專利名稱：：一種真菌的混合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供一種牛樟菇化合物成份、一種牛樟燕組合物成份，另提供一種真菌的混合物及其制備方法。具體而言，本發(fā)明是以膠體培養(yǎng)基大量生產(chǎn)真菌。-
背景技術(shù)：
：樟菇又稱牛樟芝或牛樟菇，屬于非褶菌目、多孔菌科、薄孔菌屬多年生蕈菌類，學(xué)名為」"rac^c/朋amo"wa，其是臺灣特有的一種真菌，僅生長于臺灣特有的牛樟樹。樟菇是獨特且珍貴的藥用真菌，也是目前臺灣最昂貴的野生真菌。樟菇的第一次新種發(fā)表是在1990年，當年臧穆、蘇慶華以污染靈芝孢子的牛樟菇子實體，將牛樟菇歸屬于靈芝屬下的新種Ga"oflfermacomp/7orafwm(Zang&Su)。至U了1995年有第二次白勺新禾中發(fā)表，張東柱、周文能根據(jù)牛樟菇的型態(tài)及培養(yǎng)特性，尤其發(fā)現(xiàn)牛樟燕是木材褐腐菌，而將它命名在薄孔菌屬的新種^"^o力'ac/wwwowea(ChangTT&WNChou)。1997年有了第三次的新種發(fā)表，吳聲華將樟菇重新命名為j"的&:aram;/7orato。2004年，張東柱、周文能根據(jù)國際植物命名法規(guī)ICBNArticle9.12(Greuteretal.2000)將Ga"oc^r畫co"—on^ww與爿加W/acam//zorato認定為混淆學(xué)名，且不再被使用，并恢復(fù)使用/^ra&aC/朋函麵eO的學(xué)名o已經(jīng)有研究顯示，樟菇子實體的提取物中含有三種三萜類化合物，其分別是胺蕈A(antcinA)、胺蕈B(antcinB)以及胺蕈C(antcinC)。之后，又有研究報告指出，從子實體的提取物中又發(fā)現(xiàn)了三種新的三祐類化合物，其分別是胺卓蕈(antrodn)、4，7-雙甲氧基-5-甲基-1,3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯(4，7-dimethoxy-5-methyl-l，3-benzodioxole)、2,2，,5，5，-四甲氧基_3,4，3，,4，-雙甲基-內(nèi)雙氧-6，6，-雙甲基聯(lián)苯(2，2，,5，5，-4，-bimethyI-enedioxy-6,6，-dimethylbiphenyl)。至!j了1996年，又有研究顯示另外四種新的三萜類化合物，其分別是胺蕈E(aritcinE)、胺蕈F(antcinF)、甲基胺蕈酯G(methylantcinateG)、甲基胺蕈酯H(methylantcinateH)。在1996，另外又從子實體的提取物中發(fā)現(xiàn)了兩種以麥角甾烷(ergostane)為骨架的新化合物，其分別是樟菇酸D(zl遊loiicacidD)與樟菇酸E(zhankuicacidE);以及三種以羊毛甾烷(lanostane)為骨架的新化合物，其分別是15a-乙酰-去氫硫色多孔菌酸(15a-acetyl-dehydro-sulphurenicacid)、去氫齒孑L酸(dehydroeburicoicacid)、去氫硫色多孑L菌酸(dehydro-sulphurenicacid)。由以上可知，樟菇成分非常復(fù)雜，其除了三萜類化合物，另還含有很多生理活性物質(zhì)，例如多糖、超氧化物歧化酶(SOD)、腺苷、小分子蛋白質(zhì)、維生素、微量元素、核酸、固醇類、血壓穩(wěn)定物質(zhì)等。從先前的研究結(jié)果得知，樟菇含有獨特的三萜類化合物，而這些化合物的抗癌細胞生長能力、活化神經(jīng)細胞生長能力等生理活性機制仍待理清。由于野生樟萜的生長環(huán)境均屬于幽暗、潮濕且溫度稍低的中海拔地區(qū)，且生長緩慢(生長期為1年以上)，因此要產(chǎn)生子實體的時間相當長。牛樟樹及野生樟菇為保育類植物，目前人工培養(yǎng)的技術(shù)仍無法兼具大量栽培與生物活性，且樟菇盜采情形嚴重，有瀕臨滅種的危機。目前樟燕人工培養(yǎng)方式主要有三種液體發(fā)酵、固體培養(yǎng)及椴木栽培。