專利名稱:姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種姬松茸10噸罐及10噸罐以上大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝。
姬松茸(Agaricus blazei Murrill)是一種藥用價值很高的名貴真菌,分類學(xué)上屬擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina),層菌綱(Hymenomycetes),傘菌目(Agaricales),傘菌科(Agaricaceae),傘菌屬(Agaricus)。姬松茸(又名小松菇、巴西蘑菇,日本稱為草地姬松茸)原產(chǎn)于巴西,秘魯?shù)鹊?,主要分布于海岸地帶草場及巴西東南部的皮也拿山地。姬松茸營養(yǎng)豐富,味道鮮美,有濃烈的杏仁香味,具有抗腫瘤、預(yù)防癌的效果,同時具有防低血糖、降低血壓、膽固醇,改善動脈硬化等作用。姬松茸子實體含水份85-87%,每100克干菇中含粗蛋白40-45%,糖質(zhì)38-45%,纖維質(zhì)6-8%,粗灰分5-7%,粗脂肪3-4%,是含糖質(zhì)和蛋白質(zhì)非常豐富的食用菌。姬松茸菌絲體含有多達18種氨基酸,包括人體必需的八種氨基酸,氨基酸總量為21.37g/100g干樣,其中八種氨基酸占氨基酸總量的39.7%。干菇含維生素B1、B2,還含有較多的麥角甾醇(0.1-0.2%),經(jīng)過光照或加熱,這種維生素D原就會變成維生素D2。隨著研究的深入姬松茸多糖顯著的療效也逐漸被人們所認識,多糖的功效,主要體現(xiàn)在以下幾個方面(1)抗腫瘤、提高免疫功能。(2)降血壓、血脂。(3)健胃保肝。(4)除上述外,還具有抗衰老、抗感染、抗輻射、抗毒物損傷、抗水腫、抗暈、祛痰鎮(zhèn)咳等方面的功效。
目前姬松茸生產(chǎn)的原料多靠人工栽培和野外采集獲得,由于野生姬松茸在自然界中數(shù)量稀少,加上目前野生環(huán)境的破壞和人們對姬松茸的過度采集,野外采集的姬松茸來源越來越少,而人工栽培雖能提供一定數(shù)量的姬松茸,但具有周期長(一般三個月左右)、占地面積大、產(chǎn)量低、需要的勞動量大、病蟲害多、受季節(jié)性限制(一般僅限于夏秋季栽培),無法進行工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)等缺點,因而不能滿足市場上對姬松茸的需求。而深層培養(yǎng)方法具有周期較短、產(chǎn)量高且質(zhì)量穩(wěn)定,適合工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點,可作為今后主要的生產(chǎn)方式。液體深層培養(yǎng)到一定規(guī)模時,各種參數(shù)的控制對整個發(fā)酵的質(zhì)量起著相當重要的作用。如果將小試(搖瓶或小發(fā)酵罐)工藝直接套用到大規(guī)模發(fā)酵中往往會出現(xiàn)參數(shù)控制失調(diào),進而導(dǎo)致發(fā)酵產(chǎn)量質(zhì)量下降。因此到目前為止,尚未見到姬松茸大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵技術(shù)方面的報道,僅有一些小試方面的研究。
本發(fā)明的目的提供了一種大規(guī)模的姬松茸液體深層發(fā)酵工藝,并且通過對工藝參數(shù)和培養(yǎng)基配方的優(yōu)化,使產(chǎn)量質(zhì)量都有明顯提高,從而解決了已有技術(shù)存在的各種問題。
為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝依次包括以下步驟(1)將姬松茸斜面菌種接入裝有搖瓶培養(yǎng)基的搖瓶中,25~28℃溫度培養(yǎng)6~8天;(2)將步驟1中所得的菌種轉(zhuǎn)接入裝有搖瓶培養(yǎng)基的搖瓶中再進行擴大培養(yǎng),25~28℃溫度培養(yǎng)5~6天;(3)將步驟2中所得的菌種轉(zhuǎn)接入一個裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的一級種子罐中,保持罐溫25~28℃,罐壓40~50kPa,攪拌速率120~140r/min,通氣量1∶0.3~0.5,發(fā)酵72~96小時;(4)將一級種子罐中的菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的二級種子罐中,保持罐溫25~28℃,罐壓50~60kPa