專利名稱：處理固體廢物的生物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及用于固體廢物處理的含酵母的生物組合物。本發(fā)明組合物中的酵母已被刺激從而可以行使多種功能，包括降解化學品、減少氣味和抑制微生物。本發(fā)明還涉及制備這些生物組合物的方法，以及使用這些生物組合物處理廢物的方法。
背景技術：
每天工業(yè)生產和農業(yè)生產活動以及城市產生大量固體廢物。如果這些廢物不被正確處理，可以對環(huán)境引起嚴重的和持續(xù)的破壞。在1995-1996年間，美國產生了20800萬噸城市固體廢物。所產生的城市固體廢物中，5600萬噸(27％)通過再利用或堆肥予以回收，3350萬噸(16％)被高溫焚燒，11850萬噸(57％)被掩埋。
城市廢物可以被處理，代替掩埋。一種城市廢物處理方法包括在焚化爐中高溫焚燒廢物。這樣燃燒城市廢物顯著地減少了它的體積。城市廢物焚燒所產生的灰燼必須被妥善處理以防止任何可能的有害組分對環(huán)境的損害。而且，從焚化爐煙囪排出的煙塵必須在允許的控制水平內。
在農業(yè)領域，盡管無機肥料在向人類提供充足農業(yè)產品方面很重要，近年來它對環(huán)境的危害也被認識。無機肥料可以損害土壤。例如，大多數(shù)氮肥可以使土壤酸化，因此不利于植物和其它土壤生物的生長。廣泛使用化學氮肥也可以抑制天然固氮微生物的活性，由此減少了土壤的天然肥性。長期使用無機肥料還可以引起嚴重的環(huán)境污染。例如，由于浸析和土壤浸蝕引起的氮肥和磷肥的丟失，導致土壤和地下水的污染和地表水的富營養(yǎng)化。
另一種農業(yè)廢物是糞肥，如果不妥善儲存或清除，可以造成健康和環(huán)境的威脅。例如，它可以引起環(huán)境污染，即氣味和灰塵；過剩的營養(yǎng)、有機物、鹽類和病原體污染地表水。例如，糞肥中含致病微生物如大腸桿菌、沙門氏菌和志賀氏菌。
總體說來，清除作為不當廢物處理策略結果的污染是一件復雜和艱巨的工作。這項任務的花費也是巨大的。因此，需要廉價和有效地方法來處理無數(shù)人類活動所產生的廢物。
已在許多情況下建議在污染控制中使用生物組合物。利用微生物的生物肥料已被提出作為無機肥料的替代品。天然存在的固氮微生物包括細菌，例如根瘤菌、固氮菌和固氮螺菌(見例如美國專利5,071,462號)和真菌，例如黃曲霉/米曲霉(見例如美國專利4,670,037號)已經(jīng)在生物肥料中使用。天然存在的能夠使磷鹽巖礦石或其它不溶磷酸鹽增溶為可溶性磷酸鹽的微生物也已在生物肥料中使用，與固氮微生物分別使用(例如美國專利5,912,398號)或聯(lián)合使用(例如美國專利5,484,464號)。已發(fā)展出一種基于重組DNA技術的方法，產生用于生物肥料的能夠更有效固氮、分解磷和分解鉀的細菌菌株，見例如美國專利5,578,486號；PCT公開WO95/09814；中國專利公開CN1081662A；CN1082016A；CN1082017A；CN1103060A；和CN1109595A。
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發(fā)明概述本發(fā)明涉及用于固體廢物處理的生物組合物。本發(fā)明的生物組合物包含能夠抑制致病微生物生長、分解不良化學品例如抗生素、殺蟲劑和廢棄化學品、以及減少有機廢物氣味的多個酵母細胞。
在各種實施方案中，本發(fā)明使用的酵母是市場上有售和/或公眾可以獲得的，例如但不限于釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。本發(fā)明的酵母細胞通過在一組電磁場存在的活化條件下培養(yǎng)多個酵母細胞而制備，從而使酵母細胞某些代謝功能變得非常有效。因此，本發(fā)明還涉及該處理組合物的制造方法，包括在活化條件下培養(yǎng)酵母細胞、混合本發(fā)明各種酵母細胞培養(yǎng)物，隨后干燥酵母細胞并包裝最終產品。
特別是，本發(fā)明包括一種處理固體廢物的方法，包括向固體廢物中加入多個酵母細胞，并使酵母細胞降解固體廢物中的抗生素，其中所述酵母細胞是通過在一個或一組具有特定范圍頻率和場強的電磁場中培養(yǎng)酵母細胞而制備的?？梢员槐景l(fā)明酵母細胞降解的抗生素包括但不限于青霉素、金霉素、土霉素、強力霉素、四環(huán)素、鏈霉素、卡那霉素、紅霉素、螺旋霉素、桿菌肽、多粘菌素E、氯霉素、頭孢噻吩、新霉素和新生霉素。
本發(fā)明還包括一種處理固體廢物的方法，包括向固體廢物中加入多個酵母細胞，使酵母細胞降解固體廢物中的不良化學品，其中所述酵母細胞是通過在一個或一組具有特定范圍頻率和場強的電磁場中培養(yǎng)酵母細胞而制備的?？梢员槐景l(fā)明酵母細胞降解的不良化學品包括但不限于甲苯、乙苯、三氯苯酚、二甲苯、苯甲醛、丙醛、庚醛、二氯苯、苯乙酮、對氨苯基胂酸、羅沙胂、呋喃唑酮、地考喹酯、敵百蟲、二硝托胺、敵敵畏、久效磷、樂果、滴滴涕(DDT)和毒殺芬。不良化學品還包括有機和無機鹽類，例如銨化合物、硝酸鹽或亞硝酸鹽以及磷酸鹽。
本發(fā)明進一步包括減少固體廢物氣味的方法，包括向固體廢物中加入多個酵母細胞，使酵母細胞減少固體廢物中有氣味分子的量，其中所述酵母細胞是通過在一個或一組具有特定范圍頻率和場強的電磁場中培養(yǎng)酵母細胞而制備的。有氣味的分子包括但不限于硫化氫、氨、吲哚、甲基吲哚、乙酸、甲胺和對甲酚。
本發(fā)明進一步包括抑制固體廢物中致病細菌生長的方法，包括向固體廢物中加入多個酵母細胞，使酵母細胞抑制固體廢物中致病細菌的生長，其中所述酵母細胞是通過在一個或一組具有特定范圍頻率和場強的電磁場中培養(yǎng)酵母細胞而制備的。致病細菌選自下列金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、炭疽桿菌、結核分支桿菌、沙門氏菌、大腸桿菌、弧菌、志賀菌、肉毒桿菌和產氣莢膜桿菌。
本發(fā)明的方法可以通過在固體廢物處理中聯(lián)合使用酵母細胞來進行。將本發(fā)明的生物組合物加入固體廢物中，所述生物組合物包含至少下列酵母細胞組分中的一種(a)第一個酵母細胞組分，包含多個降解固體廢物中抗生素的酵母細胞；(b)第二個酵母細胞組分，包含多個降解固體廢物中不良化學品的酵母細胞；(c)第三個酵母細胞組分，包含多個減少固體廢物中有氣味分子的量的酵母細胞；和(d)第四個酵母細胞組分，包含多個抑制固體廢物中致病細菌生長的酵母細胞。處理所需的時間可以通過監(jiān)控固體廢物中抗生素、不良化學品、致病細菌和有氣味分子的水平憑經(jīng)驗確定，可以在幾個小時、幾天、以及兩個或多個星期的范圍內變化。
本發(fā)明進一步包括在處理、儲存、加工、再利用或清除固體廢物中使用本發(fā)明的生物組合物。
附圖簡述

圖1酵母細胞的活化。1酵母細胞培養(yǎng)物；2容器；3電磁場源。
圖2酵母細胞適應土壤種類。4輸入電極；5容器；6電極；7酵母細胞培養(yǎng)物；8電磁場源；9溫度控制器。
發(fā)明詳細描述本發(fā)明提供包含酵母細胞的生物組合物。本發(fā)明還提供制備生物組合物的方法以及使用生物組合物的方法。
本發(fā)明的生物組合物用于固體廢物處理，使得通常與其儲存、運輸、處理、再利用和/或清除相關聯(lián)的健康風險和對環(huán)境的影響減少。使用這些組合物可以降低社區(qū)、企業(yè)或農場處理固體廢物的總成本，并使某些種類固體廢物的再利用變得可行。此處所用的固體廢物處理指的是改變固體廢物的物理、化學或生物學特點的過程，與未處理的固體廢物相比，使之在儲存、運輸、再利用、操作時不那么令人反感、或者對健康或環(huán)境的威脅減少。處理通常使廢物的危害減少，或使固體廢物的運輸、儲存、操作或再利用更安全。
根據(jù)本發(fā)明，生物組合物包括多個酵母細胞組分。每個酵母細胞組分是一群包括能夠執(zhí)行一種或多種屬于下列種類所需功能的多個酵母細胞(1)抑制病原體的生長，(2)降解不良化學品，或(3)減少有機物的氣味。
在一個實施方案中，本發(fā)明的一個生物組合物包含至少一個能夠執(zhí)行三種功能中的一種的酵母細胞組分。在優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的生物組合物包含可以提供全部三種功能的酵母細胞組分。因此，優(yōu)選的生物肥料組合物包含至少三種不同酵母細胞組分。酵母細胞組分的不同替代配方也在考慮之中。
此處所用的術語“固體廢物”泛指任何種類因為已實現(xiàn)其目的或者是無用的副產品而被丟棄的材料，包括人類和動物排泄的生理廢物。固體廢物的來源包括居住、商業(yè)、農業(yè)和工業(yè)活動。非工業(yè)和非衣業(yè)固體廢物例如從市區(qū)收集的廢物或垃圾，含丟棄的食物或制作食物時使用的材料，以及其它多種干材料如紙張、紡織品或塑料。特別是在有餐館和飯店的住宅區(qū)和商業(yè)區(qū)，固體廢物的主要種類，這里稱為“垃圾”，主要含可分解的食品廢物。支持致病生物生長、由于腐爛而變得惡臭的垃圾可以被本發(fā)明生物組合物有效處理。適合本發(fā)明生物組合物處理的固體廢物種類的特點是有機含量高。
另一種可以被本發(fā)明組合物處理的固體廢物是污泥。此處所用的術語“污泥”廣泛包括任何在污水儲存和/或處理過程中從懸浮液沉淀下來的固體物質，例如但不限于廢污水池中的殘渣、城市污水處理場的殘渣、或污水濃縮物。術語“污泥”還包括半固體物，以及污水和沉淀的混合物。因此，該術語包括具有廣泛粘度、密度和水含量范圍的污泥，以及被部分處理或穩(wěn)定的污泥。根據(jù)來源，污泥可以包含多種不良化學品，如果不被妥善處理對環(huán)境會造成不利影響。污泥有惡臭，并支持致病生物的生長。
本發(fā)明的生物組合物還能夠處理農業(yè)活動產生的廢物。典型的，動物在以下活動中產生廢物，例如但不限于農場、農田、屠宰場和市場。大量動物排泄物的不斷產生和積聚形成了惡臭的環(huán)境，并因為存在致病微生物而對人和家畜的健康產生威脅。農業(yè)廢物也可以含不良化學品，例如抗生素飼料添加劑、化學肥料、農藥和除草劑，如果廢物不被妥善處理，它們可以污染環(huán)境。
此處所用術語“動物糞肥”廣泛包括含飼養(yǎng)場動物的糞便和尿液的有機材料，伴有或不伴傳統(tǒng)上用來給土地施肥的例如稻草、干草、墊草等垃圾。禽糞肥包括但不限于馴化的鳥類如雞、鴨、火雞、鵝、鵪鶉、幼鴿、鴕鳥等產生的糞肥。禽糞肥包括未馴化的鳥類產生的排泄物或鳥糞。此處所用牲畜糞肥包括馴化的反芻哺乳動物如乳?；蛉馀．a生的廢物。此處所用術語“牲畜糞肥”不僅限于牛，還包括其它食草動物，主要是為了它們的奶、肉、皮、毛和毛皮而飼養(yǎng)的。牲畜糞肥包括但不限于水牛、野牛、牦牛、馬、驢、騾子、綿羊、山羊、駱駝等產生的糞肥。牲畜糞肥包括由未馴化的牲畜產生的排泄物。此處所用術語“豬糞肥”包括但不限于野豬、狗、家豬等產生的糞肥。其它農業(yè)廢物包括農作物殘渣、甘蔗渣、水果和蔬菜包裝設備產生的廢物、動物產品包裝設備產生的廢物，包括動物屠宰后的尸體。
在各種實施方案中，本發(fā)明的生物組合物在處理垃圾、污泥和糞肥方面特別有效。
多種情況下，城市廢物暫時儲存在廢物中轉站。在中轉站，廢物從當?shù)厥占€上卸下來，有時根據(jù)種類儲存。然后將廢物裝在較大的卡車或有軌車上運輸至城市廢物處理或清除場所。通常，根據(jù)固體廢物的來源，通過揀選和分類操作將玻璃、金屬、木頭和其它無機或不可降解的材料從高有機含量的廢物中分離。這些操作可以用再利用/垃圾清除工業(yè)所熟知的方法進行，例如利用固體廢物的物理特點如大小和密度的機械性操作。粉碎或磨碎可以減小廢物的大小成為細粒，所得大小均勻的材料更容易被操作，例如混合和運輸。由于糞肥、污泥或垃圾組成的不同，對一批廢物材料取樣進行分析，檢測該批中致病生物和不良化學品的量和種類可能是又意義的。
雖然以下術語被認為已經(jīng)在本領域有明確的含義，但下面還是對它們進行闡明以利于解釋本發(fā)明。
此處所用的短語“抑制病原體的生長”指由于固體廢物樣本中存在本發(fā)明的酵母細胞，經(jīng)過一段時間使樣本中的致病微生物數(shù)目減少或不增加。需要了解的是，沒有這些酵母細胞，樣本中病原體的數(shù)目會自然增加。許多這些微生物引起人和動物的疾病，可以包括細菌，例如，埃希氏菌屬、沙門氏菌屬、志賀菌屬、分枝桿菌屬、葡萄球菌屬、芽孢桿菌屬、鏈球菌屬和雙球菌屬的種類。
此處所用的短語“降解不良化學品”指使不良化合物如固體廢物中的環(huán)境毒素轉化為無活性形式的生物或生化過程，例如將這些化合物分解為較小分子量的化合物?？股爻４嬖谟诩S肥中，不希望這些化合物在由糞肥制成的肥料中出現(xiàn)，因為有被人攝入的潛在危險，例如通過食用使用含污染有機物的肥料生長的蔬菜，以及環(huán)境中抗生素抗性的可能傳播。很多抗生素可被加入動物飼料中以保護各種家畜，例如雞、火雞和豬，免于細菌和寄生蟲疾病，并促進生長。大量抗生素飼料添加劑被動物排泄，從而在糞肥和污泥中積聚。許多種抗生素在動物手術中使用，例如但不限于氨基糖苷類、四環(huán)素類、β-內酰氨類、糖肽類和大環(huán)內酯類。批準在美國農場使用的抗生素實例包括，但不限于，桿菌肽、亞甲基雙水楊酸酯、桿菌肽鋅、班貝霉素、土霉素、金霉素、青霉素、泰洛星/磺胺二甲嘧啶、羅沙胂、nitrasone、莫能星、拉沙洛西、卡巴多司、硫姆林、潮霉素B、制霉菌素、新生霉素、磺胺地索辛、奧美普林、林可霉素、芬苯達唑和維吉霉素。組合物中這些抗生素的存在以及量可以通過本領域所知的任何方法來檢測，例如高效液相色譜(HPLC)。
此處所用的短語“減少有機物的氣味”指使固體廢物有機物中的一種或多種有氣味化合物濃度減少的過程。有氣味化合物，例如但不限于硫化氫、氨、吲哚、糞臭素(即3-甲基-1H-吲哚)、對甲酚和有機酸，已知都是固體廢物惡臭性質的促成因素。這些惡臭化合物在例如家禽糞肥和接觸糞肥的空氣樣本中的濃度可以通過本領域熟知的任何方法檢測，包括但不限于氣相色譜法或質譜法。氣味是生物通過嗅覺器官感知的味道。與固體廢物相關的氣味強度的減少可以主觀檢測。已知多種方法和技術可以測量氣味的強度。一種主觀測量氣味強度的方法是測量對人或動物試驗者來說氣味無法察覺或不確定所需要的稀釋度。另外，還可以使用識別閾值，是氣味特點可以被識別的較高濃度。任何客觀或主觀檢測氣味強度的方法或技術都可以用來監(jiān)測本發(fā)明組合物和方法的作用。
本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在一定培養(yǎng)條件下，酵母可以被活化，某些代謝功能變得非常有效，使活化的酵母具有抑制病原體生長、降解不良化學品或減少有機物氣味的能力。
根據(jù)本發(fā)明，生物肥料組合物的酵母細胞組分是通過將多個酵母細胞在一個或連續(xù)多個交變電磁場存在下在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間而制備的。培養(yǎng)過程使酵母孢子萌發(fā)、酵母細胞生長和分裂，可以分批進行或連續(xù)進行。此處所用的術語“交變電磁場”、“電磁場”或“EM場”是同義詞。本發(fā)明所用的電磁場可以通過本領域熟知的多種方法產生。圖1分別描繪了示范性裝置的簡圖。電磁波源(3)產生所需頻率和場強的電磁場，該電磁波源包括一個或多個可以產生電磁波的信號發(fā)生器，優(yōu)選正弦波，優(yōu)選頻率范圍是30MHz-3000MHz。這樣的信號發(fā)生器為本領域所熟知。也可以使用能夠產生較窄頻率范圍信號的信號發(fā)生器。如果需要，還可以使用信號放大器以增加信號輸出，從而增加電磁場的強度。
電磁場可以通過多種方式作用于培養(yǎng)物，包括將酵母細胞緊靠與電磁波源相連的信號發(fā)射器放置。在一個實施方案中，由浸沒于酵母細胞培養(yǎng)物(1)中的電極形式的信號發(fā)射器施加電磁場。在優(yōu)選的實施方案中，一個電極是金屬板，另一個電極包括一組安裝于容器(2)內部的金屬線，使電磁場的能量能夠均勻分布于培養(yǎng)物中。所用電極線的數(shù)目取決于培養(yǎng)物的體積和電極線的直徑。例如，5000ml體積的培養(yǎng)物，每100ml培養(yǎng)物可以使用一根直徑在0.1到1.2mm之間的電極線；對于體積超過1000L的培養(yǎng)物，每1000L培養(yǎng)物可以使用一根直徑在3到30mm之間的電極線。見圖1。
雖不受任何理論或機制的束縛，本發(fā)明的發(fā)明人認為這些培養(yǎng)條件可以活化或加強酵母細胞的一個或一組基因的表達，從而使該酵母細胞的某些代謝活動變得更有效，產生相應的所需結果。
在各種實施方案中，酵母屬(Saccharomyces)、裂殖酵母屬(Schizosaccharomyces)、擲孢酵母屬(Sporobolomyces)、球擬酵母屬(Torulopsis)、絲孢酵母屬(Trichosporon)、維克氏酵母屬(Wickerhamia)、ashbya、芽生菌屬(Blastomyces)、假絲酵母屬(Candida)、固囊酵母屬(Citeromyces)、Crebrothecium、隱球酵母屬(Cryptococcus)、德巴利酵母屬(Debaryomyces)、擬內孢霉屬(Endomycopsis)、地霉屬(Geotrichum)、漢遜酵母屬(Hansenula)、克勒克酵母屬(Kloeckera)、油脂酵母屬(Lipomyces)、畢赤酵母屬(Pichia)、紅冬孢酵母屬(Rhodosporidium)和紅酵母屬(Rhodotorula)的酵母可以用于本發(fā)明。