液體發(fā)酵早先時期，產(chǎn)學(xué)界多數(shù)以液體發(fā)酵為主，發(fā)酵槽能大量生產(chǎn)，培養(yǎng)時間短、產(chǎn)量大，普遍上可以獲得較高的多糖含量，但一直無法令其產(chǎn)生有效成分三砲類化合物，以致于研發(fā)內(nèi)容受限，大都以多糖的功能性為主，發(fā)展?jié)摿τ邢?。固體培養(yǎng)以太空包或器皿裝入五谷雜糧為培養(yǎng)基的方式生產(chǎn)，產(chǎn)量更大，可產(chǎn)出部分三萜類，性能也比液態(tài)完整，但是生產(chǎn)穩(wěn)定性不佳，且此法不易將菌絲與五谷雜糧的培養(yǎng)基分離，所以常將五谷雜糧的培養(yǎng)基一并收起，樟菇達不到實質(zhì)的5%，導(dǎo)致整體的活性下降，且培養(yǎng)時間較長，一般需耗時34個月。椴木栽培以牛樟椴木來培育樟菇，據(jù)說可以解決牛樟樹及牛樟菇濫伐盜釆的問題，但實則不是好方法，除生長期長需1~2年、椴木來源受限之外，批次間的質(zhì)量差異極大，造成質(zhì)量上穩(wěn)定性的不佳。有鑒于目前樟菇培養(yǎng)方式的缺點及限制，本發(fā)明以膠體生成培育法培養(yǎng)牛樟6菇，配合篩檢平臺，通過培養(yǎng)基的調(diào)整，以得到具抑制癌細胞生長、保肝及其他功效性的樟燕，其優(yōu)點除了不受培養(yǎng)基影響功效性的判斷、菌絲純度更高外，培養(yǎng)時間縮短為11.5個月，可減少長時間培養(yǎng)造成雜菌污染的機會，同時增加空間產(chǎn)能的循環(huán)性，提升單位產(chǎn)能，降低成本。
發(fā)明內(nèi)容現(xiàn)行樟菇培養(yǎng)方式主要有三種液體發(fā)酵、固體培養(yǎng)及椴木栽培。液體發(fā)酵早先時期，產(chǎn)學(xué)界多數(shù)以液體發(fā)酵為主，發(fā)酵槽能大量生產(chǎn)，培養(yǎng)時間短、產(chǎn)量大，普遍上可以獲得較高的多糖含量，但一直無法令其產(chǎn)生有效成分三萜類化合物，以致于研發(fā)內(nèi)容受限，大都以多糖的功能性為主，發(fā)展?jié)摿τ邢?。固體培養(yǎng)以太空包或器皿裝入五谷雜糧為培養(yǎng)基的方式生產(chǎn)，產(chǎn)量更大，可產(chǎn)出部分三萜類，性能也比液態(tài)完整，但是生產(chǎn)穩(wěn)定性不佳，且此法不易將菌絲與五谷雜糧的培養(yǎng)基分離，所以常將五谷雜糧的培養(yǎng)基一并收起，樟菇達不到實質(zhì)的5%，導(dǎo)致整體的活性下降，且培養(yǎng)時間較長，一般需耗時34個月。椴木栽培以牛樟椴木來培育樟菇，據(jù)說可以解決牛樟樹及牛樟菇濫伐盜采的問題，但實則不是好方法，除生長期長需12年、椴木來源受限之外，批次間的質(zhì)量差異極大，造成質(zhì)量上穩(wěn)定性的不佳。為改善以上現(xiàn)象，使樟菇量產(chǎn)化，其藥理特性又得以維持相當活性，因而產(chǎn)生本發(fā)明。因此，本發(fā)明是關(guān)于一種來自膠體培養(yǎng)的牛樟菇菌絲體萃取物，其具有如圖七(c)的HPLC的特性。本發(fā)明另外是關(guān)于一種組合物，其包括本發(fā)明的萃取物。在一組合物的優(yōu)選具體實施例中，該萃取物包括下式I的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中R,是a-OH或=0;R2是(3-OH或H;R3是(3-OH或=0;R4是a-OH或H;且Rs是H。本發(fā)明的組合物可抑制癌細胞(例如人類肝癌細胞)生長或具有護肝功能(例如抑制細胞釋放門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(GOT)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(GPT)、減少肝纖維化或降低肝細胞病變發(fā)生)。