,攪拌速率120~140r/min,通氣量1∶0.4~0.6,發(fā)酵72~96小時;(5)將二級種子罐中的菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的三級種子罐中,保持罐溫25~28℃,罐壓60~70kPa,攪拌速率120~140r/min,通氣量1∶0.5~0.7,發(fā)酵85~110小時;(6)將三級種子罐中的菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的大型發(fā)酵罐中,保持罐溫25~28℃,罐壓70~90kPa,攪拌速率120~140r/min,通氣量為1∶0.7~0.8,發(fā)酵96~120小時,然后放罐將發(fā)酵液用板框壓濾機壓濾,得濕菌絲體,然后放入真空干燥機中50~60℃烘干至含水量低于8%。
本發(fā)明步驟1中搖瓶培養(yǎng)基與搖瓶的容積比為1∶5~1∶10;步驟2中搖瓶培養(yǎng)基與搖瓶的容積比為1∶2~1∶5。
本發(fā)明步驟3中一級種子罐的容積為150L~300L,在該一級種子罐中裝有的發(fā)酵培養(yǎng)基相應(yīng)為100L~250L;步驟4中二級、三級種子罐指的是1.5噸~5噸的發(fā)酵罐,在該二級、三級種子罐中裝有的發(fā)酵培養(yǎng)基相應(yīng)為1噸~4噸。
本發(fā)明步驟5中大型發(fā)酵罐指的是10噸~30噸發(fā)酵罐,在該發(fā)酵罐中裝有的發(fā)酵培養(yǎng)基相應(yīng)為7.5噸~24噸。
本發(fā)明中所述的搖瓶培養(yǎng)基的成份配比(重量體積比g/100ml)為馬鈴薯15%~25%,葡萄糖1%~3%,硫酸鎂0.08%~0.15%,磷酸二氫鉀0.2~0.4%,維生素B1為10~20ppm,加水定容至所需體積,該搖瓶培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本發(fā)明中所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的成份及配比(重量體積比g/100ml)為酵母粉0.5%~1.5%,(NH4)2SO40.5%~2%,玉米粉2%~3%,豆餅粉1%~2%,葡萄糖1.5%~2%,硫酸鎂0.03%~0.05%,磷酸二氫鉀0.1%~0.15%,維生素B1為10~20ppm,加水定容至所需體積,該發(fā)酵培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本發(fā)明步驟5中放罐的標準為發(fā)酵液變得較為粘稠,鏡檢有大量菌絲體,PH值降至3.5~3.8左右,取樣離心稱濕菌絲體重量,較4小時前無明顯增加即可放罐。
本發(fā)明適用于各種姬松茸菌種10噸罐及10噸罐以上大規(guī)模液體深層發(fā)酵,解決了姬松茸尚不能大規(guī)模生產(chǎn)的局限,這對姬松茸工業(yè)化生產(chǎn)及其相關(guān)應(yīng)用產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有重要的意義。本發(fā)明工藝發(fā)酵規(guī)模達到10噸及10噸以上,干粉得率達到1.0%~1.2%,大大提高了產(chǎn)量;每100克菌絲體干粉多糖含量達到6~8克,比香菇(5.75g/100g)、毛木耳(4.71g/100g)、靈芝(1.30g/100g)高。此外所得到姬松茸發(fā)酵菌絲體的氨基酸的總量為22.90%,必需氨基酸占氨基酸總量的43.69%,高于子實體中的相應(yīng)含量;姬松茸發(fā)酵菌絲體的鈣含量是子實體的50倍,鎂元素的含量是子實體的7.3倍。另外發(fā)酵菌絲體中鎘元素的含量遠低于子實體,因為發(fā)酵生產(chǎn)的姬松茸菌絲體能避免栽培基質(zhì)中有害元素的污染。從上述結(jié)果可以看出通過本發(fā)明發(fā)酵生產(chǎn)的姬松茸菌絲體不僅在產(chǎn)量和生產(chǎn)潛力遠遠高于栽培方法生產(chǎn)姬松茸,而且在多糖、氨基酸和微量元素含量等方面不同程度優(yōu)于栽培姬松茸菌,因此說明通過本發(fā)明發(fā)酵生產(chǎn)的姬松茸具有較栽培姬松茸更高的產(chǎn)量和更好的質(zhì)量,完全可以成為今后生產(chǎn)姬松茸菌的主要方法。
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明。
