專利名稱：一種豬皮本體高效純化的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種豬皮本體高效純化的方法，屬于生物醫(yī)學材料的制備領域。
背景技術：
近些年來，隨著科學技術的不斷發(fā)展和進步，生物醫(yī)學材料也得到了前所未有的發(fā)展，膠原在生物醫(yī)學材料中的應用日漸廣泛。
膠原廣泛地存在于哺乳動物的骨、腱、軟骨和皮膚及其它結(jié)締組織中，約占哺乳動物蛋白總量的1/3，是構(gòu)成人體重要的細胞外基質(zhì)成分。膠原具有較好的生物相容性，較弱的抗原性，且親水性好，對細胞的吸附作用強。由于它本身就是一種細胞外基質(zhì)成分，還兼具誘導細胞增殖和分化的作用。因此，長期以來，人們利用膠原的性能特點，研究開發(fā)系列膠原基生物醫(yī)學材料，如生物敷料、人工皮膚、生物醫(yī)用膜、止血海綿、脫細胞真皮基質(zhì)材料、可注射膠原溶液、膠原基復合醫(yī)用纖維以及組織工程支架材料等等，部分膠原基生物醫(yī)學材料已應用于臨床，并被證明具有一定的療效(但衛(wèi)華，王坤余，曾睿，等.膠原的醫(yī)學應用及其發(fā)展前景.生物醫(yī)學工程與臨床.2004，8(1)45-48)。
膠原是世界上資源存量最大的可再生動物生物質(zhì)資源，來源廣泛、價廉易得，具有很高的醫(yī)學利用價值。令人遺憾的是，膠原在醫(yī)學應用方面，由于膠原基生物醫(yī)學材料的生物相容性在制造過程中難于控制，導致材料在使用過程中常常出現(xiàn)可靠性和安全性的問題。出現(xiàn)這些問題的根本原因就是由于所使用的膠原蛋白的純度達不到要求。
根據(jù)我們的研究，解決膠原基生物醫(yī)學材料的生物相容性的關鍵是提高膠原蛋白的純度，盡量地清除原料中的非膠原成分和小分子物質(zhì)；在純化提取的過程中，既要確保膠原的生物活性，又要切除全部端肽。現(xiàn)有技術往往忽略了這些關鍵問題，有的技術是使用氯化鈉溶液除去原料中的非膠原成分，再進行提純(傅燕鳳，沈月新，楊承剛，等.淡水魚魚皮膠原蛋白的提取.上海水產(chǎn)大學學報.2004，13(6)146-150)；有的技術則是進行一些簡單的預處理就進行提取(李開雄，趙志遠，劉霞.豬皮中膠原蛋白的提取及應用.肉類研究.1996，443-48)；從總體上來看，已有技術側(cè)重于膠原提取的居多，而對膠原的本體純化考慮甚少(胡勝，李志強，陳敏.皮膠原蛋白的酶法提取及在高附加值領域的應用.皮革科學與工程.2002，12(5)38-42)。
綜上所述，現(xiàn)有技術存在以下不足1.以資源相對有限的牛腱、鼠尾腱為原料提取膠原蛋白，忽略了原料的選擇及其純化對于制備醫(yī)用膠原蛋白的重要性；2.以牛腱為原料提取膠原蛋白，存在攜帶瘋牛病病毒的風險；3.以豬皮、魚皮等提取膠原蛋白，工藝過于簡單，無法達到純化的目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對已有技術存在的不足而提供一種豬皮本體高效純化的方法，其特點是以價廉易得的豬皮為原料，制備具有醫(yī)學利用價值的純化豬皮。
豬皮本體純化的方法包括以下步驟(1)清洗選取健康的新鮮豬皮100重量份裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水調(diào)節(jié)液比2.0-4.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，再加水調(diào)節(jié)液比2.0-4.0，加入氯化鈉1.0-8.0重量份，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，然后充分水洗；(2)脫脂清洗完畢，加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比1.0-4.0，鼓內(nèi)溫度為32-38℃，加入平平加0.1-1.0重量份，純堿0.5-2.0重量份，滲透劑JFC 0.1-0.6重量份，轉(zhuǎn)動60-120min，控干廢液，加入溫度為28-38℃的熱水，使液比達到2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-120min，控干廢液，再加入28-38℃的熱水，使液比達到2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-150min，控干廢液，加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比2.0-5.0，鼓內(nèi)溫度為32-38℃，加入平平加0.3-0.8重量份，脫脂劑9088 2.0-5.0重量份，滲透劑JFC 0.2-0.8重量份，洗衣粉2.0-4.0重量份，2.1203脂肪酶0.3-0.6重量份，轉(zhuǎn)動60-150min，控干廢液，加入溫度為30-35℃的熱水，使液比達到3.