專利名稱：：使用抗橋粒芯蛋白3抗體的癌癥的診斷和治療的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及癌癥的診斷和治療方法、以及細胞增殖抑制劑和抗癌藥。
背景技術：
：橋粒芯蛋白3(Demoglein3)(以下在本說明書中稱為DSG3)分子是由罹患了皮膚和粘膜的自身免疫水泡形成疾病一尋常性天皰瘡(Pemphigusvulgaris,以下在本說明書中稱為PV)的患者血清中得到的自身抗體，使用該自身抗體對角質形成細胞提取物進行免疫沉淀，首次鑒定了分子量130kDa的糖蛋白，命名為PV抗原(以下在本說明書中稱為PVA)(非專利文獻1和J.Clin.Invest.74,313~320，1984)。然后，通過親和純化，從PV患者血清中分離出與上述130kDa蛋白反應的抗體分子。接著，使用該分離抗體，對使用由人角質形成細胞分離的polyARNA構建的表達載體文庫進行篩選，分離出編碼PVA的cDNA。基于對分離的cDNA的核苷酸序列的分析，表明PVA分子與屬于編碼胞間粘附因子的一群鈣粘附蛋白超家族基因的分子群的序列具有高的同源性(非專利文獻2)。在廣泛的組織中表達、在生物體內與細胞粘附相關的分子一鉀粘附蛋白分子群內，在位于細胞膜的細胞之間的粘附部位一橋粒(細胞斑)表達的該分子群的集團被命名為橋粒Cd(desmosomalcadherins)或橋粒芯蛋白。橋粒芯蛋白家族之一的DSG3分子的分離和克隆中使用的角質形成細胞是占表皮的大部分的細胞?？梢哉J為是通過橋粒與相鄰的細胞緊密粘附，DSG3分子參與了所述粘附。PV患者血清中存在的抗DSG3自身抗體與DSG3分子結合，由此抑制經(jīng)由DSG3分子的細胞間的粘附，引起PV病變。如上所述，在PV患者血清中，通過存在于多克隆抗體中的抗DSG3自身抗體誘發(fā)PV病變，不過也分離了將雜交瘤移植到小鼠中時具有誘發(fā)PV樣病變的能力的抗DSG3單克隆抗體(非專利文獻3)。該單克隆抗體在試管內也顯示出具有抑制角質形成細胞的細胞粘附的細胞解離活性(非專利文獻4)。如上所述，通過抗DSG3抗體在試管內觀察的細胞解離活性在生物體內顯示為誘發(fā)PV病變的活性。如上所述，已知DSG3蛋白質在角質形成細胞的粘附中具有重要的功能，抗DSG3抗體參與了PV病變的發(fā)生。而DSG3蛋白質對其它疾病的參與、或者抗DSG3抗體的細胞解離活性以外的功能尚未明確。特別是DSG3分子與哺乳動物、特別是人的癌癥、尤其是肺癌的發(fā)生、肺癌細胞的增殖、浸潤、轉移、或轉化的相關性目前尚未明確。各種癌癥中，肺癌在男性和女性中均是死亡率最高的癌癥，曰本的肺癌死亡率在1950年以后一直是增加的趨勢，1998年肺癌死亡人數(shù)為50,871人，占全部惡性腫瘤死亡人數(shù)的約18%，1993年以后，在男性中間肺癌死亡率超過胃癌，成為惡性肺瘤中的第1位(日本厚生統(tǒng)計協(xié)會，國民衛(wèi)生的動向、厚生指標，47，52-53，2000)。從整個世界來看，每年有300萬人左右死于肺癌。肺癌的基本組織類型包含腺癌、鱗狀細胞癌、腺鱗癌、大細胞癌、小細胞癌。前4種的預后或治療方針沒有大的差異，因此一并稱為非小細胞肺癌。非小細胞肺癌的病例數(shù)占全部肺癌的病例數(shù)的80-85%。非小細胞肺癌的特征有與小細胞癌相比，進展緩慢，對化療或放療的反應不足。因此，當腫瘤未擴散時，外科切除成為第一選擇肢，但治療效果與在TNM分類中相當于相同病期的胃癌等其它癌腫相比相差很多，最近，盛行嘗試通過協(xié)同治療提高該效果，但尚未建立可完全緩解的有效治療方法。非小細胞肺癌中，對于IIIa期以前的探討了手術療法，但對于之后的臨床病期缺乏手術適應性，化療、放療成為治療的主體。血清診斷標志物可選擇SCC(鱗狀細胞癌相關抗原)、Cyfra(細1胞角蛋白19片段)、CEA(癌胚抗原)、SLX(唾液酸化Lewisx-i抗原)等，單獨或組合使用，但對于分級初期的癌癥的陽性率依然較低，人們希望開發(fā)確實可進行分級初期的非小細胞肺癌血清診斷的診斷用標志物(腫瘍7—力一co読^方o実際；肺癌，臨床i研究78,35~40,2001)。小細胞肺癌在日本是占肺癌全體的約15~20%的肺瘤，與其它肺癌比較，肺瘤的增殖速度快，但對抗癌藥、放射線治療的感受性高，具有與腺癌、鱗狀細胞癌、大細胞癌等顯著不同的臨床上的特征。小細胞癌中，僅對分級Ia期(腫瘤直徑20mm以下，且未見向淋巴結、周圍器官的浸潤和轉移)探討了手術療法，但基本上是主要采用化療、放療的治療方法。作為診斷標志物，NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化酶)和proGRP(前胃泌素釋放肽)可用作對小細胞癌特異性較高的腫瘤標志物，有報道稱其陽性率分別為約60%和70%。盡管在臨床實踐中還沒有應用于肺癌的例子，但是對于乳腺癌或淋巴瘤等，單克隆抗體對癌癥特異性腫瘤抗原的靶向療法可發(fā)揮與以往的化療藥物不同的作用機理，因此，治療奏效率提高。使用上述抗體藥物進行靶向療法時，該抗體發(fā)揮功能、產(chǎn)生效果的活性有經(jīng)由效應細胞的抗體依賴性細胞毒(ADCC)活性，經(jīng)由補體的補體依賴性細胞毒(CDC)活性，或者通過構建與化療藥物、毒性肽或放射性化學物質的綴合分子來發(fā)揮的細胞毒活性等。該活性除上述之外，還有抗體自身對抗原分子進行催化激動作用的激動活性、或者阻斷對細胞活化或增殖等的信號的中和活性等。但依然是診斷的陽性率^f氐和疾病的治愈率低，為了應用使用發(fā)揮上述活性的抗體的分子靶向療法對仍有完全緩解余地的肺癌進行治療，強烈希望對肺癌細胞中的腫瘤特異性表達分子進行鑒定，以該分子為靶，制備可發(fā)揮所需活性的抗體。本發(fā)明的相關先行技術文獻信息如下。專利文獻1:W099/57149專利文獻2:WO02/8644315專利文獻3:WO03/20769非專利文獻1非專利文獻2非專利文獻3非專利文獻4J.Clin.Invest.70,281~288，1982Cell.67,869~877，醒J.Immunology170,2170~2178,2003J.Invest.Dermatol.,124，939~946，200
發(fā)明內容發(fā)明所要解決的抗體本發(fā)明的課題在于提供抗DSG3抗體及其用途。更具體地說，其目的在于提供使用抗DSG3抗體的診斷和治療癌癥的新型方法、含有抗DSG3抗體的新型的細胞增殖抑制劑和抗癌藥、以及新型的抗DSG3抗體。解決課題的方法
技術領域：
：本發(fā)明人等發(fā)現(xiàn)DSG3在肺癌等癌細胞中高度表達。并且，在測定抗DSG3抗體的補體依賴性細胞毒(CDC)活性、以及抗體依賴性細胞毒(ADCC)活性時，發(fā)現(xiàn)抗DSG3抗體對于DSG3表達細胞具有CDC活性和ADCC活性。進一步根據(jù)上述認識，本發(fā)明人等發(fā)現(xiàn)抗DSG3抗體對于以肺癌為代表的DSG3表達亢進的癌癥的診斷、預防和治療有效，從而完成了本發(fā)明。本發(fā)明提供含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分的藥物組合物。本發(fā)明還提供含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分的細胞增殖抑制劑。本發(fā)明又提供含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分的抗癌藥。優(yōu)選與DSG3蛋白質結合的抗體是具有細胞毒活性的抗體。還優(yōu)選癌癥是肺癌。進一步優(yōu)選癌癥是非小細胞肺癌。在另一方式中，本發(fā)明提供使DSG3表達細胞和與DSG3蛋白質結合的抗體接觸，對表達DSG3蛋白質的細胞引發(fā)細胞毒的方法。本發(fā)明還提供使表達DSG3蛋白質的細胞和與DSG3蛋白質結合的抗體接觸，抑制表達DSG3蛋白質的細胞的增殖的方法。優(yōu)選與DSG3蛋白質結合的抗體是具有細胞毒活性的抗體。還優(yōu)選表達DSG3蛋白質的細胞是癌細胞。在又一方式中，本發(fā)明提供與DSG3蛋白質結合、且對于表達DSG3蛋白質的細胞具有細胞毒活性的抗體。優(yōu)選該細胞毒活性是ADCC活性。優(yōu)選該細胞毒活性是CDC活性。本發(fā)明還提供結合有低分子化療藥物或毒性肽的抗體、或者結合有低分子化療藥物或毒性肽并具有細胞毒活性的抗體。本發(fā)明進一步提供與DSG3蛋白質結合、且對表達DSG3蛋白質的細胞具有細胞毒活性但不具有細胞解離活性的抗體。在另一方式中，本發(fā)明提供作為癌癥診斷標志物的DSG3蛋白質的應用。另外，在又一方式中，本發(fā)明提供癌癥的診斷方法，其特征在于使用與DSG3蛋白質結合的抗體檢測DSG3蛋白質。本發(fā)明的方法中，優(yōu)選檢測DSG3蛋白質的胞外區(qū)。還優(yōu)選本發(fā)明的方法使用識別DSG3蛋白質的抗體進行。優(yōu)選本發(fā)明的方法中，檢測血液中、血清中或血漿中的DSG3蛋白質，或者由細胞中分離的DSG3蛋白質。在另一方式中，本發(fā)明提供癌癥的診斷方法，該方法包含以下步驟(a)由受試者采集試樣的步驟；(b)使用與DSG3蛋白質結合的抗體，檢測采集的試樣中所含的DSG3蛋白質的步驟。本發(fā)明中，上述試樣只要可由受試者采集即可，均可使用，在一個方式中，使用由受試者采集的血清，在另一方式中，也可以使用通過活組織檢查，由受試者采集的試樣。該診斷方法涉及的癌癥只要是作為受治對象的癌細胞表達DSG3蛋白質的癌即可，可以是任何癌癥，但優(yōu)選為肺癌，進一步優(yōu)選非小細胞肺癌。本發(fā)明中，由受試者采集試樣的步驟也可描述為提供由受試者采集的試樣的步驟。17在另一方式中，本發(fā)明提供癌癥的診斷方法，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是由選自IIC、13N、150、18F、45Ti、55Co、64Cu、66Ga、68Ga、76Br、89Zr、1241的任一種核素所標記的抗體。在另一方式中，本發(fā)明提供癌癥的診斷方法，其特征在于檢測編碼DSG3蛋白質的基因的表達。在又一方式中，本發(fā)明提供在本發(fā)明的診斷方法中使用的診斷試劑或試劑盒。即，本申請?zhí)峁┮韵碌腫1][32]。藥物組合物，該藥物組合物含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分。細胞增殖抑制劑，該細胞增殖抑制劑含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分?？拱┧?，該抗癌藥含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分。[3]所述的抗癌藥，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是具有細胞毒活性的抗體。[3]或[4]所述的抗癌藥，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是以下(l)~(47)中任一項所述的抗體(1)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.2的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.4的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.6的氨基酸序列。(2)抗體，該抗體含有(1)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.8的氨基酸序列。(3)抗體，該抗體含有(1)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列。(4)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.12的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.14的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.16的氨基酸序列。(5)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.18的氨基酸序列。(6)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列。(7)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(8)抗體，該抗體含有(2)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(9)抗體，該抗體含有(3)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(10)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.22的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.24的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.26的氨基酸序列。(11)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列。(12)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列。(13)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.30的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.32的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.34的氨基酸序列。(14)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列。(15)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列。(16)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(17)抗體，該抗體含有(ll)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(18)抗體，該抗體含有(12)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(19)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(20)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(21)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(22)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。19(23)抗體，該抗體具有(ll)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(24)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(25)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.81的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.83的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.85的氨基酸序列。(26)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.28的氨基酸序列。(27)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列。(28)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.87的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.89的氨基S臾序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.91的氨基酸序列。(29)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列。(30)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列。(31)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(32)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(33)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(34)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(35)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(36)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(37)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(38)抗體，該抗體具有(ll)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(39)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(40)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(41)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(42)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。20(43)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(44)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(45)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(46)抗體，該抗體是在(1)(45)中任一項所述的抗體中有1或多個氨基酸被置換、缺失、附加和/或插入而得到的抗體，所得抗體與(l)~(45)中任一項所述的抗體具有同等活性。(47)抗體，該抗體與表位結合，該表位與(1)(45)中任一項所述的抗體所結合的DSG3蛋白質的表位相同。[3][5]中任一項所述的抗癌藥，其中，癌癥是肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌。[6]所述的抗癌藥，其中，肺癌是非小細胞肺癌。使表達DSG3蛋白質的細胞和與DSG3蛋白質結合的抗體接觸，由此對該DSG3表達細胞引發(fā)細胞毒的方法。使表達DSG3蛋白質的細胞和與DSG3蛋白質結合的抗體接觸，由此抑制該DSG3表達細胞的增殖的方法。[8]或[9]所述的方法，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是具有細胞毒活性的抗體。[8][10]中任一項所述的方法，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是以下(l)~(47)中任一項所述的抗體(1)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.2的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.4的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.6的氨基酸序列。(2)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.8的氨基酸序列。(3)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列。(4)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.12的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.14的氨基酸序列、21以及作為CDR3的SEQIDNO.16的氨基S交序列。(5)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.18的氨基酸序列。(6)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基S臾序列。(7)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(8)抗體，該抗體含有(2)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(9)抗體，該抗體含有(3)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(10)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.22的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.24的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.26的氨基酸序列。(11)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列。(12)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列。(13)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.30的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.32的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.34的氨基酸序列。(14)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列。(15)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基S交序列。(16)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(17)抗體，該抗體含有(ll)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(18)抗體，該抗體含有(12)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(19)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(20)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(21)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(22)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(23)抗體，該抗體具有(ll)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(24)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(25)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.81的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.83的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.85的氨基酸序列。(26)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.28的氨基酸序列。(27)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列。(28)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.87的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.89的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDNO,91的氨基酸序列。