專利名稱：一種鴨涎酶粗品的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生化試劑酶技術(shù)領(lǐng)域，它解決了目前沒有鴨涎酶制品 的問題。具體涉及一種鴨涎酶粗品的制備方法。
背景技術(shù)：
目前，我國對鴨涎成分、作用機理研究的很少，還沒有關(guān)于鴨涎 酶制品的發(fā)明專利。據(jù)資料表明唾涎是由遍布口腔粘膜深處的許多 大大小小的唾涎腺分泌出來的。大的唾液現(xiàn)有三對腮腺、頜下腺、 舌下腺，小的有唇腺、舌腺、頰腺、腭腺等。唾涎95%以上是水分， 還有動物健康必需的淀粉酶、溶菌酶、過氧化酶、過氧化氫酶、粘蛋 白、球蛋白、腎上腺皮質(zhì)激素、高血糖、維生素C、氨基酸、磷酸鈣、 鉀、鈉、鈣、鎂、氯等多種成分。唾涎淀粉酶是三大唾液腺中腮腺所 分泌的一種水解的酶類，其主要作用是分解淀粉，使淀粉鏈中a-l，4 葡萄糖苷鍵水解，生成麥芽糖，麥芽丙糖和糊精混合物，因而，唾液 淀粉酶是消化代謝過程中必不可少的酶類；唾液還有可以清除口腔中 食物殘渣和異物，保持口腔的清潔；唾涎具有抗菌和凝血的作用，如 口腔里的傷口往往比其它地方好得快，主要原因在于唾涎中的溶菌酶 有殺菌的能力，可阻止口腔內(nèi)細菌的大量繁殖；唾涎中的過氧化物 酶、過氧化氫酶和維生素C等具有抗癌能力，能過消除致癌物質(zhì)的毒 性。鴨涎酶的功效鴨涎酶是可能是一種復合酶，它含有a-1，4淀粉酶，還可能含有蛋白酶、纖維素酶、溶菌酶、過氧化物酶及過氧化 氫酶等等。中醫(yī)的《海上方》認為鴨涎的功能是治小兒瘥風，頭及 四肢皆往后，以鴨涎滴之。又治蚯蚓吹小兒陰腫，取雄鴨涎抹之?！妒?物本草會纂》谷芒刺喉，飲鴨涎。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明鴨涎酶粗品的制備方法解決了目前沒有鴨涎酶制品的問 題，其產(chǎn)品便于生化研究和生物制品的應用。 本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種鴨涎酶粗品的制備方法，其特征在于，它是由以下的制備方 法獲得的。1、 實驗動物身體健康，無疫病的100只鴨子。2、 鴨涎采收和儲藏為鴨科動物家鴨的唾涎。以生姜少許， 塞鴨口中，將鴨倒懸，其涎即下，接取自然流出口腔外的唾涎，用 塑料袋收集，鮮用或冷藏。3、 粗酶提取方法制備條件是鴨涎粗酶的溫度小于1(TC，將 收集的鴨涎用40目篩網(wǎng)過濾，去雜質(zhì)，取濾液，在攪拌下加5mol/L HC1，調(diào)pH值為4—5，加0. 6mol/L ZnCl2適量，再用5mol/L NaOH 在馎拌下調(diào)pH值為8—9，離心或過濾，棄上清液或濾液，取沉淀， 采用自然風干或小于40'C低溫干燥法(氣流干燥、冷凍干燥)，水 分小于16%，即得鴨涎酶粗品。4、蛋白質(zhì)含量測定法采用考馬斯亮藍法(Bradford法)。5、 唾涎淀粉酶活性的測定按崔福生《醫(yī)學生化檢測手冊》天津天津科學技術(shù)出版社，1982， 785—795記載的方法進行唾涎淀 粉酶活性的測定。6、 工藝流程驗驗無病的鴨涎一制備條件是鴨涎溫度小于10°C—用40目篩網(wǎng) 過濾一棄雜質(zhì)一留濾液一在攪拌下加5mol/L HC1，調(diào)pH值為4一5 —加鴨涎體積的三分之一的0.6mol/L ZnCl2溶液一用5mol/L NaOH 在攪拌下調(diào)pH值為8—9—離心或過濾一棄上清液或濾液一取沉淀一 用自然風干或小于4(TC低溫干燥法(氣流干燥、冷凍干燥)，水分小 于16%—包裝即得成品鴨涎酶粗品。 7、技術(shù)要點-'(l)鴨涎原料驗收試驗動物必須經(jīng)過嚴格檢驗，來源于非疫 區(qū)、無疾病鴨的口涎。制備條件是鴨涎粗酶的制備溫度小于1(TC。(2) 去雜質(zhì)用40目篩網(wǎng)過濾，棄雜質(zhì)，留濾液。