實施例1將新鮮的斜面菌種接入十個裝有100mL搖瓶培養(yǎng)基的500mL三角搖瓶中,26℃搖床培養(yǎng)8天。然后每兩個500mL搖瓶種轉(zhuǎn)接入裝有1000mL搖瓶培養(yǎng)基的2000mL三角瓶中,26℃搖床培養(yǎng)5天。將5瓶2000ml搖瓶中的種轉(zhuǎn)接入一個裝有100L發(fā)酵培養(yǎng)基的總?cè)莘e為150L的一級種子罐,保持罐溫26℃,罐壓40kPa,攪拌速率120r/min,通氣量1∶0.35,發(fā)酵85小時。將種子罐菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有1噸發(fā)酵培養(yǎng)基的1.5噸二級種子罐中,保持罐溫26℃,罐壓50kPa,攪拌速率130r/min,通氣量1∶0.5,發(fā)酵90小時。將二級種子罐中菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有10噸發(fā)酵培養(yǎng)基的15噸發(fā)酵罐中,保持罐溫26℃,罐壓70kPa,攪拌速率140r/min,通氣量為1∶0.7,發(fā)酵110小時,然后放罐將發(fā)酵液用板框壓濾機壓濾,得濕菌絲體,然后放入真空干燥機中58℃烘干,干粉得率為1.14%,用苯酚-硫酸法測總多糖含量為6.16克/100克干粉。
本實施1中的搖瓶培養(yǎng)基的成份配比(重量體積比g/100ml)為馬鈴薯20%,葡萄糖2%,硫酸鎂0.1%,磷酸二氫鉀0.3%,維生素B1為15ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至100mL、1000mL,搖瓶培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施1中的發(fā)酵培養(yǎng)基的成份及配比(重量體積比g/100ml)為酵母粉1.5%,(NH4)2SO41.5%,玉米粉2%,豆餅粉2%,葡萄糖1.8%,硫酸鎂0.03%,磷酸二氫鉀0.15%,維生素B1為15ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至100L、1噸、10噸,發(fā)酵培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施1中放罐的標準為發(fā)酵液變得較為粘稠,鏡檢有大量菌絲體,PH值降至3.5~3.8左右,取樣離心稱濕菌絲體重量,較4小時前無明顯增加即可放罐。
實施例2將新鮮的斜面菌種接入十個裝有150mL搖瓶培養(yǎng)基的500mL三角搖瓶中,27℃搖床培養(yǎng)7天。然后每兩個500mL搖瓶種轉(zhuǎn)接入裝有1000mL搖瓶培養(yǎng)基的3000mL三角瓶中,27℃搖床培養(yǎng)6天。將5瓶3000ml搖瓶中的種轉(zhuǎn)接入一個裝有100L發(fā)酵培養(yǎng)基的總?cè)莘e為150L的一級種子罐,保持罐溫27℃,罐壓45kPa,攪拌速率130r/min,通氣量1∶0.4,發(fā)酵72小時。將種子罐菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有1噸發(fā)酵培養(yǎng)基的1.5噸二級種子罐中,保持罐溫27℃,罐壓50kPa,攪拌速率120r/min,通氣量1∶0.5,發(fā)酵80小時。將二級種子罐中菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有10噸發(fā)酵培養(yǎng)基的15噸發(fā)酵罐中,保持罐溫27℃,罐壓75kPa,攪拌速率130r/min,通氣量為1∶0.7,發(fā)酵100小時,然后放罐將發(fā)酵液用板框壓濾機壓濾,得濕菌絲體,然后放入真空干燥機中55℃烘干,干粉得率為1.09%,用苯酚-硫酸法測總多糖含量為6.78克/100克干粉。
本實施2中的搖瓶培養(yǎng)基的成份配比(重量體積比g/100ml)為馬鈴薯25%,葡萄糖3%,硫酸鎂0.08%,磷酸二氫鉀0.2%,維生素B1為20ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至150ml、1000mL,搖瓶培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施2中的發(fā)酵培養(yǎng)基的成份及配比(重量體積比g/100ml)為酵母粉1%,(NH4)2SO42%,玉米粉3%,豆餅粉1%,葡萄糖2%,硫酸鎂0.05%,磷酸二氫鉀0.1%,維生素B1為20ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至100L、1噸、10噸,發(fā)酵培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施2中放罐的標準與實施1相同。
