所述的斜面培養(yǎng)基配方為蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化鈉5g、葡萄糖2.5g、瓊脂15g以及蒸餾水1000ml,在恒溫箱中溫度為37'C的溫度下培養(yǎng)72小時,得到種子培養(yǎng)物,將該種子培養(yǎng)物接種于葡萄糖液體培養(yǎng)基中,所述的葡萄糖液體培養(yǎng)基配方為蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化鈉5g、葡萄糖2.5g以及蒸餾水1000ml,在溫度為37'C條件下恒溫24小時,得到的培養(yǎng)物與輕質碳酸鈣按1:3重量比例混合,經(jīng)干燥、粉碎得到乳桿菌微生態(tài)制劑。實施例3將實施例l得到的乳桿菌aa"o6acz7/ww/.)保藏號CGMCCNo.2427接種于斜面培養(yǎng)基中,所述的斜面培養(yǎng)基配方為蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化鈉5g、葡萄糖2.5g、瓊脂15g以及蒸餾水1000ml,在恒溫箱中溫度為35'C的溫度下培養(yǎng)60小時,得到種子培養(yǎng)物,將該種子培養(yǎng)物接種于葡萄糖液體培養(yǎng)基中,所述的葡萄糖液體培養(yǎng)基配方為蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化鈉5g、葡萄糖2.5g以及蒸餾水1000ml,在溫度為36"C條件下恒溫40小時,得到的培養(yǎng)物與白炭黑實驗例1本實驗例是實施例2所得到的乳桿菌微生態(tài)制劑對仔豬生產性能的影響,用72頭斷奶仔豬,觀察日糧添加微生態(tài)制劑對仔豬生產性能的影響。仔豬按體重隨機分成三個處理,即對照組、處理1以及處理2,對照組為飼喂基礎日糧添加金霉素,處理1為飼喂基礎日糧和添加0.01%的微生態(tài)制劑;處理2為詞喂基礎日糧和添加0.05%的微生態(tài)制劑。1材料與方法'1.1微生態(tài)制劑乳桿菌微生態(tài)制劑,采用實施例2的乳桿菌制劑。1.2試驗動物擬選用仔豬72頭,體重15.76士0.34kg,公母各半,按完全隨機區(qū)組設計分為3組,每組6個重復,每個重復4頭,公母分欄飼喂。1.3試驗曰糧試驗分為3個處理,即對照組(飼喂基礎日糧+金霉素)、微生態(tài)制劑組1(飼喂基礎日糧+0.01%乳桿菌制劑)和微生態(tài)制劑組2(飼喂基礎日糧+0.05%乳桿菌制劑)?;A日糧的原料組成及營養(yǎng)成分見表1。_表l試驗日糧組成成分_<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注1預混料組成每千克日糧含有:vitaminA,5,512IU;vitaminD3,2,200IU;vitaminE,6.1IU;vitaminB,12,276ug;riboflavin,5.5mg;D-pantothenicacid,13.8mg;niacin,30.3mg;cholinechloride,551mg;Mn,lOOmg;Fe,勵mg;Ze,畫mg;Cu,234mg;I,1.4mg;Se,0.3mg;Co,l.Omg2微生態(tài)制劑混入預混料中,對照組添加金霉素lOOppm3實測值1.4飼養(yǎng)管理試驗于北京太平豬場進行,飼養(yǎng)28天,豬只自由采食和飲水。舍內溫度為18°C,濕度55%。每圈有單獨的食槽和飲水器。1.5實驗室分析詞料的常規(guī)分析按照AOAC(1990)所提供的方法進行分析測定。氨基酸用氨基酸自動分析儀進行測定。1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析試驗數(shù)據(jù)根據(jù)Duncan's多重比較用SPSS6.0(美國SPSS公司)軟件進行分析處理。