專利名稱：具有脂肪酶抑制活性及/或抗氧化活性的表沒食子兒茶素二聚體及三聚體的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及具有脂肪酶抑制活性的表沒食子兒茶素二聚體及三聚體、以及添加該二聚體及三聚體的飲食品；此外，本發(fā)明還涉及具有抗氧化作用的表沒食子兒茶素沒食子酸酯二聚體及三聚體、以及添加該二聚體及三聚體的飲食品；進而本發(fā)明還涉及該表沒食子兒茶素二聚體及三聚體的制造方法。
背景技術：
脂肪酶抑制劑近年來，伴隨日本人生活方式的歐美化，高脂肪食物的攝取在不斷增加，根據(jù)平成11年日本國國民營養(yǎng)調(diào)查，有報告指出盡管能量攝取量在逐年減少，但脂質(zhì)能量比超過正常比例25％，中性脂肪值、膽固醇值高的人的比例在60歲以上的人中占5～6成(日本國厚生勞動省平成11年國民營養(yǎng)調(diào)查結果概要臨床營養(yǎng)2001、98(5)577-588)(日語原文厚生労働省平成11年國民栄養(yǎng)調(diào)查結果の概要臨床栄養(yǎng)2001、98(5)577-588)。
肥胖是現(xiàn)代社會中最重大的疾病之一，其主要原因是過剩攝取脂肪。并且已知過剩攝取脂肪不僅引起肥胖，而且還誘發(fā)起因于肥胖的糖尿病、高血脂癥、高血壓、動脈硬化等。作為治療這種肥胖的藥物，在日本國內(nèi)唯一批準了食欲抑制劑馬吲哚(Mazindol)(注冊商標)，但報告其有口渴、便秘、胃部不適感、惡心、嘔吐等副作用(臨床評價1985、13(2)、p419-459，臨床評價1985、13(2)、p461-515)。此外，在日本國外，具有通過脂肪酶抑制活性抑制從腸管吸收脂肪作用的Xenical(注冊商標)，作為肥胖改善藥已在市場銷售，但仍報告有脂肪便、排便次數(shù)增加、軟便、下痢、腹痛等副作用(Lancet，1998，352，p.67-172)。
另一方面，作為預防肥胖的其他方法，已知通過限制飲食從而減少攝取熱量是有效的方法，但該方法必須進行嚴格的營養(yǎng)指導和管理，在日常生活中難于實行。因此，如果能夠安全且健康地抑制餐后脂肪在體內(nèi)吸收，將成為治療肥胖及其相關疾病或增進健康的現(xiàn)實的有用的對策。
在這種背景下，安全且證明對人體有效的特定保健用食品的開發(fā)受到關注。到目前為止，作為抑制餐后血清中性脂肪值升高的特定保健用食品，通過抑制胰脂肪酶從而抑制脂肪吸收的珠蛋白分解物(J.Nutr.1988，128，p.56-60；日本臨床食糧學會志1999、52(2)、p.71～77；健康·營養(yǎng)食品研究2002、5(3)、p.131～144)、具有與三?；视筒煌仗匦缘亩；视?J.Am.Coll.Nutr.2000，19(6)，p.789-796；Clin.Chim.Acta.2001，11(2)，p.109-117)、以及從魚油中精制的二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)等已在銷售。使用這些特定保健用食品用以抑制飲食性脂肪吸收時，期望進餐時同時攝取，可以預料此時會影響飲食物的香味、風味。
此外，對于脂肪酶的抑制作用，已知有數(shù)種多酚具有活性，如已報道有來自植物樹皮的單寧(日本國特公昭60-11912)，在豆科植物水皂角中含有的單寧類、類黃酮類及其糖苷(日本國特開平8-259557)，配合有綠茶中的主要成分表沒食子兒茶素沒食子酸酯及表兒茶素沒食子酸酯的抑制脂質(zhì)吸收的食品(日本國特開平3-228664)，含有青椒、叢生口蘑、南瓜、灰樹花(Grifola frondosa)、羊棲菜、綠茶、烏龍茶等水提取物的脂肪酶抑制劑(日本國特開平3-219872)，黃酮及黃酮醇類(日本國特開平7-61927)，羥基安息香酸類(沒食子酸)(日本國特開平1-102022)，三萜類化合物及其衍生物(日本國特開平9-40689)，以羅望子(Tamarinde)的原花青素(Procyanidin)為有效成分的抗肥胖劑(日本國特開平9-291039)等。