該組合物中優(yōu)選化合物分別是(a)胺蕈(Antcin)K，其中所述R,是a-OH;R2是卩-OH;R3是卩-OH;R4是H;且Rs是H;(b)樟燕酸A，其中R,是O;R2是H;113是=0;R4是H;且R5是H;(C)樟菇酸B，其中所述R,是a-OH;R2是H;113是=0;R4是H;且R5是H或(d)樟菇酸C，其中所述R,是a-OH;R2是H;尺3是=0;R4是a-OH;且R5是H。本發(fā)明另外是關(guān)于一種培養(yǎng)真菌的方法，其包含(a)于培養(yǎng)基中對真菌進行小量培養(yǎng)，以進行真菌繁殖；(b)將含真菌的培養(yǎng)基塊接種至可容納至少兩個真菌培養(yǎng)基塊的膠體培養(yǎng)基；(C)靜置膠體培養(yǎng)基至真菌成熟；及(d)由成熟真菌培養(yǎng)基中收集真菌。本發(fā)明方法中所用真菌是取自野生或人工培養(yǎng)的樟菇G4欣o血本發(fā)明方法中膠體培養(yǎng)基包含基材(如洋菜膠)、碳源(如葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、淀粉、纖維素、蔗糖或上述糖類的任一種組合)、氮源(如蛋白胨、三蛋白胨、牛肉提取物、麥芽提取物、酵母提取物或上述物質(zhì)的任一種組合)、增量劑(如葵花油、橄欖油、維生素B6或上述物質(zhì)的任一種組合)及無機酸鹽(如磷酸鹽、氯化鈉、硫酸鎂、氯化鉀或上述物質(zhì)的任一種組合)。磷酸鹽可選自包括但不限于K2HP03、K3P03、KH2P03、NaH2P03、Na2HP03或上述化合物的任一種組合。本發(fā)明方法中膠體培養(yǎng)基各成份重量百分比如下基材重量百分比是0.5%~3%;碳源重量百分比是0.5%~30%;氮源重量百分比是0.05%~5。/。；無機酸鹽重量百分比是0.01°/。~2.5%。本發(fā)明方法中膠體培養(yǎng)基是于16。C32。C培養(yǎng)2045天。本發(fā)明是經(jīng)過抗癌細胞生長測試、抗自由基測試、抑制細胞釋放門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(GOT)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(GPT)測試、活體模式護肝活性測試，均顯示卓越的樟菇藥性。圖1:樟菇培養(yǎng)方法的流程圖。圖2:不同培養(yǎng)方式的樟菇提取物對人類癌細胞抑制效果。圖3:不同培養(yǎng)方式的樟菇提取物清除二苯代苦味肼基自由基的效果。圖4樟菇提取物及四氯化碳對細胞釋放GOT的影響。圖5樟菇對四氯化碳誘導(dǎo)肝損傷的治療效果。圖6樟菇對四氯化碳誘導(dǎo)肝損傷的大鼠肝臟病理組織切片照片。圖7三種樟菇培養(yǎng)方式的HPLC圖。(A-樟菇酸(Zhankuicacid)A;B-樟菇酸B;C-樟菇酸C;K-胺蕈(Antcin)K)。具體實施方式培養(yǎng)方法圖1是依照本發(fā)明一優(yōu)選實施例的樟菇培養(yǎng)方法的流程圖。參照圖1，首先對樟菇進行預(yù)培養(yǎng)步驟，其例如是在一斜面培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)樟薛。在此，樟菇例如是取自野生樟菇或是人工培養(yǎng)的樟菇。而預(yù)培養(yǎng)的目的是為了保留樟菇菌種，以作為日后需再進行人工培養(yǎng)樟菇時的菌種來源。在此，預(yù)培養(yǎng)的條件與方式可以采用已知的任何一種方法。之后，將樟菇接種于一膠體培養(yǎng)基中。換言之，取出一部分由預(yù)培養(yǎng)出的樟菇，并將其接種于一膠體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。本發(fā)明的膠體培養(yǎng)基包括基材、碳源、氮源、增量劑以及無機鹽。上述基材例如洋菜膠。洋菜膠的重量百分比例如是介于0.5%至3%之間，其是以膠體培養(yǎng)基總重量為100%而言。此外，膠體培養(yǎng)基中的碳源例如選自葡萄糖(glucose或Dextrose)、果9糖、半乳糖、乳糖、淀粉(starch)、纖維素、蔗糖及其組合其中之一。