2結果表2為在日糧中添加乳桿菌微生態(tài)制劑對仔豬生產性能的影響結果。表2微生態(tài)制劑對仔豬生產性能的影響對照組處理1處理2SEMPDay0-7平均日增重(kg)0.460.530.430.0503NS平均日采食量(kg)1.020.931.040.0929NS飼料轉化率2.291.812.430.1973NSDay8-14平均日增重(kg)0.740.750.710.0329NS平均日采食量(kg)1.201.171.190.0213NS飼料轉化率FCR1.621.041.680.4311NSDay15-21平均日增重(kg)0.770.880.770.0896NS平均日采食量(kg)1.661.601.600.0670NS飼料轉化率2.152.042.090.1304NSDay22-28:平均日增重(kg)0.820.890.830,0367NS平均日采食量I(kg)1.841.791.790.0568NS飼料轉化率2,282.012.160.1946NSDay0-28平均日增重(kg)0.670.740.69O扁lNS平均日采食量(kg)1.361.321.380.0466NS飼料轉化率2.041.912.060.0661NS由表2可以看出,對照組,加入微生態(tài)制劑處理1組和微生態(tài)制劑處理2組的平均日增重分別為0.67,0.74禾H0.69kg;平均日采食量為1.36,1.32禾卩1.38kg;飼料轉化率為2.04,1.91和2.06。全期微生態(tài)制劑組1的日增重較對照組提高了10%,可以有效替代抗生素,甚至其作用效果超過了抗生素,即日糧中添加適當微生態(tài)制劑,可以提高仔豬的生產性能。實驗例2本實驗例為實施例2乳桿菌微生態(tài)制劑對肉雞的生產性能的影響,選用360只體重相近的1日齡健康艾維茵肉(AA)雛雞(公雛),隨機分成5個處理,每個處理8個重復,每個重復9只雞。采用單因子隨機區(qū)組試驗設計,各組分別在基礎曰糧中以微生態(tài)制劑0、1、3、6和10g/kg加入微生態(tài)制劑。試驗分兩個階段,即0~3周和46周。1材料與方法1.1試驗動物與飼養(yǎng)管理選用出生體重相近的1日齡健康AA肉雛雞(公雛)360只,打上翅號后隨機分成5組,每組72只。參照NRC(1994)肉雞營養(yǎng)需要,以玉米-豆粕型日糧為基礎日糧,分03周齡,46周齡兩階段飼養(yǎng)。試驗基礎日糧組成及營養(yǎng)水平見表3。試驗雞采用階梯籠養(yǎng),每籠3只。第一周用紅外燈取暖,室溫控制在3234'C,以后每周降低23。C。03周每日光照24h,46周每日光照20h。第7d和14d分別滴鼻、點眼進行傳支和新城疫弱毒苗及法氏囊的免疫,21d和28d分別飲水免疫傳支和新城疫弱毒苗二聯(lián)苗及傳染性法氏囊。飼料以粉料形式飼喂,試驗雞自由采食和飲水。1.2試驗設計本試驗采用單因子隨機區(qū)組試驗設計,試驗分為5個處理,即基礎日糧(微生態(tài)制劑水平為0,添加黃霉素8ppm)、1、3、6和10g/kg微生態(tài)制劑,每個處理8個重復,每個重復9只雞。1.3樣品的采集11每天記錄動物死亡數(shù),同時稱重、結料。分別于第21d和42d以重復為單位稱雞只重量,結料,計算飼料消耗和動物增重。1.4樣品分析日糧常規(guī)養(yǎng)分的分析測定按照AOAC(1995)方法進行。飼料和飼料原料中氨基酸含量使用氨基酸自動分析儀(HitachiL-8800,日本)進行測定,大多數(shù)氨基酸的測定使用6mol/LHCl酸水解方法,含硫氨基酸(蛋氨酸和胱氨酸)用氧化水解程序進行前處理(GB/T15399-94),色氨酸使用堿水解(4mol/LLiOH)后在高效液相色譜上測定(ShimadzuLC10,曰本)。脂肪酸的測定參照Sukhija和Palmquist(1988)方法在氣相色譜儀(HP6890,美國)上以C19:0作為內標進行定量??偰艿臏y定使用氧彈測熱儀(Parrl281,美國)。