專利名稱：利用幼胚離體挽救培養(yǎng)獲得百合遠(yuǎn)緣雜種的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用受精后的幼胚離體培養(yǎng)獲得百合屬遠(yuǎn)緣雜種的方法，屬于生物技術(shù)育種領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
百合(Lilium L.)花型優(yōu)美，高貴典雅，且香氣宜人，是世界上重要的切花材料之一。百合屬植物原種有90多種，因其花色豐富，雜交工作十分活躍。20世紀(jì)20-30年代一些國家即開始了對(duì)百合屬種間雜交的研究，并利用遠(yuǎn)緣雜交獲得百合種間雜種。
中國是世界百合資源的自然分布中心，全球百合屬植物約有96個(gè)種，分布于中國的就有47個(gè)(其中36種為中國特有)，此外還有18個(gè)變種。云南有野生百合20余種，占世界百合資源的四分之一。而且大多數(shù)百合種類具有較好的香味，生境分布地域較廣，抗病力及適應(yīng)性較強(qiáng)，在改良香味、抗性，增加現(xiàn)有百合品種遺傳多樣性等方面有一定優(yōu)勢(shì)，亟待進(jìn)一步的開發(fā)利用。同時(shí)隨著云南省10余年花卉產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，已有上百個(gè)現(xiàn)代栽培品種引入云南，這些品種具有豐富的花色、花型、不同的生長(zhǎng)勢(shì)及抗病性、抗逆性等，有的較適宜云南的氣候及土壤條件，各種優(yōu)良性狀得到較好表現(xiàn)，有的則表現(xiàn)出某方面的優(yōu)點(diǎn)，但缺點(diǎn)也突出。充分利用云南的百合種質(zhì)資源優(yōu)勢(shì)，選育具有云南特色，適于云南生產(chǎn)條件的優(yōu)質(zhì)、高效、抗病百合新品種是云南球根花卉產(chǎn)業(yè)發(fā)展亟待解決的關(guān)鍵問題，也是改進(jìn)云南百合商品質(zhì)量和提高花農(nóng)經(jīng)濟(jì)效益的重要途徑。
百合新品種的培育多數(shù)是通過種間或種系間遠(yuǎn)緣雜交實(shí)現(xiàn)的，要使雜交組合獲得成功，不僅要有足夠數(shù)量的雜交種子，而且必須保證雜種后代植株有足夠的生活力與生育力。雜種胚的挽救培養(yǎng)技術(shù)作為組織培養(yǎng)的一個(gè)重要領(lǐng)域已有近百年的歷史，雜交子房、胚珠和雜交幼胚的離體培養(yǎng)，是目前克服受精后發(fā)育障礙的有效方法，在植物育種工作中發(fā)揮著極為重要的作用，已廣泛運(yùn)用于水稻、小麥、玉米等糧食作物的育種工作中。當(dāng)前世界各國培育的亞洲百合和東方百合雜種系，多數(shù)是屬于不同的種群和雜種間雜交育成的，由于是遠(yuǎn)緣雜交，雜交胚的胚乳發(fā)育不正?；蚴桥吲c胚乳之間生理上的不協(xié)調(diào)而使雜種胚早期敗育。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種利用受精后的幼胚離體挽救培養(yǎng)獲得百合屬遠(yuǎn)緣雜種的方法。
本發(fā)明通過下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種利用幼胚離體挽救培養(yǎng)獲得百合遠(yuǎn)緣雜種的方法，其特征在于經(jīng)過以下步驟A、將授粉后8-23天的受精子房切割下來，在2～6℃溫度條件下存放8～15小時(shí)，用濃度為75％的酒精對(duì)其表面擦拭2-3次，再用濃度為75％的酒精浸泡消毒1～2分鐘，然后在濃度為0.05～0.1％的升汞溶液中浸泡12～18分鐘，用無菌水洗2～3次，選取膨大的部位，將子房橫切為0.2cm的切片；B、在無菌條件下，將滅菌后的子房切片接種到單位為mg/L的下列誘導(dǎo)培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA)0.5～1.0mg/L蔗糖 