(29)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列。(30)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列。(31)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(32)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(33)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(34)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(35)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(36)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(37)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(38)抗體，該抗體具有(ll)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(39)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(40)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(41)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(42)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(43)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(44)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(45)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(46)抗體，該抗體是在(1)(45)中任一項所述的抗體中有1或多個氨基酸被置換、缺失、附加和/或插入而得到的抗體，所得抗體與(l)~(45)中任一項所述的抗體具有同等活性。(47)抗體，該抗體與表位結合，該表位與(1)(45)中任一項所述的抗體所結合的DSG3蛋白質的表位相同。[8]-[11]中任一項所述的方法，其中，表達DSG3蛋白質的細胞是癌細胞。與DSG3蛋白質結合，且對于表達DSG3蛋白質的細胞具有細胞毒活性的抗體。[13]所述的抗體，其中，細胞毒活性是ADCC活性。[13]所述的抗體，其中，細胞毒活性是CDC活性。[13]~[15]中任一項所述的抗體，其中該抗體是結合有低分子化療藥物或者毒性肽的抗體。與DSG3蛋白質結合的抗體，其中該抗體是結合有低分子化療藥物或者毒性肽的抗體。[13]~[n]中任一項所述的抗體，其中該抗體是以下(l)—(47)中任一項所述的抗體(1)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.2的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.4的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.6的氨基酸序列。(2)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.8的氨基酸序列。(3)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列。(4)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.12的氨基酉拼列、作為CDR2的SEQIDN0.14的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.16的氨基酸序列。(5)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.18的氨基酸序列。(6)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列。(7)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(8)抗體，該抗體含有(2)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(9)抗體，該抗體含有(3)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(10)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.22的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.24的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.26的氨基酸序列。(11)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列。(12)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列。(13)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.30的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.32的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.34的氨基S史序列。(14)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基醋列。(15)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列。(16)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(17)抗體，該抗體含有(ll)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(18)抗體，該抗體含有(12)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(19)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(20)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(21)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(22)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(23)抗體，該抗體具有(11)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(24)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(25)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.81的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.83的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.85的氨基酸序列。(26)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列。(27)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H^1具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列。(28)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.87的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.89的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.91的氨基酸序列。(29)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列。(30)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列。(31)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(32)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(33)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(34)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(35)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(36)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(37)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(38)抗體，該抗體具有(11)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(39)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。26(40)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(41)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(42)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(43)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(44)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(45)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(46)抗體，該抗體是在(1)(45)中任一項所述的抗體中有1或多個氨基酸被置換、缺失、附加和/或插入而得到的抗體，所得抗體與(l)~(45)中任一項所述的抗體具有同等活性。(47)抗體，該抗體與表位結合，該表位與(1)(45)中任一項所述的抗體所結合的DSG3蛋白質的表位相同。DSG3蛋白質作為癌癥診斷標志物的應用。[20]癌癥的診斷方法，其特征在于使用與DSG3蛋白質結合的抗體來檢測DSG3蛋白質。癌癥的"i貪斷方法，該方法包含以下步驟(a)由受試者采集試樣的步驟；(b)使用與DSG3蛋白質結合的抗體來檢測采集的試樣中所含的DSG3蛋白質的步驟。[20]或[21]所述的診斷方法，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是由發(fā)射正電子核素標記的抗體。[22]所述的診斷方法，其中，發(fā)射正電子核素是選自IIC、13N、150、18F、45Ti、55Co、64Cu、66Ga、68Ga、76Br、89Zr、1241中任一種的核素。癌癥的診斷方法，其特征在于檢測編碼DSG3蛋白質的基因的表達。[20]~[24]中任一項所述的診斷方法，其中，癌癥是肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌。[25]所述的診斷方法，其中，肺癌是非小細胞肺癌。[27]診斷藥物，該診斷藥物用于[20]~[26]中任一項所述的#^斷方法。試劑盒，該試劑盒用于[20][26]中任一項所述的診斷方法。[29]與DSG3蛋白質結合的抗體在制備細胞增殖抑制劑中的應用。與DSG3蛋白質結合的抗體在制備抗癌藥中的應用。抑制細胞增殖的方法，該方法包含將與DSG3蛋白質結合的抗體給予受治對象的步驟。預防或治療癌癥的方法，該方法包含將與DSG3蛋白質結合的抗體給予受治對象的步驟。附圖簡述圖1是表示使用基因芯片U133對正常組織和癌組織中的DSG3基因的表達進行分析的結果圖。圖2是表示使用基因芯片U133對癌細胞抹中的DSG3基因的表達進行分析的結果圖。圖3是表示通過免疫染色使DSG3蛋白質在肺鱗狀細胞癌中的表達可視化的免疫組織染色的結果照片。全部5例臨床檢樣中均顯示DSG3蛋白質表達尤進。圖4是表示顯示抗DSG3單克隆抗體DF120、DF122、DF148、DF151、DF153、DF168、DF331、DF364、DF366與恒定表達全長DSG3的CHO細胞抹結合的流式細胞術分析的結果圖。圖5是表示抗DSG3單克隆抗體DF120、DF122、DF148、DF151、DF153、DF168、DF331對恒定表達全長DSG3的CHO細胞4朱的CDC活性的圖。圖6是表示抗DSG3單克隆抗體DF151對人皮膚鱗狀細力包癌細胞林A431、以及恒定表達DSG3的人肺鱗狀細胞癌細胞抹DSG3-A549細胞林的CDC活性的圖。圖7是表示抗DSG3單克隆抗體DF151、DF364以及DF366對恒定表達DSG3的人肺鱗狀細胞癌細胞林一DSG3-A549細胞抹的ADCC活性的圖。圖7A表示使用來自小鼠骨髓的效應細胞的分析結果，圖7B表示使用來自小鼠脾臟的效應細胞的分析結果，圖8是表示抗DSG3小鼠-人嵌合抗體DF151c、DF364c以及DF366c對恒定表達DSG3的Ba/F3細胞林一DSG3-Ba/F3細胞抹的CDC活性的圖。圖9是表示抗DSG3小鼠-人嵌合抗體DF364c以及DF366c、低巖藻糖型抗DSG3小鼠-人嵌合抗體YB-DF364c和YB-DF366c對恒定表達DSG3的Ba/F3細胞抹DSG3-Ba/F3細胞抹的ADCC活性的圖。圖10是表示抗DSG3抗體DF366m(小鼠IgG2a嵌合抗體)、低巖藻糖DF366m(低巖藻糖型小鼠IgG2a嵌合抗體)、DF366c(小鼠-人嵌合抗體)、以及YB-DF366c(低巖藻糖型小鼠-人嵌合抗體)對恒定表達DSG3的Ba/F3細胞林一DSG3-Ba/F3細胞林的ADCC活性的圖。效應細胞使用添加了白細胞介素-2的小鼠脾細胞。圖11是表示抗DSG3抗體DF366m(小鼠IgG2a嵌合抗體)、低巖藻糖DF366m(低巖藻糖型小鼠IgG2a嵌合抗體)、DF366c(小鼠-人嵌合抗體)、以及YB-DF366c(低巖藻糖型小鼠-人嵌合抗體)對恒定表達DSG3的Ba/F3細胞株一DSG3-Ba/F3細胞抹的ADCC活性的圖。效應細胞使用在白細胞介素-2存在下將小鼠脾細胞培養(yǎng)4天所得的細胞。圖12是表示抗DSG3抗體DF366m(小鼠IgG2a嵌合抗體)和低巖藻糖DF366m(低巖藻糖型小鼠IgG2a嵌合抗體)的抗腫瘤活性的圖。實施發(fā)明的最佳方式DSG3(Desmoglein3,橋粒芯蛋白3)是軸突導向受體蛋白，公開的其氨基酸序列和編碼該序列的基因序列分別為GemBank檢索號NP—001935(SEQIDNO.40)和NM—001944(SEQIDN0.39)。本發(fā)明中，DSG3蛋白質是指包含全長蛋白質及其片段兩者。片段是含有DSG3蛋白質的任意區(qū)域的多肽，可以不具有天然DSG3蛋白質的功能。對片段的例子沒有限定，可以是包含DSG3蛋白質的胞外區(qū)的片段。DSG3蛋白質的胞外區(qū)在SEQIDNO.40的氨基酸序列中相當于第1~616號?？缒^(qū)在SEQIDNO.40的氨基酸序列中相當于第617~641號。本發(fā)明中，在肺癌組織中發(fā)現(xiàn)DSG3以非常高的頻率在基因水平和蛋白質水平表達亢進。對其它癌癥種類的臨床檢樣或癌細胞抹的分析顯示不僅是肺癌，在大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌等中也表達亢進。還顯示，使用DSG3蛋白質特異性單克隆抗體可以進行免疫組織診斷。即，DSG蛋白質可用作癌癥診斷的標志物。DSG3基因表達的檢測本發(fā)明的方法的特征在于檢測DSG3基因表達。本發(fā)明的方法之一的方式中，檢測DSG3蛋白質的表達。本發(fā)明中，檢測包含定量或定性的檢測，例如，定性的檢測可以是單純的對DSG3蛋白質是否存在的測定、DSG3蛋白質是否存在一定量以上的測定、將DSG3蛋白質的量與其它試樣(例如對照試樣等)進行比較的測定等。而定量檢測可以是測定DSG3蛋白質的濃度、測定DSG3蛋白質的量等。被檢試樣只要是可能含有DSG3蛋白質的試樣即可，沒有特別限定，優(yōu)選從哺乳類等生物的體內采集的試樣，進一步優(yōu)選為由人采集的試樣。被檢試樣的具體例子例如有血液、間質液、血漿、血管外液、腦脊髓液、滑液、胸膜液、血清、淋巴液、唾液、尿等，優(yōu)選為血液、血清或血漿。此外，本發(fā)明的被檢試樣也包含由下述被檢試樣得到的試樣，即由生物體內采集的組織或細胞固定而得到的標本或者細胞的培養(yǎng)液等。對要診斷的癌癥沒有特別限定，可以是任何癌癥，具體有肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌等。優(yōu)選的是肺癌，特別優(yōu)選的是非小細胞肺癌。本發(fā)明中，被檢試樣中檢測出DSG3蛋白質時，與陰性對照或正常者比較，判斷被檢試樣中檢測出的DSG3蛋白質的量多時，可以判定受試者為癌癥，或者將來罹患癌癥的可能性高。本發(fā)明的受試者只要是遺傳性具有DSG3蛋白質的動物種類即可，所述動物種類已知有猴、牛、綿羊、小鼠、狗、貓、倉鼠等人以外的多種哺乳類。特別適合使用的受試者是人，但并不限于此。定有組織或細胞的切片上^r測DSG3蛋白質，所述組織或細胞由罹患了上述癌癥的患者獲得。本發(fā)明的其它方式包含具以下特征的"^斷方法檢測從細胞中游離出、存在于血液中的DSG3蛋白質。特別優(yōu)選本發(fā)明是以下的診斷方法檢測存在于血液中的、含有DSG3蛋白質胞外區(qū)的片段。對被檢試樣中所含的DSG3蛋白質的檢測方法沒有特別限定，優(yōu)選通過使用抗DSG3抗體的免疫學方法進行檢測。免疫學方法例如有放射免疫測定(RIA)、酶聯(lián)免疫測定(EIA)、焚光免疫測定(FIA)、發(fā)光免疫測定(LIA)、免疫沉降法(IP)、免疫比濁法(TIA)、蛋白質印跡法(WB)、免疫組織染色法(IHC)、免疫擴散法(SRID)等，優(yōu)選酶聯(lián)免疫測定，特別優(yōu)選酶聯(lián)免疫吸附定量法(enzyme-linkedimmunosorbentassay:ELISA),其中的一個方式例如有夾層ELISA(sandwichELISA)。ELISA等上述免疫學方法可按照本領域技術人員公知的方法進行。使用抗DSG3抗體的常規(guī)檢測方法例如有以下的方法。將抗DSG3抗體固定在支撐體上，然后為了防止蛋白質與支撐體的非特異性結合，例如用胎牛血清白蛋白(BSA)、明膠、白蛋白等封閉支撐體。接著，通過向支撐體中加入被檢試樣進行孵育，使已經(jīng)與支撐體結合的抗DSG3抗體與DSG3蛋白質結合。然后用清洗液清洗與支撐體結合的抗DSG3抗體和DSG3蛋白質的復合物，除去與支撐體上的抗DSG3抗體結合的DSG3蛋白質以外、與該支撐體非特異性結合的DSG3蛋白質。通過定性或定量檢測支撐體上的與抗DSG3抗體結合的DSG3蛋白質，進行被檢試樣中的DSG3蛋白質的檢測，該方法可作為使用抗DSG3抗體的才企測方法，以下進一步給出幾個具體例子進行i兌明。本發(fā)明中，用于固定抗DSG3抗體的支撐體例如有瓊脂沖唐、纖維素等不溶性多糖類，有機硅樹脂、聚苯乙烯樹脂、聚丙烯酰胺樹脂、尼龍樹脂、聚碳酸酯樹脂等合成樹脂或玻璃等不溶性的支撐體。這些支撐體可以以珠或板的形狀使用。為珠狀時，可使用填充了它們的柱等。為板狀時，可使用多孔板(96孔多孔板等)、或生物傳感芯片等?？笵SG3抗體與支撐體的結合中，可以通過化學鍵或物理吸附等通常使用的方法，使抗DSG3抗體與支撐體結合。這些支撐體均可優(yōu)選使用市售的商品o抗DSG3抗體與DSG3蛋白質的結合通常在緩沖液中進行。緩沖液例如可使用磷酸緩沖液、Tris緩沖液、檸檬酸緩沖液、硼酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液等。孵育的條件可以是常規(guī)使用的條件，例如優(yōu)選在4。C室溫之間的溫度下、以1小時~24小時的時間實施孵育。孵育后的清洗只要不妨礙DSG3蛋白質與抗DSG3抗體的結合即可，例如可優(yōu)選使用含有吐溫20等表面活性劑的緩沖液等。本發(fā)明的DSG3蛋白質的檢測方法中，除該用于沖企測DSG3蛋白質含量的被檢試樣之外，還可適當制備對照試樣。對照試樣例如有不含有DSG3蛋白質的陰性對照試樣、或含有DSG3蛋白質的陽性對照試樣等。這種情況下，可以通過對由不含有DSG3蛋白質的陰性對照試樣得到的結果、和由含有DSG3蛋白質的陽性對照試樣得到的結果進行比較，確認被檢試樣中是否存在DSG3蛋白質。另外，制備使?jié)舛入A段變化的一系列對照試樣，以數(shù)值的形式得到對各對照試樣的檢測結果，然后基于與DSG3蛋白質的濃度值對應的測定值制成標準曲線，根據(jù)該標準曲線可以定量檢測被檢試樣中所含的DSG3蛋白質。經(jīng)由抗DSG3抗體檢測與支撐體結合的DSG3蛋白質的優(yōu)選方式例如有使用用標記物標記的抗DSG3抗體的方法。例如，通過使被檢試樣與固定在支撐體上的抗DSG3抗體接觸，清洗，然后使用特異性識別與該抗DSG3抗體結合的DSG3蛋白質的標記抗體，可以纟企測該DSG3蛋白質?？笵SG3抗體的標記可按照通常已知的方法進行。標記物可以使用熒光染料、酶、輔酶、化學發(fā)光物質、放射性物質等本領域技術人員所公知的標記物質，具體例子有》文射性同位素(32P、14C、1251、3H、1311等)、熒光素、羅丹明、丹磺酰氯、傘形酮、螢光素酶、過氧化物酶、堿性磷酸酶、(3-半乳糖苷酶、卩-葡糖苷酶、辣根過氧化物酶、葡糖淀粉酶、溶菌酶、糖氧化酶、微過氧化物酶、生物素等。使用生物素作為標記物時，優(yōu)選添加生物素標記抗體，然后進一步添加使堿性磷酸酶等酶結合的抗生物素蛋白。為了使標記物與抗DSG3抗體結合，可以采用戊二醛法、馬來酰亞胺法、二硫吡啶法、高碘酸法等公知的方法。具體來說，通過將含有抗DSG3抗體的溶液加入到板等支撐體上，使抗DSG3抗體固定在支撐體上。板清洗后，為了防止蛋白質的非特異性結合，例如可用胎牛血清白蛋白(BSA)、明膠、白蛋白等封閉該板。板再次清洗后，將被檢試樣加入到板中，進行孵育。孵育后，清洗該板，加入標記抗DSG3抗體。適當孵育后，清洗該板，可以檢測出殘留在該板上的標記的抗DSG3抗體。檢測可按照本領域技術人員所公知的方法進行，例如檢測用放射性物質標記的抗DSG3抗體時，該標記抗DSG3抗體可通過液體閃爍計數(shù)法或RIA法;險測。檢測用酶標記的抗DSG3抗體時，向該標記抗DSG3抗體中加入底物，然后可通過分光光度計檢測底物的酶促變化，例如顯色。底物的具體例子有2,2-連氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)、1，2-苯二胺(鄰苯二胺)、3,3，，5,5，-四曱基聯(lián)苯胺(TMB)等。底物為熒光發(fā)光物時，底物的酶促變化可使用熒光分光光度計檢測。本發(fā)明的DSG3蛋白質的檢測方法的特別優(yōu)選的方式是使用用生33物素標記的抗DSG3抗體以及抗生物素蛋白的方法。具體來說，通過將含有抗DSG3抗體的溶液加入到板等支撐體上，可以使抗DSG3抗體固定在該板上。該板清洗后，為了防止蛋白質的非特異性的結合，該板例如可以用BSA等封閉。再次清洗該板，然后將被檢試樣加入到該板中。孵育后，清洗該板，并將生物素標記的抗DSG3抗體加入到該板上。適當將育，然后清洗該板，并將與堿性磷酸酶、過氧化物酶等酶結合的抗生物素蛋白加入到該板上。孵育后清洗該板，加入可以使與抗生物素蛋白結合的酶發(fā)揮作用的底物后，以底物的酶促變化等為指標，可以檢測DSG3蛋白質。本發(fā)明的檢測DSG3蛋白質的方法的另一方式是使用一種以上特異性識別DSG3蛋白質的一次抗體、以及一種以上特異性識別該一次抗體的二次4元體的方法。例如，在板等的支撐體上固定抗DSG3抗體后，為了防止蛋白質與支撐體的非特異性結合，例如可用胎牛血清白蛋白(BSA)、明膠、白蛋白等封閉該板。接著向該板中加入被檢試樣，然后進行孵育，使已經(jīng)與該板結合的抗DSG3抗體與DSG3蛋白質結合。然后通過清洗液清洗該板，從該板中除去不與抗DSG3抗體特異性結合、而是非特異性地與該支撐體結合的DSG3蛋白質。