表3試驗基礎日糧組成及營養(yǎng)水平(%)組成0~3周4~6周玉米56.5259.15豆粕31.0030.26豆油4.004.82魚粉5.002.00石粉1.191.57磷酸氫鈣0.830.77食鹽0.260.31DL-蛋氨酸0.190.06賴氨酸0.010.06預混料11.001.00合計100.00100.00營養(yǎng)水平粗蛋白質221.2418.86代謝能ME,Kcal/g3.053.10鈣20.870.92有效磷0.450.35賴氨酸21.120.98蛋氨酸+胱氨酸20.880.64t預混料為每千克全價料提供維生素A,9000IU;維生素D3,1850IU;維生素E,18IU;維生素K,2.0mg;維生素B。1.0mg;核黃素,7.0mg;泛酸,15.0mg;維生素B6,3,0mg;維生素Bu,0.01mg;煙酸,36.0mg;氯化膽堿,300mg;葉酸,0.60mg;生物素,0.10mg;錳,80.0mg;鐵,75.0mg;鋅,60.0mg;銅,4.0mg;碘,0.4mg禾口硒,0.3mg。2實測值1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計用SPSS9.0統(tǒng)計軟件對各項數(shù)據(jù)進行方差分析和多重比較。2結果與討論2.1微生態(tài)制劑對肉雞生產性能的影響實施例2微生態(tài)制劑對肉雞平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和飼料采食量與增重比(F/G)等的影響見表4。表4微生態(tài)制劑對肉雞生產性能的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>同列數(shù)據(jù)肩標不同者表示差異顯著(PO.05)'平均標準誤從表4實驗數(shù)據(jù)顯示得出,在0~3周,日糧中添加6g/kg微生態(tài)制劑組的ADG高于其它組,而3g/kg微生態(tài)制劑組的ADG最低,并且兩組差異顯著(戶O.05);各試驗組飼料轉化效率的變化情況與ADG的變化相同,即6g/kg微生態(tài)制劑組F/G最低,3g/kg微生態(tài)制劑組F/G最高,兩組差異顯著(P<0.05)。在46周,F(xiàn)/G隨著微生態(tài)制劑添加量增加而降低,6g/kg和10g/kg微生態(tài)制劑組的F/G顯著低于對照組(P<0.05)。在0~6周,添加6g/kg和10g/kg微生態(tài)制劑組的F/G顯著低于對照組(尸O.Ol)。從上述實驗可知,本發(fā)明提供的乳桿菌微生態(tài)制劑作為飼料添加劑,通過調節(jié)動物的消化道菌群平衡和免疫機能,可以有效替代抗生素。在日糧中添加乳桿菌微生態(tài)制劑可以改善試驗末期和全期肉雞的飼料轉化效率,6g/kg和10g/kg微生態(tài)制劑的改善效果明顯,飼料轉化效率較對照組提高3.8%。微生態(tài)制劑對一些水產動物的促生長作用已得到大多數(shù)相關研究的證實。大多數(shù)研究認為,微生態(tài)制劑可以促進肉仔雞生長、增加胸肌重量并改善飼料利用率,降低卵黃囊炎癥引起的死亡率(Lignell等,1998;Inborr,1998)。對本發(fā)明的實驗例3得到的乳桿菌微生態(tài)制劑也分別進行了如同實驗例1的實驗,結果相似。本發(fā)明人將實施例2的乳桿菌微生態(tài)制劑添加到水產動物、反芻動物的日糧中進行實驗,實驗結果顯示,同樣可以替代抗生素作為飼料添加劑。權利要求1、一種乳桿菌,其特征在于,該乳桿菌為于2008年4月1日保藏在《中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心》的乳桿菌Lactobacillussp.,保藏中心登記入冊編號CGMCCNo.2427。2、根據(jù)權利要求1所述的乳桿菌,其特征在于,所述的乳桿菌的生物學特性如下1)在pl^3的環(huán)境中,在4小時以內存活率達到90%以上;2)在溫度為95'C處理10分鐘,存活率在50%以上。