60000mg/L瓊脂 6000mg/LpH 5.0～5.5在光照8～10h/d，光強(qiáng)800～1200Lx，培養(yǎng)室溫度22～26℃條件下，培養(yǎng)20～30d后，在解剖鏡下剝離膨大的胚珠；C、在與步驟B相同的培養(yǎng)條件下，對(duì)剝離的胚珠進(jìn)行單胚培養(yǎng)，培養(yǎng)40～50天后幼胚萌發(fā)；D、將萌發(fā)的幼胚接種到單位為mg/L的下列增殖培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA)0.5～1.0mg/L萘乙酸(NAA) 0～0.1mg/L
蔗糖30000mg/L瓊脂6000mg/LpH 5.5～5.8在光照10～12h/d，光強(qiáng)1000～1500Lx，培養(yǎng)室溫度22～26℃條件下繼代培養(yǎng)，每15～20d繼代一次；E、繼代3次后，待每個(gè)單胚增殖到15～25株后，將其分離成單株，切除葉片后接種到單位為mg/L的下列培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA) 0～0.1mg/L蔗糖60000～90000mg/L瓊脂6000mg/LpH 5.5～5.8在無光照，培養(yǎng)室溫度為22～26℃條件下，培養(yǎng)80～100d出瓶，包裝后于2～4℃條件下放置60～90天，即可下地種植。
本發(fā)明所述溶液濃度單位為質(zhì)量比濃度。
本發(fā)明的創(chuàng)新點(diǎn)是本發(fā)明與常規(guī)育種技術(shù)相結(jié)合，選擇包括云南野生百合的國內(nèi)外各類優(yōu)異親本，配制不同基因型的遠(yuǎn)緣雜交組合，對(duì)受精子房和幼胚進(jìn)行離體培養(yǎng)挽救，獲得了一批雜交幼胚種質(zhì)，在胚挽救技術(shù)應(yīng)用于百合種間雜交育種上取得了進(jìn)展，是百合種間雜交育種技術(shù)的創(chuàng)新，將有效推進(jìn)百合育種工作的進(jìn)程。同時(shí)胚挽救技術(shù)與百合瓶?jī)?nèi)結(jié)球技術(shù)的結(jié)合，有效縮短了百合雜交后代的培育周期和雜種成活率。
本發(fā)明的優(yōu)越性在于(1)通過雜交授粉子房及幼胚的離體培養(yǎng)可在胚敗育之前將其取出培養(yǎng)，避免遠(yuǎn)緣雜種胚早衰，使大量遠(yuǎn)緣雜交胚繼續(xù)發(fā)育成正常種子，盡快進(jìn)入選育程序，縮短了育種周期。(2)選擇包括云南野生百合的國內(nèi)外各類優(yōu)異親本，配制不同基因型的遠(yuǎn)緣雜交組合，對(duì)授精子房和幼胚進(jìn)行離體培養(yǎng)挽救，在胚搶救技術(shù)應(yīng)用于百合種間雜交育種上取得了進(jìn)展，同時(shí)獲得了大量的遠(yuǎn)緣雜交后代，為培育具有特色的百合商業(yè)新品種打下了較好的基礎(chǔ)。(3)建立的胚挽救技術(shù)體系是百合種間雜交育種技術(shù)的創(chuàng)新，將有效推進(jìn)百合育種工作的進(jìn)程。(4)胚挽救技術(shù)與百合瓶?jī)?nèi)結(jié)球技術(shù)的結(jié)合，有效縮短了百合雜交后代的培育周期和雜種成活率。
為了更好地說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)內(nèi)容，下面給出本發(fā)明的實(shí)施例，但本發(fā)明的內(nèi)容并不僅限于這些。