并且知道葡萄種子提取物的脂肪酶抑制作用(Nutrition，2003，19，(10)，p.876-879)，來自五層龍屬(Salacia)植物的多酚的脂肪酶抑制作用和對大白鼠的抗肥胖作用(J.Nutr.，2002，132，p.1819-1824)，烏龍茶提取物對小白鼠的抗肥胖作用(Int.J.Obes.，1999，23，p.98-105)等。
另一方面，關于烏龍茶，報告其具有降低脂質(zhì)的效果，如報告每日飲用1330ml市售烏龍茶，服用6周后發(fā)現(xiàn)血中中性脂肪值顯著降低(日本營養(yǎng)·食糧學會志1991、44(4)、p.251～259)；以102名單純性肥胖癥男女為對象，使其連續(xù)6周經(jīng)口攝取烏龍茶(2g×4/日)，結果發(fā)現(xiàn)67％被驗者體重減少1kg以上，并且發(fā)現(xiàn)血中中性脂肪值為高值的被驗者攝取烏龍茶后有顯著改善效果(日本臨床營養(yǎng)學會雜志1998、20(1)、p.83～90)。
日本國厚生勞動省平成11年國民營養(yǎng)調(diào)查結果概要臨床營養(yǎng)2001、98(5)577-588(日語原文厚生労働省平成11年國民栄養(yǎng)調(diào)查結果の概要臨床栄養(yǎng)2001、98(5)577-588)[非專利文獻2]臨床評價1985、13(2)、p.419～459[非專利文獻3]臨床評價1985、13(2)、p.461～515[非專利文獻4]Lancet，1998，352，p.67-172[非專利文獻5]J.Nutr.1988，128，p.56-60[非專利文獻6]日本臨床食糧學會志1999、52(2)、p.71～77[非專利文獻7]健康營養(yǎng)食品研究2002、5(3)、p.131～144[非專利文獻8]J.Am.Coll.Nutr.2000，19(6)，p.789-796[非專利文獻9]Clin.Chim.Acta.2001，11(2)，p.109-117[非專利文獻10]Nutrition，2003，19，(10)，p.876-879)[非專利文獻11]J.Nutr.，2002，132，p.1819-1824[非專利文獻12]Int.J.Obes.，1999，23，p.98-105[非專利文獻13]日本營養(yǎng)食糧學會志1991、44(4)、p.251～259[非專利文獻14]日本臨床營養(yǎng)學會雜志1998、20(1)、p.83～90[專利文獻1]日本國特公昭60-11912[專利文獻2]日本國特開平8-259557[專利文獻3]日本國特開平3-228664[專利文獻4]日本國特開平3-219872[專利文獻5]日本國特開平7-61927 日本國特開平1-102022[專利文獻7]日本國特開平9-40689[專利文獻8]日本國特開平9-291039發(fā)明內(nèi)容上述所報道的脂肪酶抑制劑，其效果并不充分，假如某植物的提取物有效果，但只要其中含有的活性成分的量不確定，又因為來自于天然物質(zhì)，所以難于維持穩(wěn)定的脂肪酶抑制活性。
并且可以預料，來自不受歡迎的植物的脂肪酶抑制劑作為飲食物利用時，會對香味產(chǎn)生不好的影響，因此，來自于受歡迎的茶的脂肪酶抑制劑可以作為有效的代替材料，但試圖通過飲用受歡迎的烏龍茶來降低脂質(zhì)時，如果不大量飲用不會得到效果，在日常生活中無法實現(xiàn)。即使提供單純濃縮的烏龍茶，因為有強的苦味、澀味，且咖啡因的量也會增加，所以該方法也不可能成為現(xiàn)實的對策。