非限制性酵母菌株的實例包括釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae Hansen) ACCC2034、ACCC2035、ACCC2036、ACCC2037、ACCC2038、ACCC2039、ACCC2040、ACCC2041、ACCC2042、AS2.1、AS2.4、AS2.11、AS2.14、AS2.16、AS2.56、AS2.69、AS2.70、AS2.93、AS2.98、AS2.101、AS2.109、AS2.110、AS2.112、AS2.139、AS2.173、AS2.174、AS2.182、AS2.196、AS2.242、AS2.336、AS2.346、AS2.369、AS2.374、AS2.375、AS2.379、AS2.380、AS2.382、AS2.390、AS2.393、AS2.395、AS2.396、AS2.397、AS2.398、AS2.399、AS2.400、AS2.406、AS2.408、AS2.409、AS2.413、AS2.414、AS2.415、AS2.416、AS2.422、AS2.423、AS2.430、AS2.431、AS2.432、AS2.451、AS2.452、AS2.453、AS2.458、AS2.460、AS2.463、AS2.467、AS2.486、AS2.501、AS2.502、AS2.503、AS2.504、AS2.516、AS2.535、AS2.536、AS2.558、AS2.560、AS2.561、AS2.562、AS2.576、AS2.593、AS2.594、AS2.614、AS2.620、AS2.628、AS2.631、AS2.666、AS2.982、AS2.1190、AS2.1364、AS2.1396、IFFI1001、IFFI1002、IFFI1005、IFFI1006、IFFI1008、IFFI1009、IFFI1010、IFFI1012、IFFI1021、IFFI1027、IFFI1037、IFFI1042、IFFI1043、IFFI1045、IFFI1048、IFFI1049、IFFI1050、IFFI1052、IFFI1059、IFFI1060、IFFI1063、IFFI1202、IFFI1203、IFFI1206、IFFI1209、IFFI1210、IFFI1211、IFFI1212、IFFI1213、IFFI1215、IFFI1220、IFFI1221、IFFI1224、IFFI1247、IFFI1248、IFFI1251、IFFI1270、IFFI1277、IFFI1287、IFFI1289、IFFI1290、IFFI1291、IFFI1292、IFFI1293、IFFI1297、IFFI1300、IFFI1301、IFFI1302、IFFI1307、IFFI1308、IFFI1309、IFFI1310、IFFI1311、IFFI1331、IFFI1335、IFFI1336、IFFI1337、IFFI1338、IFFI1339、IFFI1340、IFFI1345、IFFI1348、IFFI1396、IFFI1397、IFFI1399、IFFI1411、IFFI1413；釀酒橢圓酵母(Sacharomyces cerevisiae Hansen Var.ellipsoideus(Hansen)Dekker)ACCC2043、AS2.2、AS2.3、AS2.8、AS2.53、AS2.163、AS2.168、AS2.483、AS2.541、AS2.559、AS2.606、AS2.607、AS2.611、AS2.612；薛瓦酵母(Saccharomyces chevalieriGuillermond)AS2.131、AS2.213；德氏酵母(Saccharomyces delbrueckii)AS2.285；Saccharomyces delbrueckii Lindner var.mongolicus Lodder etvan Rij AS2.209、AS2.1157；少孢酵母(Saccharomyces exiguus Hansen)AS2.349、AS2.1158；發(fā)酵性酵母(Saccharomyces fermentati(Saito)Lodder et van Rij)AS2.286、AS2.343；Saccharomyces logos van laer etDenamur ex Jorgensen AS2.156、AS2.327、AS2.335；蜂蜜酵母(Saccharomyces mellis Lodder et Kreger Van Rij)AS2.195；Saccharomyces microellipsoides Osterwalder AS2.699；卵形酵母(Saccharomyces oviformis Osterwalder)AS2.100；羅氏酵母(Saccharomyces rosei(Guilliermond)Lodder et kreger van Rij)AS2.287；魯氏酵母(Saccharomyces rouxii Boutroux)AS2.178、AS2.180、AS2.370、AS2.371；清酒酵母(Saccharomyces sake Yabe)ACCC2045；阿保利酵母(Candida arborea)AS2.566；CandidaKrusei(Castellani)Berkhout AS2.1045；蘭姆啤酒假絲酵母(Candidalambica(Lindner et Genoud)van.Uden et Buckley)AS2.1182；解脂假絲酵母(Candida lipolytica (Harrison)Diddens et Lodder)AS2.1207、AS2.1216、AS2.1220、AS2.1379、AS2.1398、AS2.1399、AS2.1400；近平滑肌假絲酵母(Candida parapsilosis(Ashford)Langeron et Talice)AS2.590；近平滑肌假絲酵母(Candida parapsilosis(Ashford)et TaliceVar.intermedia Van Rij et Verona)AS2.491；美極假絲酵母(Candidapulcherriman(Lindner)Windisch)AS2.492；Candida rugousa(Anderson)Diddens et Loddeer AS2.511、AS2.1367、AS2.1369、AS2.1372、AS2.1373、AS2.1377、AS2.1378、AS2.1384；熱帶假絲酵母(Candidatropicalis (Castellani)Berkout)ACCC2004、ACCC2005、ACCC2006、AS2.164、AS2.402、AS2.564、AS2.565、AS2.567、AS2.568、AS2.617、AS2.1387；產脘假絲酵母(Candida utilis Henneberg Lodder et KregerVan Rij) AS2.120、AS2.281、AS2.1180；Crebrotheciumashbyii(Guillermond)Routein AS2.481、AS2.482、AS2.1197；白地霉(Geotrichum candidum Link)ACCC2016、AS2.361、AS2.498、AS2.616、AS2.1035、AS2.1062、AS2.1080、AS2.1132、AS2.1175、AS2.1183；異常漢遜酵母(Hansenula anomala(Hansen)H et P sydow)ACCC2018、AS2.294、AS2.295、AS2.296、AS2.297、AS2.298、AS2.299、AS2.300、AS2.302、AS2.338、AS2.339、AS2.340、AS2.341、AS2.470、AS2.592、AS2.641、AS2.642、AS2.635、AS2.782、AS2.794；Hansenula arabitolgens Fang AS2.887；Hansenula jadinii WickerhamACCC2019；土星漢遜酵母(Hansenula saturnus(Klocker)H et Psydow)ACCC2020；Hansenula schneggii(Weber)Deker AS2.304；Hansenula subpelliculosa Bedford AS2.738、AS2.740、AS2.760、AS2.761、AS2.770、AS2.783、AS2.790、AS2.798、AS2.866；檸檬形克勒克酵母(Kloeckera apiculata(Reess emend.Klocker)Janke)ACCC2021、ACCC2022、ACCC2023、AS2.197、AS2.496、AS2.711、AS2.714；斯達氏脂肪酵母(Lipomyces starkeyi Lodder et Van Rij)ACCC2024、AS2.1390；粉狀畢赤酵母(Pichia farinose(Lindner)Hansen)ACCC2025、ACCC2026、AS2.86、AS2.87、AS2.705、AS2.803；膜醭畢赤酵母(Pichia membranaefaciens Hansen)ACCC2027、AS2.89、AS2.661、AS2.1039；Rhodosporidium toruloides Banno ACCC2028；粘紅酵母(Rhodotorula glutinis(Fresenius)Harrison)ACCC2029、AS2.280、ACCC2030、AS2.102、AS2.107、AS2.278、AS2.499、AS2.694、AS2.703、AS2.704、AS2.1146；小紅酵母(Rhodotorula minuta(Saito)Harrison)AS2.277；深紅酵母(Rhodotorula rubar(Demme)Lodder)ACCC2031、AS2.21、AS2.22、AS2.103、AS2.105、AS2.108、AS2.140、AS2.166、AS2.167、AS2.272、AS2.279、AS2.282；卡氏酵母(Saccharomyces carlsbergensis Hansen)ACCC2032、ACCC2033、AS2.113、AS2.116、AS2.118、AS2.121、AS2.132、AS2.162、AS2.189、AS2.200、AS2.216、AS2.265、AS2.377、AS2.417、AS2.420、AS2.440、AS2.441、AS2.443、AS2.444、AS2.459、AS2.595、AS2.605、AS2.638、AS2.742、AS2.745、AS2.748、AS2.1042；葡萄汁酵母(Saccharomycesuvarum Beijer)IFFI1023、1FFI1032、IFFI1036、IFFI1044、IFFI1072、IFFI1205、IFFI1207；魏氏酵母(Saccharomyces willianus Saccardo)AS2.5、AS2.7、AS2.119、AS2.152、AS2.293、AS2.381、AS2.392、AS2.434、AS2.614、AS2.1189；酵母(Saccharomyce sp.)AS2.311；路氏酵母(Saccharomyces ludwigii Hansen)ACCC2044、AS2.243、AS2.508；Saccharomyces sinenses Yue AS2.1395；八孢裂殖酵母(Schizosaccharomyces octosporus Beijerinck)ACCC2046、AS2.1148；果酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe Linder)ACCC2047、ACCC2048、AS2.248、AS2.249、AS2.255、AS2.257、AS2.259、AS2.260、AS2.274、AS2.994、AS2.1043、AS2.1149、AS2.1178、IFFI1056；玫瑰色擲孢酵母(Sporobolomyces roseus Kluyver et van Niel)ACCC2049、ACCC2050、AS2.619、AS2.962、AS2.1036、ACCC2051、AS2.261、AS2.262；白球擬酵母(Torulopsis candida(Saito)Lodder)ACCC2052、AS2.270；Torulopsis famta(Harrison)Lodder et van RijACCC2053、AS2.685；Torulopsis globosa(Olson et Hammer)Lodder etvan Rij ACCC2054、AS2.202；Torulopsis inconspicua Lodder et van RijAS2.75；Trichosporon behrendii Loddcr et Kreger van Rij ACCC2055、AS2.1193；頭狀絲孢酵母(Trichosporon capitatum Diddens et Lodder)ACCC2056、AS2.1385；Trichosporon cutaneum(de Beurm et al.)OtaACCC2057、AS2.25、AS2.570、AS2.571、AS2.1374；維克氏酵母(Wickerhamia fluoresens(Soneda)Soneda)ACCC2058、AS2.1388。
已知根據(jù)本發(fā)明可被活化或誘導、并包括在本發(fā)明內的某些酵母種對人和/或其它活生物體具有致病性。例如Ashbya gossypii、皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)、白假絲酵母(Candida albicans)、Candida parakrusei、熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)、馬特立坦固囊酵母(Citeromyces matritensis)、Crebrothecium ashbyii、羅倫隱球菌(Cryptococcus laurentii)、新型隱球酵母(Cryptococcua neoformans)、漢遜德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)、Debaryomyces kloeckeri、德巴利酵母菌(Debaryomyces sp.)和扣囊擬內孢霉(Endomycopsisfibuligera)。在某些情況下，本發(fā)明生物組合物中不優(yōu)選使用這樣的致病酵母，例如，如果這種使用是在開放場地，會危及人類和/或活生物體的健康。
通常優(yōu)選酵母屬的酵母。釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的菌株中Hansen釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae Hansen)為優(yōu)選菌株。最優(yōu)選的酵母菌株是保藏在中國普通微生物菌種保藏中心(CGMCC)、具有如下保藏號的釀酒酵母菌株AS2.504、AS2.558、AS2.413、AS2.397、AS2.69、AS2.109、AS2.607、AS2.516、AS2.561、AS2.422、AS2.393、AS2.631、AS2.982、AS2.560、AS2.467、AS2.415、AS2.375、AS2.628、AS2.1190、AS2.562、AS2.463、AS2.409、AS2.379、AS2.666、AS2.631、AS2.182、AS2.431、AS2.606、AS2.53、AS2.611、AS2.414、AS2.576、AS2.483、IFFI1211、IFF11293、IFFI1308、IFFI1210、IFFI1213、IFFI1307、IFFI1206、IFFI1052、IFFI1301、IFFI1291、IFFI1202、IFFI1021、IFFI1059、IFFI1052、IFFI1441、IFFI1008、IFFI1220、IFFI1302和IFFI1023。
通常，本發(fā)明使用的酵母菌株可以從私人或公共實驗室培養(yǎng)物中獲得，或者從公共菌種保藏中心獲得，如美國典型培養(yǎng)物保藏中心，馬納薩斯，大學路10801號，維吉尼亞20110-2209；以及中國科學院微生物研究所中國微生物保藏管理委員會中國普通微生物菌種保藏中心(CGMCC)，中國北京海淀區(qū)2714信箱，郵編100080。
雖然優(yōu)選使用純酵母菌株開始制備本發(fā)明酵母細胞組分，但并不限于此。每種酵母細胞組分可以通過不同種或菌株的酵母細胞混合培養(yǎng)獲得。酵母細胞組分的成分可以用本領域熟知的標準酵母鑒定技術來確定。
在本發(fā)明條件下培養(yǎng)前后活化酵母發(fā)揮所需功能的能力和效率可以通過本領域所知的方法容易地檢測。例如，HPLC或質譜法可以用來檢測和分析固體廢物樣本中多種有機分子。本領域熟知的微生物學方法可以用來檢測和計數(shù)樣本中活微生物數(shù)目以及微生物總數(shù)。
當處理細菌計數(shù)相對高的有機糞肥時，可以將生物組合物制備成主要含抑制細菌生長的酵母細胞。當用生物組合物處理含不良化學品的固體廢物時，可以將生物組合物制備成主要含降解不良化學品的酵母細胞。因此，該生物組合物可以用于城市、商業(yè)、衣業(yè)和工業(yè)機構設施所遇到的多種情形。本發(fā)明還可以供家庭使用，特別在農村地區(qū)。
本發(fā)明生物組合物可以直接施用于固體廢物。正如相關領域技術人員所知，多種方法和設備可以用來將這些酵母與固體廢物混合。在一個實施方案中，本發(fā)明酵母的培養(yǎng)液被直接加入需要處理的固體廢物中。在另一個實施方案中，本發(fā)明酵母的干粉與固體廢物混合，然后再加入水。該生物組合物可以通過撒播器、噴霧器和其它機械化方法施用和與固體廢物混合，這些方法可以是自動化的。所用生物組合物的量部分取決于當時的情形和固體廢物的種類，還可以憑經(jīng)驗決定。但是為了獲得有效處理，理想的情況是每立方米固體廢物使用約300到600g干重(濕度小于10％)的生物組合物。首先將酵母細胞與水按照每1000g酵母(干重)約30升的比例混合，然后在施用于固體廢物之前培育12到24小時。處理的效果，例如減少氣味或細菌計數(shù)，約在施用24到72小時后產生。雖然不是必須，本發(fā)明生物組合物還可以與其它種類的除臭劑、消毒劑和解毒劑聯(lián)合或交替使用。
5.1-5.4節(jié)分別描述的是用來降解抗生素、抑制病原體、降解不良化學品和減少氣味的酵母細胞組分。描述了每種酵母細胞組分的制備方法。5.6節(jié)描述了本發(fā)明生物組合物的制備。在本發(fā)明各種實施方案中，使用了酵母操作、轉移和儲存的標準技術。進行本發(fā)明的制備過程時，無菌條件和潔凈環(huán)境雖然不是必須的，但是有利的。
5.1降解抗生素的酵母細胞本發(fā)明提供能夠降解糞肥和污泥中常見抗生素的酵母細胞。
根據(jù)本發(fā)明，酵母細胞降解抗生素的能力是通過將酵母細胞在電磁場存在下在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)而活化或強化。所得酵母細胞可以作為本發(fā)明生物固體廢物處理組合物的一個組分使用。
活化或強化酵母降解抗生素能力的電磁場頻率通常在70MHz到600MHz的范圍內。酵母細胞生長足夠長時間后，可以通過本領域熟知的方法檢測酵母細胞增強的降解一種或多種抗生素的能力。可以被本發(fā)明酵母降解的抗生素包括但不限于β內酰氨類、四環(huán)素類、多肽類、糖肽類、氨基糖苷類和大環(huán)內酯類家族的分子。
本發(fā)明制備降解抗生素酵母的方法是在液體培養(yǎng)基中進行的。培養(yǎng)基中含酵母細胞可吸收的營養(yǎng)。通常，糖類等碳水化合物，例如蔗糖、葡萄糖、果糖、右旋糖、麥芽糖、木糖等以及淀粉，可以單獨或聯(lián)合作為培養(yǎng)基中可吸收碳的來源使用。培養(yǎng)基中一種或多種碳水化合物源的精確用量部分取決于培養(yǎng)基中的其它成分，但通常介于培養(yǎng)基重量的約0.1％到5％之間，優(yōu)選介于約0.5％到2％之間，最優(yōu)選約0.8％。這些碳源在培養(yǎng)基中可以單獨或聯(lián)合使用。
可以加入培養(yǎng)基中的無機鹽包括能夠提供鈉、鈣、磷酸根、硫酸根、碳酸根等離子的常規(guī)鹽。營養(yǎng)性的無機鹽的非限制性實例有(NH4)2HPO4、CaCO3、MgSO4、NaCl和CaSO4。
表1降解抗生素的酵母的培養(yǎng)基組成
含抗生素的提取物是通過將500g新鮮廢物如糞肥、污泥分散于約600ml溫水(35-40℃)中并在30-37℃培育24小時、過濾液體去除顆粒物質而制備的。如果提取物只含有微量的某種抗生素，可以向提取物中加入適量的該種抗生素。
需要注意的是，表1中提供的培養(yǎng)基組成不是限制性的。本領域的技術人員可以根據(jù)實踐和經(jīng)濟的考慮對培養(yǎng)基進行多種改進，例如培養(yǎng)的規(guī)模和培養(yǎng)基組分的本地供應。