實(shí)施例11、自百合屬種間人工授粉第5天起，對(duì)授粉子房胚的形態(tài)發(fā)育進(jìn)行觀察，根據(jù)子房膨大及萎縮現(xiàn)象的觀察，將授粉后10天的遠(yuǎn)緣雜交受精子房整個(gè)切割下來，經(jīng)4℃低溫存放12小時(shí)，用濃度為75％的酒精棉球?qū)ζ浔砻娌潦?次，再用濃度為75％的酒精浸泡消毒1分鐘，然后在0.1％升汞溶液中處浸泡15分鐘，其間經(jīng)多次搖動(dòng)，最后用無菌水洗2次，污染率可有效控制在3％以內(nèi)，選取滅菌子房頂端至中部且靠上的膨大部位，將其橫切為0.2cm的切片，每個(gè)子房可切片8-15片，此時(shí)子房切片的胎座中，可肉眼看見略為透明的膨大胚珠；2、在無菌條件下，將滅菌后的子房切片接種到單位為mg/L的下列誘導(dǎo)培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA) 1.0mg/L蔗糖60000mg/L瓊脂6000mg/LpH 5.0在光照8h/d，光強(qiáng)1200Lx，培養(yǎng)室溫度22℃條件下，培養(yǎng)20d后，在解剖鏡下剝離膨大的胚珠；3、在下列培養(yǎng)條件MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA) 1.0mg/L蔗糖60000mg/L瓊脂6000mg/LDH 5.0
光照8h/d，光強(qiáng)1200Lx，培養(yǎng)室溫度22℃下，對(duì)剝離的胚珠進(jìn)行單胚培養(yǎng)，培養(yǎng)40天后幼胚萌發(fā)4、將萌發(fā)的幼胚接種到單位為mg/L的下列增殖培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA)1.0mg/L萘乙酸(NAA) 0.1mg/L蔗糖30000mg/L瓊脂6000mg/LpH 5.8在光照10h/d，光強(qiáng)1500Lx，培養(yǎng)室溫度26℃條件下繼代培養(yǎng)，每15d繼代一次；5、繼代3次后，待每個(gè)單胚增殖到20株后，將其分離成單株，切除葉片后接種到單位為mg/L的下列培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA) 0.1mg/L蔗糖90000mg/L瓊脂6000mg/LpH 5.8在無光照，培養(yǎng)室溫度為26℃條件下，培養(yǎng)20d后，瓶?jī)?nèi)可生成白色或粉紅色、無葉片、鱗片緊實(shí)、根系發(fā)達(dá)的小籽球，繼續(xù)培養(yǎng)60天后出瓶，經(jīng)包裝并在2℃條件下放置90天，即可下地種植，定植后成活率達(dá)100％。
實(shí)施例21、自百合屬種間人工授粉第5天起，對(duì)授粉子房胚的形態(tài)發(fā)育進(jìn)行觀察，根據(jù)子房膨大及萎縮現(xiàn)象的觀察，將授粉后20天的遠(yuǎn)緣雜交受精子房整個(gè)切割下來，經(jīng)2℃低溫存放15小時(shí)，用濃度為75％的酒精棉球?qū)ζ浔砻娌潦?次，再用濃度為75％的酒精浸泡消毒2分鐘，然后在0.05％升汞溶液中處浸泡18分鐘，其間經(jīng)多次搖動(dòng)，最后用無菌水洗2次，污染率可有效控制在3％以內(nèi)，選取滅菌子房頂端至中部且靠上的膨大部位，將其橫切為0.2cm的切片，每個(gè)子房可切片8-15片，此時(shí)子房切片的胎座中，可肉眼看見略為透明的膨大胚珠；2、在無菌條件下，將滅菌后的子房切片接種到單位為mg/L的下列誘導(dǎo)培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA) 0.5mg/L蔗糖60000mg/L瓊脂6000mg/LpH 5.5在光照10h/d，光強(qiáng)800Lx，培養(yǎng)室溫度26℃條件下，培養(yǎng)30d后，在解剖鏡下剝離膨大的胚珠；3、在下列培養(yǎng)條件MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA)0.5mg/L蔗糖 60000mg/L瓊脂 6000mg/LpH 5.5光照10h/d，光強(qiáng)800Lx，培養(yǎng)室溫度26℃下，對(duì)剝離的胚珠進(jìn)行單胚培養(yǎng)，培養(yǎng)50天后幼胚萌發(fā)4、將萌發(fā)的幼胚接種到單位為mg/L的下列增殖培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA)0.5mg/L蔗糖30000mg/L瓊脂6000mg/LpH 5.5在光照12h/d，光強(qiáng)1000Lx，培養(yǎng)室溫度22℃條件下繼代培養(yǎng)，每20d繼代一次；5、繼代3次后，待每個(gè)單胚增殖到18株后，將其分離成單株，切除葉片后接種到單位為mg/L的下列培養(yǎng)基中