本發(fā)明的目的是，提供對胰脂肪酶具有高抑制活性、抑制餐后脂肪吸收及/或有助于抑制、預防肥胖的脂肪酶活性抑制劑。
本發(fā)明的目的是，提供來自于烏龍茶的受歡迎且不破壞香味的脂肪酶抑制劑。
本發(fā)明的目的是，提供該脂肪酶抑制劑的制造方法。
本發(fā)明的目的是，提供添加有本發(fā)明的脂肪酶抑制劑的飲食品等。
本發(fā)明的其他目的是，提供預防下述疾病的抗氧化劑，即、預防因活性氧引起的各種疾病如高血壓、糖尿病、高血脂癥等生活習慣病，動脈硬化等心臟疾病，以及衰老、癌癥等的抗氧化劑。
本發(fā)明的目的是，提供在飲食品等中能夠準確添加有效量的脂肪酶抑制劑及/或抗氧化劑。
表沒食子兒茶素二聚體及三聚體作為解決上述課題的手段，從烏龍茶中發(fā)現(xiàn)抑制脂肪吸收時所必需的胰脂肪酶的成分。對其中存在的各種多酚的脂肪酶抑制活性進行評價，證明具有下述結構的表沒食子兒茶素的二聚體具有強的抑制活性，所述結構為表沒食子兒茶素在其苯并二氫吡喃環(huán)(Chroman ring)的6位或8位通過亞甲基聚合形成的結構，[化學式1] 化學式1中R1、R2分別獨立地表示H或沒食子?；?。
本發(fā)明的優(yōu)選二聚體為式子化學式2表示的oolonghomobisflavan A(1)、oolonghomobisflavan B(2)、monodesgalloyl oolonghomobisflavan A(5)及didesgalloyl oolonghomobisflavan B(6)。
根據(jù)本發(fā)明，合成的新型表沒食子兒茶素沒食子酸酯二聚體oolonghomobisflavan C(3)也具有高的脂肪酶抑制活性。
根據(jù)本發(fā)明，表沒食子兒茶素在其苯并二氫吡喃環(huán)的6位及/或8位通過亞甲基聚合形成的表沒食子兒茶素三聚體也具有強的脂肪酶抑制活性。
化學式4中R3、R4及R5分別獨立地表示H或沒食子?；?br> 優(yōu)選表沒食子兒茶素三聚體為式子化學式5表示的化合物(4)。
表沒食子兒茶素二聚體及三聚體的制造本發(fā)明的大部分表沒食子兒茶素二聚體，同領域技術人員能夠根據(jù)公知的方法進行合成、或精制得到。如表沒食子兒茶素二聚體oolonghomobisflavan A(1)及B(2)，可以根據(jù)Chem.Pharm.Bull 37(12)，3255-3563(1989)所述的方法合成，monodesgalloyl oolonghomobisflavan A(5)、didesgalloyloolonghomobisflavan B(6)可以根據(jù)Chem.Pharm.Bull 37(12)，3255-3563(1989)所述的方法從茶葉中得到。
另一方面，本發(fā)明的三聚體可以根據(jù)下述制造方法進行制造。即、可以通過包括下述步驟的方法制造，即在甲醇、乙醇等溶劑中，優(yōu)選在甲醇中，在鹽酸、硫酸等酸存在下，優(yōu)選在0.01N鹽酸存在的條件下，使表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯(7)等黃烷-3-醇(Flavan-3-ol)類與甲醛反應。對于反應溫度，只要原料和生成物穩(wěn)定沒有特別限定，優(yōu)選在室溫下進行?；蛘咭部梢酝ㄟ^使表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯(7)等黃烷-3-醇溶解于二甲基亞砜(DMSO)中進行加熱而制造，對于加熱反應條件，只要原料和生成物穩(wěn)定沒有特別限定，優(yōu)選在150～200℃，更優(yōu)選在180℃下，優(yōu)選加熱1～30分鐘，更優(yōu)選加熱15分鐘。反應溶液中的甲醛濃度優(yōu)選為3～37w/v％。生成的生成物，可選擇性地進行酯化、水解等衍生化反應。