培養(yǎng)過程可以首先以細胞密度102-105細胞/ml將1ml挑選的酵母菌株接種物接種于100ml培養(yǎng)基中，優(yōu)選接種密度為3×102-104細胞/ml。該過程可以根據(jù)需要按比例增減。酵母培養(yǎng)物可以在一個電磁(EM)場或一組電磁場存在下生長。如果施加一組電磁場，當從一個電磁場切換到另一個電磁場時，酵母細胞可以在同一個容器中、使用同一套電磁波發(fā)生器和發(fā)射器。
電磁場可以通過本領域所知的任何方法施用，每個電磁場的頻率在70.000到100.000MHz范圍，優(yōu)選410.000到620.000MHz。電磁場的場強在40到250mV/cm范圍。如果施用一組電磁場，每個電磁場可以具有上述范圍內不同頻率，或上述范圍內不同場強，或上述范圍內的不同頻率和不同場強。在一個優(yōu)選實施方案中，一組中開始的電磁場與隨后電磁場相比EM場強較低，這樣酵母細胞培養(yǎng)物就被置于場強逐漸增加的電磁場中。雖然一組中應用的電磁場數(shù)目可以是任意的，但優(yōu)選的將酵母培養(yǎng)物置于一組總數(shù)為2、3、4、5、6、7、8、9或10個不同電磁場中。
雖然酵母細胞在電磁場存在下甚至培養(yǎng)幾個小時就可以被活化，但酵母細胞可以在電磁場存在下繼續(xù)培養(yǎng)一段時間(例如2周或更多周)，通常優(yōu)選的，應使活化的酵母細胞在一個或多個電磁場存在下繁殖和生長共約144-384小時。
例如，使用圖1所示的示范性裝置，電磁波的輸出振幅在8.5-85mV/cm范圍，通常約50mV/cm。第一周期培養(yǎng)后，將酵母細胞在除了振幅增加至150-250mV范圍內更高水平(通常約200mV)的基本相同的條件下進一步培養(yǎng)另一周期。本發(fā)明的方法在約25到30℃范圍進行；但是，優(yōu)選在28℃進行。培養(yǎng)過程優(yōu)選在溶解氧濃度為0.025到0.8mol/m3的條件下進行，優(yōu)選0.4mol/m3。氧氣水平可以通過本領域技術人員所知的任何常規(guī)方法來控制，包括但不限于攪拌和/或發(fā)泡。
培養(yǎng)過程結束時，酵母細胞可以通過本領域所知的多種方法從培養(yǎng)物中回收，并在低于約0℃到4℃的溫度下儲存。回收的酵母細胞可以經(jīng)干燥處理以粉末的形式儲存。
為了檢測活化的酵母細胞對抗生素化合物的活性，可以用本領域熟知的方法如HPLC測量不同時間點和不同培養(yǎng)條件下樣本中抗生素化合物的量。例如，制備含已知濃度的抗生素樣本(每升100mg)。然后，將0.1ml活化的和未活化的酵母(至少107細胞/ml)加入100升含抗生素的樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過用HPLC測量樣本，檢測和比較提取物中殘留的抗生素的量。
該方法通常適用于許多種類的抗生素。在具體的實施方案中，描述了針對特定種類抗生素的最佳方法。
分解青霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解青霉素如青霉素G和氯唑西林的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到100.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98和100MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.399的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)77MHz、48mV/cm 15小時；83MHz、48mV/cm 15小時；90MHz、48mV/cm 15小時；96MHz、48mV/cm 15小時；77MHz、200mV/cm 30小時；83MHz、200mV/cm30小時；90MHz、200mV/cm 30小時；96MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對青霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的青霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含青霉素濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中青霉素的量減少了56.5％以上。
分解金霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解金霉素如金霉素和鹽酸金霉素的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.748的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)70MHz、48mV/cm 15小時；73MHz、48mV/cm 15小時；88MHz、48mV/cm 15小時；98MHz、48mV/cm 15小時；70MHz、200mV/cm 30小時；73MHz、200mV/cm30小時；88MHz、200mV/cm 30小時；98MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對金霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的金霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含金霉素的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中金霉素的量減少了62.3％以上。
分解土霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解土霉素如鹽酸土霉素的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.101的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)70MHz、48mV/cm 15小時；74MHz、48mV/cm15小時；88MHz、44mV/cm 15小時；98MHz、48mV/cm 15小時；70MHz、200mV/cm 30小時；74MHz、200mV/cm 30小時；88MHz、200mV/cm 30小時；98MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對土霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的土霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含土霉素的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中土霉素的量減少了65.5％以上。
分解強力霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解強力霉素的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.417的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)71MHz、48mV/cm 15小時；73MHz、48mV/cm 15小時；77MHz、48mV/cm 15小時；88MHz、48mV/cm 15小時；71MHz、200mV/cm 30小時；73MHz、200mV/cm 30小時；77MHz、200mV/cm30小時；88MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對強力霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的強力霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含強力霉素濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中強力霉素的量減少了54.9％以上。
分解四環(huán)素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解四環(huán)素的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.70的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)70MHz、48mV/cm 15小時；75MHz、48mV/cm 15小時；82MHz、48mV/cm 15小時；85MHz、48mV/cm 15小時；70MHz、200mV/cm 30小時；75MHz、200mV/cm 30小時；82MHz、200mV/cm30小時；85MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對四環(huán)素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的四環(huán)素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含四環(huán)素的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中四環(huán)素的量減少了67.6％以上。
分解鏈霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解鏈霉素的酵母細胞制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.441的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)70MHz、48mV/cm 15小時；73MHz、48mV/cm 15小時；80MHz、48mV/cm 15小時；96MHz、48mV/cm15小時；70MHz、200mV/cm 30小時；73MHz、200mV/cm 30小時；80MHz、200mV/cm30小時；96MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對鏈霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的鏈霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含鏈霉素的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中鏈霉素的量減少了77.8％以上。
分解卡那霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解卡那霉素的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.336的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)71MHz、48mV/cm 15小時；78MHz、48mV/cm 15小時；86MHz、48mV/cm 15小時；98MHz、48mV/cm 15小時；71MHz、200mV/cm 30小時；78MHz、200mV/cm 30小時；86MHz、200mV/cm30小時；98MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對卡那霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的卡那霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含卡那霉素濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中卡那霉素的量減少了68.7％以上。
分解紅霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解紅霉素的酵母細胞制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.422的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)73MHz、48mV/cm 15小時；79MHz、48mV/cm 15小時；88MHz、48mV/cm 15小時；98MHz、48mV/cm 15小時；73MHz、200mV/cm 30小時；79MHz、200mV/cm 30小時；88MHz、200mV/cm30小時；98MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對紅霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的紅霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含紅霉素濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中紅霉素的量減少了72.7％以上。
分解螺旋霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解螺旋霉素的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.620的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)70MHz、48mV/cm 15小時；77MHz、48mV/cm 15小時；84MHz、48mV/cm 15小時；93MHz、48mV/cm 15小時；70MHz、200mV/cm 30小時；77MHz、200mV/cm 30小時；84MHz、200mV/cm30小時；93MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對螺旋霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的螺旋霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含螺旋霉素濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中螺旋霉素的量減少了66.8％以上。
分解桿菌肽的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解桿菌肽的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.486的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)75MHz、48mV/cm 15小時；78MHz、48mV/cm 15小時；81MHz、48mV/cm 15小時；95MHz、48mV/cm 15小時；75MHz、200mV/cm 30小時；78MHz、200mV/cm 30小時；81MHz、200mV/cm30小時；95MHz、200mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對桿菌肽的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的桿菌肽的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含桿菌肽濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中桿菌肽的量減少了71.6％以上。
分解多粘菌素E的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解多粘菌素E的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在410.000到470.000MHz范圍內，包括但不限于430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459和460MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.611的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)433MHz、85mV/cm 12小時；440MHz、85mV/cm 12小時；446MHz、85mV/cm 12小時；457MHz、85mV/cm 12小時；433MHz、204mV/cm24小時；440MHz、204mV/cm 24小時；446MHz、204mV/cm 24小時；457MHz、204mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對多粘菌素E的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的多粘菌素E的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含多粘菌素E濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中多粘菌素E的量減少了71.6％以上。
分解氯霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解氯霉素的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在410.000到470.000MHz范圍內，包括但不限于430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459和460MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.371的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)419MHz、85mV/cm 12小時；425MHz、85mV/cm 12小時；433MHz、85mV/cm12小時；462MHz、85mV/cm 12小時；419MHz、183mV/cm 24小時；425MHz、183mV/cm 24小時；433MHz、183mV/cm 24小時；462MHz、183mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對氯霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的氯霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含氯霉素濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中氯霉素的量減少了58.6％以上。