使與同支撐體結合的抗體不同的另外一種抗DSG3抗體與抗DSG3蛋白質結合，然后使二次抗體與由該DSG3蛋白質和抗DSG3抗體形成的復合物進行反應，該二次抗體可以只與抗DSG3抗體結合，該抗DSG3抗體不與支撐體而與DSG3蛋白質結合。上述操作的結果，是通過對結合的二次抗體進行定向或定量檢測，來檢測被檢試樣中DSG3蛋白質的方法。此時，可通過才示"i己物適當標^己二次抗體。本發(fā)明的DSG3蛋白質的;f企測方法的另一方式例如有利用聚集反應的檢測方法。該方法中，可以使用吸附有抗DSG3抗體的載體，檢測DSG3蛋白質。吸附抗體的載體只要為不溶性、不發(fā)生非特異性反應、且穩(wěn)定即可，可以使用任何抗體。例如有膠乳顆粒、皂土、34膠棉、高嶺土、固定羊紅細胞等，但優(yōu)選使用膠乳顆粒。膠乳顆粒例如可使用聚苯乙烯膠乳顆粒、苯乙烯-丁二烯共聚物膠乳顆粒、聚乙烯基曱苯膠乳顆粒等，但優(yōu)選使用聚苯乙烯膠乳顆粒。將致敏的顆粒與試樣混合，攪拌一定時間。試樣中以高濃度含有DSG3蛋白質等顆粒的聚集度大，因此可以通過肉眼估算該聚集度，由此可以檢測DSG3蛋白質。另外，通過分光光度計等測定聚集導致的濁度的增加，也可檢測出DSG3蛋白質。本發(fā)明的DSG3蛋白質的檢測方法的另一方式例如有使用利用表面等離子體共振現(xiàn)象的生物傳感器的方法。通過使用利用表面等離子體共振現(xiàn)象的生物傳感器，蛋白質與蛋白質之間的相互作用作為表面等離子體共振信號，無需標記即可實時觀察該蛋白質。例如，可以通過使用BIAcore(Biacore制造)等生物傳感器來檢測DSG3蛋白質與抗DSG3抗體的結合。具體來說，4吏被沖企試樣與固定有抗DSG3抗體的傳感芯片接觸，可以以共振信號的變化的形式檢測出與抗DSG3抗體結合的DSG3蛋白質。除上述例舉的標記之外，還可以使用18F、55Co、64Cu、66Ga、68Ga、76Br、89Zr和1241等發(fā)射正電子的核素，可按照常規(guī)方法(ActaOncol.32,825~830，1993)標記抗DSG3抗體。用上述發(fā)射正電子核素標記的抗DSG3抗體給予人或動物后，通過使用非侵襲性獲得藥物動力相關的數(shù)據(jù)的裝置PET(正電子斷層攝影裝置)，可以從體外計測由該放射性核素放射的放射線，通過計算機層析成像方法變換為定量圖像。如上所述，通過使用PET,在不需要從患者采集試樣的情況下，即可以檢測在特定的癌癥中高表達的抗原分子?？笵SG3抗體除上述核素之外，還可以使用IIC、13N、150、18F、45Ti等發(fā)射正電子的核素，通過短壽命RI進行放射標記。目前，使用由醫(yī)療用回旋加速器得到的上述核素的短壽命核素的生產(chǎn)、短壽命RI標記化合物制備技術等相關研究開發(fā)得到進展，可由該技術標記抗DSG3抗體。用上述發(fā)射正電子核素標記抗DSG3抗體后給予患者，由此識別生物體內存在的DSG3蛋白質的該標記抗DSG3抗體可以4艮據(jù)抗DSG3抗體與各部位的病理組織的特異性，聚集在原發(fā)灶和轉移灶中，因此可以通過檢測其放射活性來診斷該原發(fā)灶和轉移灶的存在。在該診斷用途中使用時，可以適當使用25-4000keV的Y粒子或正電子放射量的活性值。選擇適當?shù)暮怂剡M一步大量給予，有望獲得治療效果，這種情況下可適當使用70~700keV的y粒子或正電子力文射量值。本發(fā)明的方法的另一方式中，檢測DSG3mRNA的表達。本發(fā)明中，檢測包含定量或定性檢測，例如定性檢測例如有單純的DSG3mRNA是否存在的測定、DSG3mRNA是否存在一定量以上的測定、DSG3mRNA的量與其它試樣(例如對照試樣等)進行比較的測定等。而定量4企測可以是測定DSG3mRNA的濃度、測定DSG3mRNA的量等。被檢試樣只要是有含有DSG3mRNA的可能性的試樣即可，沒有特別限定，優(yōu)選為由哺乳類等生物的體內采集的試樣，進一步優(yōu)選由人采集的試樣。纟皮^H式樣的具體例子例如有血液、間質液、血漿、血管外液、腦脊髓液、滑液、胸膜液、血清、淋巴液、唾液、尿等，但優(yōu)選的是血液、血清或血漿。此外，在本發(fā)明的被檢試樣中也包含由下述被檢試樣獲得的試樣，即由生物體內采集的組織或細胞固定而得到的標本或者細胞的培養(yǎng)液等。對所要診斷的癌癥沒有特別限定，可以是任何癌癥，具體有肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌等，優(yōu)選的是肺癌，特別優(yōu)選的是小細胞肺癌。本發(fā)明中的受試者只要是遺傳性具有DSG3蛋白質的動物種類即可，所述動物種類已知有猴、牛、綿羊、小鼠、狗、貓、倉鼠等人以外的很多種哺乳類。特別適合使用的受試者是人，但并不限于此。以下給出^r測方法的具體方式，但本發(fā)明的方法并不限于這些方法。首先由受試者制備試樣。接著檢測該試樣中含有的DSG3mRNA。本發(fā)明中，可以進行由mRNA合成的cDNA的4全測。本發(fā)明中，在被檢試樣中檢測出DSG3mRNA或編碼DSG3的cDNA時，與陰性對照或正常者比較，判斷被檢試樣中檢測出的DSG3mRNA或編碼DSG3的cDNA的量多時，則可以判定受試者為癌癥，或者將來罹患癌癥的可能性高。這些方法可以是本領域技術人員所周知的方法，例如RNA印跡法、RT-PCR法、DNA陣列法等。上述本發(fā)明的檢測方法可以使用各種自動檢測裝置實現(xiàn)自動化，也可以是對于大量的試樣進行一次性檢測。本發(fā)明的目的還在于提供診斷試劑或試劑盒，該診斷試劑或試劑盒用來檢測用于癌癥診斷的被檢試樣中的DSG3蛋白質，該診斷試劑或試劑盒至少含有抗DSG3抗體。根據(jù)作為ELISA法等的EIA法進行時，該診斷試劑或試劑盒可以含有固定有抗體的載體，抗體可以預先與載體結合。基于使用膠乳等載體的聚集法時，該診斷藥或試劑盒可以含有吸附有抗體的載體。本發(fā)明的目的又在于提供診斷試劑或試劑盒，該診斷試劑或試劑盒用來檢測用于癌癥診斷的被檢試樣中的DSG3mRNA、或編碼DSG3的cDNA，該診斷試劑或試劑盒至少含有編碼DSG3的DNA(含有SEQIDN0.39所述核苷酸序列的DNA)、或含有至少15個核苷酸與該互補鏈互補的寡核苦酸。這里，"互補鏈"是指由A:T(為RNA時則為U)、G:C堿基對構成的雙鏈核酸中相對于一條鏈的另一條鏈。另外"互補"并不僅限于在至少15個連續(xù)的核苷酸區(qū)完全互補的序列，還可以在核苷酸序列上具有至少70%、優(yōu)選至少80%、更優(yōu)選90%、進一步優(yōu)選95%以上的同源性。用于確定同源性的算法可以采用本說明書所述的方法。本發(fā)明的寡核苷酸可以作為編碼DSG3的DNA的檢測或擴增中使用的探針或引物、用于檢測該DNA表達的探針或引物使用。本發(fā)明的寡核苷酸還可以以DNA陣列的基板形式使用。使用該寡核苷酸作為引物時，其長度通常為15bp100bp,優(yōu)選為17bp30bp。引物只要是可擴增編碼DSG3的DNA、或其互補鏈的至少一部分即可，沒有特別限定。作為引物使用時，其3，末端區(qū)可制成具互補性，可以對其5'末端附加限制酶識別序列或tag等。使用上述寡核普酸作為探針時，該探針只要于編碼DSG3的DNA、或其互補鏈的至少一部分特異性雜交即可，沒有特別限定。該探針可以是合成寡核香酸，通常至少具有15bp以上的鏈長。使用本發(fā)明的寡核苷酸作為探針時，優(yōu)選適當標記后使用。標記方法例如有使用T4多核苷酸激酶，用"P將寡核苷酸5'末端磷酸化而進行標記的方法；以及使用克列諾酶等的DNA聚合酶，以隨機六聚寡核苷酸等作為引物，攝入用"P等放射性同位素、熒光染料或生物素等標記的底物核苷酸的方法(隨機引物法等)。本發(fā)明的寡核苷酸例如可通過市售的寡核苷酸合成儀來制備，探針可以制成通過限制酶處理等獲得的雙鏈DNA片段的形式。上述診斷試劑或試劑盒中，除作為有效成分的寡核苷酸或抗體之外，例如可以根據(jù)需要混合無菌水、生理鹽水、植物油、表面活性劑、脂類、溶解助劑、緩沖劑、蛋白質穩(wěn)定劑(BSA或明膠等)、保存劑、封閉溶液、反應溶液、反應中止液、用于處理試樣的試劑等。本發(fā)明的診斷方法可以在體外或體內進行，優(yōu)選在體外進行。本發(fā)明的癌癥診斷方法的優(yōu)選方式可以例舉包含以下步驟的方法(a)提供由受試者采集的試樣的步驟；(b)檢測(a)的試樣中所含的DSG3蛋白質的步驟。本發(fā)明的癌癥診斷的進一步優(yōu)選方式可以例舉包含以下步驟的方法(a)提供由受試者采集的試樣的步驟；(b)檢測(a)的試樣中所含的DSG3基因的步驟?？笵SG3抗體的制備本發(fā)明中使用的抗DSG3抗體只要可與DSG3蛋白質特異性結合即可，不限定其來源、種類(單克隆、多克隆)和形狀。具體來說，可以使用動物抗體(例如小鼠抗體、大鼠抗體、駱駝抗體)、人抗體、嵌合抗體、人源化抗體等公知的抗體?？贵w可以是多克隆抗體，但優(yōu)選為單克隆抗體。本發(fā)明中使用的抗DSG3抗體可以使用公知的方法、以單克隆或多克隆抗體的形式獲得。本發(fā)明中所使用的抗DSG3抗體特別優(yōu)選來自哺乳動物的單克隆抗體。來自哺乳動物的單克隆抗體包含通過雜交瘤產(chǎn)生的單克隆抗體；以及通過基因工程的方法、由用含有抗體基因的表達載體轉化的宿主產(chǎn)生的單克隆抗體等。產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤基本上可采用公知技術，如下制備。即，使用DSG3蛋白質作為致敏抗原，將其按照常規(guī)免疫方法進行免疫，通過常規(guī)的細胞融合法將所得免疫細胞與公知的親本細胞融合，通過通常的篩選法篩選單克隆的抗體產(chǎn)生細胞，由此可選擇產(chǎn)生抗DSG3抗體的雜交瘤。具體來說，單克隆抗體的制備例如可如下進行。首先，使在GenBank檢索號NM-001944(SEQIDN0.39)中公開了其核苷S臾序列的DSG3基因表達，由此可獲得作為取得抗體的致敏抗原使用的DSG3蛋白質。即，將編碼DSG3的基因序列插入到公知的表達載體中，轉化適當?shù)乃拗骷毎?，然后按照公知的方法，從該宿主細胞中或培養(yǎng)上清中純化目標人DSG3蛋白質。另外，純化的天然DSG3蛋白質也可同樣使用。對哺乳動物進行免疫的致^t抗原可使用該純化DSG3蛋白質。DSG3的部分肽也可以用作致敏抗原。此時，該部分肽可通過化學合成，由人DSG3的氨基酸序列獲得，也可以將DSG3基因的一部分整合到表達載體中，使其表達來獲得，還可以進一步通過蛋白分解酶分解DSG3蛋白質來獲得，對用作部分肽的DSG3的區(qū)域和大小沒有限39定。對用該致敏抗原免疫的哺乳動物沒有特別限定，優(yōu)選考慮與細胞融合中使用的親本細胞的適合性而進行選擇，通?？墒褂脟X類的動物，例如小鼠、大鼠、倉鼠或兔、猴等?？砂凑展姆椒?，通過致敏抗原免疫上述動物。例如，常規(guī)方法是可將致敏抗原通過腹腔內或皮下注射給予哺乳動物來實施免疫。具體來說，將用PBS(磷酸緩沖鹽)或生理鹽水等、以適當?shù)南♂尡堵氏♂尩闹旅艨乖凑招枰c常規(guī)的佐劑例如弗氏完全佐劑混合、乳化，然后每隔4~21天分多次將該致敏抗原給予哺乳動物。用致敏抗原進行免疫時可使用適當?shù)妮d體。特別是使用分子量小的部分肽作為致敏抗原時，優(yōu)選將該致敏抗原肽與白蛋白、鑰孔蟲戚血藍蛋白(keyholelimpethemocyanin)等載體蛋白結合后用于免疫。如上所述，哺乳動物被免疫，確認血清中所需抗體量升高后，從哺乳動物中采集免疫細胞用于細胞融合。特別優(yōu)選的免疫細胞是脾細胞。與上述免疫細胞融合的細胞可使用哺乳動物的骨髓瘤細胞。該骨髓瘤細胞優(yōu)選使用公知的各種細胞抹，例如P3(P3x63Ag8.653)(J.Immno1.(1979)123,1548~1550)、P3x63Ag8U.1(CurrentTopicsinMicrobiologyandImmunology(1978)81,1~7)、NS-l(Kohler.G.和Milstein,C.Eur.J.Immunol,(1976)6,511~519)、MPC-11(Margulies.D.H.等人"Cell(1976)8，405~415)、SP2/0(Shulman,M.等人.，Nature(1978)276,269-270)、FO(deSt.Groth，S.F.等人,，J.Immunol.Methods(1980)35,1~21)、S194(Trowbridge,I.S.J.Exp.Med,(1978)148，313~323)、R210(Galfre,G.等人.，Nature(1979)277，131~133)等?；旧峡砂凑展姆椒ā⒗鏚ohler和Milstein等人的方法(Kohler.G.和Milstein,C.，MethodsEnzymo1.(1981)73,3~46)進行上述免疫細胞與骨髓瘤細胞的細胞融合。更具體地說，例如在細胞融合促進劑的存在下、在通常的營養(yǎng)培養(yǎng)液中可實施上述細胞融合。融合促進劑例如可使用聚乙二醇(PEG)、仙臺病毒(HVJ)等，為了進一步提高融合效率，可以根據(jù)需要添加二曱基亞砜等輔助劑。免疫細胞與骨髓瘤細胞的使用比例可任意設定。例如優(yōu)選相對于骨髓瘤細胞使免疫細胞為1~10倍。上述細胞融合中使用的培養(yǎng)液例如可使用適合上述骨髓瘤細胞林增殖的RPMI1640培養(yǎng)液、MEM培養(yǎng)液、或在該種細胞培養(yǎng)中使用的常規(guī)培養(yǎng)液，并且，可適當添加胎牛血清(FCS)等血清補液，結合使用。細胞融合可如下形成，即將上述規(guī)定量的免疫細胞和骨髓瘤細胞在上述培養(yǎng)液中充分混合，通常以30~60%(w/v)的濃度添加預先加溫至37。C左右的PEG溶液(例如平均分子量為1000~6000左右)，通過混合形成目標融合細胞(雜交瘤)。接著，依次添加上述例舉的適當培養(yǎng)液，通過離心除去上清，并將該操作反復進行，可以除去對雜交瘤生長不利的細胞融合劑等。上述得到的雜交瘤通?？赏ㄟ^在常規(guī)選擇培養(yǎng)液例如HAT培養(yǎng)液(含有次黃嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)液)中培養(yǎng)來進行選擇。為了使目標雜交瘤以外的細胞(非融合細胞)死亡可以使用上述HAT培養(yǎng)液持續(xù)培養(yǎng)足夠的時間(通常，所述足夠的時間是數(shù)天至數(shù)周)。接著，通過實施常規(guī)的極限稀釋法，可以實施產(chǎn)生目標抗體的雜交瘤的篩選和單一克隆。另夕卜，識別DSG3的抗體的制備可以采用國際公開WO03/104453中所述的方法進行制備。目標抗體的篩選和單一克隆可優(yōu)選按照基于公知的抗原抗體反應的篩選方法進行實施。例如，可以使抗原與用聚苯乙烯等制成的珠或市售的96孔微量滴定板等載體結合，與雜交瘤的培養(yǎng)上清反應，清洗載體，然后與用酶標記的二次抗體等反應，由此可以確定培養(yǎng)上清中是否含有與致敏抗原反應的目的抗體。產(chǎn)生與抗原具有結合能力的所需抗體的雜交瘤可以通過極限稀釋法等進行克隆。此時，抗原不僅可以使用用于免疫的抗原，還可以適當使用實質為相同性質的DSG3蛋白質。通過將抗原對人以外的動物進行免疫、獲得上述雜交瘤，除上述方法之外，通過將人淋巴細胞在體外用DSG3蛋白質致敏，將致敏的淋巴細胞與來自人的具有永久分裂能力的骨髓瘤細胞融合，也可以獲得與DSG3蛋白質具有結合活性的所需的人抗體(參照日本特公平1-59878號公報)。并且，對具有完全人抗體基因的所有組成成分的轉基因動物給予作為抗原的DSG3蛋白質，使由此所得的抗DSG3抗體產(chǎn)生細胞無限增殖，然后從該無限增殖細胞中分離DSG3蛋白質的人抗體，也可以獲得所需人抗體(參照國際公開W094/25585、W093/12227、WO92/03918、WO94/02602)。產(chǎn)生上述制備的單克隆抗體的雜交瘤可在常規(guī)的培養(yǎng)液中繼代培養(yǎng)，還可同樣實施該雜交瘤在液氮中的長期保存。由該雜交瘤獲得單克隆抗體時，可優(yōu)選實施以下的方法按照常規(guī)方法培養(yǎng)該雜交瘤，以其培養(yǎng)上清的形式獲得單克隆抗體的方法；或者將雜交瘤給予與其具有適合性的哺乳動物，使其增殖，以其腹水的形式獲得單克隆抗體的方法等。前者的方法適合獲得高純度的抗體，而后者的方法適合抗體的大量生產(chǎn)。本發(fā)明中，由雜交瘤克隆抗體基因后，可以將該基因整合到適當?shù)妮d體中，導入到宿主中，由采用上述基因重組技術制備的重組細胞產(chǎn)生的重組型抗體可用作單克隆抗體(例如參照Vandamme，A.M.等人.，Eur丄Biochem.(1990)192,767~775)。具體來說，該基因可以通過從產(chǎn)生抗DSG3抗體的雜交瘤細胞中分離編碼抗DSG3抗體的可變區(qū)(V區(qū))的mRNA來獲得。即，可以通過乂>知的方法例如胍超離心法(Chirgwin，J.M.等人"Biochemistry(1979)18，5294~5299)、APGC法(Chomczynski，P.等人.，Anal.Biochem.(1987)162，156~159)等，由該雜交瘤細胞制備總RNA,然后使用mRNA純化試劑盒(GEHealthcareBio-Sciences制備)等可以制備目標mRNA。還可以通過使用QuickPrepmRNA純化試劑盒(GEHealthcareBio-Sciences制備)由該雜交瘤直接制備mRNA。使用反轉錄酶，可以從所得mRNA合成抗體V區(qū)的cDNA。cDNA的合成可使用AMV反轉錄酶第一鏈cDNA合成試劑盒(AMVReverseTranscriptaseFirst-StrandcDNASynthesisKit)(生化學工業(yè)制備)等進行實施。為了進行cDNA的合成和擴增，還可優(yōu)選采用用5'-AmpliFINDERRACE試劑盒(Clontech制備)和PCR的5'-RACE法(Frohman,M.A.等人,，Proc.Natl.Acid.Sci.USA(1988)85,8998-9002、Bdyavsky，A.等人.，NucleicAcidsRes.(1989)17，2919~2932)等，上述cDNA的合成過程中，可以向cDNA的兩個末端導入后述的適當?shù)南拗泼盖?f立點。由所得的PCR產(chǎn)物純化目標cDNA片段，接著，與載體DNA連接。如上制備重組載體，并將其導入到大腸桿菌等中，篩選菌落，然后從形成該菌落的大腸桿菌中制備所需的重組載體。該重組載體是否具有目標cDNA的核苷酸序列，這可以通過公知的方法例如雙脫氧核苷酸鏈終止法等進行確認。在獲得編碼目標抗DSG3抗體的V區(qū)的cDNA后，通過識別插入到該cDNA兩個末端的限制酶切位點的酶消化該cDNA。通過連接，上述被消化的編碼抗DSG3抗體的V區(qū)的cDNA與用相同組合的酶消化得到的、編碼所需抗體恒定區(qū)(C區(qū))的DNA進行符合讀框的融合，整合到含有該C區(qū)的表達載體中。制備本發(fā)明中使用的抗DSG3抗體時，可優(yōu)選采用將抗體基因整合到表達控制區(qū)、例如在增強子、啟動子的控制下進行表達的表達載體中的方法。接著，使用該表達載體適當轉化宿主細胞，由此可獲得表達編碼抗DSG3抗體的DNA的重組細胞。抗體基因的表達可以將編碼抗體重鏈(H鏈)或輕鏈(L鏈)的DNA分別整合到表達載體中，同時轉化宿主細胞，或者將編碼H鏈和L鏈的DNA整合到單一的表達載體中，轉化宿主細胞(參照國際公開W094/11523)。先分離抗體基因、再導入到適當?shù)乃拗骷毎兄苽淇贵w時，優(yōu)選使用適當?shù)乃拗骱捅磉_載體的組合。使用真核細胞作為宿主時，可以使用動物細胞、植物細胞、真菌細胞。動物細胞已知有(l)哺乳類細胞，例如CHO、COS、骨髓瘤、BHK(幼倉鼠腎細胞)、Hda、Vero，(2)兩棲類細胞，例如非洲爪蟾卵細胞，或(3)昆蟲細胞，例如sf9、sf21、Tn5等。植物細胞已知有來自煙草屬(Nicotiana)例如煙草(Nicotianatabacum)的細胞，可以進行愈傷組織培養(yǎng)。真菌細胞已知有酵母例如糖酵母屬(Saccharomyces)例如啤酒片唐酵母(Saccharomycesserevisiae)、絲狀菌例如曲霉屬(Aspergillus)例如黑曲霉(Aspergillusniger)等。使用原核細胞時，優(yōu)選采用使用細菌細胞的產(chǎn)生體系。細菌細胞已知有大腸桿菌(E.coli)、枯草桿菌。通過轉化向這些細胞中導入含有目標抗體基因的表達載體，將轉化的細胞在體外進行培養(yǎng)，所需的抗體可由該轉化細胞的培養(yǎng)物中獲得。重組型抗體的產(chǎn)生不僅可使用上述宿主細胞，也優(yōu)選使用轉基因動物。例如抗體基因可符合讀框地插入到編碼乳汁中特性產(chǎn)生的蛋白質(山羊(3酪蛋白等)的基因的內部，以融合基因的形式構建。含有插入了抗體基因的融合基因的DNA片段可以注入到山羊胚胎中，該注入胚胎可以導入到雌性山羊體內。從接受了胚胎的山羊所產(chǎn)出的轉基因山羊或其子代所產(chǎn)生的乳汁中可以獲得所需抗體。另外，為了使由轉基因山羊產(chǎn)生的含有所需抗體的乳汁量增加，激素可適當應用于轉基因山羊(Ebert，K.M.等人.，Bio/Technology(1994)12，699~702)。本發(fā)明的重組抗體的C區(qū)可以使用來自動物抗體的C區(qū)。例如小鼠抗體的H鏈C區(qū)可以使用Cyl、Cy2a、Cy2b、Cy3、Qw、C3、Cod、Ca2、Cs,L鏈的C區(qū)可使用Oc、CX另外，小鼠抗體以外的動物抗體可使用大鼠、兔、山羊、綿羊、駱駝、猴等的動物抗體。這些序列是公知的。為了改善抗體或其產(chǎn)生的穩(wěn)定性，可以對C區(qū)進行修飾。本發(fā)明中，為了降低對人的異種抗原性等，可以使用人工修飾的基因重組型抗體、例如嵌合抗體、人源化抗體等。這些修飾抗體可采用公知的方法進行制備。嵌合抗體是含有人以外的動物例如小鼠抗體的重鏈、輕鏈的可變區(qū)和人抗體的重鏈、輕鏈的恒定區(qū)的抗體。編碼小鼠抗體可變區(qū)的DNA與編碼人抗體恒定區(qū)的DNA連接，將其整合到表達載體中，由此可以制備表達該DNA的重組載體。培養(yǎng)由該載體轉化的重組細胞，使整合的DNA表達，由此可獲得在培養(yǎng)中產(chǎn)生的該嵌合抗體。嵌合抗體和人源化抗體的C區(qū)可以使用人抗體，例如H鏈可以使用Cyl、Cy2、Cy3、Cy4、Qa、G5、Ccd、Ca2、Ce,L鏈可使用Oc、CA。這些序列是公知的。為了改善抗體或其產(chǎn)生的穩(wěn)定性，可以對人抗體C區(qū)進行修飾。和來自人抗體的構架區(qū)(FR)、以及來自人抗體的C區(qū)構成。由于人源化抗體在人體內的抗原性降低，因此可用作本發(fā)明的治療藥的有效成分。人源化抗體也稱為重構人抗體，是通過移植將人以外的動物例如小鼠抗體的CDR置換為人抗體的CDR而成的，且其常規(guī)的基因重組方法也是已知的。具體來說，設計成小鼠抗體的CDR與人抗體的FR符合讀框的融合的DNA序列是通過使用設計為末端部具有重疊部分的多個寡核苷酸作為引物的PCR法進行合成。將上述得到的DNA與編碼人抗體C區(qū)的DNA符合讀框的融合，插入到表達載體中，由此制備重組載體。將該重組載體導入宿主中，建立重組細胞，然后培養(yǎng)該重組細胞，使編碼該人源化抗體的DNA表達，由此，該人源化抗體可以在該培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)物中產(chǎn)生(參照歐洲專利公開EP239400,國際公開WO96/02576)。量測定并評價，可以適當選擇經(jīng)由CDR連接時該CDR可形成良好的抗原結合部位的人抗體的FR。根據(jù)需要，F(xiàn)R的氨基酸也可以被置換，使重構人抗體的CDR形成適當?shù)目乖Y合部位。上述氨基酸置換可以適當采用在小鼠CDR與人FR融合時所使用的PCR法進行導入，通過上述方法測定并評價置換了氨基酸的突變型抗體與抗原的結合活性，由此可以選擇具有所需性質的突變FR序列(Sato，K.等人.，CancerRes,1993，53,851—856)。還已知人抗體的獲得方法。例如，在體外將人淋巴細胞用所需抗原或表達所需抗原的細胞致敏，將致敏淋巴細胞與人骨髓瘤細胞例如U266融合，由此可獲得與抗原具有結合活性的所需人抗體(參照日本特公平1-59878)。還可以將具有完全人抗體基因的所有組成成分的轉基因動物用所需抗原進行免疫，由此獲得所需人抗體(參照國際公開W093/12227、WO92/03918、WO94/02602、W094/25585、WO96/34096、W096/33735)。進一步已知使用人抗體庫，通過淘選獲得人抗體的技術。例如，將人抗體的V區(qū)作為單鏈抗體(scFv),通過噬菌體展示法在噬菌體的表面表達，可以選擇與抗原結合的噬菌體。通過分析所選擇的噬菌體基因，由此可以確定編碼與抗原結合的人抗體的V區(qū)的DNA序列。確定了與抗原結合的scFv的DNA序列之后，將該V區(qū)序列與所需人抗體C區(qū)序列進行符合讀框的融合，然后插入到適當?shù)谋磉_載體中，由此可以制備表達載體。將該表達載體導入到上述所例舉的優(yōu)選的表達細胞中，使編碼該人抗體的基因表達，可以獲得該人抗體。這些方法也是公知的，可參考國際公開WO92/01047、W092脂91、W093馬213、WO93/11236、WO93/19172、WO95/01438、W095/15388。本發(fā)明中所使用的抗體只要與DSG3蛋白質結合即可，不僅是以IgG為代表的二價抗體，也包含一價抗體、或以IgM為代表的多價抗體。