上述三聚體的制造方法也適于制造二聚體。如實施例3所示，包括新型homobisflavan C(3)的數(shù)個二聚體均根據(jù)上述制造方法制造。
脂肪酶抑制活性本發(fā)明的化合物具有脂肪酶抑制活性，特別是胰脂肪酶抑制活性。
脂肪酶抑制活性的測定，可以根據(jù)背景技術中提到的以往申請中所記載的任一種脂肪酶活性評價方法進行，對胰脂肪酶的抑制活性，如可通過使用熒光性4-甲基傘形酮油酸酯作基質(zhì)，測定脂肪酶反應生成的4-甲基傘形酮的熒光來實施。用對脂肪酶活性產(chǎn)生50％抑制的試料量IC50表示也可以通過常法進行。
如實施例1所示，相對于公知的脂肪酶抑制劑表沒食子兒茶素3-O-沒食子酸酯(7)的胰脂肪酶IC50，本發(fā)明化合物顯示的值非常低。
因此，與以往已知的來自于天然的脂肪酶抑制劑相比，使用少量的本發(fā)明的脂肪酶抑制劑，就能夠抑制餐后脂肪吸收、抑制血中中性脂肪上升及/或防止肥胖。因本發(fā)明化合物來自于天然物質(zhì)，安全性高，適合日常及/或長期攝取發(fā)揮其效果。同時，來自于烏龍茶的本發(fā)明的化合物，非常受歡迎。
抗氧化劑活性本發(fā)明者進一步發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的二聚體及三聚體也具有消除超氧陰離子自由基的活性。
超氧陰離子自由基(O2-)是體內(nèi)生成的一種活性氧，在生物體內(nèi)用于殺菌等，不僅如此，還在生物體內(nèi)無選擇地發(fā)生強氧化反應。有人認為這種作用如通過細胞膜的不飽和脂肪酸的過氧化，會引起生物體衰老、致癌等疾病(如參照南山堂“醫(yī)學大辭典第18版”1998年1月16日發(fā)行、p329)。此外，如在食品中發(fā)生不飽和脂肪酸的過氧化反應，可使食品變壞，并且也可產(chǎn)生食品變壞氣味。因此，能夠消除超氧陰離子自由基的化合物具有的有益特性是能夠預防因活性氧引起的各種疾病，如高血壓、糖尿病、高血脂癥等生活習慣病，動脈硬化等心臟疾病，以及衰老、癌癥等。
超氧陰離子自由基的消除活性，根據(jù)實施例5所述方法測定。即、由黃嘌呤氧化酶產(chǎn)生O2-，使用5，5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物作捕集劑，利用ESR進行測定。在本發(fā)明化合物存在或不存在的條件下進行測定，其結果用抑制50％的O2-生成量的試料量IC50表示。
根據(jù)實施例5可知，相對于公知的超氧陰離子自由基消除劑化合物(7)的IC50，本發(fā)明化合物的值非常低。
因此，與以往來自于天然物質(zhì)的超氧陰離子自由基消除劑相比較，使用少量的本發(fā)明化合物就能夠預防因活性氧引起的各種疾病，如高血壓、糖尿病、高血脂癥等生活習慣病，動脈硬化等心臟疾病，以及衰老、癌癥等。并且因本發(fā)明化合物來自于天然物質(zhì)，其安全性高，可以長期攝取發(fā)揮其效果。
添加脂肪酶抑制劑及/或抗氧化劑的飲食品通過添加本發(fā)明的表沒食子兒茶素二聚體及/或三聚體增強茶多酚，能夠制造具有下述作用的飲食品。即、具有降低中性脂肪、防止脂質(zhì)過氧化、防止衰老、預防肥胖等作用，以及預防因活性氧引起的各種疾病，如高血壓、糖尿病、高血脂癥等生活習慣病，動脈硬化等心臟疾病及衰老、癌癥等作用的飲食品。
添加本發(fā)明化合物的飲料，例如為清涼飲料、茶飲料、液體強壯劑、健康飲料、營養(yǎng)補助飲料、運動飲料、碳酸飲料等(包括這些飲料的濃縮原液及調(diào)制用粉末)；食品為如口香糖、糖果、果凍、片劑保健食品(Tablet)、健康食品、營養(yǎng)補助食品、營養(yǎng)補充劑(Supplement)等。