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-150min，控干廢液。再加入30-35℃的熱水，使液比達到4.0-6.0，轉(zhuǎn)動60-150min，控干廢液；(3)浸酶加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比0.5-1.2，鼓內(nèi)溫度為32-40℃，加入5萬單位的166中性蛋白酶0.8-4.0重量份，5萬單位的AS1.398蛋白酶0.3-2.0重量份，硫酸銨0.2-0.8重量份，平平加0.3-0.8重量份，間歇轉(zhuǎn)動3min/30min，共轉(zhuǎn)動3-10次，總時間90-300min，然后，控干廢液，加入氯化鈉3.0-8.0重量份，轉(zhuǎn)動30-90min，將皮出鼓，在溫度為25-32℃的溫室內(nèi)整齊堆置，堆置總時間24-72h；(4)去毛、清洗采用機器對豬皮進行去毛后，將豬皮裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水調(diào)節(jié)液比2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，加水至液比為2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，反復操作3次，加入氯化鈉2.0-5.0重量份，加水調(diào)節(jié)液比為2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比為2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，反復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液；(5)膨脹去毛、清洗后，加水調(diào)節(jié)液比1.5-4.0，加入30wt％的液堿3.0-6.0重量份，滲透劑JFC 0.3-0.8重量份，轉(zhuǎn)動90-180min，流水洗30min；(6)脫堿、酶消化加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比1.5-2.0，鼓內(nèi)溫度為30-32℃，加入硫酸0.1-0.3重量份，氯化銨或硫酸銨1.5-3.0重量份，平平加0.2-0.6重量份，轉(zhuǎn)動90-180min，再加入5萬單位的AS1.398中性蛋白酶0.1-0.8重量份、活力為1∶25的工業(yè)胰酶0.1-0.6重量份，轉(zhuǎn)動120-240min，控干廢液；(7)清洗加水調(diào)節(jié)液比2.0-5.0，加入氯化鈉2.0-5.0重量份，轉(zhuǎn)動90-180min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比2.0-5.0，轉(zhuǎn)動90-180min，控干廢液，按上述方法重復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液，獲得純化豬皮；(8)滾鹽加入氯化鈉3.0-12.0重量份，轉(zhuǎn)動30-90min，出鼓；(9)分割首先將純化豬皮裁成矩形，然后再分割成10.0-30.0cm×10.0-30.0cm的小塊矩形；(10)裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度-5--15℃的條件下冷凍保存。
轉(zhuǎn)鼓為懸掛式木制轉(zhuǎn)鼓或不銹鋼轉(zhuǎn)鼓。
本發(fā)明所得到的純化豬皮具有以下性能1.外觀白色片狀物，無肉眼所見之雜質(zhì)；2.蛋白質(zhì)含量＞95％；3.水分60-70％；4.重金屬含量＜10μg/g(m/m)。
本發(fā)明的方法處理得到的純化豬皮，用于提取制備醫(yī)用膠原蛋白、制備組織工程支架材料和制備修復與重建材料。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點1.以價廉易得、來源廣泛的豬皮為原料，制備純化豬皮，既降低了材料成本，又避免了使用牛腱、鼠尾腱所存在的種種不足；2.方法簡單，工藝條件不苛刻，容易滿足；3.工藝規(guī)范，條件可控，易于工業(yè)化生產(chǎn)；4.實現(xiàn)了豬皮的高效純化，純化豬皮不僅可以作為提取制備醫(yī)用膠原蛋白的原料，而且還適合其他多種醫(yī)學用途；5.本方法也能用于其它動物皮的本體高效純化；6.生產(chǎn)過程無污染，具有顯著的環(huán)境效益和經(jīng)濟效益。
具體實施例方式
下面通過實施例對本發(fā)明進行具體的描述，有必要在此指出的是，本實施例只用于對本發(fā)明進行進一步說明，而不能理解為對本發(fā)明的保護范圍的限制，該領域的技術熟練人員可以根據(jù)本發(fā)明的內(nèi)容作出一些非本質(zhì)的改進和調(diào)整。