本發(fā)明的多價抗體中包含具有完相同的抗原結合部位的多價抗體、或具有一部分或者完全不同的抗原結合部位的多價抗體。本發(fā)明中使用的抗體并不限于抗體的全長分子，只要與DSG3蛋白質結合即可，可以是低分子抗體或其修飾物。低分子抗體也含有全抗體(wholeantibody,例如全IgG等)的一部分缺損的抗體片段，只要具有與抗原的結合能力即可，沒有特別限定。本發(fā)明的抗體片段只要是全抗體的一部分即可，沒有特別限定，但優(yōu)選含有重鏈可變區(qū)(VH)或/和輕鏈可變區(qū)(VL)。VH或VL的氨基酸序列可以具有置換、缺失、附加和/或插入。并且，只要具有與抗原的結合能力即可，可以使VH或/和VL的一部分缺損。另外，可變區(qū)可以進行嵌合或人源化。抗體片,更的具體例子例如有Fab、Fab'、F(ab')2、Fv等。低分子抗體的具體例子例如有Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、scFv(單鏈Fv)、雙抗體、sc(Fv)2(單鏈(Fv)2)等。這些抗體的多聚體(例如二聚體、三聚體、四聚體、多聚體)也包含在本發(fā)明的低分子抗體中。關于抗體的片段，可以將抗體用酶例如木瓜蛋白酶、胃蛋白酶處理，生成抗體片段，或者構建編碼這些抗體片段的基因，將其導入表達載體中，然后在適當?shù)乃拗骷毎斜磉_(例如參照Co,M.S.等人.，J.Immuno1.(1994)152,2968~2976;Better,M.和Horwitz，A.H.MethodsinEnzymology(1989)178，476-496;Plueckthun,A.和Skerra,A.MethodsinEnzymology(1989)178，476~496;Lamoyi,E.，MethodsinEnzymology(1989)121,652~663;Rousseaux,J.等人.，MethodsinEnzymology(1989)121，663~669;Bird,R.E.等人.，TIBTECH(1991)9:132-137)。雙抗體是指通過基因融合構建的二價抗體片段(HolligerP等人.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448(1993);EP404,097號；W093/11161號等)。雙抗體是由兩條多肽鏈構成的二聚體，通常各多肽鏈在相同的鏈中，VL和VH通過短至無法互相結合的、例如5個殘基左右的接頭進行連接。在相同多肽鏈上所編碼的VL和VH，其之間的接頭短，因此無法形成單鏈可變區(qū)片段，而是形成二聚體，因此雙抗體具有兩個抗原結合部位。scFv可通過將抗體的H鏈V區(qū)和L鏈V區(qū)連接而獲得。在該scFv中，H鏈V區(qū)和L鏈V區(qū)經(jīng)由接頭、優(yōu)選肽接頭連接(Huston,J.S.等人.，Pro"Natl.Acid.Sci.U.S.A.(1988)85，5879~5883)。scFv中的H鏈接V區(qū)的肽接頭沒有特別限定，例如可使用含有3~25個殘基左右的任意的單鏈肽，還可使用后述的肽接頭等。V區(qū)的連接方法可利用上述的PCR法。上述編碼抗體的H鏈或H鏈V區(qū)的DNA序列、以及編碼L鏈或L鏈V區(qū)的DNA序列中，以編碼全部或所需氨基酸序列的DNA部分為模板，以及使用具有與其兩端的序列對應的序列的一對引物，通過PCR法擴增編碼scFv的DNA。接著，將編碼肽接頭部分的DNA、以及具有設計為其兩端分別與各H鏈、L鏈連接的序列的一對引物組合，進行PCR反應，由此可獲得具有所需序列的DNA。還可以先制備編碼scFv的DNA，可按照常規(guī)方法獲得含有它們的表達載體、以及通過該表達載體轉化的重組細胞，培養(yǎng)所得重組細胞，使編碼該scFv的DNA表達，可獲得該scFv。sc(Fv)2是兩個VH和兩個VL通過接頭等連接而形成的單鏈的低分子抗體(Hudson等人.，JImmunol.Methoda1999;231:177~189)。sc(Fv)2例如可通過用接頭連接scFv來制備。優(yōu)選具有以下特征的抗體2個VH和2個VL以單鏈多肽的N末端一側為基點，以VH、VL、VH、VL([VH]4妄頭[VL]接頭[VH]接頭[VL])的順序排列。2個VH和2個VL的順序并不特別限定于上述排列，可以以任何順序排列。例如包含以下的排列。[VL]接頭[VH]接頭[VH]接頭[VL][VH]接頭[VL]接頭[VL]接頭[VH][VH]接頭[VH]接頭[VL]接頭[VL][VL]接頭[VL]接頭[VH]接頭[VH][VL]接頭[VH]接頭[VL]接頭[VH]連接抗體的可變區(qū)的接頭可以使用可通過基因工程導入的任意的肽接頭、或化學合成的接頭(例如參照ProteinEngineering,9(3),299~305,1996)中所公開的接頭等，但本發(fā)明中優(yōu)選肽接頭。對肽接頭的長度沒有特別限定，可以根據(jù)需要由本領域技術人員適當選擇，但通常為1~100個氨基酸,優(yōu)選為3~50個氨基酸，進一步優(yōu)選為5~30個氨基酸，特別優(yōu)選為12-18個氨基酸(例如15個氨基酸)。肽接頭的例子包括SerGly.SerGlyGly.SerSerGlyGlyGlyGly'Gly.Ser(SEQIDNO:72)Ser.Gly.GIyGly(SEQIDNO:73)GlyGly'GlyGly.Ser(SEQIDNO:74)Ser.Gly.Gly.Gly.Gly(SEQIDNO:75)GlyGly.Gly'Gly.Gly,Ser(SEQIDNO:76)Ser.Gly.GlyGly.Gly.Gly(SEQIDNO:77)Gly'Gly.GlyGly.Gly.GlySer(SEQIDNO:78)SerGly.Gly.GlyGly.Gly,Gly(SEQIDNO:79)(Gly.GlyGly,Gly.Ser(SEQIDNO:74))n(Ser.Gly-Gly.GlyGly(SEQIDNO:75))n等。但是，肽接頭的長度或序列可根據(jù)目的，由本領域技術人員適當選擇。因此，本發(fā)明中特別優(yōu)選的sc(Fv)2的方式例如有以下的sc(Fv)2。[VH]肽接頭(15個氨基酸)[VL]肽接頭(15個氨基酸)[VH]肽接頭(15個氨基酸)[VL]化學合成的接頭(化學交聯(lián)劑)是肽交聯(lián)中通常使用的交聯(lián)劑，例如為N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)、二琥珀酰亞氨基辛二酸酯(DSS)、雙(石黃基琥珀酰亞氨基)辛二酸酯(BS3)、二硫代雙(琥珀酰亞氨基丙酸酯)(DSP)、二硫代雙(磺基琥珀酰亞氨基丙酸S旨)(DTSSP)、雙(琥珀酰亞氨基琥珀酸)乙二醇酯(EGS)、雙(磺基琥珀酰亞氨基琥珀酸)乙二醇酯(磺基-EGS)、二琥珀酰亞氨基酒石酸鹽(DST)、二石黃基琥珀酰亞氨基酒石酸鹽(磺基-DST)、雙[2-(琥珀酰亞胺氧基羰基氧基)乙基]砜(BSOCOES)、雙[2-(磺基琥珀酰亞胺氧基羰基氧基)乙基]砜(磺基-BSOCOES)等，這些交聯(lián)劑均有銷售。連接4個抗體可變區(qū)時，通常需要3個接頭，可以使用完全相同的接頭，也可以使用不同的接頭。本發(fā)明中，優(yōu)選的低分子抗體是雙抗體或sc(Fv)2。為了獲得上述低分子抗體，可以將抗體用酶例如木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等處理，生成抗體片段，或構建編碼這些抗體片段的DNA，將其導入到表達載體中，然后在適當?shù)乃拗骷毎斜磉_(例如參照Co,M.S.等人.，J.Immuno1.(1994)152，2968~2976;Better,M.和Horwitz,A.H.MethodsEnzymol(1989)178,476~496;Plueckthun,A.和Skerra,A.MethodsEnzymol(1989)178,497—515;Lamoyi，E.,MethodsEnzymol(1986)121,652~663;Rousseaux,J.等人.，MethodsEnzymol(1986)121,663-669;Bird,R.E.和Walker,B.W.，TrendsBiotechnol.(1991)9,132~137)。本發(fā)明的抗體可例舉以下(1)(62)所述的抗體，但并不限于這些抗體。以下(1)(62)所述的抗體例如有全抗體、低分子抗體、動物抗體、嵌合抗體、人源化抗體、人抗體等。(1)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.2的氨基酸序列(DF151抗體的H鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.4的氨基酸序列(DF151抗體的H鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDNO.6的氨基酸序列(DF151抗體的H鏈的CDR3序歹'J)。(2)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，該H鏈具有作為CH(H鏈恒定區(qū))的SEQIDN0.8的氨基酸序列(DF151抗體的CH序列)。(3)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，該H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列(DF151小鼠-人嵌合抗體的CH序列)。(4)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.12的氨基酸序列(DF151抗體的L鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDNO.14的氨基酸序列(DF151抗體的L鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.16的氨基酸序列(DF151抗體的L鏈的CDR3序歹'j)。(5)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，該L鏈具有作為CL(L鏈恒定區(qū))的SEQIDN0.18的氨基酸序列(DF151抗體的CL序列)。(6)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，該L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基S臾序列(DF151小鼠-人嵌合抗體的CL序列)。(7)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(8)抗體，該抗體含有(2)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(9)抗體，該抗體含有(3)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(10)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.22的氨基酸序列(DF364抗體的H鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.24的氨基S交序列(DF364抗體的H鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.26的氨基酸序列(DF364抗體的H鏈的CDR3序列)。(11)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，該H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列(DF364抗體的CH序列)。(12)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，該H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列(DF364小鼠-人嵌合抗體的CH序列)。(13)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.30的氨基酸序列(DF364抗體的L鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.32的氨基酸序列(DF364抗體的L鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.34的氨基酸序列(DF364抗體的L鏈的CDR3序列)。(14)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，該L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列(DF364抗體的CL序列)。(15)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，該L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列(DF364小鼠-人嵌合抗體的CL序列)。(16)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(17)抗體，該抗體含有(ll)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(18)抗體，該抗體含有(12)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(19)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(20)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(21)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(22)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(23)抗體，該抗體具有(ll)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(24)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(25)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.81的氨基酸序列(DF366抗體的H鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.83的氨基酸序列(DF366抗體的H鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.85的氨基酸序列(DF366抗體的H鏈的CDR3序歹'J)。(26)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，該H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列(DF366抗體的CH序列)。(27)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，該H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列(DF366小鼠-人嵌合抗體的CH序列)。(28)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.87的氨基酸序列(DF366抗體的L鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.89的氨基酸序列(DF366抗體的L鏈的CDR2序歹'J)、以及作為CDR3的SEQIDN0.91的氨基酸序列(DF366抗體的L鏈的CDR3序歹'J)。(29)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，該L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列(DF366抗體的CL序列)。(30)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，該L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列(DF366小鼠-人嵌合抗體的CL序列)。(31)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(32)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(33)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(34)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(35)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(36)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(37)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(28)所述的L鏈。(38)抗體，該抗體具有(11)所述的H鏈和(29)所述的L鏈。(39)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(30)所述的L鏈。(40)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(4)所述的L鏈。(41)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(5)所述的L鏈。(42)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(6)所述的L鏈。(43)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(13)所述的L鏈。(44)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(14)所述的L鏈。(45)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(15)所述的L鏈。(46)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，該H鏈具有作為CH的SEQIDNO.108的氨基S吏序列(小鼠IgG2a抗體的CH序列)。(47)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，該L鏈具有作為CL的SEQIDNO.l12的氨基酸序列(小鼠IgG2a抗體的CL序列)。(48)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，該H鏈具有作為CH的SEQIDNO.108的氨基S吏序列(小鼠IgG2a抗體的CH序列)。(49)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，該L鏈具有作為CL的SEQIDN0.112的氨基酸序歹寸(小鼠IgG2a抗體的CL序列)。(50)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，該H鏈具有作為CH的SEQIDNO.108的氨基酸序列(小鼠IgG2a抗體的CH序列)。(51)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，該L鏈具有作為CL的SEQIDNO.l12的氨基酸序歹寸(小鼠IgG2a抗體的CL序列)。(52)抗體，該抗體含有(46)所述的H鏈和(47)所述的L鏈。(53)抗體，該抗體含有(48)所述的H鏈和(49)所述的L鏈。(54)抗體，該抗體含有(50)所述的H鏈和(51)所述的L鏈。53(55)抗體，該抗體含有(46)所述的H鏈和(49)所述的L鏈。(56)抗體，該抗體含有(48)所述的H鏈和(51)所述的L鏈。(57)抗體，該抗體含有(50)所述的H鏈和(47)所述的L鏈。(58)抗體，該抗體含有(46)所述的H鏈和(51)所述的L鏈。(59)抗體，該抗體含有(48)所述的H鏈和(47)所述的L鏈。(60)抗體，該抗體含有(50)所述的H鏈和(49)所述的L鏈。(61)抗體，該抗體是在(1)~(60)中任一項所述的抗體中有1或多個氨基酸被置換、缺失、附加和/或插入而得到的抗體，所得抗體與(l)~(61)中任一項所述的抗體具有同等活性。(62)抗體，該抗體與表位結合，該表位與(1)~(60)中任一項所述的抗體所結合的DSG3蛋白質的表位相同。上迷(1)所述的"H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.2的氨基酸序列(DF151抗體的H鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.4的氨基酸序列(DF151抗體的H鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.6的氨基酸序列(DF151抗體的H鏈的CDK3序列)"中的VH可例舉具有SEQIDN0.46所述氨基酸序列(DF151抗體的VH序列)的VH。上述(4)所述的"L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.12的氨基酸序列(DF151抗體的L鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.14的氨基S吏序列(DF151抗體的L鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.16的氨基酸序列(DF151抗體的L鏈的CDR3序列)"中的VL可例舉具有SEQIDN0.48所述氨基酸序列(DF151抗體的VL序列)的VL。上述(10)所述的"H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.22的氨基酸序列(DF364抗體的H鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.24的氨基酸序列(DF364抗體的H鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.26的氨基酸序列(DF364抗體的H鏈的CDR3序列)"中的VH可例舉具有SEQIDNO.50所述氨基酸序列(DF364抗體的VH序列)的VH。上述(13)所述的"L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.30的氨基酸序列(DF364抗體的L鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.32的氨基酸序列(DF364抗體的L鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.34的氨基S吏序列(DF364抗體的L鏈的CDR3序列)"中的VL可例舉具有SEQIDN0.52所述氨基酸序列(DF364抗體的VL序列)的VL。上述(25)所述的"H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.81的氨基酸序列(DF366抗體的H鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.83的氨基酸序列(DF366抗體的H鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.85的氨基S臾序列(DF366抗體的H鏈的CDR3序列)"中的VH可例舉具有SEQIDN0.93所述氨基酸序列(DF366抗體的VH序列)的VH。上述(28)所述的"L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.87的氨基酸序列(DF366抗體的L鏈的CDR1序列)、作為CDR2的SEQIDN0.89的氨基酸序列(DF366抗體的L鏈的CDR2序列)、以及作為CDR3的SEQIDN0.91的氨基酸序列(DF366抗體的L鏈的CDR3序列)"中的VL可例舉具有SEQIDN0.95所述氨基酸序列(DF366抗體的VL序列)的VL。上述(61)所述抗體的優(yōu)選方式是CDR未被修飾的抗體。