MS基本培養(yǎng)液蔗糖90000mg/L瓊脂6000mg/LpH 5.5在無光照，培養(yǎng)室溫度為22℃條件下，培養(yǎng)30d后，瓶?jī)?nèi)可生成白色或粉紅色、無葉片、鱗片緊實(shí)、根系發(fā)達(dá)的小籽球，繼續(xù)培養(yǎng)70天后出瓶，經(jīng)包裝并在4℃條件下放置60天，即可下地種植，定植后成活率達(dá)100％。
由于百合各個(gè)雜交組合親本來源及遺傳背景的不同，在離體培養(yǎng)中的生長(zhǎng)狀況存在一定的差異。本發(fā)明著重對(duì)雜種幼胚培養(yǎng)中的關(guān)鍵因素進(jìn)行了研究。具體對(duì)適合子房切片培養(yǎng)材料的選擇、不同雜交組合子房切片的膨大狀況及胚珠萌發(fā)情況、胚齡(授粉的發(fā)育時(shí)間)及培養(yǎng)條件對(duì)幼胚萌發(fā)的影響開展了試驗(yàn)研究，其結(jié)果報(bào)告如下1、試驗(yàn)材料經(jīng)人工授粉的遠(yuǎn)緣雜交百合子房。共5個(gè)雜交組合類型，15個(gè)雜交組合(表1)。
2.方法與結(jié)果外植體的選擇、滅菌、培養(yǎng)的整個(gè)環(huán)節(jié)同實(shí)施例，重點(diǎn)研究了遠(yuǎn)緣雜交幼胚的有效培養(yǎng)方法。
(1)適合子房切片培養(yǎng)材料的選擇有報(bào)道已表明，百合幼胚的胚齡與胚培救效果有一定的關(guān)系。我們?cè)谠囼?yàn)中也證實(shí)了這一結(jié)論。百合進(jìn)行雜交授粉后，不同雜交組合的子房發(fā)育有差異，有些不親合的配組在發(fā)育的前期就表現(xiàn)出萎縮的狀況。選擇合適的時(shí)期進(jìn)行子房的離體培養(yǎng)，對(duì)切片培養(yǎng)結(jié)果有明顯的影響。根據(jù)多次試驗(yàn)與觀察，本試驗(yàn)根據(jù)子房發(fā)育狀況，主要是膨大及萎縮現(xiàn)象的觀察，依照不同的雜交配組，采取了授粉后8-23天，每個(gè)組合2-3個(gè)子房。
經(jīng)滅菌處理后，主要切取頂端至中部，有膨大現(xiàn)象的部位，由于子房的生長(zhǎng)狀況不同，每個(gè)子房可切片8-15片。此時(shí)子房切片的胎座中，可肉眼看見略為透明的膨大胚珠。由于培養(yǎng)材料前期的生長(zhǎng)狀況有差異，每個(gè)子房切片肉眼可見的胚珠為9-15個(gè)。
(2)不同雜交組合子房切片的膨大狀況及胚珠萌發(fā)情況子房切片在培養(yǎng)基中培養(yǎng)7-10天后，子房壁開始增厚，胎座中部的胚珠開始膨大；培養(yǎng)25-30天以后，有的子房切片從胚珠處開始褐化，直到完全失去生命力；而有的切片中幼胚膨大明顯，呈淺綠色。在此期間多數(shù)培養(yǎng)材料經(jīng)3-4次轉(zhuǎn)瓶，少數(shù)長(zhǎng)勢(shì)較好的膨大胚珠在轉(zhuǎn)接時(shí)，切去周邊的部分子房壁，采用胚珠結(jié)合胎座培養(yǎng)(ovule with placenta culture，OPC)和胚獨(dú)立培養(yǎng)方法(young single ovule culture，YOC)進(jìn)行。100天以后，陸續(xù)有胚珠開始萌發(fā)，并長(zhǎng)成幼苗。
表1百合遠(yuǎn)緣雜交胚培救材料

(注O為東方百合雜種系；為麝香百合；A為亞洲百合雜種系；W為中國野生百合。)
我們于培養(yǎng)150天后，比較了各個(gè)雜交組合幼胚的出苗情況(表2)。