分解頭孢菌素類的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解頭孢菌素類如頭孢噻吩、頭孢噻啶、頭孢來星、頭孢氨芐和頭孢唑林的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在410.000到470.000MHz范圍內，包括但不限于430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459和460MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.559的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)434MHz、85mV/cm12小時；441MHz、85mV/cm 12小時；450MHz、85mV/cm 12小時；458MHz、85mV/cm 12小時；434MHz、198mV/cm 24小時；441MHz、198mV/cm 24小時；450MHz、198mV/cm 24小時；458MHz、198mV/cm24小時。
活化的酵母細胞對頭孢菌素類的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的頭孢噻吩的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含頭孢噻吩的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中頭孢噻吩的量減少了75.5％以上。
分解新霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解新霉素的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在550.000到620.000MHz范圍內，包括但不限于555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、566、567、568、569、570、571、572、573、574和575MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.182的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)557MHz、85mV/cm 12小時；564MHz、85mV/cm 12小時；568MHz、85mV/cm 12小時；574MHz、85mV/cm 12小時；557MHz、231mV/cm24小時；564MHz、231mV/cm 24小時；568MHz、231mV/cm 24小時；574MHz、231mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對新霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的新霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含新霉素的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中新霉素的量減少了67.7％以上。
分解新生霉素的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解新生霉素的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在550.000到620.000MHz范圍內，包括但不限于590、591、592、593、594、595、596、597、598、599、600、601、602、603、604、605、606、607、608、609和610MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.112的酵母細胞在約25-30℃、表1所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)594MHz、85mV/cm 12小時；599MHz、85mV/cm 12小時；602MHz、85mV/cm 12小時；608MHz、85mV/cm 12小時；594MHz、231mV/cm 24小時；599MHz、231mV/cm 24小時；602MHz、231mV/cm24小時；608MHz、231mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對新生霉素的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的新生霉素的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含新生霉素濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中新生霉素的量減少了69.5％以上。
5.2分解不良化學品的酵母細胞組分本發(fā)明進一步提供能夠降解固體廢物中代表性化學品的酵母細胞。
根據(jù)本發(fā)明，酵母細胞降解不良化學品的能力是通過將酵母細胞在電磁場存在下在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)而活化或強化。所得酵母細胞可以作為本發(fā)明生物固體廢物處理組合物的一個組分使用。
用來活化或強化酵母降解不良化學品能力的電磁場頻率通常在30到280MHz、410到440MHz、660到690MHz、1400到1435MHz、以及1980到2210MHz的范圍內。酵母細胞生長足夠長的時間后，可以通過本領域熟知的方法檢測酵母細胞增強的分解一種或多種化學品的能力?？梢员槐景l(fā)明酵母降解的不良化學品包括但不限于除草劑、農藥以及與肥料相關的污染物。
本發(fā)明制備降解化學品酵母的方法是在液體培養(yǎng)基中進行的。培養(yǎng)基中含酵母細胞可吸收的營養(yǎng)源。通常，糖類等碳水化合物，例如蔗糖、葡萄糖、果糖、右旋糖、麥芽糖、木糖等以及淀粉，可以單獨或聯(lián)合作為培養(yǎng)基中可吸收碳的來源使用。培養(yǎng)基中碳水化合物源的精確用量部分取決于培養(yǎng)基中的其它成分，但通常介于培養(yǎng)基重量的約0.1％到5％之間，優(yōu)選約0.5％到2％，最優(yōu)選約0.8％。這些碳源在培養(yǎng)基中可以單獨或聯(lián)合使用。
可以加入培養(yǎng)基中的無機鹽包括能夠提供鈉、鈣、磷酸根、硫酸根、碳酸根等離子的常規(guī)鹽。營養(yǎng)性的無機鹽的非限制性實例有(NH4)2HPO4、CaCO3、MgSO4、NaCl和CaSO4。
表2降解化學品的酵母的培養(yǎng)基組成
培養(yǎng)基所用的提取物是通過將500g新鮮廢物如糞肥、污泥和/或垃圾分散于600ml溫水(35-40℃)中并在30-37℃培育24小時、過濾液體去除顆粒物質而制得的。如果提取物只含有少量的某種化學品，可以將適量的該種化學品加入到提取物中。
需要注意的是，表2中提供的培養(yǎng)基成分不是限制性的。本領域的技術人員可以根據(jù)實踐和經(jīng)濟考慮對培養(yǎng)基進行多種改進，例如培養(yǎng)的規(guī)模和培養(yǎng)基組分的本地供應。
培養(yǎng)過程可以首先以細胞密度102-105細胞/ml將1ml挑選的酵母菌株接種物接種于100ml培養(yǎng)基中，優(yōu)選接種密度為3×102-104細胞/ml。該過程可以根據(jù)需要按比例增減。酵母培養(yǎng)物可以在一個電磁(EM)場或一組電磁場存在下生長。如果施加一組電磁場，從一個電磁場切換到另一個電磁場時，酵母細胞可以在同一個容器中、使用同一套電磁波發(fā)生器和發(fā)射器。
電磁場可以通過本領域所知的任何方法施用，每個電磁場的頻率在30.000到100.000、70.000到280.000、410.000到430.000、660.000到680.000和1980.000到2210.000MHz范圍。電磁場的場強在40到250mV/cm范圍。如果施用一組電磁場，每個電磁場可以具有上述范圍內不同頻率，或上述范圍內不同場強，或上述范圍內的不同頻率和不同場強。在一個優(yōu)選實施方案中，一組中開始的電磁場與隨后電磁場相比EM場強較低，這樣酵母細胞培養(yǎng)物就被置于場強逐漸增加的電磁場中。雖然一組中應用的電磁場數(shù)目可以是任意的，但優(yōu)選的將酵母培養(yǎng)物置于一組總數(shù)為2、3、4、5、6、7、8、9或10個不同的電磁場中。
雖然酵母細胞在電磁場存在下甚至培養(yǎng)幾個小時就可以被活化，但酵母細胞可以在電磁場存在下繼續(xù)培養(yǎng)一段時間(例如2周或更多周)，通常優(yōu)選的，應使活化的酵母細胞在一個或多個電磁場存在下繁殖和生長共約90-480小時。
例如，使用圖1所示的示范性裝置，電磁波的輸出振幅在約8到約300mV/cm范圍。本發(fā)明的方法在約25到30℃溫度范圍進行，但是優(yōu)選在28℃進行。培養(yǎng)過程優(yōu)選在溶解氧濃度為0.025到0.8mol/m3的條件下進行，優(yōu)選0.4mol/m3。氧氣水平可以通過本領域技術人員所知的任何常規(guī)方法來控制，包括但不限于攪拌和/或發(fā)泡。
在培養(yǎng)過程結束時，酵母細胞可以通過本領域所知的多種方法從培養(yǎng)物中回收，并在低于約0℃到4℃的溫度下儲存。回收的酵母細胞可以經(jīng)干燥處理以粉末的形式儲存。
為了檢測活化的酵母細胞對化合物的活性，可以用本領域熟知的方法如HPLC測量不同時間點和不同培養(yǎng)條件下試驗樣本中化合物的量。例如，制備含已知濃度化合物的樣本(每升100mg)。然后，將0.1ml活化的和未活化的酵母(至少107細胞/ml)加入100升含該化合物的樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過用HPLC測量樣本，檢測和比較提取物中殘留的化合物的量。
該方法可通用于許多種類的化學品。在具體的實施方案中，描述了針對特定種類化學品的最佳方法。
分解芳香族化合物的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解三氯苯酚的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在30.000到100.000MHz范圍內，或優(yōu)選52到98MHz，包括但不限于52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株IFFI1411的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的6個電磁場存在下培養(yǎng)82MHz、82mV/cm 25小時；90MHz、82mV/cm25小時；98MHz、82mV/cm 25小時；82MHz、274mV/cm 32小時；90MHz、274mV/cm 32小時；98MHz、274mV/cm 25小時。
活化的酵母細胞對三氯苯酚的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的該化合物的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含該化合物的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的化合物的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中三氯苯酚的量減少了56.4％以上。
在另一個具體實施方案中，提供了一種分解甲苯或乙苯的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在52.000到98.000MHz范圍內，包括但不限于52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.56的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)76MHz、89mV/cm 20小時；80MHz、89mV/cm 200小時；86MHz、89mV/cm 20小時；和96MHz、89mV/cm 20小時。
活化的酵母細胞對甲苯或乙苯的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的該化合物的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含該化合物的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的化合物的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中甲苯的量減少了74.3％以上。
在另一個具體實施方案中，提供了一種分解二甲苯化合物如對二甲苯的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在30.000到50.000MHz或70.000到98.000范圍內，包括但不限于30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.420的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)72MHz、93mV/cm 20小時；80MHz、93mV/cm 20小時；88MHz、93mV/cm 20小時；和98MHz、93mV/cm 20小時。
活化的酵母細胞對二甲苯化合物的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的二甲苯化合物的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含二甲苯化合物的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的對二甲苯的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中對二甲苯的量減少了66.6％以上。
分解醛類化合物的酵母細胞組分在另一個具體實施方案中，提供了一種分解苯甲醛和相關化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或133-151MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150或151MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.374的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)78MHz、130mV/cm 30小時；86MHz、130mV/cm 30小時；94MHz、130mV/cm 30小時；96MHz、130mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對苯甲醛的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的苯甲醛的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含苯甲醛的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的苯甲醛的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中苯甲醛的量減少了63.6％以上。
在另一個具體實施方案中，提供了一種分解丙醛和相關化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或145-162MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161和162MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.414的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)76MHz、103mV/cm 20小時；88MHz、103mV/cm 20小時；96MHz、103mV/cm 20小時；98MHz、103mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對丙醛的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的丙醛的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含丙醛的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的丙醛的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中丙醛的量減少了73.8％以上。
在另一個具體實施方案中，提供了一種分解庚醛化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到100.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97和98MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.503的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)81MHz、90mV/cm 12小時，85MHz、90mV/cm 12小時，89MHz、90mV/cm 12小時，94MHz、90mV/cm 12小時，81MHz、157mV/cm 24小時，85MHz、157mV/cm24小時，89MHz、157mV/cm 24小時，94MHz、157mV/cm 24小時。
活化酵母細胞對庚醛的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的庚醛的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含庚醛濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的庚醛的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中庚醛的量24小時減少了81.3％以上。
分解鹵代苯化合物的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解鹵代苯化合物如間二氯苯的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或163.000到183.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182和183MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.483的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)72MHz、107mV/cm20小時；80MHz、107mV/cm 10小時；90MHz、107mV/cm 30小時；94MHz、107mV/cm 40小時。
