專利名稱：用于降低由螺桿菌引起炎癥的乳酸菌的選擇和應(yīng)用的制作方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及用于篩選非病原抗炎菌株方法的應(yīng)用、和使用這類菌株用于治療和預(yù)防由諸如幽門螺桿菌、其它螺桿菌種、和其它引起炎癥的胃腸病原體之類胃腸細(xì)菌引起的炎癥的產(chǎn)品和方法。
現(xiàn)有技術(shù)幽門螺桿菌是一種螺旋形細(xì)菌，它定居在胃中，亦在其中通過其產(chǎn)生脲酶的能力以中和胃中的酸。脲酶轉(zhuǎn)化尿素(它在胃中有豐富的供應(yīng))為碳酸氫鹽和氨，它們是強(qiáng)堿。這將導(dǎo)致在幽門螺桿菌細(xì)胞周圍存在著云狀的酸中和堿，以保護(hù)它們不受胃酸的影響。幽門螺桿菌細(xì)胞滲入并穿過胃粘液層，附著到胃內(nèi)膜的上皮細(xì)胞上。至少一部分的幽門螺桿菌菌株具有產(chǎn)生毒素的能力。幽門螺桿菌感染會刺激宿主的免疫系統(tǒng)，它會輸送白血球、殺傷T細(xì)胞和其它抗感染劑到該區(qū)域，但是，人體免疫系統(tǒng)在胃的粘液內(nèi)膜逆轉(zhuǎn)幽門螺桿菌效果時不是有效的。幽門螺桿菌細(xì)胞仍存在于該內(nèi)部中，免疫系統(tǒng)逐步增強(qiáng)其對細(xì)胞的響應(yīng)，如果不存在有用的充分抗炎機(jī)制，就會引起炎癥。在幽門螺桿菌感染過程中，由宿主上皮樹狀細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞分裂素(cytokine)細(xì)胞間信號蛋白、固有殺傷細(xì)胞、T細(xì)胞和其它免疫防御細(xì)胞，會傳播免疫響應(yīng)到侵襲的病原體。其結(jié)果是，宿主嗜中性白細(xì)胞被吸引到并滲透胃的上皮細(xì)胞，并在整個感染過程中存留在該處。除了別的因素以外，這些細(xì)胞會產(chǎn)生活性氧產(chǎn)物，如過氧化物自由基，它們會導(dǎo)致在該上皮細(xì)胞中發(fā)生氧化響應(yīng)和隨后的上皮細(xì)胞死亡、潰瘍形成和最終癌發(fā)生。幽門螺桿菌還會誘發(fā)養(yǎng)分從宿主的泄漏流出胃的上皮細(xì)胞，以保持幽門螺桿菌提供養(yǎng)分源，并加劇感染和其后果。幽門螺桿菌能夠躲避人體免疫系統(tǒng)，存活于胃中，盡管宿主的免疫響應(yīng)和這種躲避機(jī)理是當(dāng)前研究的目標(biāo)。
當(dāng)前治療是基于通過抗生素和質(zhì)子泵抑制劑消滅幽門螺桿菌，而不是企圖消除宿主過度免疫響應(yīng)對感染的影響，例如，使充分抗炎機(jī)理更有效，它是本發(fā)明的目的。
因此，幽門螺桿菌感染會引起發(fā)展中的胃炎、胃潰瘍和十二指腸潰瘍增加的危險，包括胃潰瘍、胃癌、和胃粘膜相關(guān)的淋巴組織淋巴瘤。這些問題不是由幽門螺桿菌直接引起的，而是由胃內(nèi)膜響應(yīng)幽門螺桿菌的炎癥引起的。業(yè)已使用多種治療方法，用來改善胃潰瘍和十二指腸潰瘍的癥狀，例如，與抗生素結(jié)合，能減少胃中酸產(chǎn)生的治療方法。新型的防幽門螺桿菌疫苗已經(jīng)試過，但僅具有有限的成功。業(yè)已知道，其它幽門螺桿菌種、以及其它胃腸病原體，會引起胃腸炎癥。
在最近研究文章中，研究幽門螺桿菌感染的研究人員得出結(jié)論，幽門螺桿菌感染會引起胃粘膜唾液酸(sialylation)作為慢性炎癥響應(yīng)的一部分，并且許多有毒菌株從而更能連接到該發(fā)炎部位(Science18573-578，2002)。