作為一個例子，在上述(61)所述的抗體中，"在(l)所述的抗體中有1或多個氨基酸被置換、缺失、附加和/或插入而得到的、與(l)所述的抗體具有同等活性的抗體"的優(yōu)選方式是"抗體，該抗體是與(l)所述的抗體具有同等活性、在(l)所述的抗體中有l(wèi)或多個氨基酸被置換、缺失、附加和/或插入而得到的抗體，其含有H鏈，所述H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.2的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.4的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDNO.6的氨基酸序列"。上述(61)所述的抗體中，其它的抗體的優(yōu)選方式也可同樣描述。本領域技術人員周知的制備與某種多肽功能同等的多肽的方法已知有向多肽導入突變的方法。例如，本領域技術人員可采用位點特異性誘變法(Hashimoto-Gotoh,T.等人.(1995)Gene152,271-275;Zoller,MJ,和Smith,M.(1983)MethodsEnzymol.100,468—500;Kramer,W.等人.(1984)NucleicAcidsRes.12，9441~9456;Kramer,W.和FritzHJ(1987)MethodsEnzymol.154,350~367;Kunkel,TA(1985)ProcNatlAcidSciUSA.82,488-492;Kunkel(1988)Methods,Enzymol.85，2763~2766)等，向本發(fā)明的抗體導入適當?shù)耐蛔?，由此可以制備與該抗體同等功能的抗體。另外，氨基酸的突變在自然界也可發(fā)生。如上所述，在本發(fā)明的抗體的氨基酸序列中，具有l(wèi)或多個氨基酸發(fā)生突變的氨基酸序列、且與該抗體的功能同等的抗體也包含在本發(fā)明中。上述突變中，突變的氨基酸數(shù)目通常為50個氨基酸以內、優(yōu)選為30個氨基酸以內、進一步優(yōu)選為10個氨基酸以內(例如為5個氨基酸以內)。在突變的氨基酸殘基中，優(yōu)選突變?yōu)楸Ｊ匕被嶂ф湹男再|的其它的氨基酸。例如，氨基酸支鏈的性質有疏水性氨基酸(A、I、L、M、F、P、W、Y、V)、親水性氨基酸(R、D、N、C、E、Q、G、H、K、S、T)、具有脂族支鏈的氨基酸(G、A、V、L、I、P)、具有含羥基支鏈的氨基酸(S、T、Y)、具有含硫原子支鏈的氨基酸(C、M)、具有羧酸和含酰胺的支鏈的氨基酸(D、N、E、Q)、具有含堿的支鏈的氨基酸(R、K、H)、具有含芳族的支鏈的氨基酸(H、F、Y、W)(括號內均表示氨基酸的單一字母標記)。已知具有對某一氨基酸序列，通過1或多個氨基酸殘基的缺失、附加和/或其它氨基酸的置換進行修飾的氨基酸序列的多肽可保持其生物學活性(Mark，D.F.等人.,ProcNatlAcidSciUSA.(1984)81，5662~5666;Zoller，M.J.和Smith,M.,Nucleic,AcidResearch(1982)10:6487~6500;Wang,A.等人.，Science224，1431-1433;Dalbadie-McFarland,G.等人.，ProcNatlAcidSciUSA,(1982)79,6409~6413)。本發(fā)明中還提供與表位結合的抗體，該表位與本發(fā)明所公開的抗DSG3抗體所結合的表位相同。上述抗體例如可通過以下的方法獲得。為了確定被檢抗體是否可竟爭性地與同本發(fā)明所公開的抗DSG3抗體所結合的表位相同的表位結合，可實施交叉阻斷測定、例如竟爭ELISA測定。例如，在竟爭ELISA測定中，在候選竟爭抗體的存在或非存在下，對包被在微量板的孔上的DSG3蛋白質進行孵育，然后添加生物素標記的本發(fā)明的抗DSG3抗體。與孔中的DSG3蛋白質結合的標記抗DSG3抗體的量可通過使用抗生物素蛋白過氧化物酶綴合物和適當?shù)牡孜飦頊y定?？贵w可用放射標記或熒光標記等的可檢測或測定的其它標記物進行標記。與DSG3蛋白質結合的標記抗DSG3抗體的量與對相同表位竟爭性結合的候選竟爭抗體(被檢抗體)的結合能力之間存在相關性。即，被檢抗體對相同表位的親和性越大，則標記抗DSG3抗體與包被有DSG3蛋白質的孔的結合活性降低。與在候選竟爭抗體非存在下實施的對照實驗中得到的結合活性比較，候選抗體如果可以阻斷至少20%、優(yōu)選至少20~50%、進一步優(yōu)選至少50%的抗DSG3抗體的結合，則可以認為該候選竟爭抗體與同本發(fā)明的抗DSG3抗體實質相同的表位結合，或者是對與相同表位結合進行竟爭的抗體。與同抗DSG3抗體所結合的表位相同的表位結合的抗體例如有上述(62)所述的抗體，但并不限于此。上述(1)(62)所述的抗體如上所述，不只是一價抗體，也包含二價以上的多價抗體。本發(fā)明的多價抗體包含具有完全相同的抗原結合部位的多價抗體、或者具有部分或者完全不同的抗原結合部位的多價抗體。具有不同的抗原結合部位的多價抗體可例舉以下抗體，但本發(fā)明的抗體并不限于這些抗體。含有選自(7)、(16)、(19)、(22)、(31)、(34)、(37)、(40)和(43)所述的H鏈和L鏈對(以下稱為HL對)的至少2個HL對的抗體。含有選自(8)、(17)、(20)、(23)、(32)、(35)、(38)、(41)和(44)所述的HL對的至少2個HL對的抗體。含有選自(9)、(18)、(21)、(24)、(33)、(36)、(39)、(42)和(45)所述的HL對的至少2個HL對的抗體。含有選自(52)~(60)所述的HL對的至少2個HL對的抗體?？贵w的修飾物可以使用與聚乙二醇(PEG)等各種分子結合的抗體?？贵w上可以結合化療藥物、毒性肽或放射性化學物質等。上述抗得?？贵w的修飾方法在該領域中已經(jīng)確立。如后所述，可以使用基因重組技術設計為不僅識別DSG3蛋白質，也識別化療藥物、毒性肽或放射性化學物質等的雙特異性抗體等的分子型。本發(fā)明中的"抗體"也包含這些抗體。與抗DSG3抗體結合、發(fā)揮細胞毒活性功能的化療藥物(包含在生物體內酶^f足性或非酶促性地變換為該化療藥物的前藥)有阿扎立平、阿那曲哇、5-氮雜胞苦、博來霉素、硼替佐米(Bortezomib)、莒蘚抑素-1、白消安、喜樹堿、10-羥基喜樹堿、卡莫司汀、西樂葆、苯丁酸氮芥、順柏、伊立替康、卡鉑、克拉屈濱、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、達卡巴。秦、多西他賽、放線菌素D、道諾霉素葡萄糖醛酸苷、柔紅霉素、地塞米松、己烯雌酚、多柔比星、多柔比星葡萄糖醛酸苷、表柔比星、炔雌醇、雌莫司汀、依托泊苦、依托泊苷葡萄糖醛酸苷、氟尿苷、氟達拉濱、氟他胺、氟尿嘧啶、氟曱睪酮、吉西他濱、己酸羥孕酮、羥基尿、伊達比星、異環(huán)磷酰胺、亞葉酸、洛莫司汀、氮芥、醋酸曱羥孕酮、醋酸曱地孕酮、美法侖、巰噤呤、甲氨蝶呤、米托蒽醌、普卡霉素、絲裂霉素、米托坦、丁酸苯酯、潑尼松、丙卡巴肼、紫杉醇、噴司他丁、司莫司汀、鏈佐星、他莫昔芬、紫杉烷類、泰素、丙酸睪酮、沙利度胺、硫鳥。票呤、塞替派、替尼泊苷、托泊替康、烏拉莫司汀、長春堿、長春瑞濱、長春新堿等低分子的化療藥物。也優(yōu)選使用蓖麻毒蛋白、相思子毒蛋白、核糖核酸酶、豹蛙酶(Onconase)、DNaseI、葡萄球菌素腸毒素-A、美洲商陸抗病毒蛋白、gelonin、白喉毒素、假單胞菌外毒素、假單胞菌內毒素、L-天冬酰胺酶、PEGL-天冬酰胺酶等的毒性肽。在另外的方式中，可以將1或2種以上的低分子化療藥物和毒性肽分別優(yōu)選組合使用。抗DSG3抗體與上述低分子化療藥物的結合優(yōu)選選擇共價鍵或非共價鍵，結合有該化療藥物的抗體的制備方法是公知的。并且，與蛋白質性藥物或毒素的結合可以通過基因重組法，使編碼上述毒性肽的DNA與編碼抗DSG3抗體的DNA進行符合讀框的融合，插入到表達載體中，構建重組載體。將該載體導入到適當?shù)乃拗骷毎?，得到轉化細胞，培養(yǎng)所得轉化細胞。通過使整合的DNA表達，可以制備該重組蛋白質。并且，本發(fā)明中使用的抗體可以是雙特異性抗體。雙特異性抗體可以是識別DSG3分子上的不同表位的具有抗原結合部位的雙特異性抗體，其中一個抗原結合部位識別DSG3，另一抗原結合部位識別化療藥物、毒性肽或放射性化學物質等細胞毒性物質。這種情況下，可以使細胞毒性物質與表達DSG3的細胞直接作用，對腫瘤細胞產(chǎn)生特異性毒性，抑制肺瘤細胞的增殖。還可以制成另一個抗原結合部位識別以下抗原的雙特異性抗體與DSG3同樣，在作為靶的癌細胞的細胞表面特異性表達，但與DSG3不同。雙特異性抗體可以通過使兩種抗體的HL對連接來制備，也可以使產(chǎn)生不同的單克隆抗體的雜交瘤融合，制備產(chǎn)生雙特異性抗體的融合細胞。還可以通過基因工程的方法來制備雙特異性抗體。上述構建的抗體基因可通過公知的方法表達并獲得。為哺乳類細胞時，抗體基因可以是在常用的有效啟動子、要表達的抗體基因、其3'—側下游功能性結合polyA信號來表達。例如啟動子/增強子可以是人巨細胞病毒早期啟動子/增強子。除此之外，在本發(fā)明中使用的、用于抗體表達的啟動子/增強子可以是反轉錄病毒、多瘤病毒、腺病毒、猿猴病毒40(SV40)等的病毒啟動子/增強子，或者人延伸因子la(HEFla)等來自哺乳類細胞的啟動子/增強子等。使用SV40啟動子/增強子時，可根據(jù)Mulligan等人的方法(Nature(1979)277,108),以及使用HEFla啟動子/增強子時，可根據(jù)Mizushima等人的方法(NucleicAcidsRes.(199C))18,5322)，容易地進行基因表達。為大腸桿菌時，可以使常用的有效啟動子、用于抗體分泌的信號序列和要表達的抗體基因功能性連接，表達該基因。啟動子例如有l(wèi)acZ啟動子、araB啟動子。使用lacZ啟動子時，可根據(jù)Warb等人的方法(Nature(1098)341,544~546;FASEBJ.(1992)6，2422~2427)、或者使用araB啟動子時可根據(jù)Better等人的方法(Science(1988)240,1041~1043)表達該基因。用于抗體分泌的信號序列在大腸桿菌的周質中產(chǎn)生時，可以使用pelB信號序列(Lei,S.P.等人.，J.Bacterio1.(1987)169,4379)。分離在周質中產(chǎn)生的抗體后，使用尿素的胍鹽酸鹽等的蛋白質改性劑，可重折疊抗體的結構，使其具有所需結合活性。插入到表達載體中的復制起點可以使用來自SV40、多瘤病毒、腺病毒、牛乳頭瘤病毒(BPV)等的復制起點，并且，為了在宿主細胞體系中擴增基因的拷貝數(shù)，可以向表達載體中插入作為選擇標志物的氨基糖苷轉移酶(APH)基因、胸腺嘧咬核苷激酶(TK)基因、大腸桿菌黃。票呤-鳥噤呤磷酸核糖轉移酶(Ecogpt)基因、二氫葉酸還原酶(dhfr)基因等。為了制備本發(fā)明中使用的抗體，可以使用任意的表達體系，例如真核細胞或原核細胞的表達體系。真核細胞例如有建立的哺乳類細胞系、昆蟲細胞系、真絲狀菌細胞和酵母細胞等動物細胞等，原核細胞例如有大腸桿菌細胞等細菌細胞。優(yōu)選本發(fā)明中使用的抗體可使用哺乳類細胞例如CHO、COS、骨髓瘤、BHK、Vero、Hela細胞進行表達。接著，將轉化的宿主細胞在體外或體內培養(yǎng)，產(chǎn)生目標抗體。宿主細胞的培養(yǎng)可按照公知的方法進行。例如培養(yǎng)液可使用DMEM、MEM、RPMI1640、IMDM，也可以結合使用胎牛血清(FCS)等血清補液。如上所述地表達并產(chǎn)生的抗體可將常規(guī)蛋白質純化中使用的公知的方法單獨使用或適當組合來純化。例如，可通過適當選擇并組合蛋白A柱等親和柱、色譜柱、濾器、超濾、鹽析、透析等，來分離并純化抗體(AntibodiesALaboratoryManual.EdHarlow，DavidLane,ColdSpringHarborLaboratory,1988)?？贵w與抗原的結合活性(AntibodiesALaboratoryManual.EdHarlow,DavidLane,ColdSpringHarborLaboratory,1988)的測定可采用公知的方法。例如可使用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定法)、EIA(酶聯(lián)免疫測定法)、RIA(放射免疫測定法)或熒光免疫法等。本發(fā)明中使用的抗體可以是糖鏈被修飾的抗體。已知通過修飾抗體的糖鏈，可以增強抗體的細胞毒活性。已知糖鏈被修飾的抗體例如有進行糖基化修飾的抗體(W099/54342等)、附加到糖鏈上的巖藻糖缺損的抗體(W000/61739、WO02/31140等)、具有具等分GlcNAc的糖鏈的抗體(W002/79255等)等。本發(fā)明中使用的抗體優(yōu)選為具有細胞毒活性的抗體。在本發(fā)明中，細胞毒活性例如可以是抗體依賴性細胞介導的細胞毒(ADCC)活性、補體依賴性細胞毒(CDC)活性等。本發(fā)明中，CDC活性是指補體系統(tǒng)產(chǎn)生的細胞毒活性，ADCC活性是指特異性抗體附著于靶細胞的細胞表面抗原時，保有Fcy受體的細胞(免疫細胞等)經(jīng)FcY受體介導與其Fc部位結合，使耙細胞產(chǎn)生變性的活性。抗DSG3抗體是否具有ADCC活性、或者是否具有CDC活性，這可通過/^^口的方法進4亍觀寸定(例^口CurrentprotocolsinImmunologyChapter7.Immunologicstudiesinhumans,Editor,JohnE，Coligan等人.,JohnWiley&Sons,Inc.,(1993)等)。具體來說，首先是實施效應細胞、補體溶液、靶細胞的制備。(1)效應細胞的制備從CBA/N小鼠等中摘除脾臟，在RPMI1640培養(yǎng)基(Invitrogen公司制備)中分離脾細胞。用含有10。/o胎牛血清(FBS、HyClone公司制備)的相同培養(yǎng)基清洗后，將細胞濃度制備為5xl0VmL，由此可制備效應細胞。(2)補體溶液的制備將幼兔補體(BABYRABBITCOMPLEMENT)(CEDARLANE公司制備)用含有10%FBS的培養(yǎng)基(Invitrogen公司制備)稀釋10倍，可制備補體溶液。(3)靶細胞的制備將表達DSG3蛋白質的細胞(用編碼DSG3蛋白質的基因轉化的細胞、肺癌細胞、大腸癌細胞、食道癌細胞、胃癌細胞、胰腺癌細胞、皮膚癌細胞或子宮癌細胞等)與0.2mCi的51Cr-鉻酸鈉(GEHealthcareBio-Sciences公司制備)一起在含有10%FBS的DMEM培養(yǎng)基中、在37。C下培養(yǎng)1小時，由此可以放射性標記該靶細胞。放射性標記后，將細胞用含有10%FBS的RPMI1640培養(yǎng)基清洗3次，將細胞濃度制備為2xl05/mL,可制備該靶細胞。ADCC活性或CDC活性可通過以下所述方法進行測定。在測定ADCC活性時，可以在96孔U底板(BectonDickinson公司制造)中分別加入50|iL乾細胞和抗DSG3抗體，在冰上反應15分鐘。然后加入100pL效應細胞，在二氧化碳培養(yǎng)箱內培養(yǎng)4小時。使抗體的終濃度為0或10pg/mL。培養(yǎng)后回收100nL上清，用y計數(shù)儀(COBRAIIAUTO隱GAMMA，型號B5005，PackardInstrumentCompany公司制造)測定放射活性。細胞毒活性(。/。)可使用所得的值，根據(jù)(A-C)/(B-C)xl00的計算式來計算。A表示各試樣中的放射活性(cpm),B表示加入了1%NP-40(nacalaitesque公司制備)的試樣中的放射活性(cpm),C表示只含有靶細胞的試樣的放射活性(cpm)。另一方面，在測定CDC活性時，是向96孔平底板(BectonDickinson公司制造)中分別加入50|xL耙細胞和抗DSG3抗體，在水上反應15分鐘。然后加入100|iL補體溶液，在二氧化碳培養(yǎng)箱內培養(yǎng)4小時?？贵w的終濃度為0或3pg/mL。培養(yǎng)后回收100[iL上清，用y計數(shù)儀測定放射活性。細胞毒活性可與ADCC活性的測定同樣地進行計算。另一方面，測定抗體綴合而導致的細胞毒活性時，向96孔平底板(BectonDickinson公司制造)中分別加入50nL耙細胞和抗DSG3抗體綴合物，在冰上反應15分鐘。在二氧化碳培養(yǎng)箱內培養(yǎng)1~4小時。使抗體的終濃度為0或3昭/mL。培養(yǎng)后回收100上清，以y計數(shù)儀測定放射活性。細胞毒活性可與ADCC活性的測定同樣計算。本發(fā)明的具有細胞毒活性的抗體進一步優(yōu)選為不具有細胞解離活性的抗體。該抗體可以以在試管內測定抑制角質形成細胞粘附的細胞解離活性，適當選擇并獲得不具有該細胞解離活性的抗體。測定該細胞解離活性的方法例如可以按照J.Invest.Dermatol.，124,939~946,2005所述的方法在試管內進行測定。在生物體內，見察該細胞活性的方法可以是以該細胞解離活性在生物體內的表現(xiàn)型PV病變的誘發(fā)活性來評價該活性。PV病變的誘發(fā)活性可按照J.Immunology170,2170~2178,2003所述的方法評價。通過抗DSG3抗體抑制其增殖的細胞只要是可表達DSG3蛋白質的細胞即可，沒有特別限定，優(yōu)選為癌細胞，更優(yōu)選為肺癌細胞、大腸癌細胞、食道癌細胞、胃癌細胞、胰腺癌細胞、皮膚癌細胞或子宮癌細胞。進一步優(yōu)選非小細胞肺癌。因此，該DSG3抗體可以用于起因于細胞增殖的疾病例如肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌等的治療或預防。更優(yōu)選為非小細胞肺癌，進一步優(yōu)選為肺鱗狀細胞癌、腺癌、腺鱗癌、大細胞癌。本發(fā)明還提供多核苷酸，該多核苷酸是編碼本發(fā)明的抗體的多核苷酸，或與該多核普酸在嚴謹條件下雜交、且編碼與本發(fā)明的抗體具有同等活性的抗體的多核苷酸。本發(fā)明還提供含有這些多核苷酸的載體、含有該載體的轉化體(包含轉化細胞)。本發(fā)明的多核苷酸只要編碼本發(fā)明的抗體即可，沒有特別限定，可以是含有多個脫氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)等的堿基或石威基對的聚合物。也可以含有天然以外的堿基。本發(fā)明的多核苷酸可以在用基因工程方法表達抗體時使用。在篩選與本發(fā)明的抗體具有同等功能的抗體時可用作探針。即，使用編碼本發(fā)明的抗體的多核苷酸或其一部分作為探針，通過雜交、基因擴增技術(例如PCR)等技術，可獲得可與該多核苷酸在嚴謹條件下雜交、且編碼與本發(fā)明的抗體具有同等活性的抗體的DNA。上述DNA也包含在本發(fā)明的多核苷酸中。雜交技術(Sambrook，J等人.,MolecularCloning2nded.,9.47~9.58,ColdSpringHarborLab.Press,1989)是本領域技術人員周知的技術。雜交的條件例如有低嚴謹條件。低嚴謹條件是在雜交后的清洗中，例如為42°C、O.lxSSC、0.1%SDS的條件，優(yōu)選5(TC、O.lxSSC、0.1。/。SDS的條件。更優(yōu)選的雜交條件例如有高嚴謹條件。高嚴謹條件例如為65°C、5xSSC和0.1。/。SDS的條件。在這些條件中，如同在較高溫度下一樣，可有效地獲得具有高同源性的多核苷酸。對雜交的嚴謹度有影響的因素是溫度或鹽濃度等嚴謹度。通過這些雜交技術或基因擴增技術而得到的多核苷酸所編碼的與本發(fā)明的抗體功能同等的抗體通常在這些抗體和氨基酸序列中具有高的同源性。本發(fā)明的抗體也包含與本發(fā)明的抗體功能相同、且與該抗體的氨基S吏序列具有高同源性的抗體。高同源性是指在氨基酸水平通常至少具有50%以上的同一性、優(yōu)選75%以上的同一性、進一步優(yōu)選85%以上的同一性、更進一步優(yōu)選95%以上的同一性。確定多肽的同源性時可4姿照文獻(Wilbur，W丄和Lipman,D丄Proc.Natl.Sci.USA(1983)80,726~730)所述的算法進行。藥物組合物在另一個方面，本發(fā)明的特征在于含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分的藥物組合物。此外，本發(fā)明的特征在于含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分的細胞增殖抑制劑，特別是抗癌藥。優(yōu)選本發(fā)明的細胞增殖抑制劑和抗癌藥給予罹患或可能罹患癌癥的受治對象。本發(fā)明的受治對象是遺傳性具有DSG3蛋白質的動物種，只要是雍患癌癥的動物種、或者具有,限患可能性的動物種即可，例如有人、猴、牛、綿羊、小鼠、狗、貓、倉鼠等哺乳類，但并不限于此。本發(fā)明中，含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分的細胞增殖抑制劑可描述為抑制細胞增殖的方法，該方法包含將與DSG3蛋白質結合的抗體給予受治對象的步驟；或者與DSG3蛋白質結合的抗體在制備細胞增殖抑制劑中的應用。本發(fā)明中，含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分的抗癌藥可描述為癌癥的預防或治療方法，該方法包含將與DSG3蛋白質結合的抗體給予受治對象的步驟；或者與DSG3蛋白質結合的抗體在制備抗癌藥中的應用。本發(fā)明中，"含有與DSG3結合的抗體作為有效成分"是指含有抗DSG3抗體作為主要活性成分，并不限定抗DSG3抗體的含有率。本發(fā)明的藥物組合物(例如細胞增殖抑制劑、抗癌藥。以下也相同)中含有的抗體只要可與DSG3蛋白質結合即可，沒有限定，可例舉本說明書中所述的抗體。本發(fā)明的藥物組合物的給藥方法可通過口服、胃腸外給藥的任何方法實施。特別優(yōu)選經(jīng)胃腸外給藥的給藥方法，所述給藥方法具體有注射給藥、經(jīng)鼻給藥、經(jīng)肺給藥、經(jīng)皮給藥等。注射給藥的例子例如可通過靜脈內注射、肌內注射、腹腔內注射、皮下注射等全身或局部給予本發(fā)明的藥物組合物。還可以根據(jù)患者的年齡、癥狀選擇適當?shù)慕o藥方法。給藥量例如每次給藥可以是在0.0001mg1000mg/kg體重的范圍內選擇給藥量?；蛘呃缑课换颊咴?.001mg~100000mg/個體的范圍內選擇給藥量。但是，本發(fā)明的藥物組合物并不限于這些給藥量。本發(fā)明的藥物組合物可以*換照常規(guī)方法制成制劑(例如Remington'sPharmaceuticalScience,latestedition,MarkPublishingCompany,Easton,U.S.A),可以同時含有制藥學上可接受的載體或添加物。例如有表面活性劑、賦形劑、著色劑、香料、保存劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、懸浮劑、等滲劑、粘結劑、崩解劑、潤滑劑、流動性促進劑、矯味劑等，但并不限于此，可以適當使用其它常用的載體。具體例子有輕質硅酸酐、乳糖、結晶纖維素、甘露糖醇、淀粉、羧甲纖維素鈣、羧曱纖維素鈉、羥丙基纖維素、羥丙曱基纖維素、聚乙烯基縮醛二乙基氨基乙酸酯、聚乙烯基吡咯烷酮、明膠、中鏈脂肪酸三甘油酯、聚氧乙烯氫化蓖麻油60、蔗糖、羧曱基纖維素、玉米淀4分、無機鹽類等。本發(fā)明還提供通過使DSG3表達細胞和與DSG3蛋白質結合的抗體接觸來對DSG3表達細胞引發(fā)毒性的方法，或抑制細胞增殖的方法。如上所述，與DSG3蛋白質結合的抗體是在本發(fā)明的細胞增殖抑制劑中所含的與DSG3蛋白質結合的抗體的形式?？笵SG3抗體所結合的細胞只要是表達DSG3的細胞即可，沒有特別限定，優(yōu)選為癌細胞，更優(yōu)選肺癌細胞、大腸癌細胞、食道癌細胞、胃癌細胞、胰腺癌細胞、皮膚癌細胞或子宮癌細胞，進一步優(yōu)選為非小細胞肺癌。本發(fā)明中的"接觸"例如可通過向在試管內培養(yǎng)的DSG3表達細月包的培養(yǎng)液中添加抗體來進行。這種情況下，所添加的抗體的劑型可以適當使用溶液或通過冷凍干燥等而得到的固體等劑型。以水溶液的形式添加時，可以是純粹地只含有抗體的水溶液，或者例如也可以是含有上述的表面活性劑、賦形劑、著色劑、香料、保存劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、懸浮劑、等滲劑、粘結劑、崩解劑、潤滑劑、流動性促進劑、矯味劑等的溶液。對添加濃度沒有特別限定，但培養(yǎng)液中的終濃度可66適當4吏用4尤選為1pg/mL~1g/mL、更優(yōu)選為1ng/mL~1mg/mL、進一步優(yōu)選為1pg/mL~1mg/mL的范圍。此外，在另一方式中，本發(fā)明中的"接觸"可通過對將DSG3表達細胞移植到體內的非人動物、或具有內源性表達DSG3的癌細胞的動物給予來進行。給藥方法可按照口服或胃腸外給藥的任何方式實施。特別優(yōu)選經(jīng)胃腸外給藥的給藥方法。所述給藥方法具體有注射給藥、經(jīng)鼻給藥、經(jīng)肺給藥、經(jīng)皮給藥等。注射給藥的例子例如有通過靜月永內注射、肌內注射、腹腔內注射、皮下注射等全身或局部給予本發(fā)明的藥物組合物、細胞增殖抑制劑和抗癌藥。還可根據(jù)受試動物的年齡、癥狀等選擇適當?shù)慕o藥方法。以水溶液的方式給藥時，可以是純粹地只含有抗體的水溶液，或者例如可以是含有上述的表面活性劑、賦形劑、著色劑、香料、保存劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、懸浮劑、等滲劑、粘結劑、崩解劑、潤滑劑、流動性促進劑、矯味劑等的溶液。