碳源的重量百分比是0.5%至30%，其是以膠體培養(yǎng)基的總重量為100%而言。另外，膠體培養(yǎng)基中的氮源例如是選自蛋白胨(peptone)、三蛋白胨(tripeptone)、牛肉提取物、麥芽提取物、酵母提取物及其組合其中之一。氮源的重量百分比是0.05%至5%，其是以膠體培養(yǎng)基的總重量為100%而曰。另外，膠體培養(yǎng)基中的增量劑例如是選自葵花油、橄欖油、維生素B6及其組合其中之一。增量劑的重量百分比是0.005%至0.05%，其是以膠體培養(yǎng)基的總重量為100%而言。另外，膠體培養(yǎng)基中的無機酸鹽例如是選自磷酸鹽、氯化鈉、硫酸鎂、氯化鉀及其組合其中之一。其中，磷酸鹽例如是選自K2HP03、K3P03、KH2P03、NaH2P03、Na2HP03及其組合其中之一。無機酸鹽的重量百分比例如是介于0.01%至2.5%之間，其是以膠體培養(yǎng)基的總重量為100%而言。在膠體培養(yǎng)基中培養(yǎng)樟菇的溫度例如是介于16至32"C之間。于膠體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)時的培養(yǎng)震蕩條件為靜止。而于膠體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)的時間例如是介于20至45天。以本發(fā)明的方法所培養(yǎng)出的樟菇具有與野生樟菇子實體相同的生理活性，因而能用于抑制人類癌細胞生長，亦可以降低肝損傷的GOT、GPT上升。以下將舉出一些測試結(jié)果，以證明利用本發(fā)明的方法所培養(yǎng)出的樟菇具有抑制人類癌細胞生長以及降低肝損傷的GOT、GPT上升的能力。抗人類癌細胞生長測試此測試方法是根據(jù)美國國家癌癥研究所(NationalCancerInstitution,NCI)所訂定的抗腫瘤藥物篩檢模式進行的測試。此測試方法是以人類肝癌細胞株(Hep3B)進行離體測試。人類肝癌細胞株(Hep3B)是于含有胎牛血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時之后再更換新的培養(yǎng)基，然后加入待測試樣品后培養(yǎng)72小吋。之后再以MTT呈色分析法評估細胞的存活率。測試以本發(fā)明的方法所培養(yǎng)出的樟菇對人類肝癌細胞的生長抑制作用時，是以計算96孔微量盤各孔中的細胞存活率，以MTT呈色分析法評估癌細胞的存活率。>MTT呈色分析法MTT(3-〔4,5-Dimenthylthialzol-2-yl)2，5-diphenyltetrazoliumbromide)是一種四唑藍，為黃色染劑，可被活細胞吸收并在線粒體中被琥珀酸脫氫酶(succinate-tetrazoliumreductase)還原成藍色的甲臜(formazan)，常用于篩檢物質(zhì)對細胞的生長及增殖的影響。由圖2的結(jié)果顯示，膠體培養(yǎng)出的樟菇抑制人類肝癌細胞生長的能力比液態(tài)或固體培養(yǎng)出的樟菇要好，與野生樟菇的活性最相近。抗自由基測試此測試方法是以清除二苯代苦味肼基自由基(DPPH)以進行離體測試。取DPPH溶液加入不同濃度的1t菇酒精提取物，經(jīng)均勻混和后室溫避光反應(yīng)30分鐘，以分光光度計測其517nm的吸光值，吸光值越低表示清除能力越強。由圖3的結(jié)果顯示，膠體培養(yǎng)出的樟菇清除二苯代苦味肼基自由基的能力比液態(tài)或固體培養(yǎng)出的樟菇及野生樟菇強。抑制細胞釋放GOT測試此測試方法是以人類肝癌細胞株(HepG2)進行離體測試。人類肝癌細胞株(HepG2)是于含有胎牛血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時之后再更換新的培養(yǎng)基，然后加入待測試樣品及四氯化碳(CCU)后培養(yǎng)1小時。之后取上清液加入4。/。MTS的無血清培養(yǎng)基，40分鐘之后以ELISAreader讀取其490nm吸光值。測試以本發(fā)明的方法所培養(yǎng)出的樟燕對細胞釋放GOT的抑制作用時，是以計算24孔微量盤各孔中吸光值，吸光值越低表示抑制效果越好。