胃內(nèi)和胃腸道的炎癥，可通過稱作細(xì)胞分裂素的細(xì)胞間信號蛋白而得到調(diào)節(jié)，該細(xì)胞分裂素是由上皮細(xì)胞中巨噬細(xì)胞和樹狀細(xì)胞響應(yīng)抗原刺激諸如由幽門螺桿菌或其它病原體產(chǎn)生的刺激而產(chǎn)生的。當(dāng)該上皮細(xì)胞與抗原諸如幽門螺桿菌或由其產(chǎn)生的內(nèi)毒素如LPS接觸時，該上皮細(xì)胞中的抗原遞呈細(xì)胞(包括樹狀細(xì)胞)會傳播該信號到自然巨噬細(xì)胞，它接著以所謂Th-1型響應(yīng)進(jìn)行響應(yīng)，其中，包括TNFα、IL-1、IL-6、IL-12R前發(fā)炎細(xì)胞分裂素由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。這些細(xì)胞分裂素反過來刺激固有殺傷細(xì)胞、T-細(xì)胞和其它細(xì)胞產(chǎn)生干擾素γ(IFNγ)，它是炎癥的關(guān)鍵培養(yǎng)基。IFNγ會導(dǎo)致發(fā)炎響應(yīng)和上述導(dǎo)致細(xì)胞毒性反應(yīng)的逐步升級。自然巨噬細(xì)胞還會以Th-2型響應(yīng)對抗原進(jìn)行響應(yīng)。這種響應(yīng)受到IFNγ的抑制。這些Th-2型細(xì)胞產(chǎn)生抗炎的細(xì)胞分裂素，諸如IL-4、IL-5、IL-9和IL-10。
已經(jīng)知道IL-10能抑制產(chǎn)生IFNγ，從而能抑制免疫響應(yīng)。Th-1和Th-2之間的平衡和它們各自細(xì)胞分裂素產(chǎn)生，決定了對于給定抗原的發(fā)炎響應(yīng)的程度。Th-2型細(xì)胞還能經(jīng)由免疫系統(tǒng)刺激免疫球蛋白的產(chǎn)生。在胃腸道中的抗炎活性，其中存在降低的TNFα水平，與提高的上皮細(xì)胞(腸壁內(nèi)膜完整性)相關(guān)，從而，與由胃腸病原體和毒素引起的負(fù)作用降低相關(guān)聯(lián)。
大量研究的結(jié)果表明，DNA能夠?qū)δc上皮細(xì)胞發(fā)揮抗炎作用，或者，能刺激免疫系統(tǒng)。(Madsen等和Rachmilewitz等各自在《消化疾病期刊(Digestive Disease Week)》，May 19-22，2002，The MosconeCenter，San Francisco的陳述)。
老鼠自發(fā)性產(chǎn)生慢性結(jié)腸炎，這在無病毒動物中不會發(fā)生。老鼠結(jié)腸炎與人的克羅恩氏病相似，它是一種慢性嚴(yán)重的胃腸道炎癥?？肆_恩氏病通常發(fā)生在腸內(nèi)，但也可發(fā)生在胃腸道的任何地方。這些情形都需要存在腸道菌群，并且它們都是Th-1中介的-IL-12-依賴形結(jié)腸炎。由于起因和癥狀的相似性，結(jié)腸炎的老鼠模型和其它老鼠模型，被用來直接研究發(fā)炎響應(yīng)的成分，并且，以應(yīng)用于人體的相同機(jī)理，被接受用來研究開發(fā)對人體胃腸疾病的治療。
羅伊乳酸桿菌是一種天然存在的動物胃腸道居民，它日常地發(fā)現(xiàn)在健康動物的腸內(nèi)，盡管具有低的pH，有時也存在于人的胃中。已知它具有抗菌活性。例如，參見美國專利5,439,678、5,458,875、5,534,253、5,837,238和5,849,289。當(dāng)羅伊乳酸桿菌細(xì)胞在甘油存在下于厭氧條件下生長時，它們會產(chǎn)生稱作無蛋白菌質(zhì)(reuterin)(β-羥基-丙醛)的抗菌物質(zhì)。