實施例11.清洗選取健康的新鮮豬皮100重量份裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水調(diào)節(jié)液比2.0，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液，再加水調(diào)節(jié)液比2.0，加入氯化鈉1.0重量份，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液，然后充分水洗；2.脫脂清洗完畢，加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比1.0，鼓內(nèi)溫度為32℃，加入平平加0.1重量份，純堿0.5重量份，滲透劑JFC 0.1重量份，轉(zhuǎn)動60min。控干廢液，加入溫度為28℃的熱水，使液比達到2.0，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液，再加入28℃的熱水，使液比達到2.0，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液，加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比2.0，鼓內(nèi)溫度為32℃，加入平平加0.3重量份，脫脂劑9088 2.0重量份，滲透劑JFC 0.2重量份，洗衣粉2.0重量份，4萬單位的2.1203脂肪酶0.3重量份，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液，加入溫度為30℃的熱水，使液比達到3.0，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液。再加入30℃的熱水，使液比達到4.0，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液；3.浸酶加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比0.5，鼓內(nèi)溫度為32℃，加入5萬單位的166中性蛋白酶0.8重量份，5萬單位的AS1.398蛋白酶0.3重量份，硫酸銨0.2重量份，平平加0.3重量份，間歇轉(zhuǎn)動3min/30min，共轉(zhuǎn)動3次，總時間90min，然后，控干廢液，加入氯化鈉3.0重量份，轉(zhuǎn)動30min，將皮出鼓，在溫度為25℃的溫室內(nèi)整齊堆置，堆置總時間24h；4.去毛、清洗采用機器對豬皮進行去毛后，將豬皮裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水使液比達到2.0，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液，加水至液比為2.0，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液，反復操作3次，加入氯化鈉2.0重量份，加水調(diào)節(jié)液比2.0，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比2.0，轉(zhuǎn)動60min，控干廢液，反復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液；5.膨脹去毛、清洗后，加水調(diào)節(jié)液比1.5，加入30wt％的液堿3.0重量份，滲透劑JFC 0.3重量份，轉(zhuǎn)動90min，流水洗30min；6.脫堿、酶消化加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比為1.5，鼓內(nèi)溫度為30℃，加入硫酸0.1重量份，氯化銨或硫酸銨1.5重量份，平平加0.2重量份，轉(zhuǎn)動90min。再加入5萬單位的AS1.398中性蛋白酶0.1重量份、活力為1∶25的工業(yè)胰酶0.1重量份，轉(zhuǎn)動120min，控干廢液；7.清洗加水調(diào)節(jié)液比為2.0，加入氯化鈉2.0重量份，轉(zhuǎn)動90min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比為2.0，轉(zhuǎn)動90min，控干廢液，按上述方法重復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液，獲得純化豬皮；8.滾鹽加入氯化鈉3.0重量份，轉(zhuǎn)動30min，出鼓；9.分割首先將純化豬皮裁成矩形，然后再分割成10.0-30.0cm×10.0-30.0cm的小塊矩形；10.裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度為-5℃的條件下冷凍保存。