(3) 調(diào)酸性在攪拌下加5mol/L HC1，調(diào)pH值為4一5，便于 下面的ZnCl2更好溶解。(4) 中性鹽沉淀加鴨涎體積的三分之一的0.6mol/L ZnCL使 鴨涎中的酶和蛋白質(zhì)沉淀。選擇氯化鋅是因為其用量少、鹽析作用強、 對粗'酶的使用無毒副作用及不良影響。(5)調(diào)堿性用5mol/L Na0H調(diào)pH值8—9 ，這是從沉淀和產(chǎn) 品含量考慮， 一方面pH越高越有利于沉淀，另一方面鴨涎中的中性蛋白酶在pH值7處對鴨涎中各種酶和蛋白質(zhì)分解越大，還有pH值 太低與太高都不有利于鴨涎酶的穩(wěn)定。(6) 離心或過濾離心方法是離心機轉(zhuǎn)速大于4000轉(zhuǎn)/分，過 濾方法可采用真空過濾、加壓過濾或常壓過濾，棄上清液或濾液，取 沉淀。(7) 干燥用自然風干或小于4(TC低溫干燥法(氣流干燥、冷 凍干燥)，水分小于16%。(8) 包裝注入瓶內(nèi)或塑料袋包裝保存，也可采用真空包裝，4 'C冷藏保存。本發(fā)明產(chǎn)品的性狀粉狀、色澤灰白。本發(fā)明的優(yōu)點工藝穩(wěn)定，收率高，便于操作，適合廣大基層 農(nóng)戶從鴨涎中提取粗酶。
具體實施方式
實施例本發(fā)明鴨涎酶粗品原輔料如下 鴨涎5mol/L HC1 0. 6mol/L ZnCl25mol/L Na0H 制作過程1.0公斤約5ml 0. 33L (約O. 027公斤ZnCl2) 約10ml制備條件是鴨涎粗酶的制備溫度小于io°c ，將收集的鴨涎用40目篩網(wǎng)過濾，去雜質(zhì)，取濾液，在攪拌下加5mol/LHCl，調(diào)pH值 為4_5，加0. 6mol/L ZnCl2適量，再用5mol/L NaOH在攪拌下調(diào)pH 值為8—9，離心或過濾，棄上清液或濾液，取沉淀，采用自然風干 或小于4(TC低溫干燥法(氣流干燥、冷凍干燥)，水分含量小于16%， 即得鴨涎酶粗品約O. l公斤。水分分析法采用烘干法測水分，水分含量15% 蛋白質(zhì)含量測定法采用考馬斯亮藍法(Bradford法)，鴨涎 粗酶'的蛋白質(zhì)含量為50%。唾涎淀粉酶活性的測定按崔福生《醫(yī)學生化檢測手冊》天津天津科學技術(shù)出版社，1982， 785—795記載的方法進行唾涎淀粉酶 活性的測定。鴨涎粗酶的唾涎淀粉酶活性為14 IU/g ( IU/g指每克 粗酶樣中唾涎淀粉酶活性為酶的國際單位)。
權(quán)利要求
1、一種鴨涎酶粗品的制備方法，其特征在于它用中性鹽氯化鋅制備鴨涎酶粗品。
2、如權(quán)利要求l所述的一種鴨涎酶粗品的制備方法，其特征是 制備步驟和條件如下:制備條件是鴨涎制備粗酶品的溫度小于1(TC， 將收集的鴨涎用40目篩網(wǎng)過濾，去雜質(zhì)，取濾液，在攪拌下加HC1， 調(diào)pH值為4一5，加ZnCl2溶液適量，再用NaOH在攪拌下調(diào)pH值為 8—9，離心或過濾，棄上清液或濾液，取沉淀，采用自然風干或小 于4(TC低溫干燥法(氣流干燥、冷凍干燥)，水分小于16%，即得 鴨涎酶粗品。
全文摘要
本發(fā)明屬于生化試劑酶技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種鴨涎酶粗品的制備方法，其產(chǎn)品便于生化研究和生物制品的應用。本發(fā)明通過中性鹽氯化鋅制備鴨涎粗酶，其的優(yōu)點是工藝穩(wěn)定，收率高，便于操作，適合廣大基層農(nóng)戶從鴨涎中提取粗酶。
文檔編號C12N9/98GK101245340SQ20081005053
公開日2008年8月20日 申請日期2008年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月24日
發(fā)明者麗 焦, 王有為 申請人:焦 麗;王有為