給藥量例如每次給藥可以是在0.0001mg~1000mg/kg體重的范圍選擇給藥量?；蛘呃缑课换颊咴?.001mg~100000mg/個體的范圍內選擇給藥量。但是，本發(fā)明的給藥量并不限于這些給藥量。通過抗DSG3抗體的接觸來評價或測定在DSG3表達細胞中引發(fā)的細胞毒的方法優(yōu)選采用以下的方法。在試管內評價或測定該細胞毒活性的方法有上述抗體依賴性細胞介導的細胞毒(ADCC)活性、補體依賴性細胞毒(CDC)活性等的測定方法。抗DSG3抗體是否具有ADCC活性、或是否具有CDC活性，這可根據(jù)公知的方法進行測定(例如CurrentprotocolsinImmunologyChapter7.Immunologicstudiesinhumans,Editor,JohnE，Coligan等人.，JohnWiley&Sons,Inc.,(1993)等)。測定活性時，作為對照抗體可以與抗DSG3抗體同樣地使用與抗DSG3抗體具有相同的同工型、但不具有任何細胞毒活性的結合抗體，通過抗DSG3抗體顯示比對照抗體強的細胞毒活性來判定活性。抗體的同工型由該抗體的氨基酸序列的H鏈恒定區(qū)的序列來確定，由產(chǎn)生抗體的B細胞成熟時發(fā)生的染色體上的基因重組所產(chǎn)生的類型轉換的結果來確定。同工型的不同反應在抗體的生理、病理性功能的不同，已知例如細胞毒活性的強度與抗原的表達量一起受抗體的同工型影響。因此，測定上述的細胞毒活性時，作為對照^吏用的抗體優(yōu)選使用與被檢抗體為相同的同工型。在生物體內評價或測定細胞毒活性的方法例如可以是將表達DSG3的癌細胞移植到非人被^r動物的皮內或皮下，然后>^人當天或者第二天起每天或間隔數(shù)天靜脈或腹腔內給予被;險抗體。每天測定腫瘤的大小，由此來確定細胞毒活性。與試管內的評價同樣，給予具有相同的同工型的對照抗體，可根據(jù)抗DSG3抗體給藥組的腫瘤的大小比對照抗體給藥組的腫瘤的大小顯著小來判定細胞毒活性。使用小鼠作為非人被檢動物時，優(yōu)選使用使胸腺遺傳性缺損、使其T淋巴細胞的功能缺陷的棵小鼠(nu/nu)。通過使用該小鼠，在評價、測定給予的抗體所產(chǎn)生的細胞毒活性時，可以排除被檢動物中T淋巴細胞的參與。果的方法可優(yōu)選采用以下方法。在試管內評價或測定該細胞增殖抑制活性的方法可以采用以添加到培養(yǎng)基中的卩H]標記的胸苷向活細胞中的攝入作為DNA復制能力的指標進行測定的方法。更簡^更的方法是在顯微鏡下計測將臺盼藍等色素排出到細胞外的能力的染色排除法或MTT法。后者是利用活細胞將四唑鹽的MTT(3-(4,5-二曱基瘞口坐-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽)轉化為藍色的曱臘(Formazan)產(chǎn)物的能力。更具體地說，向被檢細胞的培養(yǎng)液中添加被檢抗體，經(jīng)過一定時間后向培養(yǎng)液中添加MTT溶液，靜置一定時間，使MTT攝入到細胞中。結果，黃色的化合物MTT通過活細胞線粒體內的琥珀酸脫氫酶變換為藍色的化合物。溶解該藍色產(chǎn)物使其顯色后，測定其吸光度，以此作為活細胞數(shù)的指標。除MTT之外，還可優(yōu)選使用市場銷售的MTS、XTT、WST-1、WST-8等試劑(nacalaitesque等)。進行活性測定時，但不具有該細胞增殖抑制活性的結合抗體作為對照抗體，通過抗DSG3抗體顯示比對照抗體強的細胞增殖抑制活性，可判定活性。在生物體內評價或測定細胞增殖抑制活性的方法可優(yōu)選采用與上述的在生物體內評價或測定細胞毒活性相同的方法。本說明書中引用的所有的先行技術文獻均作為參照援引到本說明書中。實施例以下通過實施例更詳細地說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受這些實施例的限定。[實施例1]各種癌癥中的DSG3mRNA表達分析為了進行DSG3基因表達分析，使用了基因芯片。為了探討癌細胞中表達亢進的基因，使用了通過ISOGEN(NipponGene公司制備)、按照常規(guī)方法從表1、2所示的各種RNA和各種摘除組織中制備的總RNA。更具體地說，使用各10]ig總RNA供給基因芯片U-133A(Affymetrix公司制備)，按照表達分析技術手冊(Affymetrix公司制訂)實施基因的表達分析。肺腺癌和肝細胞癌的分析中，12例肺腺癌病例和3例肝細胞癌病例的總RNA共計10(ag，實施分析(表1)。[表l]<table>tableseeoriginaldocumentpage69</column></row><table>末梢血單核細胞臨床檢樣1例睪丸Clontech64027-1前列腺Ambion7988卵巢Ambion7974皮膚Stratagene735031肺癌(腺癌)臨床檢樣12例肺癌(鱗狀細胞癌)臨床檢樣1例肺癌(鱗狀細胞癌)臨床檢樣1例肺癌(鱗狀細胞癌)臨床檢樣1例肺癌(鱗狀細胞癌)臨床檢樣1例肺癌(鱗狀細胞癌)臨床檢樣1例肝癌(中分化)臨床檢樣3例肝癌(高分化)臨床檢樣3例大腸癌臨床檢樣1例大腸癌臨床4企樣1例大腸癌臨床檢樣1例DSG3基因表達分析中使用的組織70<table>tableseeoriginaldocumentpage71</column></row><table>DSG3基因表達分析中使用的癌細胞抹和培養(yǎng)條件通過將全部基因的表達分值(scores)的平均值設定為100，對各基因的相對表達量進行比較，來探討在癌組織或癌細胞中表達亢進的基因。結果，DSG3mRNA(探針I(yè)D:205595—atHG-U133A)的表達在正常組織中限于皮膚，而在癌組織中、在肺癌(肺鱗狀細胞癌)或大腸癌，以及癌細胞抹中、在TE2(食道癌)、2M(胃癌)和PK-1(胰腺癌)中亢進(圖1、圖2)。以上表明，DSG3基因(探針I(yè)D:205595_atHG-U133A)在皮膚以外的正常組織中的表達非常低，而在肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌和胰腺癌的廣泛癌癥種類中表達亢進。由以上的結果顯示，通過以DSG3的表達作為指標，診斷上述癌癥發(fā)生的可能性高。[實施例2]肺鱗狀細胞癌中的DSG3的免疫組織染色DSG3基因的轉錄在癌細胞、特別是肺鱗狀細胞癌細胞中亢進，由此，為了確認DSG3蛋白質的表達，實施免疫組織染色分析。各檢樣制備成固定的石蠟包埋標本，切成4iim薄切片，該切片粘在載玻片上，然后在37卩下靜置16小時左右，z使其充分干燥。該切片在100%二甲苯中浸泡5分鐘，重復3次進行脫石蠟，在100%乙醇中浸泡5分鐘，重復3次，進一步在70。/。乙醇中浸泡5分鐘，由此實施親水處理。然后使用50mMTBS緩沖液清洗5分鐘，重復3次，然后將該切片在檸檬酸緩沖液(10mM,pH7.0)中、在120。C下處理10分鐘，激活切片中的抗原?？乖患せ钐幚砗蟮脑撉衅ㄟ^TBS緩沖液清洗5分鐘，實施3次，然后在含有被稀釋為終濃度為50pg/mL的抗DSG3抗體(5Gll)(Zymed公司)的TBS緩沖液中、在室溫下處理1小時。為了使內源性的過氧化物酶失活，將結合了抗DSG3抗體的切片用0.3%過氧化氫、在室溫下處理15分鐘。進一步用TBS緩沖液清洗3次，然后上述切片用作為二次抗體的ENVISON+試劑盒/HRP(DAKO公司)在室溫下處理1小時。用TBS緩沖液清洗5分鐘，實施3次，然后加入DAB(3，3'-二氨基苯甲酰胺四鹽酸鹽)作為顯色底物，使切片染色。另外，在核的對比染色中使用蘇木精作為染色劑。結果，5例來自罹患肺鱗狀細胞癌的癌癥患者的組織切片中，均顯示了被抗DSG3抗體(5G11)染色的陽性反應(圖3)。通過獲得肺癌特異性的染色圖像，表明DSG3在肺癌中、在蛋白質水平也表達亢進。顯示通過使用抗DSG3抗體可以檢測肺癌的發(fā)生?？笵SG3抗體的制備3-1)克隆編碼人DSG3的全長cDNA編碼人DSG3的全長cDNA可通過以HumanSmallIntestineMarathon-ReadycDNA(CLONTECH公司)作為模板的PCR擴增而獲得。即，將50|iL含有2cDNA、1有義引物(SEQIDN0.37)、1|iL反義引物(SEQIDN0.38)、5jiLlOxKOD-Plus援沖液、52mMdNTPs、225mMMgS04、1|止KOD-Plus的反應液，實施下述條件下連續(xù)進行的PCR反應將由94。C15秒、70°C2分鐘的反應構成的反應循環(huán)進行5次，將由94"C15秒、68'C2分鐘的反應構成的反應循環(huán)進行5次，將由94。C15秒、66。C2分鐘的反應構成的反應循環(huán)進行28次。通過上述PCR反應而得到的擴增產(chǎn)物使用pGEM-Teasy載體系統(tǒng)I(Promega公司)插入到pGEM-Teasy中。通過使用ABI3730DNA測序儀進行的測序，確認編碼人DSG3的cDNA序列的成功克IDNO.40所示的序列表示人DSG3蛋白質的氨基酸序列。3-2)恒定表達全長人DSG3的細胞的建立將全長人DSG3cDNA克隆到哺乳細胞表達用載體(pMCN)中(pMCN/hDSG3)。pMCN可在小鼠CMV啟動子(ACCESSIONNo.U68299)的控制下誘導表達，是整合了新霉素抗性基因的載體。通過電穿孔法將pMCN/hDSG3導入CHO細胞DG44林(Invitrogen公司)中，用500pg/mL遺傳霉素(Geneticin)篩選，建立恒定表達全長人DSG3的CHO細胞抹。同樣，將pMCN/hDSG3導入到不表達DSG3的人肺鱗狀細胞癌細胞抹A549細胞中，用1000pg/mL遺傳霉素篩選，建立恒定表達全長人DSG3的A549細胞株。3-3〗可溶型人DSG3/小鼠IgG2aFc融合蛋白質的制備制備可溶型人DSG3/小鼠IgG2aFc融合蛋白質(以下稱為shDSG3—mlgG2aFc)作為用于制備抗DSG3抗體的免疫抗原。將通過絞鏈部位的Cpol識別序列連接人DSG3胞外區(qū)(Metl-Leu616)和小鼠IgG2a恒定區(qū)而得到的shDSG3—mlgG2aFc,克隆到pMCDN載體中(pMCDN/shDSG3—mlgG2aFc)，所述pMCDN載體是將DHFR基因整合到表達載體pMCN中而得到的。SEQIDN0.41所示的序列表示shDSG3—mlgG2aFc基因的核苷酸序列，SEQIDN0.42所示的序列表示shDSG3—mlgG2aFc的氨基商^f列。將pMCDN/shDSG3—mlgG2aFc通過電穿孔法導入到DG44細胞中，用500ng/mL遺傳霉素篩選，建立恒定表達shDSG3—mlgG2aFc的CHO細胞林。接著，由建立的該表達shDSG3—mlgG2aFc的CHO細胞株的培養(yǎng)上清實施shDSG3—mlgG2aFc的純化。培養(yǎng)上清添加到HiTrapProteinGHP(GEHealthcareBio-Sciences公司)柱中，用結合緩沖液(20mM磷酸鈉(pH7.0))清洗后，用洗脫緩沖液(O.lM甘氨酸-HCl(pH2.7))洗脫。洗脫液洗脫到加入了中和緩沖液(lMTris-HCl(pH9.0))的管中，立即中和。將該洗脫液供給利用Superdex200HR10/30(GEHealthcareBio-Sciences公司)的凝膠過濾，使含有所需抗體的溶液的溶劑被置換為PBS緩沖液。純化蛋白質是使用DC蛋白測定試劑盒(BIO-RAD公司)，換算成以該試劑盒所附的牛IgG作為標準試樣的濃度，進行定量。3-4)抗DSG3抗體的制備使用Balb/c小鼠或MRL/MpJUmmCij-lpr/lpr小鼠(以下稱為MRL/lpr小鼠，購自日本CharlesRiver)作為免疫動物。從7周齡或8周齡開始免疫，初次免疫時，將用PBS緩沖液按照每只含100jugshDSG3—mlgG2aFc進行制備、用弗氏完全佐劑(BecktonDickinson公司)制成乳液的抗原給予皮下。2周后用PBS緩沖液制備成每只含有50嗎、用弗氏不完全佐劑(BecktonDickinson公司)將其制成乳液的抗原給予皮下。以后以1周的間隔共追加免疫2-4次，最終免疫是用PBS稀釋成每只含有50昭，然后經(jīng)尾靜脈進行給藥。最終免疫4天后，摘除脾細胞，與小鼠骨髓瘤P3-X63Ag8Ul(P3U1，購自ATCC)按照2:1混合，緩慢加入PEG1500(RocheDiagnostics公司)，實施細胞融合。接著慎重地加入RPMI1640培養(yǎng)基(Invitrogen公司)，稀釋PEG1500，然后通過離心除去上清，由此除去PEG1500。用含有10%FBS的RPMI1640懸浮得到融合細胞群，使融合細胞群按100pL/孔接種于96孔培養(yǎng)板中。第二天，按100(iL/孔添加含有10%FBS、lxHAT培養(yǎng)基添加劑(SIGMA公司)、0.5xBM-CondimedHl雜交瘤克隆添加劑(RocheDiagnostics公司)的RPMI1640(以下稱為HAT培養(yǎng)基)。2、3天后培養(yǎng)基的一半置換為HAT培養(yǎng)基，使用7天后的培養(yǎng)上清，以與DSG3分子的結合活性為指標實施篩選。該篩選是通過可;險測與恒定表達全長DSG3的CHO細胞的結合的流式細胞術分析來實施。由該分析得到的陽性克隆通過極限稀釋法制成單克隆。即，建立了DF120、DF122、DF148、DF151、DF153、DF168、DF331、DF364、DF366作為與DSG3特異性結合的抗體。用使用FBS(超低IgG)(Invitrogen公司)作為血清的HAT培養(yǎng)基培養(yǎng)雜交瘤，使用HiTrap蛋白GHP柱，從該雜交瘤的培養(yǎng)上清中與shDSG3—mlgG2aFc同樣地實施該單克隆抗體的純化。洗脫組分是^f吏用PD-10柱(GEHealthcareBio-Sciences公司)，將該溶液的溶劑置換為PBS后在4。C下保管。純化抗體是使用DC蛋白測定試劑盒(BIO-RAD公司)，換算為以該試劑盒所附的牛IgG為標準試樣的濃度來定量。3-5)通過流式細胞術進行結合活性的評價使用獲得的抗體，通過流式細胞術評價與恒定表達全長人DSG3的CHO細胞的結合。將細胞懸浮于FACS緩沖液(1。/。FBS/PBS)中，使?jié)舛葹?x105個細胞/mL，并分注到Multiscreen-HV濾板(Millipore公司)上，通過離心，從分注到Multiscreen-HV濾板上的細胞懸浮液中除去上清。向除去了上清的細胞中添加用FACS緩沖液稀釋為適當濃度(3嗎/mL)的、含有抗DSG3單克隆抗體的FACS緩沖液，然后在冰上75靜置30分鐘，使該細胞與該單克隆抗體反應。通過離心，從該反應液中除去上清，然后細胞用FACS緩沖液清洗1次。接著，用含有作為二次抗體的、FITC標記抗小鼠IgG抗體的FACS緩沖液使細胞懸浮，使細胞與該二次抗體在冰上反應30分鐘。反應結束后通過離心除去上清，將所得細胞懸浮于100pLFACS緩沖液中，然后供給流式細胞術分析。流式細胞儀使用FACSCalibur(BectonDickinson公司)。通過前散射光和側散射光的直方圖對活細胞集團設定閥值。如圖4所示，3ng/mL的抗DSG3單克隆抗體(DF120、DF122、DF148、DF151、DF153、DF168、DF331、DF364、DF366)與表達DSG3的CHO細胞強烈結合，但不與作為母林的CHO細胞結合，由此表明該抗DSG3單克隆抗體與呈遞于細胞膜上的DSG3特異性結合?？笵SG3抗體所具有的細胞毒活性的測定4-1〗抗DSG3抗體的補體依賴性細胞毒活性(CDC)活性的測定使用恒定表達全長人DSG3的CHO(DSG3-CHO，記載在實施例3-2中)細胞抹作為耙細胞。DSG3-CHO細胞抹的培養(yǎng)是使用含有500fig/mL遺傳霉素(Invitrogen公司)、HT添加劑(Invitrogen公司)、青霉素/鏈霉素(Invitrogen公司)的CHO-S-SFMII培養(yǎng)基(Invitrogen公司)(以下稱為"培養(yǎng)基")。將5xl()S個細胞的DSG3-CHO細胞林在4。C下離心5分鐘(IOOOrpm),并將由此得到的細胞團塊懸浮于約200(iL含有3.7MBq的鉻-51(GEHealthcareBio-Sciences公司)的培養(yǎng)基中，然后在5%二氧化碳培養(yǎng)箱中、在37。C下培養(yǎng)1小時。將該細胞用培養(yǎng)基清洗3次，然后用培養(yǎng)基制備成細胞密度為lxl()S個細胞/niL,然后分別以100pL分注到96孔平底板中。接著，向各孔中分別添加50用培養(yǎng)基稀釋的抗DSG3抗體和對照小鼠IgG2a抗體(BDBiosciencesPharmingen公司)。將抗體制備成終濃度為10pg/mL。接著，向各孔中分別添加50^L用培養(yǎng)基稀釋5倍的幼兔補體(Cederlane公司)，然后板在5%二氧化碳培養(yǎng)箱中、在37°。下靜置1.5小時。靜置后在4°C下離心5分鐘(1000rpm)，由板的各孔中分別回收100pL的上清，用y計數(shù)儀(1480WIZARD3",Wallac公司)測定放射活性。基于下式確定特異性鉻游離率。特異性鉻游離率(％)=(A-C)xlOO/(B—C)A表示各孔中的放射活性(cpm)，B表示添加100細胞和100(iL2%NonidetP-40溶液(NacalaiTesque公司)的孔中的放射活性(cpm)的平均值，C表示添加100細胞和100^L培養(yǎng)基的孔中的放射活性(cpm)的平均值。測定通過雙份實驗進行，計算特異性鉻游離率的平均值和標準偏差。確認實驗中使用的全部的抗DSG3抗體均具有CDC活性(圖5)。而對照小鼠IgG2a抗體在相同濃度下不顯示CDC活性。接著，使用人皮膚鱗狀細胞癌細胞抹A431(購自ATCC)、人肺鱗狀細胞癌細胞林A549(購自ATCC)、以及恒定表達全長人DSG3的A549細胞抹(DSG3-A549，記載在實施例3-2中)作為靶細胞，研究該抗體是否有CDC活性。A431和DSG3-A549在細胞膜上表達DSG3。A431、A549的培養(yǎng)使用含有10。/。胎牛血清(Invitrogen公司)、青霉素/鏈霉素的Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基(Invitrogen公司)(以下稱為DMEM培養(yǎng)基)。DSG3-A549細胞林的培養(yǎng)是使用含有1mg/mL遺傳霉素的DMEM培養(yǎng)基。A431、A549、DSG3-A549細胞是向96孔平底板的各孔中分別添加2xl()3個細胞(A549、DSG3-A549)或4><103個細胞(A431)，在5%二氧化碳培養(yǎng)箱中、在37。C下培養(yǎng)3天。培養(yǎng)后以終濃度1.85MBq/mL添加鉻-51,進一步持續(xù)培養(yǎng)1小時。各孔用300的DMEM培養(yǎng)基洗滌，然后添加100的DMEM培養(yǎng)基。接著，抗DSG3抗體和幼兔補體按照與在使用DSG3-CHO細胞株的實驗中所采用的條件同樣地進行添加，由此確定特異性鉻游離率?？笵SG3抗體DF151對表達DSG3的A431和DSG3-A549細胞林濃度依賴性地誘導CDC，但對不表達DSG3的A549細胞林則不顯示CDC活性(圖6)。由以上結果顯示，抗DSG3抗體發(fā)揮抗原特異性77CDC活性。4-2)抗DSG3抗體的抗體依賴性細胞介導的細胞毒(ADCC)活性的測ADCC活性的測定使用DSG3-A549細胞林和A431細胞林。與CDC活性測定同樣，用96孔平底板培養(yǎng)上述細胞，與4各-51反應。然后各孔用含有10%胎牛血清、青霉素/鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)基(Invitrogen公司)(以下稱為RPMI培養(yǎng)基)清洗，然后添加100的RPMI培養(yǎng)基。接著，向各孔中分別添加50pL用RPMI培養(yǎng)基稀釋的抗DSG3抗體和對照小鼠IgG2a抗體。將抗體制備成終濃度為10pg/mL(來自骨髓的效應細胞)或1嗎/mL(來自脾臟的效應細胞)。接著，向各孔中分別添加50pL后述的效應細胞溶液(lxl(^個細胞/mL)、然后將板放入5%二氧化碳培養(yǎng)箱中、在37。C下靜置4小時，之后測定該板中各孔的放射活性，由此放射活性確定特異性鉻游離率。效應細胞使用將Balb/c小鼠(日本CharlesRiver公司)的脾細胞用含有50ng/mL重組人白細胞介素-2(Peprotech公司)的RPMI培養(yǎng)基培養(yǎng)5天所得的細胞，或者將相同的小鼠骨髓細胞用含有50ng/mL重組人白細胞介素-2和10ng/mL重組小鼠GM-CHF(Peprotech公司)的RPMI培養(yǎng)基培養(yǎng)6天所得的細胞?？笵SG3抗體DF151、DF364和DF366對DSG3-A549細胞林和A431細胞林誘導ADCC(圖7)。以上結果顯示，抗DSG3抗體通過ADCC活性對表達DSG3蛋白質的細胞發(fā)揮細胞毒作用?？笵SG3抗體可變區(qū)基因序列的確定對于DSG3表達細胞，從產(chǎn)生顯示ADCC活性、CDC活性的單克隆抗體DF151、DF364和DF366的雜交瘤中克隆抗體可變區(qū)基因，確定其序列。使用由產(chǎn)生抗DSG3抗體的雜交瘤提取的總RNA，通過RT-PCR法擴增編碼單克隆抗體DF151、DF364和DF366的抗體基因。總RNA使用RneasyPlantMini試劑盒(QIAGEN公司)，由1x107個細胞的雜交瘤提取。用1嗎總RNA，使用SMARTRACEcDNA擴增試劑盒(CLONTECH公司)、與小鼠IgG2b恒定區(qū)序列互補的合成寡核苷酸MHC-IgG2b(SEQIDN0.43)、與小鼠IgGl恒定區(qū)序列互補的合成寡核苷酸MHC-IgGl(SEQIDNO.100)或者與小鼠k鏈恒定區(qū)核苦酸序列互補的合成寡核苷酸k(SEQIDN0.44),擴增5'末端一側基因片段。反轉錄反應是在42。C下進行1小時30分鐘。在50|iL含有51OxAdvantage2PCR緩沖液、5fiLlOxUniversalPrimerAMix、0.2mMdNTPs(dNTP、dGTP、dCTP、dTTP)、1Advantage2聚合酶Mix(以上為CLONTECH公司制備)、2.5pL反轉錄反應產(chǎn)物、lOpmol合成寡核普酸MHC-IgG2b、MHC-IgGl或k的PCR反應液中實施PCR反應。反應條件是在94。C的初始溫度下反應30秒；然后將由94°C5秒、72。C3分鐘的反應構成的反應循環(huán)重復5次，將由94°C5秒、7(TC10秒、72°C3分鐘的反應構成的反應循環(huán)重復5次，再將由94°C5秒、68。C10秒、72°C3分鐘的反應構成的反應循環(huán)重復25次，實施PCR反應；最后，反應產(chǎn)物在72°C下加熱7分鐘。各PCR產(chǎn)物使用QIAquickGel純化試劑盒(QIAGEN公司制備)，由瓊脂糖凝膠進行純化，然后克隆到pGEM-TEasy載體(Promega公司制備)中，確定該克隆的核苷酸序列。DF151的H鏈的CDR1的核苷酸序列表示為SEQIDNO.l、氨基酸序列表示為SEQIDN0.2、CDR2的核苷酸序列表示為SEQIDN0.3、氨基酸序列表示為SEQIDN0.4、CDR3的核苷酸序列表示為SEQIDN0.5、氨基酸序列表示為SEQIDN0.6。另外，DF151的L鏈的CDR1的核苷酸序列表示為SEQIDNO.ll、氨基酸序列表示為SEQIDN0.12、CDR2的核香酸序列表示為SEQIDN0.13、氨基酸序列表示為SEQIDN0.14、CDR3的核苷酸序列表示為SEQIDN0.15、氨基酸序列表示為SEQIDN0.16。DF364的H鏈的CDR1的核苷酸序列表示為SEQIDN0.21、氨基酸序列表示為SEQIDN0.22、CDR2的核普酸序列表示為SEQIDN0.23、氨基酸序列表示為SEQIDN0.24、CDR3的核苷酸序列表示為SEQIDN0.25、氨基酸序列表示為SEQIDN0.26。另外，DF364的L鏈的CDR1的核苷酸序列表示為SEQIDN0.29、氨基酸序列表示為SEQIDNO.30、CDR2的核苷酸序列表示為SEQIDN0.31、氨基酸序列表示為SEQIDN0.32、CDR3的核苷酸序列表示為SEQIDN0.33、氨基酸序列表示為SEQIDN0.34。DF366的H鏈的CDR1的核苷酸序列表示為SEQIDNO.80、氨基酸序列表示為SEQIDNO.Sl、CDR2的核苷酸序列表示為SEQIDN0.82、氨基酸序列表示為SEQIDN0.83、CDR3的核苦酸序列表示為SEQIDN0.84、氨基酸序列表示為SEQIDN0.85。另外，DF366的L鏈的CDR1的核普酸序列表示為SEQIDN0.86、氨基酸序列表示為SEQIDN0.87、CDR2的核苦S臾序列表示為SEQIDN0.88、氨基酸序列表示為SEQIDN0.89、CDR3的核苷酸序列表示為SEQIDNO.90、氨基酸序列表示為SEQIDN0.91。DF151的H鏈可變區(qū)的核苷酸序列表示為SEQIDN0.45、氨基酸序列表示為SEQIDN0.46、L鏈可變區(qū)的核苷酸序列表示為SEQIDN0.47、氨基酸序列表示為SEQIDN0.48。DF364的H鏈可變區(qū)的核苷酸序列表示為SEQIDN0.49、氨基酸序列表示為SEQIDN0.50、L鏈可變區(qū)的核普酸序列表示為SEQIDN0.51、氨基酸序列表示為SEQIDN0.52。DF366的H鏈可變區(qū)的核苷酸序列表示為SEQIDN0.92、氨基S吏序列表示為SEQIDN0.93、L鏈可變區(qū)的核苷酸序列表示為SEQIDN0.94、氨基酸序列表示為SEQIDN0.95?？