活化的酵母細胞對二氯苯的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的二氯苯的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含二氯苯的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的二氯苯的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中二氯苯的量減少了64.6％以上。
分解苯乙酮和相關化合物的酵母細胞組分在另一個具體實施方案中，提供了一種分解苯乙酮和相關化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或175.000到191.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190和191MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.256的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)76MHz、124mV/cm 20小時；82MHz、124mV/cm30小時；90MHz、124mV/cm 40小時；98MHz、124mV/cm 20小時。
活化的酵母細胞對苯乙酮的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的苯乙酮的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含苯乙酮濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的苯乙酮的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中苯乙酮的量減少了75.5％以上。
分解對氨苯基胂酸和相關化合物的酵母細胞組分在另一個具體實施方案中，提供了一種分解對氨苯基胂酸和相關化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或183.000到205.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204和205MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.745的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)78MHz、133mV/cm 30小時；88MHz、133mV/cm 40小時；92MHz、133mV/cm30小時；96MHz、133mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對對氨苯基胂酸的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的對氨苯基胂酸的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含對氨苯基胂酸的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的對氨苯基胂酸抗生素的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中對氨苯基胂酸的量減少了75.5％以上。
分解羅沙胂和相關化合物的酵母細胞組分在另一個具體實施方案中，提供了一種分解羅沙胂和相關化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或114.000到128.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127和128MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.173的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)78MHz、110mV/cm 10小時；92MHz、110mV/cm 10小時；78MHz、213mV/cm 30小時；92MHz、213mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對羅沙胂的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的羅沙胂的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含羅沙胂的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的羅沙胂的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中羅沙胂的量減少了67.9％以上。
分解呋喃唑酮化合物的酵母細胞組分在另一個具體實施方案中，提供了一種分解呋喃唑酮和相關化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或200.000到220.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219和220MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.397的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)74MHz、98mV/cm30小時；76MHz、98mV/cm 20小時；86MHz、98mV/cm 30小時；94MHz、98mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對呋喃唑酮的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的呋喃唑酮的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含呋喃唑酮的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的呋喃唑酮的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中呋喃唑酮的量減少了81.4％以上。
分解地考喹酯的酵母細胞組分在另一個具體實施方案中，提供了一種分解地考喹酯和相關化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或213.000到229.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228和229MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.452的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)78MHz、112mV/cm 30小時；82MHz、112mV/cm30小時；86MHz、112mV/cm 30小時；94MHz、112mV/cm 20小時。
活化的酵母細胞對地考喹酯的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的地考喹酯的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含地考喹酯的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的地考喹酯的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中地考喹酯的量減少了67.9％以上。
分解trichlorophonum化合物的酵母細胞組分在另一個具體實施方案中，提供了一種分解trichlorophonum和相關化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或220.000到250.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、245、248和250MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.100的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)74MHz、219mV/cm 30小時；86MHz、219mV/cm20小時；96MHz、219mV/cm 30小時；98MHz、219mV/cm 20小時。
活化的酵母細胞對trichlorophonum的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的trichlorophonum的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含trichlorophonum的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的trichlorophonum的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中trichlorophonum的量減少了72.4％以上。
分解二硝托胺的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解二硝托胺和相關化合物的酵母細胞的制備方法。二硝托胺是2-甲基-3，5-二硝基苯甲酰胺，也叫3，5-二硝基鄰甲苯酰胺。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在70.000到98.000MHz或220.000到250.000MHz范圍內，包括但不限于70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248和250MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.189的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)76MHz、202mV/cm 30小時；82MHz、202mV/cm30小時；90MHz、202mV/cm 20小時；96MHz、202mV/cm 20小時。
活化的酵母細胞對二硝托胺的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的3，5二硝基鄰甲苯酰胺的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含二硝托胺的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的二硝托胺的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中二硝托胺的量減少了72.4％以上。
去除銨化合物(NH4)的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種去除或減少固體廢物中銨化合物水平的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在660到680MHz或2160到2190MHz范圍內，優(yōu)選661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、672、673、674、675、676、677、678、679、680、2170、2171、2172、2173、2174、2175、2176、2177、2178、2179、2180、2181、2182、2183、2184、2185MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.614的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)662MHz、152mV/cm 18小時；666MHz、152mV/cm 18小時；672MHz、152mV/cm18小時；678MHz、152mV/cm 18小時；662MHz、310mV/cm 25小時；666MHz、310mV/cm 25小時；672MHz、310mV/cm 35小時；678MHz、310mV/cm 35小時。
活化的酵母的活性是通過測量活化酵母細胞去除銨化合物的量來檢測。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中銨化合物的量明顯減少(＞93.6％)。
去除硝酸鹽和亞硝酸鹽的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種去除或減少固體廢物中硝酸鹽和亞硝酸鹽水平的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在661.000到680.000MHz范圍內，包括但不限于661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、672、673、674、675、676、677、678、679和680MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.14的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)661MHz、126mV/cm 25小時；665MHz、126mV/cm 25小時；672MHz、126mV/cm 25小時；676MHz、126mV/cm25小時；661MHz、196mV/cm 25小時；665MHz、196mV/cm 25小時；672MHz、196mV/cm 38小時；676MHz、196mV/cm 38小時。
活化的酵母細胞對硝酸鹽的活性是通過測量活化酵母細胞去除硝酸鹽的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含硝酸鹽的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的硝酸鹽的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中硝酸鹽的量減少了69.7％以上。
去除生物可利用磷的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種去除固體廢物中生物可利用磷如HPO42-、H2PO4-等的酵母細胞的制備方法。在一個具體實施方案中，提供了一種去除或減少固體廢物中硝酸鹽和亞硝酸鹽的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在80.000到440.000MHz范圍內，優(yōu)選86.000到120.000MHz或410.000到440.000MHz，包括但不限于86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429和430MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.620的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)98MHz、68mV/cm 24小時；112MHz、68mV/cm24小時；108MHz、68mV/cm 24小時；118MHz、68mV/cm 24小時；98MHz、240mV/cm 24小時；112MHz、240mV/cm 24小時；108MHz、240mV/cm 42小時；118MHz、240mV/cm 42小時。
活化的酵母細胞對可利用磷的活性是通過測量活化的酵母細胞可以去除的可利用磷的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含生物可利用磷的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的生物可利用磷的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中可利用磷的量減少了65.8％以上。
分解敵百蟲的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解敵百蟲和相關有機磷農藥化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在1980.000到2020.000，優(yōu)選2000.000到2020.000MHz范圍內，包括但不限于2000、2001、2002、2003、2004、2005、2006、2007、2008、2009、2010、2011、2012、2013、2014、2015、2016、2017、2018、2019和2020MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.440的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)2000MHz、125mV/cm 10小時；2004MHz、125mV/cm 10小時；2009MHz、125mV/cm 24小時；2018MHz、125mV/cm 24小時；2000MHz、168mV/cm 10小時；2004MHz、168mV/cm 10小時；2009MHz、168mV/cm 56小時；2018MHz、168mV/cm 56小時。
活化的酵母細胞對敵百蟲的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的敵百蟲的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含敵百蟲的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的敵百蟲的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，48小時后，含活化酵母細胞的樣本中敵百蟲的量減少了10％以上。