表2不同雜交組合子房切片的培養(yǎng)及胚珠萌發(fā)情況

從表2的觀察結(jié)果表明由于百合各個(gè)雜交組合親本來源及遺傳背景的不同，雜交配組的類型對(duì)培養(yǎng)效果有明顯的影響。O×O類型的子房在取材時(shí)表現(xiàn)出較好的長(zhǎng)勢(shì)，在培養(yǎng)過程中萌發(fā)率最高，H3的萌發(fā)率達(dá)到35.5％，而且胚珠的長(zhǎng)勢(shì)最好；O×W類型的雜交子房在發(fā)育過程中，因在田間發(fā)育的后期有萎縮現(xiàn)象，所以培養(yǎng)取材的胚齡較小，在培養(yǎng)過程中萌發(fā)率最低，H9僅為4.3％，而且長(zhǎng)勢(shì)不好。尤其是H7(Siberia×岷江百合)的3個(gè)培養(yǎng)子房切片均未獲得萌發(fā)的幼胚植株。其它的組合類型O×A、O×LA和O×L都有再生的幼胚植株。
從親緣關(guān)系分析，O×O類型屬種系內(nèi)雜交，親和力較好，在田間也收到了一定數(shù)量的正常種子；其它的組合均屬于遠(yuǎn)緣的種系外雜交，但在發(fā)育前期均有胚的生長(zhǎng)。雖然所選取的O×W類型中的野生岷江百合和淡黃花百合均屬于亞洲百合系列，但可能由于其在人工栽培條件下的馴化生長(zhǎng)仍存在一定的不適應(yīng)性，在雜交配組后子房的發(fā)育有障礙。
從整個(gè)培養(yǎng)結(jié)果觀察，在經(jīng)多次試驗(yàn)的改進(jìn)后，本試驗(yàn)所采取的培養(yǎng)方法是有效的，采用的取材方法和培養(yǎng)條件對(duì)百合幼胚的生長(zhǎng)有利。所培養(yǎng)的材料大部分均有萌芽現(xiàn)象，并獲得了一定數(shù)量的雜交幼胚再生植株。
(3)胚齡(授粉的發(fā)育時(shí)間)及培養(yǎng)條件對(duì)幼胚萌發(fā)的影響所培養(yǎng)材料的胚齡階段內(nèi)，胚齡對(duì)幼胚的萌發(fā)無明顯的影響。胚齡最小為8天，最大為23天均可培養(yǎng)出雜交后代。但胚齡不同，胚萌發(fā)時(shí)間有一定的差異。在同一雜交類型中，H12的胚齡8天，胚萌發(fā)時(shí)間為128天，H11的胚齡12天，胚萌發(fā)時(shí)間為108天；H14的胚齡12天，胚萌發(fā)時(shí)間為120天，H15的胚齡9天，胚萌發(fā)時(shí)間為125天。胚齡越小，胚萌發(fā)需要的時(shí)間越長(zhǎng)。
本試驗(yàn)采取的不同培養(yǎng)方法主要針對(duì)培養(yǎng)材料轉(zhuǎn)接時(shí)的生長(zhǎng)狀況，未觀察到對(duì)培養(yǎng)結(jié)果有明顯的影響。只是在培養(yǎng)過程中，子房壁、胎座等組織可能會(huì)因適宜的培養(yǎng)條件產(chǎn)生愈傷組織而分化出芽，影響培養(yǎng)出的再生植株的雜種真實(shí)性，所以在試驗(yàn)后期，我們采用ARP-PCR(anchored randomprimer-PCR)法對(duì)部分胚培后代進(jìn)行了雜種鑒定。
在培養(yǎng)過程中，對(duì)少數(shù)胚大明顯的胚珠采取了剝離培養(yǎng)，但培養(yǎng)材料均出現(xiàn)玻璃化和褐化現(xiàn)象，在培養(yǎng)后期未觀察到胚的萌發(fā)?？赡茉囼?yàn)所采取的培養(yǎng)條件不適應(yīng)于剝離胚的培養(yǎng)；培養(yǎng)基的pH值對(duì)培養(yǎng)效果有一定的影響。當(dāng)pH值超過5.8時(shí)，培養(yǎng)物的褐化現(xiàn)象較明顯。
在百合遠(yuǎn)緣雜交育種中，采用子房切片離體培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行胚挽救是一種有效的方法。在合適的胚齡階段，不同種間及種系間雜交組合類型對(duì)百合幼胚的萌發(fā)及植株再生有一定的影響O×O，O×A雜交類型的授粉子房幼胚萌發(fā)率最高，O×野生種的幼胚萌發(fā)率最低。