實施例21.清洗選取健康的新鮮豬皮100重量份裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水調(diào)節(jié)液比3.0，轉(zhuǎn)動120min，控干廢液，再加水調(diào)節(jié)液比3.0，加入氯化鈉4.5重量份，轉(zhuǎn)動120min，控干廢液，然后充分水洗；2.脫脂清洗完畢，加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比2.5，鼓內(nèi)溫度為36℃，加入平平加0.5重量份，純堿1.2重量份，滲透劑JFC 0.4重量份，轉(zhuǎn)動90min?？馗蓮U液，加入溫度為33℃的熱水，使液比達到3.5，轉(zhuǎn)動90min，控干廢液，再加入33℃的熱水，使液比達到3.5，轉(zhuǎn)動110min，控干廢液，調(diào)節(jié)液比3.5，鼓內(nèi)溫度為35℃，加入平平加0.5重量份，脫脂劑9088 3.5重量份，滲透劑JFC 0.5重量份，洗衣粉3.0重量份，4萬單位的2.1203脂肪酶0.5重量份，轉(zhuǎn)動110min，控干廢液，加入溫度為32℃的熱水，使液比達到4.0，轉(zhuǎn)動110min，控干廢液。再加入32℃的熱水，使液比達到5.0，轉(zhuǎn)動110min，控干廢液；3.浸酶加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比0.8，鼓內(nèi)溫度為36℃，加入5萬單位的166中性蛋白酶2.4重量份，5萬單位的AS1.398蛋白酶1.2重量份，硫酸銨0.5重量份，平平加0.5重量份，間歇轉(zhuǎn)動3min/30min，共轉(zhuǎn)動6次，總時間180min，然后，控干廢液，加入氯化鈉6重量份，轉(zhuǎn)動60min，將皮出鼓，在溫度為29℃的溫室內(nèi)整齊堆置，堆置總時間48h；4.去毛、清洗采用機器對豬皮進行去毛后，將豬皮裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水使液比達到3.5，轉(zhuǎn)動120min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比3.5，轉(zhuǎn)動120min，控干廢液，反復操作3次，加入氯化鈉3.5重量份，加水調(diào)節(jié)液比3.5，轉(zhuǎn)動120min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比為3.5，轉(zhuǎn)動120min，控干廢液，反復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液；5.膨脹去毛、清洗后，加水調(diào)節(jié)液比2.6，加入30wt％的液堿4.5重量份，滲透劑JFC 0.5重量份，轉(zhuǎn)動130min，流水洗30min；6.脫堿、酶消化加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比為1.8，鼓內(nèi)溫度為31℃，加入硫酸0.2重量份，氯化銨或硫酸銨2.2重量份，平平加0.4重量份，轉(zhuǎn)動130min。再加入5萬單位的AS1.398中性蛋白酶0.45重量份、活力為1∶25的工業(yè)胰酶0.35重量份，轉(zhuǎn)動180min，控干廢液；7.清洗加水調(diào)節(jié)液比為3.5，加入氯化鈉3.5重量份，轉(zhuǎn)動135min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比為3.5，轉(zhuǎn)動135min，控干廢液，按上述方法重復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液，獲得純化豬皮；8.滾鹽加入氯化鈉7.5重量份，轉(zhuǎn)動60min，出鼓；9.分割首先將純化豬皮裁成矩形，然后再分割成10.0-30.0cm×10.0-30.0cm的小塊矩形；10.裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度為-7.5℃的條件下冷凍保存。
實施例3
1.清洗選取健康的新鮮豬皮100重量份裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水調(diào)節(jié)液比4.0，轉(zhuǎn)動180min，控干廢液，再加水調(diào)節(jié)液比4.0，加入氯化鈉8.0重量份，轉(zhuǎn)動180min，控干廢液，然后充分水洗；2.脫脂清洗完畢，加入40-45℃熱水調(diào)節(jié)液比4.0，鼓內(nèi)溫度為38℃，加入平平加1.0重量份，純堿2.0重量份，滲透劑JFC 0.6重量份，轉(zhuǎn)動120min?？