實施例3將新鮮的斜面菌種接入十個裝有100mL搖瓶培養(yǎng)基的500mL三角搖瓶中,28℃搖床培養(yǎng)6天。然后每兩個500mL搖瓶種轉(zhuǎn)接入裝有1500mL搖瓶培養(yǎng)基的3000mL三角瓶中,28℃搖床培養(yǎng)5天。將5瓶3000ml搖瓶中的種轉(zhuǎn)接入一個裝有100L發(fā)酵培養(yǎng)基的總?cè)莘e為150L的一級種子罐,保持罐溫28℃,罐壓40kPa,攪拌速率120r/min,通氣量1∶0.35,發(fā)酵72小時。將種子罐菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有1噸發(fā)酵培養(yǎng)基的1.5噸二級種子罐中,保持罐溫28℃,罐壓50kPa,攪拌速率120r/min,通氣量1∶0.55,發(fā)酵72小時。將二級種子罐中菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有10噸發(fā)酵培養(yǎng)基的15噸發(fā)酵罐中,保持罐溫28℃,罐壓80kPa,攪拌速率120r/min,通氣量為1∶0.6,發(fā)酵96小時,然后放罐將發(fā)酵液用板框壓濾機壓濾,得濕菌絲體,然后放入真空干燥機中50℃烘干,干粉得率為0.92%,用苯酚-硫酸法測總多糖含量為5.60克/100克干粉。
本實施3中的搖瓶培養(yǎng)基的成份配比(重量體積比g/100ml)為馬鈴薯15%,葡萄糖1%,硫酸鎂0.15%,磷酸二氫鉀0.4%,維生素B1為10ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至100mL、1500mL,搖瓶培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施3中的發(fā)酵培養(yǎng)基的成份及配比(重量體積比g/100ml)為酵母粉0.5%,(NH4)2SO40.5%,玉米粉2%,豆餅粉1.5%,葡萄糖1.5%,硫酸鎂0.04%,磷酸二氫鉀0.1%,維生素B1為10ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至100L、1噸、10噸,發(fā)酵培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施3中放罐的標準與實施1相同。
實施例4將新鮮的斜面菌種接入十六個裝有80mL搖瓶培養(yǎng)基500mL三角搖瓶中,25℃搖床培養(yǎng)8天。然后每兩個500mL搖瓶種轉(zhuǎn)接入裝有1000mL搖瓶培養(yǎng)基的3000mL三角瓶中,25℃搖床培養(yǎng)6天。將8瓶3000ml搖瓶中的種轉(zhuǎn)接入一個裝有150L發(fā)酵培養(yǎng)基的總?cè)莘e為300L的一級種子罐,保持罐溫25℃,罐壓50kPa,攪拌速率120r/min,通氣量1∶0.5,發(fā)酵96小時。將種子罐菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有1噸發(fā)酵培養(yǎng)基的1.5噸二級種子罐中,保持罐溫25℃,罐壓60kPa,攪拌速率120r/min,通氣量1∶0.55,發(fā)酵72小時。將二級種子罐中菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有3.5噸發(fā)酵培養(yǎng)基的5噸三級種子發(fā)酵罐中,保持罐溫25℃,罐壓65kPa,攪拌速率130r/min,通氣量為1∶0.6,發(fā)酵100小時。將三級種子罐中菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有22.5噸發(fā)酵培養(yǎng)基的30噸發(fā)酵罐中,保持罐溫25℃,罐壓85kPa,攪拌速率140r/min,通氣量為1∶0.8,發(fā)酵120小時,然后放罐將發(fā)酵液用板框壓濾機壓濾,得濕菌絲體,然后放入真空干燥機中55℃烘干,干粉得率為0.81%,用苯酚-硫酸法測總多糖含量為5.02克/100克干粉。