棒狀乳芽孢桿菌(Lactobacillus coryniformis)是一種鮮為人知的乳酸桿菌種，它是人體口腔常見居住者。它可在土壤、肥料和植物體中發(fā)現(xiàn)。它已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在青貯飼料中和當(dāng)啤酒變壞時，而且，良好的乳酸生產(chǎn)以及抗真菌活性也有報導(dǎo)。此處所用棒狀乳芽孢桿菌MM7分離物(ATCC PTA-4660)，發(fā)現(xiàn)存在于人體母乳中。
免疫調(diào)制活性還與多種乳酸桿菌有關(guān)。盡管一些乳酸桿菌的有效抗菌活性的可能性是已知的，但是，存在于菌株之間它們降低胃腸炎癥的能力的實質(zhì)性差異，以前還不是已知的，對這類菌株的選擇也不是已知的。
因此，本發(fā)明一個目的是提供乳酸桿菌菌株，對于它們能降低胃腸炎癥能力經(jīng)過選擇，例如歸因于幽門螺桿菌的炎癥。本發(fā)明另一個目的是提供含有所述菌株的產(chǎn)品，包括用于人體給藥以治療或預(yù)防與幽門螺桿菌有關(guān)炎癥的試劑，包括調(diào)制培養(yǎng)基，其中所述菌株已經(jīng)長成及其含蛋白質(zhì)提取物。
其它目的和優(yōu)點將從下述說明和隨后權(quán)利要求書變得更加清楚明了。
發(fā)明概述本發(fā)明包括對于能降低胃腸炎癥能力經(jīng)過選擇的乳酸桿菌菌株，例如這種炎癥歸因于幽門螺桿菌，和源自所述菌株的產(chǎn)品，包括用于人體給藥以治療或預(yù)防與幽門螺桿菌有關(guān)炎癥的試劑，并包括調(diào)制培養(yǎng)基，其中所述菌株已經(jīng)長成和該調(diào)制培養(yǎng)基的含蛋白質(zhì)提取物。
本發(fā)明其它目的和特征將從下述說明和隨后權(quán)利要求書變得更加清楚明了。
附圖簡要說明

圖1為表示乳酸桿菌調(diào)制培養(yǎng)基對由LPS活化巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的TNFα影響的條形圖。45種乳酸桿菌菌株得到測試。
圖2為表示在調(diào)制培養(yǎng)基存在下各種不同乳酸桿菌株和LPS的巨噬細(xì)胞TNFα表達(dá)與僅有LPS的巨噬細(xì)胞比較的折疊變化的條形圖。
發(fā)明詳細(xì)說明及其優(yōu)選實施例本發(fā)明包括對于能降低胃腸炎癥能力經(jīng)過選擇的乳酸桿菌菌株，例如這種炎癥歸因于幽門螺桿菌。這類菌株包括棒狀乳芽孢桿菌MM7、ATCC PTA-4660和羅伊乳酸桿菌MM2-3、ATCC PTA-4659。諸如食品、營養(yǎng)添加劑和配方、醫(yī)藥品或含有源自這些菌株的全部細(xì)胞或成分的醫(yī)療器械的產(chǎn)品，可按本領(lǐng)域已知方法進(jìn)行配制，通常包括已知的可吸收載體和乳酸桿菌菌株、或其衍生成分。先前已知的菌株，現(xiàn)在確認(rèn)具有良好TNFα降低能力，諸如鼠李糖乳酸桿菌GGATCC 53103、羅伊乳酸桿菌ATCC 55730和其它菌株，也可用于上述配方。這些產(chǎn)品是用于人體給藥以治療或預(yù)防與幽門螺桿菌有關(guān)炎癥的試劑。