馗蓮U液，加入溫度為38℃的熱水，使液比達到5.0，轉(zhuǎn)動120min，控干廢液，再加入38℃的熱水，使液比達到5.0，轉(zhuǎn)動150min，控干廢液，調(diào)液比5.0，鼓內(nèi)溫度為38℃，加入平平加0.8重量份，脫脂劑9088 5.0重量份，滲透劑JFC0.8重量份，洗衣粉4.0重量份，4萬單位的2.1203脂肪酶0.6重量份，轉(zhuǎn)動150min，控干廢液，加入溫度為35℃的熱水，使液比達到5.0，轉(zhuǎn)動150min，控干廢液。再加入35℃的熱水，使液比達到6.0，轉(zhuǎn)動150min，控干廢液；3.浸酶加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比1.2，鼓內(nèi)溫度為40℃，加入5萬單位的166中性蛋白酶4.0重量份，5萬單位的AS1.398蛋白酶2.0重量份，硫酸銨0.8重量份，平平加0.8重量份，間歇轉(zhuǎn)動3min/30min，共轉(zhuǎn)動10次，總時間300min，然后，控干廢液，加入氯化鈉8.0重量份，轉(zhuǎn)動90min，將皮出鼓，在溫度為32℃的溫室內(nèi)整齊堆置，堆置總時間72h；4.去毛、清洗采用機器對豬皮進行去毛后，將豬皮裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水使液比達到5.0，轉(zhuǎn)動180min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比為5.0，轉(zhuǎn)動180min，控干廢液，反復操作3次，加入氯化鈉5.0重量份，加水調(diào)節(jié)液比5.0，轉(zhuǎn)動180min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比5.0，轉(zhuǎn)動180min，控干廢液，反復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液；5.膨脹去毛、清洗后，加水調(diào)節(jié)液比4.0，加入30wt％的液堿6.0重量份，滲透劑JFC 0.8重量份，轉(zhuǎn)動180min，流水洗30min；6.脫堿、酶消化加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比為2.0，鼓內(nèi)溫度為32℃，加入硫酸0.3重量份，氯化銨或硫酸銨3.0重量份，平平加0.6重量份，轉(zhuǎn)動180min。再加入5萬單位的AS1.398中性蛋白酶0.8重量份、活力為1∶25的工業(yè)胰酶0.6重量份，轉(zhuǎn)動240min，控干廢液；7.清洗加水調(diào)節(jié)液比為5.0，加入氯化鈉5.0重量份，轉(zhuǎn)動180min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比為5.0，轉(zhuǎn)動180min，控干廢液，按上述方法重復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液，獲得純化豬皮；8.滾鹽加入氯化鈉12.0重量份，轉(zhuǎn)動90min，出鼓；9.分割首先將純化豬皮裁成矩形，然后再分割成10.0-30.0cm×10.0-30.0cm的小塊矩形；10.裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度為-15℃的條件下冷凍保存。
注本發(fā)明所用的滲透劑JFC、平平加為上海助劑廠生產(chǎn)，脫脂劑9088為杭州永固化工廠生產(chǎn)，4萬單位的2.1203脂肪酶和5萬單位的166中性蛋白酶為上海酒精廠生產(chǎn)，活力為1∶25的工業(yè)胰酶為溫江東方酶制劑廠生產(chǎn)，AS1.398蛋白酶為云南陸良酶制劑有限責任公司生產(chǎn)，其余的化學試劑均為市場購買。
權(quán)利要求
1.一種豬皮本體高效純化的方法，其特征在于該純化方法含有以下步驟(1)清洗選取健康的新鮮豬皮100重量份裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水調(diào)節(jié)液比2.0-4.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，再加水調(diào)節(jié)液比2.0-4.0，加入氯化鈉1.0-8.0重量份，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，然后充分水洗；(2)脫脂清洗完畢，加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比1.0-4.0，鼓內(nèi)溫度為32-38℃，加入平平加0.1-1.0重量份，純堿0.5-2.0重量份，滲透劑JFC 0.1-0.6重量份，轉(zhuǎn)動60-120min，控干廢液，加入溫度為28-38℃的熱水，使液比達到2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-120min，控干廢液，再加入28-38℃的熱水，使液比達到2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-150min，控干廢液，加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比2.0-5.0，鼓內(nèi)溫度為32-38℃，加入平平加0.3-0.8重量份，脫脂劑9088 2.0-5.0重量份，滲透劑JFC 0.2-0.8重量份，洗衣粉2.0-4.0重量份，2.1203脂肪酶0.3-0.6重量份，轉(zhuǎn)動60-150min，控干廢液，加入溫度為30-35℃的熱水，使液比達到3.