分解敵敵畏的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解敵敵畏(DDVP)和相關有機磷農藥化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在1983.000到2118.000MHz范圍內，包括但不限于1983、1988、1993、1998、2003、2008、2013、2018、2023、2028、2033、2038、2043、2048、2053、2058、2063、2068、2073、2078、2083、2088、2093、2098、2103、2108、2113和2118MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.443的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)1993MHz、140mV/cm 24小時；2023MHz、140mV/cm 24小時；2083MHz、140mV/cm 24小時；2103MHz、140mV/cm 24小時；1993MHz、190mV/cm 24小時；2023MHz、190mV/cm 24小時；2083MHz、190mV/cm 56小時；2103MHz、190mV/cm 56小時。
活化的酵母細胞對敵敵畏的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的敵敵畏的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含敵敵畏的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的敵敵畏的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中敵敵畏的量減少了67.5％以上。
分解久效磷的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解久效磷和相關殺蟲劑的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在1983.000到2118.000MHz范圍內，包括但不限于1983、1988、1993、1998、2003、2008、2013、2018、2023、2028、2033、2038、2043、2048、2053、2058、2063、2068、2073、2078、2083、2088、2093、2098、2103、2108、2113和2118MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.93的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)2998MHz、165mV/cm 24小時；2033MHz、165mV/cm 24小時；2058MHz、165mV/cm 24小時；2113MHz、165mV/cm 24小時；2998MHz、202mV/cm 56小時；2033MHz、202mV/cm 56小時；2058MHz、202mV/cm 24小時；2113MHz、202mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對久效磷的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的久效磷的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含久效磷的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的久效磷的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中久效磷的量減少了73.4％以上。
分解樂果的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解樂果和相關殺蟲化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在1983.000到2118.000MHz范圍內，包括但不限于1983、1988、1993、1998、2003、2008、2013、2018、2023、2028、2033、2038、2043、2048、2053、2058、2063、2068、2073、2078、2083、2088、2093、2098、2103、2108、2113和2118MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.379的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)1988MHz、195mV/cm 24小時；2023MHz、195mV/cm 24小時；2088MHz、195mV/cm 24小時；2108MHz、195mV/cm 24小時；1988MHz、277mV/cm 56小時；2023MHz、277mV/cm 56小時；2088MHz、277mV/cm 24小時；2108MHz、277mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對樂果的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的樂果的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含樂果的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的樂果的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中樂果的量減少了69.6％以上。
分解滴滴涕(DDT)的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解DDT和相關二氯有機殺蟲化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在1420.000到1435.000MHz范圍內，包括但不限于1420、1421、1422、1423、1424、1425、1426、1427、1428、1429、1430、1431、1432、1433、1434、1435MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.415的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)1423MHz、75mV/cm 24小時；1426MHz、75mV/cm24小時；1433MHz、75mV/cm 24小時；1435MHz、75mV/cm 24小時；1423MHz、146mV/cm 56小時；1426MHz、146mV/cm 56小時；1433MHz、146mV/cm 24小時；1435MHz、146mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對DDT的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的DDT的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含DDT的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的DDT的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中DDT的量減少了78.5％以上。
分解毒殺芬的酵母細胞組分在一個具體實施方案中，提供了一種分解毒殺芬和相關氯代有機殺蟲化合物的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在1420.000到1435.000MHz范圍內，包括但不限于1420、1421、1422、1423、1424、1425、1426、1427、1428、1429、1430、1431、1432、1433、1434、1435MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.504的酵母細胞在約25-30℃、表2所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)1420MHz、120mV/cm 24小時；1426MHz、120mV/cm 24小時；1431MHz、120mV/cm 24小時；1434MHz、120mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對毒殺芬的活性是通過測量活化的酵母細胞可以降解的毒殺芬的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含毒殺芬的濃度為100mg/L。然后分別將0.1ml活化的和未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，用HPLC檢測和比較樣本中殘留的毒殺芬的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中毒殺芬的量減少了70.8％以上。
5.3減少氣味的酵母細胞組分本發(fā)明還提供能夠減少固體廢物如糞肥、污泥和/或垃圾的氣味的酵母細胞。盡管不受任何理論或機制的束縛，本發(fā)明的發(fā)明人認為本發(fā)明的酵母細胞能夠通過減少、吸收或分解固體廢物中已知和未知的惡臭化合物，來減少固體廢物的氣味。但是，沒有必要證實這些化合物已經(jīng)被分解。只要使用本發(fā)明酵母細胞后，一組主體主觀檢測氣味已被減少就可以了。
根據(jù)本發(fā)明，制備能夠減少固體廢物氣味的酵母細胞是通過在電磁場存在下、在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞而進行的?；罨驈娀湍冈摴δ艿碾姶艌鲱l率通常在2160到2380MHz范圍內。酵母細胞生長足夠長的時間后，可以通過本領域熟知的方法，檢測酵母細胞減少固體廢物氣味的能力。
本發(fā)明制備減少氣味的酵母細胞的方法是在液體培養(yǎng)基中進行的。培養(yǎng)基中含酵母細胞可吸收的營養(yǎng)源。通常，糖類等碳水化合物，例如蔗糖、葡萄糖、果糖、右旋糖、麥芽糖、木糖等以及淀粉，可以單獨或聯(lián)合作為培養(yǎng)基中可吸收碳的來源使用。培養(yǎng)基中碳水化合物的精確用量部分取決于培養(yǎng)基中的其它成分，但通常介于培養(yǎng)基重量的約0.1％到5％之間，優(yōu)選約0.5％到2％。最優(yōu)選約0.8％。這些碳源在培養(yǎng)基中可以單獨或聯(lián)合使用。
可以加入培養(yǎng)基中的無機鹽包括能夠提供鈉、鈣、磷酸根、硫酸根、碳酸根等離子的常規(guī)鹽。營養(yǎng)性的無機鹽的非限制性實例有(NH4)2HPO4、CaCO3、MgSO4、NaCl和CaSO4。
需要注意的是，表38中提供的培養(yǎng)基組成不是限制性的。本領域的技術人員可以根據(jù)實踐和經(jīng)濟考慮對培養(yǎng)基進行多種改進，例如培養(yǎng)的規(guī)模和培養(yǎng)基組分的本地供應。
培養(yǎng)過程可以首先以細胞密度102-105個細胞/ml、優(yōu)選3×102-104個細胞/ml將1ml挑選的酵母菌株接種物接種于100ml培養(yǎng)基中。該過程可以根據(jù)需要按比例增減。酵母培養(yǎng)物可以在一個電磁(EM)場或一組電磁場存在下生長。如果施加一組電磁場，從一個電磁場切換到另一個電磁場時，酵母細胞可以在同一個容器中、使用同一套電磁波發(fā)生器和發(fā)射器。
電磁場可以通過本領域所知的任何方法施用，每個電磁場的頻率可以在2160到2380MHz，優(yōu)選2160.000到2250.000MHz或2280.000到2380.000MHz范圍內。電磁場的場強在25到300mV/cm范圍。如果施用一組電磁場，每個電磁場可以具有上述范圍內不同頻率，或上述范圍內不同場強，或上述范圍內的不同頻率和不同場強。在一個優(yōu)選實施方案中，一組中開始的電磁場與隨后電磁場相比EM場強較低，這樣酵母細胞培養(yǎng)物就被置于場強逐漸增加的電磁場中。雖然一組中應用的電磁場數(shù)目可以是任意的，但優(yōu)選的將酵母培養(yǎng)物置于一組總數(shù)為2、3、4、5、6、7、8、9或10個不同電磁場中。
雖然酵母細胞在電磁場存在下甚至培養(yǎng)幾個小時就可以被活化，但酵母細胞可以在電磁場存在下繼續(xù)培養(yǎng)一段時間(例如2周或更多周)，通常優(yōu)選的，應使活化的酵母細胞在一個或多個電磁場存在下繁殖和生長共約80-320小時。
例如，使用圖1所示的示范性裝置，電磁波的輸出振幅在25-200mV/cm范圍。第一階段培養(yǎng)后，將酵母細胞在除了振幅增加至250-300mV/cm范圍內更高水平之外基本相同的條件下進一步培養(yǎng)一段時間。本發(fā)明的方法在約25到30℃范圍進行，但是優(yōu)選在28℃進行。培養(yǎng)過程優(yōu)選在溶解氧濃度為0.025到0.8mol/m3的條件下進行，優(yōu)選0.4mol/m3。氧氣水平可以通過本領域技術人員所知的任何常規(guī)方法來控制，包括但不限于攪拌和/或發(fā)泡。
在培養(yǎng)過程結束時，酵母細胞可以通過本領域所知的多種方法從培養(yǎng)物中回收，并在低于約0℃到4℃的溫度下儲存?；厥盏慕湍讣毎梢越?jīng)干燥處理以粉末的形式儲存。
可以用本領域所知的任何方法檢測培養(yǎng)的酵母細胞減少有機材料氣味的能力。有機材料試驗樣本中惡臭化學品如硫化氫、氨、吲哚、對甲酚、糞臭素和有機酸的量可以用本領域所知的任何方法檢測，包括但不限于氣相色譜法、嗅覺測量法、質譜法或使用氣味測試板。
例如，為了檢測活化酵母細胞對惡臭化合物的活性，可以使用質譜法(如VG micromass)測量不同時間點和不同培育條件下試驗樣本中惡臭化合物的量。例如，將已知量的惡臭化合物(達100mg每升)加入10升糞肥的水性提取物中。然后，將0.1ml活化和未活化的酵母(至少107細胞/ml)加入10升含該化合物的樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，檢測和比較提取物中殘余的惡臭化合物的量。
減少含硫化合物引起的氣味的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個實施方案中，提供了一種去除硫化氫和其它相關的含硫或含巰基(SH-)分子的酵母細胞的制備方法。去除硫化氫和其它相關的含硫或含巰基(SH-)分子的酵母細胞可以通過將細胞在2160.000到2250.000MHz范圍的電磁場存在下培養(yǎng)而制備，包括但不限于2160、2165、2170、2175、2180、2185、2190、2195、2200、2205、2210、2215、2220、2225、2230、2235、2240、2245和2250MHz。
例如，將釀酒酵母菌株AS2.559的酵母細胞在約25-30℃、表3所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)2165MHz、240mV/cm 20小時；2175MHz、240mV/cm 20-60小時；2200MHz、240mV/cm 20小時；2235MHz、240mV/cm 20小時。
活化的酵母細胞對含硫或含巰基(SH-)化合物的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下硫化氫的量的改變來檢測。制備兩個100升的樣本，每個含硫化氫的濃度為100mg/L。然后將0.1ml活化的和0.1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，檢測和比較樣本中殘留的硫化氫的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中硫化氫的量減少了59.8％以上。
減少含NH-化合物引起的氣味的酵母細胞組分在本發(fā)明另一個實施方案中，提供了一種去除氨和相關含NH-化合物的酵母細胞的制備方法。去除氨和相關含NH-化合物的酵母細胞可以通過將細胞在2160.000到2250.000MHz范圍的電磁場存在下培養(yǎng)而制備，包括但不限于2160、2165、2170、2175、2180、2185、2190、2195、2200、2205、2210、2215、2220、2225、2230、2235、2240、2245和2250MHz。
例如，將釀酒酵母菌株AS2.423的酵母細胞在約25-30℃、表3所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)2160MHz、250mV/cm 20小時；2175MHz、250mV/cm 20小時；2210MHz、250mV/cm 20小時；2245MHz、250mV/cm 10小時。
活化的酵母細胞對氨和含NH-化合物的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下氨量的改變來檢測。制備兩個100升的樣本，每個樣本中含NH-化合物的濃度為100mg/L。然后將0.1ml活化的和0.1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，檢測和比較樣本中殘留的氨的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中氨的量減少了69.6％以上。
減少吲哚和其它相關化合物引起的氣味的酵母細胞組分本發(fā)明中，提供了一種分解吲哚和其它相關化合物如糞臭素的酵母細胞的制備方法。分解吲哚和其它相關化合物的酵母細胞可以通過將細胞在2160.000到2250.000MHz范圍的電磁場存在下培養(yǎng)而制備，包括但不限于2160、2165、2170、2175、2180、2185、2190、2195、2200、2205、2210、2215、2220、2225、2230、2235、2240、2245和2250MHz。
例如，將釀酒酵母菌株AS2.612的酵母細胞在約25-30℃、表3所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)2165MHz、240mV/cm 40小時；2180MHz、240mV/cm 20小時；2200MHz、240mV/cm 40小時；2220MHz、240mV/cm 20小時。
活化的酵母細胞對吲哚和其它相關化合物的活性是通過測量活化的酵母細胞去除吲哚的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個樣本中含吲哚相關化合物的濃度為100mg/L。然后將0.1ml活化的和0.1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過HPLC檢測和比較樣本中殘留的吲哚的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中吲哚的量減少了71.3％以上。
減少有機酸引起的氣味的酵母細胞組分在本發(fā)明另一個實施例中，提供了一種去除有氣味的有機酸如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸和其它揮發(fā)性脂肪酸的酵母細胞的制備方法?？梢詼p少有機酸氣味的酵母細胞可以通過將細胞在2160.000到2250.000MHz范圍的電磁場存在下培養(yǎng)而制備，包括但不限于2160、2165、2170、2175、2180、2185、2190、2195、2200、2205、2210、2215、2220、2225、2230、2235、2240、2245和2250MHz。