笵SG3抗體全長基因序列的確定在確定DF151、DF364和DF366的可變區(qū)基因序列時，與可變區(qū)相鄰的恒定區(qū)的基因序列也得到確定。用國家生物技術信息中心(http:www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)的基本局部比對搜索工具(BLAST)檢80索與該序列具有相同序列的基因，可獲得恒定區(qū)整個區(qū)域的核苷酸序列。通過將可變區(qū)核苷酸序列與所得恒定區(qū)的核苷酸序列結合，可以確定全長核苷酸序列。這樣，從DF151的H鏈恒定區(qū)的核苷酸序列(SEQIDN0.53)、DF151、DF364和DF366的L鏈恒定區(qū)的核苷酸序列(SEQIDN0.54)、DF364和DF366的H鏈恒定區(qū)的核苷酸序列(SEQIDN0.55)可分別獲得小鼠IgG2b核苷酸序列(DDBJAccession#:BC025447)、小鼠k輕鏈核香酸序列(DDBJAccession^AY704179)、小鼠IgGl核香酸序列(DDBJAccessionsBC057688)。DF151(小鼠IgG2bK)、DF364(小鼠IgGlK)和DF366(小鼠IgGlK)的同工型使用IsoStrip小鼠單克隆抗體同工型分型試劑盒(ROCHE公司)預先確定。預想的DF151的H鏈全長核苷酸序列表示為SEQIDN0.56、氨基酸序列表示為SEQIDN0.57、L鏈全長核苷酸序列表示為SEQIDN0.58、氨基酸序列表示為SEQIDN0.59。另外，預想的DF364的H鏈全長核苦酸序列表示為SEQIDNO.60、氨基酸序列表示為SEQIDN0.61、L鏈全長核普酸序列表示為SEQIDN0.62、氨基酸序列表示為SEQIDN0.63。另外，預想的DF366的H鏈全長核苷酸序列表示為SEQIDNO.lOl、氨基S吏序列表示為SEQIDN0.102、L鏈全長核苷S交序列表示為SEQIDN0.103、氨基酸序列表示為SEQIDNO.104。此外，DF151的H鏈恒定區(qū)的核苷酸序列表示為SEQIDNO,7、氨基酸序列表示為SEQIDN0.8、L鏈恒定區(qū)的核苷酸序列表示為SEQIDN0.17、氨基酸序列表示為SEQIDN0.18。DF364和DF366的H鏈恒定區(qū)的堿基區(qū)的核普酸序列表示為SEQIDNO,27、氨基酸序列表示為SEQIDN0.28、L鏈恒定區(qū)的核苷酸序列表示為SEQIDN0.35、氨基酸序列表示為SEQIDN0.36、抗DSG3小鼠-人嵌合抗體的制備進行符合讀框的連接。使用在編碼H鏈可變區(qū)的核苷酸序列的5'末端具有Kozak序列的互補序列和EcoRI位點的合成寡核苷酸，以及與3末端核芬酸序列互補、在其序列中插入Nhel位點所得的合成寡核苷酸實施PCR。使用在編碼L鏈可變區(qū)的核苷酸序列的5'末端具有Kozak序列的互補序列和BamHI位點的合成寡核苷酸，以及與3，末端一側核苷酸序列互補、在其序列中具有BsiWI位點的合成寡核苷酸實施PCR。所得PCR產(chǎn)物被克隆到抗體表達質粒pMCDN—Glk中。pMCDN-Glk具有將人IgGl恒定區(qū)(核香酸序列表示為SEQIDN0.9,氨基酸序列表示為SEQIDNO.10)克隆到pMCDN載體中、且具有通過NheI位點連接小鼠H鏈可變區(qū)和人H鏈(yl鏈)恒定區(qū)的結構。還具有另外一個含有小鼠CMV啟動子的表達單元、以及插入有人k恒定區(qū)(核苷酸序列表示為SEQIDNO.19，氨基酸序列表示為SEQIDNO.20)、且具有通過BsiWI位點連接小鼠L鏈可變區(qū)和人L鏈(k鏈)恒定區(qū)的結構。該質粒在動物細胞內表達新霉素抗性基因、DHFR基因、抗DSG3小鼠-人嵌合抗體基因。上述制備的pMCDN—Glk—DF151、pMCDN—Glk—DF364和pMCDN—Glk—DF366通過電穿孔法導入到DG44細胞中。用500嗎/mL遺傳霉素進行篩選，建立恒定表達DF151小鼠-人嵌合抗體(以下稱為DF151c)、DF364小鼠-人嵌合抗體(以下稱為DF364c)和DF366小鼠-人嵌合抗體(以下稱為DF366c)的CHO細胞。接著，使用HiTr叩r蛋白A柱(GEHealthcareBio-Sciences公司)，從該CHO細胞的培養(yǎng)上清中純化抗DSG3小鼠-人嵌合抗體。純化抗體是用PD-10柱(GEHealthcareBio-Sciences公司)進行緩沖液更換，更換為PBS緩沖液，通過DC蛋白測定進行定量，然后在4'C下保存。純化的抗DSG3小鼠-人嵌合抗體通過流式細胞術分析確認與小鼠抗體同樣，與DSG3特異性結合。另外，DF151c的H鏈全長的核苷酸序列表示為SEQIDN0.64、氨基酸序列表示為SEQIDN0.65、L鏈全長的核苷酸序列表示為SEQIDN0.66、氨基酸序列表示為SEQIDN0.67。DF364c的H鏈全長的核芬酸序列表示為SEQIDN0.68、氨基酸序列表示為SEQIDN0.69、L鏈全長的核芬酸序列表示為SEQIDN0.70、氨基酸序列表示為SEQIDN0.71。DF366c的H鏈全長的核苷S吏序列表示為SEQIDN0.96、氨基酸序列表示為SEQIDN0.97、L鏈全長的核苷酸序列表示為SEQIDN0.98、氨基酸序列表示為SEQIDN0.99。低巖藻糖型抗DSG3小鼠-人嵌合抗體的制備作為增強抗體的ADCC活性的方法，已知有將抗體的糖鏈進行修飾的方法。例如W099/54342中記載通過抗體的葡糖基化修飾，可以改良ADCC活性。WO00/61739中記載根據(jù)抗體糖^隨中巖藻糖的存在與否，可調節(jié)ADCC活性。WO02/31140號中記載，通過在YB2/0細胞林中產(chǎn)生抗體，可以制備具有不含a-l,6核芯巖藻糖的糖鏈的抗體。探討了抗DSG3抗體通過上述例舉的ADCC改良技術是否可增強其活性。首先，作為宿主細胞，YB2/0細胞4朱(購自ATCC)在含有10%FBS的RPMI1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)。實施例7中制備的抗DSG3小鼠-人嵌合抗體表達載體通過電穿孔法、在1.4kV、25laF的條件下導入到YB2/0細胞抹中。用500嗎/mL遺傳霉素進行篩選，由此建立了恒定表達低巖藻糖型DF151小鼠-人嵌合抗體(以下稱為YB-DF151c)、低巖藻糖型DF364小鼠-人嵌合抗體(以下稱為YB-DF364c)和低巖藻糖型DF366小鼠-人嵌合抗體(以下稱為YB-DF366c)的YB2/0細胞林。接著，使用HiTrapr蛋白A柱，從培養(yǎng)上清中純化低巖藻糖型抗DSG3小鼠-人嵌合抗體。純化抗體是通過PD-10柱進行緩沖液更換，更換為PBS緩沖液，通過DC蛋白測定進行定量，然后在4。C下保存。純化的低巖藻糖型抗DSG3小鼠-人嵌合抗體通過流式細胞術分析確認與抗DSG3小鼠-人嵌合抗體同樣，與DSG3特異性結合?？笵SG3小鼠-人嵌合抗體和低巖藻糖型抗DSG3小鼠-人嵌合抗體的CDC活性和ADCC活性的測定9-1)恒定表達全長人DSG3的細胞株的建立83全長人DSG3的cDNA克隆到哺乳細胞表達用載體(pMCDN)中(pMCDN/hDSG3)。pMCDN可在小鼠CMV啟動子(ACCESSIONNo.U68299)下誘導表達，是整合有新霉素抗性基因、DHFR基因的載體。pMCDN/hDSG3通過電穿孔法導入到Ba/F3細胞(購自理化學研究所BioResourceCenter)中，用500|ag/mL遺傳霉素(Invitrogen^^司)篩選，建立恒定表達全長人DSG3的Ba/F3細胞林(DSG3-Ba/F3)。該DSG3-Ba/F3細胞的培養(yǎng)是使用含有500嗎/mL遺傳霉素、青霉素/鏈霉素(Invitrogen公司)、重組小鼠白細胞介素-3(R&D系統(tǒng)公司)、10%胎牛血清(Invitrogen公司)的RPMI1640培養(yǎng)基(Invitrogen公司)。9-2)全長人CD16恒定表達細胞的建立全長人CD16(RefSeqlD，NM—000569)克隆到pMCDN中，然后通過電穿孔法導入到NK-92細胞(購自ATCC)中，用500嗎/mL遺傳霉素進行篩選，建立恒定表達全長人CD16的NK-92細月包才朱(CD16-NK92)。CD16-NK92細胞林的培養(yǎng)是使用含有500ng/mL遺傳霉素、青霉素/鏈霉素、0.2mM肌醇(Sigma公司)、0.1mM2-巰基乙醇(Invitrogen公司)、0.02mM葉酸(Sigma公司)、100U/mL重組人白細胞介素-2(Peprotech公司)、12.5。/o馬血清(Invitrogen公司)、12.5%胎牛血清的不含核糖核苷和脫氧核糖核苷、含L-谷氨酰胺的a極限必需培養(yǎng)基(Invitrogen公司)。9-3〗抗DSG3小鼠-人嵌合抗體的CDC活性的測定對5><105個細胞的DSG3-Ba/F3細胞懸浮液進行離心(IOOOrpm，5分鐘，4°C)，細胞團塊懸浮于約200pL含有10%胎牛血清、青霉素/鏈霉素和3.7MBq的鉻-51(GEHealthcareBio-Sciences公司)的RPMI1640培養(yǎng)基(以下稱為培養(yǎng)基)中，將其在5%二氧化碳培養(yǎng)箱中、在37。C下培養(yǎng)1小時。該細胞用培養(yǎng)基清洗3次，然后制備成2x105個細胞/mL,然后向96孔圓底板的各孔中分別添加50pL。接著，每孔分別添加50|iLDF151c、DF364c和DF366c以及對照人IgG抗體(Zymed公司)?？贵w制備成終濃度為10|ig/mL。接著，幼兔補體(Cederlane公司)是用培養(yǎng)基稀釋為5倍，然后分別添加100pL。將該板在5%二氧化碳培養(yǎng)箱中、在37。C下靜置4小時。培養(yǎng)后離心(1000rpm，5分鐘，4。C)該板，通過y計數(shù)儀(1480WIZARD3〃，Wallac公司)測定100pL上清的放射活性?；谙率酱_定特異性鉻游離率。特異性鉻游離率(％)=(A-C)xlOO/(B-C)A表示各孔的放射活性(cpm)，B表示添加50pL細胞和1502%NonidetP-40溶液(NacalaiTesque公司)的孔中的方文射活性(cpm)的平均值，C表示添加50|iL細胞和150iaL培養(yǎng)基的孔中的放射活性(cpm)的平均值。測定通過雙份實驗進行，計算特異性鉻游離率的平均值和標準偏差。顯示DF151c、DF364c和DF366c具有CDC活性(圖8)。9-4)抗DSG3小鼠-人嵌合抗體和低巖藻糖型抗DSG3小鼠-人嵌合抗體的ADCC活性的測定DSG3-Ba/F3細胞用鉻-51標記后，96孔圓底板的各孔中分別添加50jiL。接著，DF364c、DF366c、YB-DF364c、YB-DF366c和對照人IgG抗體是各孔中分別添加50pL。抗體的終濃度通過由1嗎/mL以比例10、分4個階段連續(xù)稀釋來制備。接著向各孔中分別添加100!iL2xl()S個細胞/mL的CD16-NK92細胞。該板在5%二氧化碳培養(yǎng)箱中、在37"C下靜置4小時，然后通過與8-3)同樣的方法確定特異性鉻游離率。各抗體均顯示抗體濃度依賴性的ADCC活性(圖9)。特別是低巖藻糖型抗體YB-DF364c和YB-DF366c顯示強的ADCC活性。肺癌、皮膚癌、子宮癌中的DSG3的免疫組織染色DSG3在肺鱗狀細胞癌中以蛋白質水平表達亢進(參照實施例2)。這里，對于皮膚癌、子宮癌和肺癌中罹患數(shù)較多的肺腺癌，為了確認85DSG3蛋白質的表達而重新實施免疫組織染色分析。首先，由各4企樣制備4%多聚曱醛(PFA)或過碘酸-賴氨酸-多聚曱醛(PLP)固定的AmeX包埋石蠟塊和10。/。中性緩沖甲醛(NBF)固定的石蠟包埋塊，薄切成3jim的切片。脫石蠟后對這些切片用VentanaHXDiscovery系統(tǒng)(VentanaMedicalSystems,Inc.,亞利桑那，美國)，如下所述進行免疫組織化學染色。各標本在脫石蠟后進行水洗，為了除去內源性過氧化物酶，在室溫下、在3.0。/o過氧化氫溶液(D抑制劑)下反應4分鐘。清洗后為了除去非特異性反應而加入蛋白質封閉，在室溫下反應30分鐘。接著進行清洗，加入小鼠抗人橋粒芯蛋白抗體(Clone5G11,ZYMEDLaboratoriesInc.,加利福尼亞，美國)作為一次抗體，在室溫下反應1小時。清洗后力口入二次抗體(VentanaUniversal二次抗體，VentanaMedicalSystems),在室溫下反應30分鐘。清洗后為了用BlockerD除去非特異性反應，在室溫下反應2分鐘。接著加入鏈霉親和素辣根過氧化物酶(SA-HRP,VentanaMedicalSystems),在37°C下反應16分鐘。清洗后將二氨基聯(lián)苯胺(DAB圖譜溶液，VentanaMedicalSystems)和過氧化氫溶液(DAB圖譜溶液，VentanaMedicalSystems)混合、并加入，為了使底物顯色，在37。C下反應8分鐘。接著通過硫酸銅溶液(VentanaMedicalSystems)進行顯色的增敏。清洗后用蘇木精進行核染，進行脫水、透明、密封。結果，3例肺鱗狀細胞癌中有2例、9例肺腺癌中有1例、2例皮膚鱗狀細胞癌中有2例、1例皮膚基底細胞癌中有1例、1例子宮鱗狀細胞癌中有1例確認了DSG3的表達(表3)。[表3j<table>tableseeoriginaldocumentpage87</column></row><table>縮寫B(tài)BC:基底細胞癌；M:乳腺癌；SCC:鱗狀細胞癌a)癌癥的組織部位b)組織類型c)癌癥的分級(l:分化良好；2:中度分化；3:低分化)d)病例編號e)l:微弱；2:弱；3:中度；4:強f)l:稀少(低于10%);2:偶爾(低于50%，但為10%以上)；3:頻繁(低于卯％,但為50%以上)；4:衡量(為卯％以上)抗DSG3抗體的抗腫瘤活性的評價11-1)小鼠IgG2a嵌合DF366抗體(DF366m)的制備將DF366抗體的H鏈可變區(qū)基因的核苷酸序列與小鼠IgG2a的H鏈恒定區(qū)基因的核苷酸序列進行符合讀框的連接。首先，使用具有H鏈可變區(qū)基因的5'末端核苷酸序列和Kozak序列以及限制酶EcoRI序列的引物(SEQIDNO.105),和在3'末端核普酸序列的互補序列中附加有c殘基的反義引物(SEQIDNO.106)實施PCR。將所得擴增產(chǎn)物用限制酶EcoRI處理，然后整合到小鼠IgG2a嵌合H鏈表達質粒(pMCD/G2a)的EcoRI-NruI位點中，構建小鼠IgG2a嵌合DF366抗體H鏈表達載體(pMCD/G2a-DF366)。pMCD/G2a是將小鼠IgG2a的H鏈恒定區(qū)基因(核苷酸序列SEQIDNO.107,氨基酸序列SEQIDNO.108)克隆到哺乳細胞表達用質粒pMCD中，使H鏈恒定區(qū)的限制酶Nrul序列與H鏈可變區(qū)連接。pMCD栽體是可在小鼠CMV啟動子(ACCESSIONNo.U68299)的控制下誘導表達、且整合有DHFR基因的載體。將DF366抗體的L鏈可變區(qū)基因的核苷酸序列與小鼠IgG2a的L鏈(K鏈)恒定區(qū)基因的核苷酸序列進行符合讀框的連接。首先，使用具有L鏈可變區(qū)基因的5'末端核苦酸序列和Kozak序列以及限制酶EcoRI序列的引物(SEQIDNO.109),和在3'末端核苦酸序列的互補序列中附加有gcccg殘基的反義引物(SEQIDNO.lIO)實施PCR。將所得擴增產(chǎn)物用限制酶EcoRI處理，然后整合到小鼠IgG2a嵌合L鏈(K鏈)表達質粒(pMCN/k)的EcoRI-NruI位點中，構建小鼠IgG2a嵌合DF366抗體L鏈表達載體(pMCN/K-DF366)。pMCN/k是將小鼠IgG2a的L鏈(K鏈)恒定區(qū)基因(核苷酸序列:SEQIDNO.lll，氨基酸序列SEQIDN0.112)克隆到質粒pMCN中，使L鏈(K鏈)恒定區(qū)的限制酶NruI序列與L鏈可變區(qū)連接。將質粒pMCD/G2a-DF366和質粒pMCN/k-DF366通過電穿孔法導入到DG44細胞中。用500嗎/mL遺傳霉素和不含核酸(HT添加劑)的培養(yǎng)基進行篩選，建立恒定表達小鼠IgG2a嵌合DF366抗體(DF366m)的CHO細胞(DF366m-DG44)。接著，使用HiTrap蛋白GHP柱，由該DF366m-DG44的培養(yǎng)上清中純化DF366m抗體。使用PD-10柱將溶劑置換為PBS。純化的DF366m抗體的濃度使用DC蛋白測定試劑盒進行定量。DF366m抗體通過流式細胞術分析，確認與DF366抗體(記載在實施例3-5中)同樣，與DSG3特異性結合。DF366m抗體的H鏈基因全長核苷酸序列表示為SEQIDNO.U3、氨基酸序列表示為SEQIDN0.114、L鏈基因全長核苷S吏序列表示為SEQIDNCU15、氨基酸序列表示為SEQIDN0.116。11-2)低巖藻糖小鼠IgG2a嵌合DF366抗體(低巖藻糖DF366m)的制備通過電穿孔法將質粒pMCD/G2a-DF366和質粒pMCD/k-DF366導入到敲除巖藻糖轉運蛋白的CHO細胞(FTPKO-DXB11細胞，國際公開公報WO2006/067913、國際公開公報WO2006/067847)中。用500嗎/mL遺傳霉素和不含核酸(HT添加劑)的培養(yǎng)基進行篩選，建立恒定表達低巖藻糖的小鼠IgG2a嵌合DF366抗體(低巖藻糖DF366m)的CHO細胞(DF366m-DXB11)。接著，使用HiTrap蛋白GHP柱，從該DF366m-DXB11的培養(yǎng)上清中純化低巖藻糖DF366m抗體。使用PD-10柱將溶劑置換為PBS，通過DC蛋白測定試劑盒定量抗體濃度。11-3)ADCC活性的測定實驗是使用含有青霉素/鏈霉素、10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基(Invitrogen公司)(以下稱為RPMI培養(yǎng)基)。將1乂106個DSG3-Ba/F3細胞懸浮于約200nL含有3.7MBq鉻-51(GEHealthcareBio-Sciences公司)的RPMI培養(yǎng)基中，然后在5%二氧化碳的培養(yǎng)箱中、在37。C下培養(yǎng)1小時。清洗后將細胞密度制備為為2xl()S個細胞/mL,以每孔50|iL分別分注到96孔U底板中。接著向各孔中分別添加50)aL抗體溶液。在室溫下靜置15分鐘，然后分別添加100jaL效應細胞(后述)。板在5%二氧化碳培養(yǎng)箱中、在37°。下靜置6小時。然后^Mv各孔中分別回收100iaL上清，用y計數(shù)儀(1480WIZARD3",Wallac公司)測定放射活性。基于下式計算特異性鉻游離率。特異性鉻游離率(％)=(A-C)xl00/(B-C)A表示各孔的放射活性(cpm),B表示添加50(iL細胞和150jiL2%NonidetP-40溶液(NacalaiTesque公司)的孔中的放射活性(cpm)的平均值，C表示添加50pL細胞和150jaLRPMI培養(yǎng)基的孔中的放射活性(cpm)的平均值。測定通過雙份實驗進行，計算特異性鉻游離率的平均值和標準偏差。效應細胞是向由C3H小鼠(日本CharlesRiver公司)制備的脾細胞中添加50ng/mL重組人白細胞介素-2(P印rotech公司)所得的細胞(以下稱為SPL)，或者在50ng/mL重組白細胞介素-2的存在下將脾細胞培養(yǎng)4天所得的細胞(以下稱為SPL-LAK)。每孔的效應細胞數(shù)是5xl0589個(SPL)或2xl05個(SPL-LAK)。陰性對照使用小鼠IgG2a(Cat.No.553453，BectonDickinson公司)和人IgGl(Cat.No.PHPO10,Serotec公司)。在DF366m和低巖藻糖DF366m中測定到了ADCC活性，而DF366c、YB-DF366c中均未測到ADCC活性(圖10、11)。因此可以認為，在小鼠中，DF366m、低巖藻糖DF366m比DF366c、YB-DF366c顯示強的藥效。11-4)全長人DSG3恒定表達細胞抹的建立將pMCDN/hDSG3用限制酶Pvul消化，然后通過使用FuGENE(Roche公司)而進行的轉染導入到SK-HEP-1細胞(購自ATCC)中，用1mg/mL遺傳霉素進行篩選，建立恒定表達全長人DSG3的SK-HEP-1細胞抹(以下稱為DSG3-SK)。DSG3-SK細胞的培養(yǎng)使用含有1mg/mL遺傳霉素、10%胎牛血清的D-MEM培養(yǎng)基(Sigma公司)。11-5)評價DF366m和低巖藻糖DF366m的抗腫瘤活性將DSG3-SK細胞用以1:1含有D-MEM培養(yǎng)基和MATRIGEL(Cat.No.354234，BDBioscience)的溶液制備成lxl()8個細胞/mL，將100移植到在前一天腹腔內給予100^L抗去唾液酸GM1抗體(和光純藥制備，將l個安瓿瓶用lmL的注射用蒸餾水溶解，然后添加4mL生理鹽水)的SCID小鼠(雌性，9周齡，日本CLEA)的腹部皮下。自移植后的第19天起，每周一次通過尾靜脈給予DF366m和低巖藻糖DF366m,共給藥4周?？贵w是用PBS制備成1mg/mL(10mg/kg給藥組)或0.2mg/mL(2mg/kg給藥組)，以10mL/kg進行給藥。同樣地給予PBS(溶媒)作為陰性對照。每組5只進行實驗?？鼓[瘤活性以肺瘤體積進行評價。腫瘤體積基于下式測定，計算平均值和標準偏差。肺瘤體積=長徑x短徑x短徑/2顯著性檢驗是使用非參數(shù)Dunnett型多重比較，以P值低于0.05為顯著。實驗的結果表明，對于DF366m和低巖藻糖DF366m,在10mg/kg的給藥組中相對于溶媒給藥組顯著抑制了腫瘤的增殖(圖12)。并且，雖然不顯著、但是低巖藻糖DF366m在以2mg/kg給藥時也顯示了抑制的傾向。以上確認了抗DSG3抗體顯示抗腫瘤活性。產(chǎn)業(yè)實用性使用本發(fā)明的DSG3蛋白質特異性抗體，不僅可用作肺癌、也可用作大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌的診斷試劑。并且，通過將該抗DSG3抗體用化學物質或放射性同位素等標記后使用，在生物體內可以才全測出肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌的存在。而且，本發(fā)明的具有細胞毒活性的抗DSG3抗體可用作表達DSG3蛋白質的肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌等各種癌細胞的細胞毒性劑或細胞增殖抑制劑。并且，本發(fā)明的具有細胞毒活性的抗DSG3抗體可用作肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌等各種癌癥的治療藥物。此外，使用本發(fā)明的抗DSG3抗體，不會誘發(fā)天皰瘡病態(tài)，可用作上述癌癥的治療藥物。并且，編碼本發(fā)明抗體的基因和由該基因轉化的重組細月包可應用于發(fā)揮上述效果、以及更優(yōu)選效果的重組抗體的制備。權利要求1.藥物組合物，該藥物組合物含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分。2.細胞增殖抑制劑，該細胞增殖抑制劑含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分。3.抗癌藥，該抗癌藥含有與DSG3蛋白質結合的抗體作為有效成分。4.權利要求3所述的抗癌藥，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是具有細胞毒活性的抗體。5.