使用合適細(xì)胞分裂素的模型系統(tǒng)，用來確定能降低或提高炎癥的因素。在本申請?zhí)峁┑膶嵤├?，一種老鼠巨噬細(xì)胞化驗，它使用RAW 264.7巨噬細(xì)胞(ATCC，Rockville，MD，ATCC # TIB-71)，用來篩選細(xì)菌菌株主要是乳酸桿菌，以確定它們對于發(fā)炎途徑的影響。IL-10用于此化驗中作為正控制，采用IL-10的治療對于前炎性細(xì)胞分裂素如TNFα(腫瘤壞死因子α)具有抑制作用。當(dāng)篩選的乳酸桿菌株在實驗室培養(yǎng)基中經(jīng)過單獨培育后，通過過濾除去活的細(xì)菌細(xì)胞，在巨噬細(xì)胞化驗中對上清液(本申請中也稱作“調(diào)制培養(yǎng)基”)進(jìn)行測試。巨噬細(xì)胞先采用前炎性抗原進(jìn)行刺激，例如，純化的LPS(大腸桿菌衍生的脂多糖)、金黃色葡萄球菌衍生的脂磷壁質(zhì)酸(LTA)或不含大腸桿菌或螺桿菌調(diào)制培養(yǎng)基的細(xì)胞，以產(chǎn)生含TNFα的前炎性細(xì)胞分裂素。源自乳酸桿菌菌株的調(diào)制培養(yǎng)基，含有源自篩選細(xì)菌的假定免疫調(diào)制物質(zhì)，與抗原活化的巨噬細(xì)胞一起被培養(yǎng)。調(diào)制培養(yǎng)基對調(diào)制巨噬細(xì)胞免疫響應(yīng)的能力，可通過改變該細(xì)胞的TNFα產(chǎn)生而進(jìn)行監(jiān)測。自該化驗的TNFα輪廓，能保證選擇的菌株在降低巨噬細(xì)胞的TNFα產(chǎn)生方面是最有效的。在該化驗體系中采用pH調(diào)節(jié)的對照實驗，消除了變化的pH會引起觀察影響的可能性。
令人驚奇地，明顯相似的細(xì)菌分離物和乳酸桿菌菌株，甚至來自非常相似的人體來源，都顯示變化的且廣泛不同的能力都影響在響應(yīng)前炎性抗原時由巨噬細(xì)胞的TNFα的產(chǎn)生。這些菌株甚至不能通過遺傳指紋而被確認(rèn)，因為它們可高達(dá)98％的遺傳相似，但是，對于免疫細(xì)胞仍具有非常不同的影響。經(jīng)此篩選且發(fā)現(xiàn)對于防止巨噬細(xì)胞的受激前炎性細(xì)胞分裂素生產(chǎn)具有強(qiáng)的抑制效果的菌株，對于治療人體胃腸道炎癥是非常有效的，包括幽門螺桿菌引起的胃部炎癥。
本發(fā)明特征借助于下述實施例將變得更加清楚明了，但是，這些實施例不能理解為是對本發(fā)明的限制。
實施例1 選擇抗炎菌株乳酸桿菌[例如，包括鼠李糖乳酸桿菌GG ATCC 53103，約氏乳酸桿菌(L.Johnsonii)ATCC 33200，羅伊乳酸桿菌MM2-3ATCCPTA-4659，棒狀乳芽孢桿菌菌株，MM7，ATCC PTA-4660]和大腸桿菌Nissle，分別在de Man，Rogosa，Sharpe(MRS)和Luria-Bertani(LB)培養(yǎng)基(Difco，Sparks，MD)培育。過夜，乳酸桿菌培養(yǎng)物稀釋到OD600為1.0(大約表示109細(xì)胞/ml)，進(jìn)一步以1∶10進(jìn)行稀釋，并另外培育4、8和24小時。幽門螺桿菌、(悉尼菌株SS1)和肝螺桿菌381(ATCC 51449)在補充有10％牛胎兒血清(FBS)的布魯氏肉湯(Difco)中培養(yǎng)48小時。培養(yǎng)物以1∶10進(jìn)行稀釋，并培育另外24和48小時。在4℃于8500rpm周速通過離心分離10分鐘，收集不含細(xì)菌細(xì)胞的調(diào)制培養(yǎng)基。調(diào)制培養(yǎng)基與該細(xì)胞小球分離，接著過濾流過0.22μm孔過濾裝置(Millipore，Bedford，Mass)。