例如，將釀酒酵母菌株AS2.53的酵母細胞在約25-30℃、表42所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)2315MHz、290mV/cm 30小時；2335MHz、290mV/cm 10小時；2355MHz、290mV/cm 20小時；2375MHz、290mV/cm 10小時。
活化的酵母細胞對有機酸的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下乙酸量的改變來檢測。制備兩個100升的樣本，每個樣本中含有機酸的濃度為100mg/L。然后將0.1ml活化的和0.1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過HPLC檢測和比較樣本中殘留的乙酸的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中乙酸的量減少了89.4％以上。
減少脂肪族取代胺引起的氣味的酵母細胞組分在本發(fā)明另一個實施例中，提供了一種去除或降解脂肪族取代胺，例如甲胺、二甲胺或三甲胺，由此減少這些化合物引起的氣味的酵母細胞的制備方法。去除或降解這些胺類的酵母細胞可以通過將細胞在2160.000到2250.000MHz范圍的電磁場存在下培養(yǎng)而制備，包括但不限于2160、2165、2170、2175、2180、2185、2190、2195、2200、2205、2210、2215、2220、2225、2230、2235、2240、2245和2250MHz。
例如，將釀酒酵母菌株AS2.541的酵母細胞在約25-30℃、表3所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)2160MHz、250mV/cm 20小時；2190MHz、250mV/cm 10小時；2210MHz、250mV/cm 40小時；2250MHz、250mV/cm 40小時。
活化的酵母細胞對甲基取代胺的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下該胺的量來檢測。制備兩個100升的樣本，每個樣本中含甲基取代胺的濃度為100mg/L。然后將0.1ml活化的和0.1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過HPLC測量和比較樣本中殘留的甲基取代胺的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中甲基取代胺的量減少了82.2％以上。
減少對甲酚和相關化合物引起的氣味的酵母細胞組分在本發(fā)明另一個實施例中，提供了一種去除或降解對甲酚和相關化合物的酵母細胞的制備方法。去除或降解對甲酚和其它相關化合物的酵母細胞可以通過將細胞在2160.000到2250.000MHz范圍的電磁場存在下培養(yǎng)而制備，包括但不限于2160、2165、2170、2175、2180、2185、2190、2195、2200、2205、2210、2215、2220、2225、2230、2235、2240、2245和2250MHz。
例如，將釀酒酵母菌株AS2.163的酵母細胞在約25-30℃、表3所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的4個電磁場存在下培養(yǎng)2300MHz、98mV/cm 20小時；2370MHz、98mV/cm 15小時；2300MHz、250mV/cm 20小時；2370MHz、250mV/cm 30小時。
活化的酵母細胞對對甲酚和相關化合物的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下對甲酚和相關化合物的量的改變來檢測。制備兩個100升的樣本，每個樣本中含對甲酚的濃度為100mg/L。然后將0.1ml活化的和0.1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個樣本中，在28℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過HPLC檢測和比較樣本中殘留的對甲酚的量。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中對甲酚的量減少了92.5％以上。
5.4病原體抑制性酵母細胞組分本發(fā)明還提供能夠抑制固體廢物中存在的致病微生物生長的酵母細胞。通常，由于固體廢物中存在這些致病微生物可以利用的豐富的營養(yǎng)，經(jīng)過一段時間后病原體的數(shù)目快速增長。但是，在本發(fā)明病原體抑制性酵母的存在下，處理過的固體廢物中病原體的數(shù)目隨時間不變或減少。雖不受任何理論或機制的束縛，本發(fā)明的發(fā)明人認為固體廢物中存在的抑制病原體的酵母細胞形成了不利于致病微生物生長的環(huán)境。
根據(jù)本發(fā)明，酵母影響/控制病原體數(shù)目的能力是通過將酵母在電磁場存在下培養(yǎng)而被活化或強化的。所得病原體抑制性酵母細胞作為本發(fā)明固體廢物處理組合物的組分使用。
活化或強化酵母控制致病微生物數(shù)目的能力的電磁場頻率通常在30到50MHz范圍內。酵母細胞生長足夠長的時間后，可以通過本領域熟知的方法檢測酵母細胞影響/控制病原體數(shù)目的能力。
本發(fā)明制備病原體抑制性酵母細胞的方法是在液體培養(yǎng)基中進行的。培養(yǎng)基中含酵母細胞可吸收的營養(yǎng)源。通常，糖類等碳水化合物，例如蔗糖、葡萄糖、果糖、右旋糖、麥芽糖、木糖等以及淀粉，可以單獨或聯(lián)合作為培養(yǎng)基中可吸收碳的來源使用。培養(yǎng)基中碳水化合物的精確用量部分取決于培養(yǎng)基中的其它成分，但通常介于培養(yǎng)基重量的約0.1％到5％之間，優(yōu)選約0.5％到2％，最優(yōu)選約0.8％。這些碳源在培養(yǎng)基中可以單獨或聯(lián)合使用。
可以加入培養(yǎng)基中的無機鹽包括能夠提供鈉、鈣、磷酸根、硫酸根、碳酸根等離子的常規(guī)鹽。營養(yǎng)性的無機鹽的非限制性實例有(NH4)2HPO4、CaCO3、MgSO4、NaCl和CaSO4。
表4病原體抑制性酵母的培養(yǎng)基組成
培養(yǎng)基所用的病原體提取物是通過將500g含病原體的廢物在約600ml溫水(35-40℃)中30-37℃下培育24小時、過濾液體去除顆粒物質制備的。需要注意的是，表4中提供的培養(yǎng)基組成不是限制性的。本領域的技術人員可以根據(jù)實踐和經(jīng)濟考慮對培養(yǎng)基進行多種改進，例如培養(yǎng)的規(guī)模和培養(yǎng)基組分的本地供應。
培養(yǎng)過程可以首先以細胞密度102-105細胞/ml、優(yōu)選3×102-104細胞/ml將1ml挑選的酵母菌株接種物接種于100ml培養(yǎng)基中。該過程可以根據(jù)需要按比例增減。酵母培養(yǎng)物可以在一個電磁(EM)場或一組電磁場存在下生長。如果施加一組電磁場，從一個電磁場切換到另一個電磁場時，酵母細胞可以在同一個容器中、使用同一套電磁波發(fā)生器和發(fā)射器。
電磁場可以通過本領域所知的任何方法施用，每個電磁場的頻率可以在30.000到50.000、500.000到650.000和1000.000到1150.000MHz范圍內。電磁場的場強在20到200mV/cm范圍。如果施用一組電磁場，每個電磁場可以具有上述范圍內不同頻率，或上述范圍內不同場強，或上述范圍內不同頻率和場強。在一個優(yōu)選實施方案中，一組中開始的電磁場與隨后電磁場相比EM場強較低，這樣酵母細胞培養(yǎng)物就被置于場強逐漸增加的電磁場中。雖然一組中應用的電磁場數(shù)目可以是任意的，但優(yōu)選的將酵母培養(yǎng)物置于一組總數(shù)為2、3、4、5、6、7、8、9或10個不同電磁場中。
雖然酵母細胞在電磁場存在下甚至培養(yǎng)幾個小時就可以被活化，但酵母細胞可以在電磁場存在下繼續(xù)培養(yǎng)一段時間(例如2周或更多周)，通常優(yōu)選的，應使活化的酵母細胞在一個或多個電磁場存在下繁殖和生長共約144-272小時。
例如，使用圖1所示的示范性裝置，電磁波的輸出振幅在20-180mV/cm范圍。第一階段培養(yǎng)后，將酵母細胞在除了振幅增加至200-350mV/cm范圍內的更高水平之外基本相同的條件下進一步培養(yǎng)一段時間。
在培養(yǎng)過程結束時，抑制病原體的酵母細胞可以通過本領域所知的多種方法從培養(yǎng)物中回收，并在約0℃到4℃儲存。抑制病原體的酵母細胞還可以經(jīng)干燥處理以粉末的形式儲存。
可以用本領域所知的任何微生物計數(shù)方法，例如光密度法、固體介質平板接種稀釋計數(shù)法或者在顯微鏡下單個細胞計數(shù)法，檢測抑制病原體的酵母控制病原體數(shù)目的能力?？梢詰萌旧珌韰^(qū)分或確定樣本中不同的微生物菌株或種，或檢測它們的存活性。當希望病原體抑制性酵母對一組致病微生物起作用時，可以監(jiān)測一種以上的典型致病微生物的數(shù)目來評估病原體抑制性酵母的性能。
例如，在不同濃度的病原體抑制性酵母存在下，含已知濃度致病微生物的固體廢物樣本在同一條件下培養(yǎng)相同的時間，沒有根據(jù)本發(fā)明培養(yǎng)方法處理的相同酵母菌株作為陰性對照。也可以用沒有加入任何酵母的樣本來檢測正常狀況下病原體的生長。檢測和比較培養(yǎng)前后病原體的數(shù)目。
制備1升培養(yǎng)物，每毫升至少含1010細胞的致病微生物。向1升致病微生物培養(yǎng)物中加入1ml活化的酵母細胞(每毫升含2×107到5×107個酵母)，在30℃培育24小時。包括含未活化酵母細胞的對照。檢測和比較各自培養(yǎng)物中微生物的數(shù)目。下面是幾個實施例，其中研究了特定種的致病細菌。
抑制金黃色葡萄球菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施方案中，提供了一種抑制金黃色葡萄球菌生長的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在30.000到50.000MHz范圍內，包括但不限于30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49和50MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.595的酵母細胞在約25-30℃、表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)30MHz、26mV/cm 12小時；36MHz、26mV/cm 12小時；43MHz、26mV/cm 12小時；47MHz、26mV/cm 12小時；30MHz、150mV/cm 24小時；36MHz、150mV/cm 24小時；43MHz、150mV/cm 24小時；47MHz、150mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對金黃色葡萄球菌的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下金黃色葡萄球菌的生長來檢測。固體廢物提取物中所含的金黃色葡萄球菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中金黃色葡萄球菌的細胞。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了2.6％。
抑制肺炎雙球菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施方案中，提供了一種抑制肺炎雙球菌生長的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在30.000到50.000MHz范圍內，包括但不限于30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49和50MHz。例如，將釀酒酵母菌株IFFI1021的酵母細胞在約25-30℃、表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)30MHz、26mV/cm 12小時；36MHz、26mV/cm 12小時；42MHz、26mV/cm 12小時；49MHz、26mV/cm 12小時；30MHz、150mV/cm 24小時；36MHz、150mV/cm 24小時；42MHz、150mV/cm 24小時；49MHz、150mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對肺炎雙球菌的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下肺炎雙球菌的生長來檢測。固體廢物提取物中所含的肺炎雙球菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中肺炎雙球菌的細胞計數(shù)。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了3％。
抑制炭疽桿菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施方案中，提供了一種抑制炭疽桿菌生長的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在20.000到45.000MHz范圍內，包括但不限于20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44和45MHz。例如，將炭疽桿菌菌株AS2.390的酵母細胞在約25-30℃、表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)24MHz、100mV/cm 24小時；37MHz、100mV/cm 24小時；40MHz、100mV/cm 24小時；45MHz、100mV/cm 24小時；24MHz、190mV/cm 24小時；37MHz、190mV/cm 24小時；40MHz、190mV/cm24小時；45MHz、190mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對炭疽桿菌的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下炭疽桿菌的生長來檢測。固體廢物提取物中所含的炭疽桿菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中炭疽桿菌的細胞計數(shù)。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了2.6％。
抑制結核分支桿菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施方案中，提供了一種抑制結核分支桿菌生長的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在30.000到50.000MHz范圍內，包括但不限于30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49和50MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.431的酵母細胞在約25-30℃、表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)33MHz、26mV/cm 12小時；36MHz、26mV/cm 12小時；45MHz、26mV/cm 12小時；47MHz、26mV/cm 12小時；33MHz、150mV/cm 24小時；36MHz、150mV/cm 24小時；45MHz、150mV/cm 24小時；47MHz、150mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對結核分支桿菌的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下結核分支桿菌的生長來檢測。使固體廢物提取物中所含的結核分支桿菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中結核分支桿菌的細胞計數(shù)。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了2.9％。
抑制大腸桿菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施方案中，提供了一種抑制大腸桿菌生長的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在30.000到50.000MHz范圍內，包括但不限于30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49和50MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.561的酵母細胞在約25-30℃、表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)30MHz、26mV/cm 12小時；34MHz、26mV/cm 12小時；38MHz、26mV/cm 12小時；49MHz、26mV/cm 12小時；30MHz、150mV/cm 24小時；3443MHz、150mV/cm 24小時；38MHz、150mV/cm 24小時；49MHz、150mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對大腸桿菌的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下大腸桿菌的生長來檢測。使固體廢物提取物中所含的大腸桿菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中大腸桿菌的細胞計數(shù)。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了48％。
抑制沙門氏菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施方案中，提供了一種抑制沙門氏菌生長的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在30.000到50.000MHz范圍內，包括但不限于30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49和50MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.178的酵母細胞在約25-30℃、表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)30MHz、26mV/cm 12小時；33MHz、26mV/cm 12小時；36MHz、26mV/cm 12小時；38MHz、26mV/cm 12小時；30MHz、150mV/cm 24小時；33MHz、150mV/cm 24小時；36MHz、150mV/cm 24小時；38MHz、150mV/cm24小時。