由圖4的結(jié)果顯示，膠體培養(yǎng)出的樟菇(CAC101)抑制細胞釋放GOT的能力比其他方式培養(yǎng)出的樟菇(CJ50005、CJ50013)及野生樟燕(AC)強。活體模式護肝活性測試ii以四氯化碳誘發(fā)大鼠慢性肝損傷為動物模式。采用的動物為12周齡，體重約250-300g的雄性WISTAR為實驗動物模式。動物經(jīng)馴養(yǎng)后，分成6組，經(jīng)口服投與四氯化碳誘導(dǎo)肝疾病，再以管喂投予樟菇來測試樟菇對四氯化碳誘導(dǎo)肝損傷的治療效果，如表1所示。表l:各組處理方式<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>'每周兩次，一次2.5毫升/千克'每天200毫克/千克'每天0.15克/千克'每天0.45克/千克'每天1.35克/千克實驗第8星期，將全部大鼠犧牲，從下腔靜脈抽血測GOT、GPT。將血液放干后，取肝臟右大葉，固定一地方切取長寬各l厘米的肝組織放入10%中性福爾馬林內(nèi)作病理切片。圖5繪示出樟菇對四氯化碳誘導(dǎo)肝損傷的治療效果，由圖5的結(jié)果顯示，膠體培養(yǎng)出的樟菇可有效抑制四氯化碳誘導(dǎo)肝損傷GOT、GPT的上升。實驗動物犧牲后，肝臟進行切片，如圖6所示，第一組-正常組，可見肝組織正常。第二組-陰性對照組，可見大量肝細胞發(fā)生變性及大量纖維結(jié)締組織切入肝小葉區(qū)。第三組-陽性對照組，可見少量肝細胞發(fā)生變性及少量纖維結(jié)締組織切入肝小葉區(qū)。第四組-低劑量組，可見極少量肝細胞發(fā)生變性。第五組-中劑量組，可見大量肝細胞發(fā)生變性及少量纖維結(jié)締組織切入肝小葉區(qū)。第六組-高劑量組，可見大量肝細胞發(fā)生變性。顯示本發(fā)明的膠體培養(yǎng)出的樟菇具有降低GOT、GPT上升、減少肝纖維化及肝細胞病變的發(fā)生的能力。樟菇萃取物的制備樟菇萃取物，可通過將樟菇干燥粉末100克壓碎，加入2升乙醇，攪拌萃取l-4小時，將過濾后的萃取液濃縮干燥，而得到15°/。的樟菇萃取物，其高效液相層析圖如圖7所示，高效液相層析儀的管柱為CosmosilPakedColumn5C18-AR，4.6><250mm;高效液相層析儀的流動相如下表所示；高效液相層析儀的流速為每分鐘一毫升(l毫升/分)；其檢測儀為DAD，波長設(shè)定于210,243,254,280nm。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>權(quán)利要求1.一種來自膠體培養(yǎng)的牛樟菇菌絲體萃取物，其具有如圖七(c)的HPLC特性。2.—種組合物，其包括如權(quán)利要求1的萃取物。3.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中所述萃取物包括下式I的化合物I其中Ri是a-OH或=0;R2是(3-OH或H;R3是P-OH或=0;R4是a-OH或H;且R5是H。4.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其中所述R,是a-OH;R2是(3-OH;R3是卩-OH;R4是H;且Rs是H。5.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其中所述R4是0;R2是H;113是=0;R4是H;且Rs是H。6.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其中所述R,是a-OH;R2是H;R3是=0;R4是H;且Rs是H。7.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其中所述是a-OH;尺2是H;R3是=0;R4是a-OH;且R5是H。8.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其可抑制癌細胞生長。9.根據(jù)權(quán)利要求8的組合物，其中癌細胞是人類肝癌細胞。10.