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-150min，控干廢液，再加入30-35℃的熱水，使液比達到4.0-6.0，轉(zhuǎn)動60-150min，控干廢液；(3)浸酶加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比0.5-1.2，鼓內(nèi)溫度為32-40℃，加入5萬單位的166中性蛋白酶0.8-4.0重量份，5萬單位的AS1.398蛋白酶0.3-2.0重量份，硫酸銨0.2-0.8重量份，平平加0.3-0.8重量份，間歇轉(zhuǎn)動3min/30min，共轉(zhuǎn)動3-10次，總時間90-300min，然后，控干廢液，加入氯化鈉3.0-8.0重量份，轉(zhuǎn)動30-90min，將皮出鼓，在溫度為25-32℃的溫室內(nèi)整齊堆置，堆置總時間24-72h；(4)去毛、清洗采用機器對豬皮進行去毛后，將豬皮裝入轉(zhuǎn)鼓中，加水調(diào)節(jié)液比2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，加水至液比為2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，反復操作3次，加入氯化鈉2.0-5.0重量份，加水調(diào)節(jié)液比為2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比為2.0-5.0，轉(zhuǎn)動60-180min，控干廢液，反復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液；(5)膨脹去毛、清洗后，加水調(diào)節(jié)液比1.5-4.0，加入30wt％的液堿3.0-6.0重量份，滲透劑JFC 0.3-0.8重量份，轉(zhuǎn)動90-180min，流水洗30min；(6)脫堿、酶消化加入40-45℃的熱水調(diào)節(jié)液比1.5-2.0，鼓內(nèi)溫度為30-32℃，加入硫酸0.1-0.3重量份，氯化銨或硫酸銨1.5-3.0重量份，平平加0.2-0.6重量份，轉(zhuǎn)動90-180min，再加入5萬單位的AS1.398中性蛋白酶0.1-0.8重量份、活力為1∶25的工業(yè)胰酶0.1-0.6重量份，轉(zhuǎn)動120-240min，控干廢液；(7)清洗加水調(diào)節(jié)液比2.0-5.0，加入氯化鈉2.0-5.0重量份，轉(zhuǎn)動90-180min，控干廢液，加水調(diào)節(jié)液比2.0-5.0，轉(zhuǎn)動90-180min，控干廢液，按上述方法重復操作3次，然后，充分水洗，控干廢液，獲得純化豬皮；(8)滾鹽加入氯化鈉3.0-12.0重量份，轉(zhuǎn)動30-90min，出鼓；(9)分割首先將純化豬皮裁成矩形，然后再分割成10.0-30.0cm×10.0-30.0cm的小塊矩形；(10)裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度-5--15℃的條件下冷凍保存。
2.按照權(quán)利要求1所述一種豬皮本體高效純化的方法，其特征在于轉(zhuǎn)鼓為懸掛式木制轉(zhuǎn)鼓或不銹鋼轉(zhuǎn)鼓。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種豬皮本體高效純化的方法，該純化方法是選用健康的新鮮豬皮為原料，在維持豬皮的三維構(gòu)造不變的前提下，對豬皮進行反復清洗和多種酶制劑－堿性材料交替處理，除去豬皮中的非膠原成分和小分子物質(zhì)，得到具有良好生物相容性和生物活性的純化豬皮。這種純化豬皮用于提取制備醫(yī)用膠原蛋白、制備組織工程支架材料和修復與重建材料。
文檔編號A22B5/08GK1784986SQ200510022189
公開日2006年6月14日 申請日期2005年12月2日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月2日
發(fā)明者但衛(wèi)華, 曾睿, 林海, 但年華, 陳馳, 曲健健, 葉易春, 關林波 申請人:四川大學