含有脂肪酶抑制劑及/或抗氧化劑的醫(yī)藥組合物通過使用本發(fā)明的表沒食子兒茶素二聚體及/或三聚體，能夠制造具有下述作用的醫(yī)藥品，即、具有降低中性脂肪等作用，以及預防因活性氧引起的各種疾病，如高血壓、糖尿病、高血脂癥等生活習慣病，動脈硬化等心臟疾病及衰老、癌癥等作用的醫(yī)藥品。
將本發(fā)明化合物作為醫(yī)藥使用時，可以提供散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、液劑、注射劑、皮膚用液劑、乳劑、軟膏等形式。
添加脂肪酶抑制劑及/或抗氧化劑的化妝品通過使用本發(fā)明的表沒食子兒茶素二聚體及/或三聚體，能夠制造具有防止脂質(zhì)過氧化、防止衰老、美白作用等作用的化妝品。
添加本發(fā)明化合物的化妝品，例如為面部用、皮膚用、頭發(fā)用的霜(Cream)、露(Lotion)、凝膠、摩絲、香波、護發(fā)素等。
本發(fā)明化合物，可以將其提取精制品、合成品單獨用于飲食品、醫(yī)藥品組合物或化妝品中，也可以以含有1種以上本發(fā)明化合物的混合物的形式添加到飲食品中。
因此，如果從茶葉等原料中提取的提取物中含有多種本發(fā)明的化合物，對于其提取混合物，不用分離各成分，能夠作為本申請的脂肪酶抑制劑使用。
通過添加烏龍茶的多酚或表沒食子兒茶素二聚體及/或三聚體中脂肪酶抑制活性高的成分，可以提供不會破壞香味、受歡迎且以預防肥胖、促進健康為目的的飲料。
本發(fā)明化合物及飲食品也具有抗氧化活性，并有助于防止脂質(zhì)過氧化、預防衰老。


圖1表示評價脂肪酶抑制活性及抗氧化活性的樣品的化學結構式。
圖2為oolonghomobisflavan C(3)的1H-NMR光譜。
圖3為oolonghomobisflavan C(3)的13C-NMR光譜。
圖4為三聚體(4)的1H-NMR光譜。
圖5為三聚體(4)的13C-NMR光譜。
具體實施例方式
以下根據(jù)實施例對本發(fā)明進行具體說明，但只要在本發(fā)明的范圍內(nèi)，并不限于這些實施例。
實施例1 脂肪酶抑制活性的測定脂肪酶活性的測定，通過下述步驟實施，即、使用熒光性4-甲基傘形酮油酸酯(4-UMO)作基質(zhì)，測定酶反應生成的4-甲基傘形酮的熒光。
測定時，緩沖液使用含有150mM NaCl、1.36mM CaCl2的13mM Tris-HCl(pH8.0)，基質(zhì)4-UMO(Sigma-Aldrich co.公司制)為將制備成的0.1M的DMSO溶液用上述緩沖液稀釋1000倍后使用，脂肪酶為將豬胰脂肪酶(Sigma公司制)用上述緩沖液制備成400U/ml溶液，以供酶測定使用。
酶反應是在25℃條件下，在96孔微型板上添加并混合50μl的4-UMO緩沖溶液、25μl蒸餾水(或試料水溶液)，然后添加25μl脂肪酶緩沖液溶液使反應開始，反應進行30分鐘后，添加100μl的0.1M檸檬酸緩沖液(pH4.2)終止反應。反應生成的4-甲基傘形酮的熒光(激發(fā)波長355nm、熒光波長460nm)用熒光分析儀(Labsystems公司制Fluoroskan Asent CF)測定。
被檢試料的抑制活性，以相對于對照(蒸餾水)的活性產(chǎn)生50％抑制的試料量IC50(μl)求出。
實施例2 測定樣品根據(jù)論文Chem.Pharm.Bull 37(12)，3255-3563(1989)合成oolonghomobisflavan A(1)、oolonghomobisflavan B(2)。根據(jù)Chem.Pharm.Bull 37(12)，3255-3563(1989)所述方法從茶葉中提取精制monodesgalloyloolonghomobisflavan A(5)及didesgalloyl oolonghomobisflavan B(6)，或者也可以通過鞣酸酶水解從oolonghomobisflavan A(1)、oolonghomobisflavanB(2)中得到。新型化合物oolonghomobisflavan C(3)及三聚體(4)，利用實施例3及4的方法合成精制以后，通過儀器分析確認為圖1的結構。(-)-表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯(EGCG、化合物7)，從和光純藥工業(yè)株式會社購入。