3、一種含有權利要求1或2所述乳桿菌的乳桿菌微生態(tài)制劑,其特征在于,乳桿菌在培養(yǎng)基中經(jīng)過充分培養(yǎng)、發(fā)酵后得到的代謝產物與無機物混合,經(jīng)烘干、粉碎后得到微生態(tài)制劑。4、根據(jù)權利要求3所述的乳桿菌微生態(tài)制劑,其特征在于,所述的培養(yǎng)、發(fā)酵過程包括將乳桿菌接種于斜面培養(yǎng)基進行培養(yǎng),得到的種子培養(yǎng)物再接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。5、根據(jù)權利要求3或4所述的乳桿菌微生態(tài)制劑,其特征在于,所述的斜面培養(yǎng)基為適合乳桿菌培養(yǎng)的任何培養(yǎng)基;其優(yōu)選的培養(yǎng)基的配方為蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化鈉5g、葡萄糖2.5g、瓊脂15g以及蒸餾水1000ml。6、根據(jù)權利要求3或4所述的乳桿菌微生態(tài)制劑,其特征在于,所述的液體培養(yǎng)基為合適乳桿菌培養(yǎng)的任何培養(yǎng)基;其優(yōu)選葡萄糖營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基;更優(yōu)選培養(yǎng)基的配方為蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化鈉5g、葡萄糖2.5g以及蒸餾水1000ml。7、根據(jù)權利要求3-6任一項所述的乳桿菌微生態(tài)制劑,其特征在于,所述的培養(yǎng)是在溫度為3537。C的條件下,培養(yǎng)20-80小時;其優(yōu)選乳桿菌接種于斜面培養(yǎng)基,在溫度為37'C恒溫箱中,培養(yǎng)72小時,作為種子培養(yǎng)物,所述的種子培養(yǎng)物接種于液體培養(yǎng)基,在溫度為3537'C時,培養(yǎng)24小時,所述的液體培養(yǎng)基為葡萄糖營養(yǎng)肉湯。8、一種含有權利要求3-7任一項所述乳桿菌微生態(tài)制劑的動物飼料,包括動物日糧和乳桿菌微生態(tài)制劑,所述的乳桿菌微生態(tài)制劑在動物飼料中的添加量為動物飼料重量的0.005%0.5%,其優(yōu)選0.01%0.15%。9、根據(jù)權利要求8所述的動物飼料,其特征在于,所述的動物日糧包括豬用日糧、雞用日糧、反芻動物用日糧或水產動物用日糧。10、權利要求1或2所述乳桿菌或權利要求3-7任一項所述的乳桿菌微生態(tài)制劑在動物飼料上的應用。全文摘要本發(fā)明提供了一種乳桿菌、乳桿菌微生態(tài)制劑其制備方法、含有該微生態(tài)制劑的飼料及其用途,所述的乳桿菌為于2008年4月1日保藏在《中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心》的乳桿菌Lactobacillussp.,保藏中心登記入冊編號CGMCCNo.2427,是一種具有耐酸、耐高溫、抑制大腸桿菌生長等性能穩(wěn)定的菌種,該菌種在培養(yǎng)基中經(jīng)過充分培養(yǎng)、發(fā)酵后得到的代謝產物與無機物混合,經(jīng)烘干、粉碎后得到微生態(tài)制劑,該乳桿菌及其制劑主要作為動物飼料添加劑,調節(jié)動物的消化道菌群平衡和免疫機能,可有效替代抗生素作為動物飼料的添加劑,甚至其作用效果超過抗生素。文檔編號C12N1/20GK101475919SQ200810239549公開日2009年7月8日申請日期2008年12月12日優(yōu)先權日2008年12月12日發(fā)明者潘寶海申請人:北京巨潤農業(yè)科技發(fā)展有限公司
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