老鼠單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞細(xì)胞系，RAW 264.7(ATCC TIB-71)和RAW 264.7γNO(-)(ATCC CRL-2278)，用作研究炎癥反應(yīng)途徑的報道細(xì)胞。RAW 264.7細(xì)胞是在補充有10％FBS和2％抗生素(5000單位/ml青霉素和5mg/ml鏈霉素，Sigma)的Dulbecco’s改性鷹培養(yǎng)基(野生型)或RPMI培養(yǎng)基1640(γNO-)(Gibco-InvitrogenCarlsbad，CA)中于5％ CO237℃下進(jìn)行培育，直到80-90％融合。大約5×104細(xì)胞播種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)物簇中，并在脂多糖(LPS)活化和添加調(diào)制培養(yǎng)基之前，使之粘合2小時。自然RAW 264.7細(xì)胞暴露于自大腸桿菌血清型O127:B8(Sigma)的純化LPS。活化培養(yǎng)通過每孔添加2ng LPS到20μl調(diào)制培養(yǎng)基進(jìn)行。巨噬細(xì)胞既可預(yù)培養(yǎng)，或者可與不含細(xì)胞的乳酸桿菌調(diào)制培養(yǎng)基一起共培養(yǎng)。重組體mIL-10(R&D體系，Minneapolis，Min.)用作正控制。細(xì)胞存活率通過臺盼藍(lán)(Invitrogen)排除進(jìn)行評價。在細(xì)胞培養(yǎng)物上清液中TNF-α的存在，采用夾心酶免疫測定進(jìn)行測量，Quantikine M老鼠TNF-α免疫測定(R&D體系)。
乳酸桿菌調(diào)制培養(yǎng)基對LPS活化巨噬細(xì)胞的TNF-α產(chǎn)生的影響，如圖1所示，它表明，在測試的45種菌株中，多種不同菌株具有降低活化巨噬細(xì)胞的TNF-α產(chǎn)生的能力。圖2表示各種不同乳酸桿菌株的TNFα表達(dá)與單獨LPS相比的折疊變化。這些研究結(jié)果接著可用來選擇最有效的菌株。在附圖中有提及但在文本中沒有特別提及的菌株，是已經(jīng)測試的乳酸桿菌主要是羅伊乳酸桿菌的各種菌株。
在這個實施例中，棒狀乳芽孢桿菌MM7，ATCC PTA-4660，通過使用上述方法進(jìn)行選擇，用于添加到標(biāo)準(zhǔn)酸奶中。通過使用乳品加工業(yè)培育乳酸桿菌的標(biāo)準(zhǔn)方法，使棒狀乳芽孢桿菌菌株培育并使之凍干。這種培養(yǎng)物接著添加到先前發(fā)酵牛奶中，使用傳統(tǒng)酸奶培養(yǎng)物，以10E+7CFU/克酸奶的水平，該酸奶為人所用，作為預(yù)防由幽門螺桿菌引起的胃炎。
實施例2使用調(diào)制培養(yǎng)基使用上述方法，在此實施例中，源自一種有效TNF-α降低菌株的調(diào)制培養(yǎng)基是選擇源自羅伊乳酸桿菌ATCC PTA-4659的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通過使該菌株在de Man，Rogosa，Sharpe(MRS)(Difco，Sparks，MD)培育而大規(guī)模地制備。過夜，乳酸桿菌培養(yǎng)物稀釋到OD600為1.0(大約表示109細(xì)胞/ml)，進(jìn)一步以1∶10進(jìn)行稀釋，并另外培育24小時。在4℃于8500rpm轉(zhuǎn)速通過離心分離10分鐘，收集不含細(xì)菌細(xì)胞的調(diào)制培養(yǎng)基。調(diào)制培養(yǎng)基與該細(xì)胞小球分離，接著過濾流過0.22μm孔過濾裝置(Millipore，Bedford，Mass)。該調(diào)制培養(yǎng)基接著進(jìn)行凍干，并使用標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行配制以制得片劑。這種片劑被人作為藥物用來治療由幽門螺桿菌引起的潰瘍。