實施例3 oolonghomobisflavan(OHBF)類的合成及精制A合成使100mg(-)-表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯(和光純藥工業(yè)株式會社)溶解于含有0.01N HCl和18.5％甲醛的2ml甲醇中，室溫下攪拌1小時。反應結束后，用高效液相色譜法精制。
B制備型HPLC的條件柱子Develosil C30-UG-5(2cmφ×25cm、野村化學株式會社)流動相A0.1％TFA/H2O、B90％CH3CN、0.1％TFA/H2O、6ml/min梯度程序B 10％→40％(0～40min)、B 40％iso(40～60min)檢測A 280nm在上述條件下進行制備型HPLC，得到的OHBF-A、OHBF-B、OHBF-C及3聚體分別為24.2mg、17.2mg、5.6mg及13.8mg。采用micromass Q-TOF測定各化合物的MS，在正離子模式下，確認OHBF-A、OHBF-B、OHBF-C及三聚體分別在m/z 929、929、929、139的[M+H]+離子峰。OHBF-A、OHBF-B與Chem.Pharm.Bull 37(12)，3255-3563(1989)所述的光譜數(shù)據(jù)一致，能夠確認為圖1的化學式1和2的結構。對于OHBF-C及3聚體，采用DMX-750光譜儀(BRUKER BIOSPIN)進行1H-NMR、13C-NMR、1H{13C}-HSQC、1H{13C}-HMBC、TOCSY、DQF-COSY的NMR測定，證明為圖1的化學式3和4的結構。OHBF-C的1H-NMR及13C-NMR光譜如圖2及圖3所示，三聚體的1H-NMR及13C-NMR光譜如圖4及圖5所示。
實施例4 oolonghomobisflavan類及其3聚體的脂肪酶抑制活性OHBF類的2聚體、3聚體的6種化合物及表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的脂肪酶抑制活性按照實施例1進行測定，其結果如表1所示。此外，圖1記載有以供評價的化合物的化學結構式。
在苯并二氫吡喃環(huán)的3位上沒食子?；纬甚ユI的黃烷-3-醇的2聚體，如oolonghomobisflavan A、B、C及3聚體，與EGCG相比具有強有力的脂肪酶抑制活性，由此表明EGCG聚合形成的2聚體及3聚體可作為脂肪酶抑制劑有效利用。
其中，確認特別是脂肪酶抑制活性強的oolonghomobisflavan A、B存在于烏龍茶葉中。
表1各種多酚的脂肪酶抑制活性[表1]

實施例5 活性氧消除活性對一種活性氧超氧陰離子自由基的消除活性進行評價。
方法制備(1)2mM次黃嘌呤溶液(溶解于pH為7.4的0.1M磷酸緩沖液)、(2)5.5mM二亞乙基三胺五乙酸溶液(溶解于pH為7.4的0.1M磷酸緩沖液)，然后將5.0ml溶液(1)、3.5ml溶液(2)及1.5ml的Labotech公司制造的5，5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物(DMPO)混合，作為試藥1。將50μl試藥1加入1.5ml的微量試管內(nèi)，37℃培養(yǎng)4分鐘，再加入20μl樣品的甲醇溶液，進一步加入50μl的0.4unit/ml黃嘌呤氧化酶，攪拌10秒鐘。將反應液注入壓積管內(nèi)，放入ESR裝置內(nèi)，加入黃嘌呤氧化酶60秒后開始磁場掃描。ESR測定條件如下所示，即、Power4mW、C.Field335.5mT、SwWid(±)5mT、SwTime1min、ModWid0.1mT、Amp160、Time C0.1sec、Temperature20℃。