活化的酵母細胞對沙門氏菌的活性是通過測量活化酵母細胞存在下沙門氏菌的生長來檢測。使固體廢物提取物中所含的沙門氏菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中沙門氏菌的細胞計數(shù)。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了62％。
抑制弧菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施例中，提供了一種抑制弧菌的酵母細胞制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在500.000到550.000MHz范圍內，包括但不限于520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539和540MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.377的酵母細胞在約25-30℃、表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)521MHz、150mV/cm 24小時；527MHz、150mV/cm 24小時；531MHz、150mV/cm 24小時；538MHz、150mV/cm 24小時；521MHz、276mV/cm 24小時；527MHz、276mV/cm 24小時；531MHz、276mV/cm 24小時；538MHz、276mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對弧菌的活性是通過測量活化酵母細胞存在下弧菌的生長來檢測。使固體廢物提取物中所含的弧菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中弧菌的細胞計數(shù)。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了5.6％。
抑制志賀菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施例中，提供了一種抑制志賀菌的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在600.000到650.000MHz范圍內，包括但不限于630、631、632、633、634、635、636、637、638、639、640、641、642、643、644、645、646、647、648、649和650MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.395的酵母細胞在約25-30℃、表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)630MHz、180mV/cm 24小時；636MHz、180mV/cm 24小時；641MHz、180mV/cm 24小時；649MHz、180mV/cm 24小時；630MHz、314mV/cm 24小時；636MHz、314mV/cm 24小時；641MHz、314mV/cm 24小時；649MHz、314mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對志賀菌的活性是通過測量活化酵母細胞存在下志賀菌的生長來檢測。使固體廢物提取物中所含的志賀菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中志賀菌的細胞計數(shù)。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了4.6％。
抑制肉毒桿菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施方案中，提供了一種抑制肉毒桿菌的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在1000.000到1050.000MHz范圍內，包括但不限于1010、1011、1012、1013、1014、1015、1016、1017、1018、1019、1020、1021、1022、1023、1024、1025、1026、1027、1028、1029、1030、1031、1032、1033、1034和1035MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.432的酵母細胞在約25-30℃、在表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)1012MHz、180mV/cm 24小時；1018MHz、180mV/cm 24小時；1024MHz、180mV/cm24小時；1033MHz、180mV/cm 24小時；1012MHz、323mV/cm 24小時；1018MHz、323mV/cm 24小時；1024MHz、323mV/cm 24小時；1033MHz、323mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對肉毒桿菌的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下肉毒桿菌的生長來檢測。使固體廢物提取物中所含的肉毒桿菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中肉毒桿菌的細胞計數(shù)。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了5.1％。
抑制產氣莢膜桿菌的酵母細胞組分在本發(fā)明的一個具體實施方案中，提供了一種抑制產氣莢膜桿菌的酵母細胞的制備方法。用于活化酵母細胞的電磁場的頻率在1100.000到1150.000MHz范圍內，包括但不限于1100、1101、1102、1103、1104、1105、1106、1107、1108、1109、1110、1111、1112、1113、1114、1115、1116、1117、1118、1119和1120MHz。例如，將釀酒酵母菌株AS2.432的酵母細胞在約25-30℃、表4所述的培養(yǎng)基中、在一組下列順序的8個電磁場存在下培養(yǎng)1102MHz、180mV/cm24小時；1106MHz、180mV/cm 24小時；1113MHz、180mV/cm 24小時；1117MHz、180mV/cm 24小時；1102MHz、301mV/cm 24小時；1106MHz、301mV/cm 24小時；1113MHz、301mV/cm 24小時；1117MHz、301mV/cm 24小時。
活化的酵母細胞對產氣莢膜桿菌的活性是通過測量活化的酵母細胞存在下產氣莢膜桿菌的生長來檢測。使固體廢物提取物中所含的產氣莢膜桿菌在培養(yǎng)基中生長至細胞計數(shù)達到1010細胞/ml。然后將1ml活化的和1ml未活化的酵母細胞(都含107細胞/ml)分別加入兩個1升的細菌培養(yǎng)物樣本中，在20-37℃培育24小時。包括不含任何酵母細胞的對照。24小時后，通過傳統(tǒng)細菌細胞計數(shù)方法檢測樣本中產氣莢膜桿菌的細胞計數(shù)。與含未活化酵母細胞的樣本相比，含活化酵母細胞的樣本中細胞計數(shù)減少了6.2％。
5.5適應在本發(fā)明另一個實施方案中，根據(jù)5.1-5.10節(jié)任何一節(jié)制備的活化的酵母細胞可以在待處理的固體廢物樣本存在下作為混合物被進一步培養(yǎng)。以下實施例描述了這個提高固體廢物組合物性能的選擇性方法。
待處理的固體廢物如糞肥或污泥的提取物，是通過將約1000g禽糞肥與1000到3000ml水混合、浸泡約48小時而制備。然后將提取物與約1000g干糞肥(干重，即濕度小于10％)混合形成懸浮液，將酵母細胞加入其中。至少將含5×107細胞/ml以上的1ml酵母加入懸浮液中。根據(jù)所用活化酵母細胞菌株的數(shù)目，可以加入約50ml的酵母細胞。如果只用少數(shù)菌株，每個菌株可以加入5到10ml酵母細胞。該方法可以根據(jù)需要按比例擴大或減小。酵母和固體廢物的混合物在一組電磁場存在下培養(yǎng)約120-280小時。根據(jù)所用酵母的菌株，每個電磁場的頻率符合5.1-5.4節(jié)描述的頻率之一。如果使用多種不同的酵母菌株，可以聯(lián)合使用下列5個頻率帶20-50MHz、60-150MHz、400-700MHz、1400-1600MHz、2000-2500MHz；每個約24到56小時。通常，在此方法中施于酵母細胞的場強是在20mV/cm到350mV/cm的范圍內。
將該培養(yǎng)物在約5℃到約37℃之間循環(huán)的溫度下培育。例如，在一個典型的循環(huán)中，培養(yǎng)物的溫度可以從約37℃開始，保持該溫度約1-2小時，然后調至26-30℃，保持該溫度約2-4小時，然后降低到5-10℃并保持該溫度約1-2小時，然后溫度再升高至約37℃開始另一個循環(huán)。重復循環(huán)直到過程結束。最后一個溫度循環(huán)結束后，培養(yǎng)物的溫度降至3-4℃，并保持該溫度約5-6小時。該過程結束后，用傳統(tǒng)方法如過濾將酵母細胞從培養(yǎng)基中分離、回收。適應后的酵母細胞儲存于4℃。圖2描述了該培養(yǎng)方法的一個示例性裝置。
5.6生物組合物的制備本發(fā)明的生物組合物可以通過將酵母細胞在根據(jù)5.1到5.4節(jié)的適宜條件下培養(yǎng)、并混合所需量的酵母細胞培養(yǎng)物而制備。因為生物組合物不是馬上就用于處理固體廢物，生物組合物的酵母可以用兩步干燥法干燥。在第一個干燥步驟中，酵母細胞在第一個干燥機中在不超過65℃的溫度下干燥不超過10分鐘，使酵母細胞迅速休眠。然后酵母細胞在第二個干燥機中在不超過70℃的溫度下干燥不超過30分鐘，進一步去除水分。兩個階段后，水含量應小于5％。優(yōu)選的，在兩個干燥步驟中應遵守溫度和干燥時間，這樣酵母細胞才不會失去活性和功能。然后將干燥的酵母細胞冷卻至室溫。還可以用分離器篩選干燥的酵母細胞，挑選優(yōu)選大小的顆粒。然后用裝袋機包裝干燥的酵母細胞。
本發(fā)明不限于所述具體實施方案的范疇，它們只是本發(fā)明各個方面的個別例子，功能相當?shù)姆椒ê徒M分也在本發(fā)明的范疇內。毫無疑問，除了那些這里顯示和描述的內容之外，根據(jù)前面的描述和附圖，本發(fā)明的多種改進對于那些本領域的技術人員來說將是顯而易見的。這些改進也在隨后的權利要求范疇之內。
權利要求
1.一種處理含不良化學品的固體廢物的方法，所述方法包括向固體廢物中加入多個酵母細胞，使酵母細胞降解不良化學品，其中所述多個酵母細胞至少包含下列中的一種(a)通過將酵母細胞在頻率為52到98MHz范圍內、場強為8到300mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解甲苯、乙苯或三氯苯酚；(b)通過將酵母細胞在頻率為30到50MHz或70到98MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解二甲苯化合物；(c)通過將酵母細胞在頻率為70到98MHz或133到151MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解苯甲醛；(d)通過將酵母細胞在頻率為70到98MHz或145到162MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解丙醛；(e)通過將酵母細胞在頻率為70到100MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解庚醛；和(f)通過將酵母細胞在頻率為70到98MHz或163到183MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解二氯苯。
2.一種處理含不良化學品的固體廢物的方法，所述方法包括向固體廢物中加入多個酵母細胞，使酵母細胞降解不良化學品，其中所述多個酵母細胞至少包含下列中的一種(a)通過將酵母細胞在頻率為70到98MHz或175到191MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解苯乙酮；(b)通過將酵母細胞在頻率為70到98MHz或183到205MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解對氨苯基胂酸；(c)通過將酵母細胞在頻率為70到98MHz或114到128MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解羅沙胂；(d)通過將酵母細胞在頻率為70到98MHz或200到220MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解呋喃唑酮；(e)通過將酵母細胞在頻率為70到98MHz或213到229MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解地考喹酯；和(f)通過將酵母細胞在頻率為70到98MHz或220到250MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解trichlorophonum或二硝托胺。
3.一種處理含不良化學品的固體廢物的方法，所述方法包括向固體廢物中加入多個酵母細胞，使酵母細胞減少不良化學品的量，其中所述多個酵母細胞至少包含下列中的一種(a)通過將酵母細胞在頻率為660到680MHz或2160到2190MHz范圍內、場強為25到300mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以減少銨化合物的量；(b)通過將酵母細胞在頻率為661到680MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以減少硝酸鹽或亞硝酸鹽的量；或(c)通過將酵母細胞在頻率為86到120MHz或410到430MHz范圍內、場強為8到250mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以減少磷酸鹽的量。
4.一種處理含不良化學品的固體廢物的方法，所述方法包括向固體廢物中加入多個酵母細胞，使酵母細胞降解不良化學品，其中所述多個酵母細胞至少包含下列中的一種(a)通過將酵母細胞在頻率為1980到2118MHz范圍內、場強為25到300mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解選自下列的不良化學品敵百蟲、敵敵畏、久效磷和樂果；(b)通過將酵母細胞在頻率為1420到1435MHz范圍內、場強為25到300mV/cm的一個或一組電磁場內培養(yǎng)而制備的酵母細胞，其可以降解滴滴涕或毒殺芬。
5.一種處理固體廢物的方法，包括向固體廢物中加入一種生物組合物，所述生物組合物至少包含下列酵母細胞組分的一種(a)第一酵母細胞組分，其包含降解固體廢物中抗生素的多個酵母細胞，所述第一酵母細胞組分是通過將酵母細胞在一個或一組下述電磁場內培養(yǎng)而制備的頻率選自70到100MHz、410到470MHz和550到620MHz，場強為8到250mV/cm；(b)第二酵母細胞組分，其包含降解固體廢物中不良化學品的多個酵母細胞，所述第二酵母細胞組分是通過將酵母細胞在一個或一組下述電磁場內培養(yǎng)而制備的頻率選自30到100MHz、70到280MHz、410到430MHz、660到680MHz、和1980到2210MHz，場強為8到250mV/cm；(c)第三酵母細胞組分，其包含減少固體廢物中有氣味分子的量的多個酵母細胞，所述第三酵母細胞組分是通過將酵母細胞在一個或一組頻率在2160到2380MHz、場強在25到300mV/cm范圍的電磁場內培養(yǎng)而制備的；(d)第四酵母細胞組分，其包含抑制固體廢物中致病菌生長的多個酵母細胞，所述第四酵母細胞組分是通過將酵母細胞在一個或一組下述電磁場內培養(yǎng)而制備的頻率選自30到50MHz、500到550MHz、600到650MHz、1000到1050MHz和1100到1150MHz，場強為20到350mV/cm；和使酵母細胞組分中的酵母細胞減少固體廢物中抗生素、不良化學品、有氣味化合物和致病菌的量。
6.權利要求5的方法，其中生物組合物包含酵母細胞組分(a)、(b)、(c)和(d)。
7.權利要求5的方法，其中所述酵母細胞是選自下列酵母種的細胞釀酒酵母、薛瓦酵母、德氏酵母、少孢酵母、發(fā)酵性酵母、Saccharomyces logos、蜜蜂酵母、Saccharomyces microellipsoides、卵形酵母、羅氏酵母、魯氏酵母、清酒酵母、葡萄汁酵母、魏氏酵母、路氏酵母、Saccharomyces sinenses和卡氏酵母。
8.權利要求5的方法，其中所述酵母細胞是釀酒酵母細胞。
9.權利要求8的方法，其中所述生物組合物包含干酵母細胞，每立方米固體廢物中加入約300到600g該生物組合物。
10.權利要求8的方法，其中向所述固體廢物中加入所述干酵母細胞之前，將所述干酵母細胞與水按照約30升約1000g酵母細胞的比例混合，并培育約12到24小時。
11.一種包含降解固體廢物中不良化學品的多個酵母細胞的組合物，其中所述多個酵母細胞是通過包括將酵母細胞在一個或一組電磁場中培養(yǎng)的方法而制備的，所述電磁場具有(i)一個或多個選自下列范圍的頻率30到100MHz、70到280MHz、410到430MHz、660到680MHz和1980到2210MHz，和(ii)場強8到250mV/cm。
12.權利要求11的組合物，其中所述酵母細胞是選自下列酵母種的細胞釀酒酵母、薛瓦酵母、德氏酵母、少孢酵母、發(fā)酵性酵母、Saccharomyces logos、蜜蜂酵母、Saccharomyces microellipsoides、卵形酵母、羅氏酵母、魯氏酵母、清酒酵母、葡萄汁酵母、魏氏酵母、路氏酵母、Saccharomyces sinenses和卡氏酵母。
13.權利要求11的組合物，其中所述酵母細胞是干酵母細胞。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于處理固體廢物的生物組合物。本發(fā)明生物組合物包含多個能夠抑制致病微生物生長、分解不良化學品例如抗生素、殺蟲劑和廢棄的化學品、以及減少有機廢物氣味的酵母細胞。本發(fā)明的酵母細胞是通過將多個酵母細胞在存在一組電磁場的活化條件下培養(yǎng)而制備的。本發(fā)明還涉及制備這種處理組合物的方法。
文檔編號C12P13/00GK1683527SQ20051007219
公開日2005年10月19日 申請日期2002年3月1日 優(yōu)先權日2001年3月1日
發(fā)明者張令玉 申請人:歐亞生物科技有限公司