實施例3羅伊乳酸桿菌菌株的DNA指紋識別使用Lupski等的美國專利5,523,217和5,691,136的方法，來進(jìn)行羅伊乳酸桿菌菌株的染色體組指紋識別。這種方法利用通過添加一對外表定向的引物到細(xì)菌樣品中的細(xì)菌DNA的放大。在放大后，所得雜交作用的延伸產(chǎn)物按尺寸進(jìn)行分離，細(xì)菌菌株通過測量分級的延伸產(chǎn)物圖案對其進(jìn)行表征。通過使用Upriime E引物(一種引物)，對于Bacterial Barcodes，Inc.(Houston，TX)的82種羅伊乳酸桿菌菌株，獲得二倍凝膠圖象。這些數(shù)據(jù)的二倍組是可比的。共有11個相互不同的簇，和8個看起來獨特的異常值。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)對于降低TNF-α有效的(參見圖1和2)菌株，使用這種方法沒有集合在一起，表明使用DNA指紋識別這種方法以發(fā)現(xiàn)具有TNF-α的多種菌株，是不充分的。
實施例4 表征由有效乳酸桿菌菌株產(chǎn)生的蛋白質(zhì)采用多種變性化合物，對不同的有效乳酸桿菌調(diào)制培養(yǎng)基包括羅伊乳酸桿菌菌株MM2-3調(diào)制的培養(yǎng)基，進(jìn)行處理，以確定源自該細(xì)菌的假定免疫模量的性質(zhì)。這樣，調(diào)制培養(yǎng)基進(jìn)行重復(fù)的凍融、熱處理、采用DNA消化酶、蛋白酶和滅活蛋白酶的消化。這樣，假定免疫模量實質(zhì)上被確定為一種或多種蛋白質(zhì)或肽。為了確定貧富蛋白質(zhì)免疫模量的大小，通過過濾對該調(diào)制培養(yǎng)基進(jìn)行分離，并測試濾液的療效。這樣，發(fā)現(xiàn)有效乳酸桿菌的調(diào)制培養(yǎng)基的活性成分，大小約為5kDa或更小。
盡管本發(fā)明業(yè)已借助具體實施方式
對其進(jìn)行了說明，但是，應(yīng)該理解多種變化、改進(jìn)、和實施方式是可能的，因此，所有這些變化、改進(jìn)和實施方式可被認(rèn)為是處于本發(fā)明精神和范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種棒狀乳芽孢桿菌菌株MM7，ATCC PTA-4660的生物純培養(yǎng)物。
2.一種羅伊乳酸桿菌菌株MM2-3，ATCC PTA-4659的生物純培養(yǎng)物。
3.一種乳酸桿菌菌株的生物純培養(yǎng)物，是通過使用老鼠巨噬細(xì)胞化驗TNFα活性、對于其具有降低與哺乳動物胃腸道中幽門螺桿菌感染有關(guān)的胃腸炎癥的能力進(jìn)行選擇的。
4.一種降低與幽門螺桿菌相關(guān)炎癥的成分，源自乳酸桿菌菌株的生物純培養(yǎng)物，所述成分是在所述菌株培育后從不含細(xì)胞的培養(yǎng)物上清液中獲得的，并具有降低TNFα數(shù)量的能力。
5.權(quán)利要求4所述降低與幽門螺桿菌相關(guān)炎癥的成分，其中，所述成分是蛋白質(zhì)或其組成部分。
6.權(quán)利要求5所述成分，其中，所述蛋白質(zhì)、或其組成部分特征在于小于5kDa。
7.一種自羅伊乳酸桿菌菌株MM2-3，ATCC PTA-4659的生物純培養(yǎng)物分離得到的不含細(xì)胞的培養(yǎng)物上清液。
8.一種自棒狀乳芽孢桿菌菌株MM7，ATCC PTA-4660的生物純培養(yǎng)物分離得到的不含細(xì)胞的培養(yǎng)物上清液。