將DMPO-OOH的ESR信號中最低磁場側的信號高度與內(nèi)標Mn2+信號的高度比(S/M)作為O2-量，如下式所示計算消除活性。
O2-消除活性(％)＝100-[100×(樣品存在下的S/M)/(樣品不存在下的S/M)]結果oolonghomobisflavan A、B、C(二聚體)及三聚體對超氧陰離子自由基(O2-)的消除作用，消除50％的O2-的濃度(IC50)用μM計算。使用表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)作為比較對照，與EGCG相比，證明oolonghomobisflavan類(二聚體、三聚體)的O2-消除活性強。
表2超氧物自由基的消除活性[表2]

權利要求
1.表沒食子兒茶素沒食子酸酯二聚體，其用下式化學式1表示。[化學式1]
2.表沒食子兒茶素沒食子酸酯三聚體，其用下式化學式2表示。[化學式2]
3.脂肪酶抑制劑，其含有表沒食子兒茶素在其苯并二氫吡喃環(huán)的6位或8位通過亞甲基聚合形成的表沒食子兒茶素二聚體及/或表沒食子兒茶素在其苯并二氫吡喃環(huán)的6位及/或8位通過亞甲基聚合形成的表沒食子兒茶素三聚體，其中二聚體用化學式3表示，三聚體用化學式4表示，[化學式3] 化學式3中R1和R2分別獨立地表示H或沒食子?；?，[化學式4] 化學式4中R3、R4及R5分別獨立地表示H或沒食子?；?。
4.抗氧化劑，其含有表沒食子兒茶素在其苯并二氫吡喃環(huán)的6位或8位通過亞甲基聚合形成的表沒食子兒茶素二聚體及/或表沒食子兒茶素在其苯并二氫吡喃環(huán)的6位及/或8位通過亞甲基聚合形成的表沒食子兒茶素三聚體，其中二聚體用化學式5表示，三聚體用化學式6表示，[化學式5] 化學式5中R1和R2分別獨立地表示H或沒食子?；?，[化學式6] 化學式6中R3、R4及R5分別獨立地表示H或沒食子?；?。
5.飲食品，其添加有權利要求3或4所述的表沒食子兒茶素二聚體及/或三聚體。
6.茶飲料，其添加有權利要求3或4所述的表沒食子兒茶素二聚體及/或三聚體。
7.醫(yī)藥組合物，其含有權利要求3或4所述的表沒食子兒茶素二聚體及/或三聚體。
8.制造方法，其為權利要求1所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯二聚體的制造方法，包括在酸存在的條件下使黃烷-3-醇類和甲醛反應。
9.制造方法，其為權利要求2所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯三聚體的制造方法，包括在酸存在的條件下使黃烷-3-醇類和甲醛反應。
全文摘要
本發(fā)明的課題是提供對胰脂肪酶具有高抑制活性、抑制餐后脂肪吸收及/或有助于抑制、預防肥胖的脂肪酶活性抑制劑，以及添加該抑制劑的飲食品，或者提供來自于茶的受歡迎且不破壞香味的脂肪酶抑制劑；此外，本發(fā)明的課題還提供該脂肪酶抑制劑的制造方法；進而本發(fā)明的課題還提供抗氧化劑。作為解決所述課題的手段，在飲食物中添加表沒食子兒茶素的二聚體(oolonghomobisflavan類)或三聚體，由此可以抑制餐后脂肪吸收，并得到抗氧化作用。本發(fā)明化合物的制造，可以通過使表沒食子兒茶素沒食子酸酯和甲醛在酸存在的條件下進行反應而實現(xiàn)。
文檔編號A23L1/30GK1989123SQ20058002518
公開日2007年6月27日 申請日期2005年5月26日 優(yōu)先權日2004年5月27日
發(fā)明者中井正晃, 福井祐子, 淺見純生 申請人:三得利株式會社