權利要求3或4所述的抗癌藥，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是以下(l)~(47)中任一項所述的抗體(1)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.2的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.4的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.6的氨基酸序列；(2)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.8的氨基S吏序列；(3)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列；(4)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.12的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.14的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDNO.16的氨基酸序列；(5)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.18的氨基酸序列；(6)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列；(7)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈和(4)所述的L鏈；(8)抗體，該抗體含有(2)所述的H鏈和(5)所述的L鏈；(9)抗體，該抗體含有(3)所述的H鏈和(6)所述的L鏈；(10)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.22的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.24的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.26的氨基酸序列；(11)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列；(12)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列；(13)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.30的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.32的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.34的氨基酸序列；(14)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基S吏序列；(15)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列；(16)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈和(13)所述的L鏈；(17)抗體，該抗體含有(ll)所述的H鏈和(14)所述的L鏈；(18)抗體，該抗體含有(12)所述的H鏈和(15)所述的L鏈；(19)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(13)所述的L鏈；(20)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(14)所述的L鏈；(21)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(15)所述的L鏈；(22)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(4)所述的L鏈；(23)抗體，該抗體具有(11)所述的H鏈和(5)所述的L鏈；(24)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(6)所述的L鏈；(25)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.81的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDNO.83的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.85的氨基酸序列；(26)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列；(27)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列；(28)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.87的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDNO.89的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDNO,91的氨基酸序列；(29)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基S臾序列；(30)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列；(31)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(28)所述的L鏈；(32)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(29)所述的L鏈；(33)抗體,該抗體含有(27)所述的H鏈和(30)所述的L鏈；(34)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(28)所述的L鏈；(35)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(29)所述的L鏈；(36)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(30)所述的L鏈；(37)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(28)所述的L鏈；(38)抗體，該抗體具有(ll)所述的H鏈和(29)所述的L鏈；(39)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(30)所述的L鏈；(40)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(4)所述的L鏈；(41)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(5)所述的L鏈；(42)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(6)所述的1^連；(43)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(13)所述的L鏈；(44)抗體,該抗體含有(26)所述的H鏈和(14)所述的L鏈；(45)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(15)所述的L鏈；(46)抗體，該抗體是在(l)-(45)中任一項所述的抗體中有1或多個氨基酸被置換、缺失、附加和/或插入而得到的抗體，所得抗體與(l)~(45)中任一項所述的抗體具有同等活性;(47)抗體，該抗體與表位結合，該表位與(l)-(45)中任一項所述的抗體所結合的DSG3蛋白質的表位相同。6.權利要求3~5中任一項所述的抗癌藥，其中，癌癥是肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌。7.權利要求6所述的抗癌藥，其中，肺癌是非小細胞肺癌。8.使表達DSG3蛋白質的細胞和與DSG3蛋白質結合的抗體接觸，由此對該DSG3表達細胞引發(fā)細胞毒的方法。9.使表達DSG3蛋白質的細胞和與DSG3蛋白質結合的抗體接觸，由此抑制該DSG3表達細胞的增殖的方法。10.權利要求8或9所述的方法，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是具有細胞毒活性的抗體。11.權利要求8~10中任一項所述的方法，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是以下(l)~(47)中任一項所述的抗體(1)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.2的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.4的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.6的氨基酸序列；(2)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.8的氨基酸序列；(3)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列；(4)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.12的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.14的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDNO.16的氨基酸序列；(5)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.18的氨基酸序列；(6)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列；(7)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈和(4)所述的L鏈；(8)抗體，該抗體含有(2)所述的H鏈和(5)所述的L鏈；(9)抗體，該抗體含有(3)所述的H鏈和(6)所述的L鏈；(10)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.22的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.24的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.26的氨基酸序列；(11)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列；(12)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列；(13)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.30的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.32的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.34的氨基S臾序列；(14)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列；(15)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基S吏序列；(16)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈和(13)所述的L鏈；(17)抗體，該抗體含有(ll)所述的H鏈和(14)所述的L鏈；(18)抗體，該抗體含有(12)所述的H鏈和(15)所述的L鏈；(19)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(13)所述的L鏈；(20)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(14)所述的L鏈；(21)抗體,該抗體具有(3)所述的H鏈和(15)所述的L鏈；(22)抗體,該抗體具有(10)所述的H鏈和(4)所述的L鏈；(23)抗體，該抗體具有(ll)所述的H鏈和(5)所述的L鏈；(24)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(6)所述的L鏈；(25)抗體,該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.81的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.83的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.85的氨基酸序歹'J;(26)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列；(27)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列；(28)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.87的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.89的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.91的氨基酸序列；(29)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列；(30)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列；(31)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(28)所述的L^t連；(32)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(29)所述的L鏈；(33)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(30)所述的L鏈；(34)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(28)所述的L鏈；(35)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(29)所述的L鏈；(36)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(30)所述的L鏈；(37)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(28)所述的L鏈；(38)抗體，該抗體具有(11)所述的H鏈和(29)所述的L鏈；(39)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(30)所述的L鏈；(40)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(4)所述的L鏈；(41)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(5)所述的L鏈；(42)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(6)所述的L鏈；(43)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(13)所述的L鏈；(44)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(14)所述的L鏈；(45)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(15)所述的L鏈；(46)抗體，該抗體是在(l)-(45)中任一項所述的抗體中有1或多個氨基酸被置換、缺失、附加和/或插入而得到的抗體，所得抗體與(l)~(45)中任一項所述的抗體具有同等活性；(47)抗體，該抗體與表位結合，該表位與(l)-(45)中任一項所述的抗體所結合的DSG3蛋白質的表位相同。12.權利要求8~11中任一項所述的方法，其中，表達DSG3蛋白質的細胞是癌細胞。13.與DSG3蛋白質結合且對表達DSG3蛋白質的細胞具有細胞毒活性的抗體。14.權利要求13所述的抗體，其中，細胞毒活性是ADCC活性。15.權利要求13所述的抗體，其中，細胞毒活性是CDC活性。16.權利要求13~15中任一項所述的抗體，其中該抗體是結合有低分子化療藥物或者毒性肽的抗體。17.與DSG3蛋白質結合的抗體，其中該抗體是結合有低分子化療藥物或者毒性肽的抗體。18.權利要求13~17中任一項所述的抗體，其中該抗體是以下(1)~(47)中任一項所述的抗體(1)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.2的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.4的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.6的氨基酸序列；(2)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.8的氨基酸序列；(3)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列；(4)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDRl的SEQIDNO.12的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDNO.14的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDNO.16的氨基酸序列；(5)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.18的氨基酸序列；(6)抗體，該抗體含有(4)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列；(7)抗體，該抗體含有(l)所述的H鏈和(4)所述的L鏈；(8)抗體，該抗體含有(2)所述的H鏈和(5)所述的L鏈；(9)抗體，該抗體含有(3)所述的H鏈和(6)所述的L鏈；(10)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.22的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.24的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.26的氨基酸序列；(11)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基S交序列；(12)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列；(13)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDNO.30的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.32的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.34的氨基S吏序列；(14)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列；(15)抗體，該抗體含有(13)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列；(16)抗體，該抗體含有(10)所述的H鏈和(13)所述的Lli;(17)抗體，該抗體含有(ll)所述的H鏈和(14)所述的L鏈；(18)抗體，該抗體含有(12)所述的H鏈和(15)所述的L鏈；(19)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(13)所述的L鏈；(20)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(14)所述的L鏈；(21)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(15)所述的L鏈；(22)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(4)所述的L鏈；(23)抗體，該抗體具有(11)所述的H鏈和(5)所述的L鏈；(24)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(6)所述的L鏈；(25)抗體，該抗體含有H鏈，該H鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.81的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.83的氨基酸序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.85的氨基酸序列；(26)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDN0.28的氨基酸序列；(27)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈，其中H鏈具有作為CH的SEQIDNO.10的氨基酸序列；(28)抗體，該抗體含有L鏈，該L鏈具有作為CDR1的SEQIDN0.87的氨基酸序列、作為CDR2的SEQIDN0.89的氨基S臾序列、以及作為CDR3的SEQIDN0.91的氨基酸序列；(29)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDN0.36的氨基酸序列；(30)抗體，該抗體含有(28)所述的L鏈，其中L鏈具有作為CL的SEQIDNO.20的氨基酸序列；(31)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(28)所述的L鏈；(32)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(29)所述的L鏈；(33)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(30)所述的L鏈；(34)抗體，該抗體具有(l)所述的H鏈和(28)所述的L鏈；(35)抗體，該抗體具有(2)所述的H鏈和(29)所述的L鏈；(36)抗體，該抗體具有(3)所述的H鏈和(30)所述的！^連；(37)抗體，該抗體具有(10)所述的H鏈和(28)所述的L鏈；(38)抗體，該抗體具有(ll)所述的H鏈和(29)所述的L鏈；(39)抗體，該抗體具有(12)所述的H鏈和(30)所述的L鏈；(40)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(4)所述的L鏈；(41)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(5)所述的L鏈；(42)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(6)所述的L鏈；(43)抗體，該抗體含有(25)所述的H鏈和(13)所述的L鏈；(44)抗體，該抗體含有(26)所述的H鏈和(14)所述的L鏈；(45)抗體，該抗體含有(27)所述的H鏈和(15)所述的L鏈；10(46)抗體，該抗體是在(1)(45)中任一項所述的抗體中有1或多個氨基酸被置換、缺失、附加和/或插入而得到的抗體，所得抗體與(l)~(45)中任一項所述的抗體具有同等活性；(47)抗體，該抗體與表位結合，該表位與(1)~(45)中任一項所述的抗體所結合的DSG3蛋白質的表位相同。19.DSG3蛋白質作為癌癥診斷標志物的應用。20.癌癥的診斷方法，其特征在于使用與DSG3蛋白質結合的抗體來檢測DSG3蛋白質。21.癌癥的診斷方法，該方法包含以下步驟(a)由受試者采集試樣的步驟；(b)使用與DSG3蛋白質結合的抗體來檢測采集的試樣中所含的DSG3蛋白質的步驟。22.權利要求20或21所述的診斷方法，其中，與DSG3蛋白質結合的抗體是由發(fā)射正電子核素標記的抗體。23.權利要求22所述的診斷方法，其中，發(fā)射正電子核素是選自IIC、13N、150、18F、45Ti、55Co、64Cu、66Ga、68Ga、76Br、89Zr、124I中的任一種核素。24.癌癥的診斷方法，其特征在于檢測編碼DSG3蛋白質的基因的表達。25.權利要求20-24中任一項所述的診斷方法，其中，癌癥是肺癌、大腸癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌或子宮癌。26.權利要求25所述的診斷方法，其中，肺癌是非小細胞肺癌。27.診斷藥物，該診斷藥物用于權利要求20-26中任一項所述的診斷方法。28.試劑盒，該試劑盒用于權利要求20-26中任一項所述的診斷方法。29.與DSG3蛋白質結合的抗體在制備細胞增殖抑制劑中的應用。30.與DSG3蛋白質結合的抗體在制備抗癌藥中的應用。31.抑制細胞增殖的方法，該方法包含將與DSG3蛋白質結合的抗體給予受治對象的步驟。32.預防或治療癌癥的方法，該方法包含將與DSG3蛋白質結合的抗體給予受治對象的步驟。全文摘要本發(fā)明公開了癌癥的診斷方法，其特征在于檢測DSG3蛋白質。肺癌中，發(fā)現(xiàn)DSG3以非常高的頻率、在基因水平和蛋白質水平表達亢進。本發(fā)明的方法可使用識別DSG3蛋白質的抗體來進行。還公開了含有與DSG3結合的抗體作為有效成分的藥物組合物、細胞增殖抑制劑和抗癌藥。進一步公開了通過使DSG3表達細胞和與DSG3結合的抗體接觸，對DSG3表達細胞引發(fā)細胞毒的方法、以及抑制DSG3表達細胞的增殖的方法。文檔編號C12N15/09GK101505791SQ200780030389公開日2009年8月12日申請日期2007年8月14日優(yōu)先權日2006年8月14日發(fā)明者中野清孝,伊藤浩孝,川合重人,油谷浩幸,石川俊平申請人:株式會社未來創(chuàng)藥研究所;國立大學法人東京大學