本實施4中的搖瓶培養(yǎng)基的成份配比(重量體積比g/100ml)為馬鈴薯19%,葡萄糖1.5%,硫酸鎂0.1%,磷酸二氫鉀0.2%,維生素B1為15ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至80mL、1000mL,搖瓶培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施4中的發(fā)酵培養(yǎng)基的成份及配比(重量體積比g/100ml)為酵母粉0.9%,(NH4)2SO41.5%,玉米粉2.5%,豆餅粉1%,葡萄糖2%,硫酸鎂0.03%,磷酸二氫鉀0.12%,維生素B1為15ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至150L、1噸、3.5噸、22.5噸,發(fā)酵培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施4中放罐的標準與實施1相同。
實施例5將新鮮的斜面菌種接入十八個裝有70mL搖瓶培養(yǎng)基的500mL三角搖瓶中,26℃搖床培養(yǎng)8天。然后每兩個500mL搖瓶種轉(zhuǎn)接入裝有1500mL搖瓶培養(yǎng)基的4000mL三角瓶中,26℃搖床培養(yǎng)6天。將9瓶4000ml搖瓶中的種轉(zhuǎn)接入一個裝有200L發(fā)酵培養(yǎng)基的總?cè)莘e為300L的一級種子罐,保持罐溫26℃,罐壓40kPa,攪拌速率120r/min,通氣量1∶0.4,發(fā)酵96小時。將種子罐菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有1噸發(fā)酵培養(yǎng)基的1.5噸二級種子罐中,保持罐溫26℃,罐壓60kPa,攪拌速率130r/min,通氣量1∶0.4,發(fā)酵80小時。將二級種子罐中的菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有4噸發(fā)酵培養(yǎng)基的5噸三級種子罐中,保持罐溫26℃,罐壓70kPa,攪拌速率130r/min,通氣量為1∶0.6,發(fā)酵100小時。將三級種子罐中菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有24噸發(fā)酵培養(yǎng)基的30噸發(fā)酵罐中,保持罐溫26℃,罐壓90kPa,攪拌速率140r/min,通氣量為1∶0.75,發(fā)酵112小時,然后放罐將發(fā)酵液用板框壓濾機壓濾,得濕菌絲體,然后放入真空干燥機中60℃烘干,干粉得率為0.87%,用苯酚-硫酸法測總多糖含量為6.17克/100克干粉。
本實施5中的搖瓶培養(yǎng)基的成份配比(重量體積比g/100ml)為馬鈴薯22%,葡萄糖2.5%,硫酸鎂0.1%,磷酸二氫鉀0.3%,維生素B1為18ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至70mL、1500mL,搖瓶培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施5中的發(fā)酵培養(yǎng)基的成份及配比(重量體積比g/100ml)為酵母粉1.2%,(NH4)2SO42%,玉米粉2.5%,豆餅粉1.5%,葡萄糖1.5%,硫酸鎂0.04%,磷酸二氫鉀0.15%,維生素B1為20ppm,按上述的重量體積比分別加水定容至200L、1噸、4噸、24噸,發(fā)酵培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
本實施5中放罐的標準與實施1相同。
權(quán)利要求
1.一種姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝,依次包括以下步驟(1)將姬松茸斜面菌種接入裝有搖瓶培養(yǎng)基的搖瓶中,25~28℃溫度培養(yǎng)6~8天;(2)將步驟1中所得的菌種轉(zhuǎn)接入裝有搖瓶培養(yǎng)基的搖瓶中再進行擴大培養(yǎng),25~28℃溫度培養(yǎng)5~6天;(3)將步驟2中所得的菌種轉(zhuǎn)接入一個裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的一級種子罐中,保持罐溫25~28℃,罐壓40~50kPa,攪拌速率120~140r/min,通氣量1∶0.3~0.5,發(fā)酵72~96小時;(4)將一級種子罐中的菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的二級種子罐中,保持罐溫25~28℃,罐壓50~60kPa,攪拌速率120~140r/min,通氣量1∶0.4~0.6,發(fā)酵72~96小時;(5)將二級種子罐中的菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