9.一種食品組合物，包括一種可消化載體和一種降低與幽門螺桿菌相關(guān)炎癥的成分，該成分源自一種乳酸桿菌菌株，其選自由棒狀乳芽孢桿菌菌株MM7，ATCC PTA-4660和羅伊乳酸桿菌菌株MM2-3，ATCC PTA-4659組成的組。
10.權(quán)利要求9所述食品組合物，其中，所述成分含有所述乳酸桿菌菌株的生物純培養(yǎng)物的細(xì)胞。
11.一種藥物組合物，包括一種藥物載體和一種降低與幽門螺桿菌相關(guān)炎癥的成分，該成分源自一種乳酸桿菌菌株，其選自由棒狀乳芽孢桿菌菌株MM7，ATCC PTA-4660和羅伊乳酸桿菌菌株MM2-3，ATCC PTA-4659組成的組。
12.權(quán)利要求11所述藥物組合物，其中，所述成分含有所述乳酸桿菌菌株的生物純培養(yǎng)物的細(xì)胞。
13.一種營養(yǎng)補劑，包括一種可消化載體和一種降低與幽門螺桿菌相關(guān)炎癥的成分，該成分源自一種乳酸桿菌菌株，其選自由棒狀乳芽孢桿菌菌株MM7，ATCC PTA-4660和羅伊乳酸桿菌菌株MM2-3，ATCC PTA-4659組成的組。
14.權(quán)利要求13所述營養(yǎng)補劑，其中，所述成分含有所述乳酸桿菌菌株的生物純培養(yǎng)物的細(xì)胞。
15.一種制備食品組合物的方法，包括a.選擇一種權(quán)利要求3的乳酸桿菌菌株；b.從所述菌株得到一種抗炎成分；和c.添加所述成分到一種可消化載體中得到食品。
16.一種制備藥物組合物的方法，包括a.選擇一種權(quán)利要求3的乳酸桿菌菌株；b.從所述菌株得到一種抗炎成分；和c.添加所述成分到藥物載體中得到一種藥物組合物。
17.一種制備營養(yǎng)補劑的方法，包括a.選擇一種權(quán)利要求3的乳酸桿菌菌株；b.從所述菌株得到一種抗炎成分；和c.添加所述成分到一種可消化載體中得到一種營養(yǎng)補劑。
18.一種用于治療或預(yù)防與幽門桿菌有關(guān)炎癥的試劑，含有一種源自權(quán)利要求1、2或3的乳酸桿菌菌株的抗炎成分。
19.一種用于治療或預(yù)防與幽門桿菌有關(guān)炎癥的方法，包括選擇至少一種乳酸桿菌菌株，所述至少一種菌株其特征在于它能夠降低胃腸炎癥；和將所述至少一種菌株的細(xì)胞對人給藥。
20.權(quán)利要求19所述方法，其中，所述細(xì)胞是口服給藥。
21.權(quán)利要求19所述方法，其中，所述細(xì)胞是直腸給藥。
22.權(quán)利要求19所述方法，其中，所述菌株在調(diào)制培養(yǎng)基中產(chǎn)生一種與降低炎性細(xì)胞分裂素活性有關(guān)的蛋白質(zhì)。
23.權(quán)利要求22所述方法，其中，所述蛋白質(zhì)其特征在于小于5kDa。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有降低胃腸炎癥例如幽門螺桿菌炎癥的能力經(jīng)過選擇的乳酸桿菌，和源自該菌株的產(chǎn)品，包括用于對人給藥以治療或預(yù)防與幽門螺桿菌有關(guān)炎癥的試劑，和其中所選用菌株已經(jīng)培育的調(diào)制培養(yǎng)基，以及該調(diào)制培養(yǎng)基含蛋白質(zhì)的提取物。
文檔編號A23L1/30GK1694954SQ200380100800
公開日2005年11月9日 申請日期2003年10月6日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月7日
發(fā)明者布·莫爾斯泰姆, 埃蒙·康諾利 申請人:生命大地女神有限公司