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其具有護肝功能。11.根據(jù)權(quán)利要求10的組合物，其中該護肝功能是指可抑制細胞釋放門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(GOT:)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(GPT)、減少肝纖維化或降低肝細胞病變發(fā)生。12.—種培養(yǎng)真菌的方法，其包含(a)于培養(yǎng)基中對真菌進行小量培養(yǎng)，以進行真菌繁殖；(b)將含真菌的培養(yǎng)基塊接種至可容納至少兩個真菌培養(yǎng)基塊的膠體培養(yǎng)基；(c)靜置膠體培養(yǎng)基至真菌成熟；及(d)由成熟真菌培養(yǎng)基中收集真菌。13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所述真菌是取自野生或人工培養(yǎng)白勺棒燕(勘"W/a"'朋歸ome")o14.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所述膠體培養(yǎng)基包含基材、碳源、氮源、增量劑及無機酸鹽。15.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述基材是洋菜膠。16.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述碳源是葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、淀粉、纖維素、蔗糖或上述糖類的任一種組合。17.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述氮源是蛋白胨、三蛋白胨、牛肉提取物、麥芽提取物、酵母提取物或上述物質(zhì)的任一種組合。18.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述增量劑是葵花油、橄欖油、維生素B6或上述物質(zhì)的任一種組合。19.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述無機酸鹽是磷酸鹽、氯化鈉、硫酸鎂、氯化鉀或上述物質(zhì)的任一種組合。20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中所述磷酸鹽選自K2HP03、K3P03、KH2P03、NaH2P03、Na2HP03或上述化合物的任一種組合。21.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述基材重量百分比是0.5%~3%。22.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述碳源重量百分比是0.5%~30%。23.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述氮源重量百分比是0.05%5%。24.根據(jù)權(quán)利要求14項的方法，其中所述增量劑重量百分比是O.OO5%0.05%。25.根據(jù)權(quán)利要求14項的方法，其中所述無機酸鹽重量百分比是，0.01%~2.50/o。26.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述培養(yǎng)基是于16。C32。C培養(yǎng)20~45天。全文摘要本發(fā)明提供一種牛樟菇化合物成份、一種牛樟菇組合物成份，另提供一種真菌的混合物及其制備方法。具體而言，本發(fā)明是以膠體培養(yǎng)基大量生產(chǎn)真菌。文檔編號C12N1/14GK101538304SQ20081008821公開日2009年9月23日申請日期2008年3月21日優(yōu)先權(quán)日2008年3月21日發(fā)明者王玉龍,鐘淑君申請人:科捷生物科技股份有限公司