培養(yǎng)基中的糖濃度、激素濃度、pH值的大小以及培養(yǎng)條件不是各自獨(dú)立地對(duì)培養(yǎng)有影響。胚培養(yǎng)后代以瓶?jī)?nèi)結(jié)球的形式出瓶后，成活率大大提高。出瓶的小籽球經(jīng)過春化處理，可于次年長(zhǎng)出地上莖，在一定程度上縮短了雜種后代種球的培育周期，可于2-3年后開花篩選。
權(quán)利要求
1.一種利用幼胚離體挽救培養(yǎng)獲得百合遠(yuǎn)緣雜種的方法，其特征在于經(jīng)過以下步驟A、將授粉后8-23天的受精子房切割下來，在2～6℃溫度條件下存放8～15小時(shí)，用濃度為75％的酒精對(duì)其表面擦拭2-3次，再用濃度為75％的酒精浸泡消毒1～2分鐘，然后在濃度為0.05～0.1％的升汞溶液中浸泡12～18分鐘，用無菌水洗2～3次，選取膨大的部位，將子房橫切為0.2cm的切片；B、在無菌條件下，將滅菌后的子房切片接種到單位為mg/L的下列誘導(dǎo)培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA)0.5～1.0mg/L蔗糖 60000mg/L瓊脂 6000mg/LpH 5.0～5.5在光照8～10h/d，光強(qiáng)800～1200Lx，培養(yǎng)室溫度22～26℃條件下，培養(yǎng)20～30d后，在解剖鏡下剝離膨大的胚珠；C、在與步驟B相同的培養(yǎng)條件下，對(duì)剝離的胚珠進(jìn)行單胚培養(yǎng)，培養(yǎng)40～50天后幼胚萌發(fā)；D、將萌發(fā)的幼胚接種到單位為mg/L的下列增殖培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 0.5～1.0mg/L萘乙酸(NAA)0～0.1mg/L蔗糖 30000mg/L瓊脂 6000mg/LpH 5.5～5.8在光照10～12h/d，光強(qiáng)1000～1500Lx，培養(yǎng)室溫度22～26℃條件下繼代培養(yǎng)，每15～20d繼代一次；E、繼代3次后，待每個(gè)單胚增殖到15～25株后，將其分離成單株，切除葉片后接種到單位為mg/L的下列培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA)0～0.1mg/L蔗糖 60000～90000mg/L瓊脂 6000mg/LpH 5.5～5.8在無光照，培養(yǎng)室溫度為22～26℃條件下，培養(yǎng)80～100d出瓶，包裝后于2～4℃條件下放置60～90天，即可下地種植。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用幼胚拯救獲得百合屬遠(yuǎn)緣雜種的方法，它選擇云南野生百合及國內(nèi)外各類優(yōu)異親本，以東方百合雜種系為母本，進(jìn)行雜交，通過雜交授粉子房及幼胚的離體培養(yǎng)可在胚敗育之前將其取出培養(yǎng)，避免遠(yuǎn)緣雜種胚早衰，使大量遠(yuǎn)緣雜交胚繼續(xù)發(fā)育成正常種子，盡快進(jìn)入選育程序，縮短了育種周期，同時(shí)獲得了大量的遠(yuǎn)緣雜交后代，實(shí)現(xiàn)了百合屬種間遠(yuǎn)緣雜交，創(chuàng)造了一批新種質(zhì)，胚挽救技術(shù)與百合瓶?jī)?nèi)結(jié)球技術(shù)的結(jié)合，有效縮短了百合雜交后代的培育周期和雜種成活率。
文檔編號(hào)C12N5/04GK1994067SQ20061004882
公開日2007年7月11日 申請(qǐng)日期2006年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月16日
發(fā)明者屈云慧, 熊麗, 蔣亞蓮, 吳學(xué)尉, 張藝萍 申請(qǐng)人:云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所