的三級種子罐中,保持罐溫25~28℃,罐壓60~70kPa,攪拌速率120~140r/min,通氣量1∶0.5~0.7,發(fā)酵85~110小時;(6)將三級種子罐中的菌種轉(zhuǎn)接到一個裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的大型發(fā)酵罐中,保持罐溫25~28℃,罐壓70~90kPa,攪拌速率120~140r/min,通氣量為1∶0.6~0.8,發(fā)酵96~120小時,然后放罐將發(fā)酵液用板框壓濾機壓濾,得濕菌絲體,然后放入真空干燥機中50~60℃烘干至含水量低于8%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝,其中步驟1中搖瓶培養(yǎng)基與搖瓶的容積比為1∶5~1∶10;步驟2中搖瓶培養(yǎng)基與搖瓶的容積比為1∶2~1∶5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝,其中步驟3中一級種子罐的容積為150L~300L,在該一級種子罐中裝有的發(fā)酵培養(yǎng)基相應(yīng)為100L~250L;步驟4中二級、三級種子罐指的是1.5噸~5噸的發(fā)酵罐,在該二級、三級種子罐中裝有的發(fā)酵培養(yǎng)基相應(yīng)為1噸~4噸。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝,其中步驟5中大型發(fā)酵罐指的是10噸~30噸發(fā)酵罐,在該發(fā)酵罐中裝有的發(fā)酵培養(yǎng)基相應(yīng)為7.5噸~24噸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝,其中所述的搖瓶培養(yǎng)基的成份及其重量體積比(g/100ml)為馬鈴薯15%~25%,葡萄糖1%~3%,硫酸鎂0.08%~0.15%,磷酸二氫鉀0.2~0.4%,維生素B1為10~20ppm,加水定容至所需體積,該搖瓶培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、3或4所述的姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝,其中所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的成份及其重量體積比(g/100ml)為酵母粉0.5%~1.5%,(NH4)2SO40.5%~2%,玉米粉2%~3%,豆餅粉1%~2%,葡萄糖1.5%~2%,硫酸鎂0.03%~0.05%,磷酸二氫鉀0.1%~0.15%,維生素B1為10~20ppm,加水定容至所需體積,該發(fā)酵培養(yǎng)基的PH值為5.5~6.0。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝,其中步驟5中放罐的標準為發(fā)酵液變得較為粘稠,鏡檢有大量菌絲體,PH值降至3.5~3.8左右,取樣離心稱濕菌絲體重量,較4小時前無明顯增加即可放罐。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種姬松茸大規(guī)模液體深層發(fā)酵工藝,依次包括以下步驟:(1)將姬松茸斜面菌種接入裝有搖瓶培養(yǎng)基的搖瓶中培養(yǎng);(2)將步驟1中所得的菌種轉(zhuǎn)接入搖瓶中再進行擴大培養(yǎng);(3)將步驟2中所得的菌種依次轉(zhuǎn)接入裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的一級種子罐、二級種子罐、三級種子罐中發(fā)酵;(4)將三級種子罐中的菌種轉(zhuǎn)接到大型發(fā)酵罐中發(fā)酵,然后放罐將發(fā)酵液用板框壓濾機壓濾,得濕菌絲體。通過對姬松茸發(fā)酵工藝的步驟、參數(shù)和培養(yǎng)基配方的改進,成功地建立了姬松茸10噸罐及10噸罐以上發(fā)酵工藝,打破了以往姬松茸發(fā)酵只限于小試而不能工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)的局限,所得的姬松茸菌絲干粉得率達0.80%~1.20%,每百克菌絲干粉的姬松茸多糖含量達到5~7克。
文檔編號C12N1/14GK1339582SQ0112971
公開日2002年3月13日 申請日期2001年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2001年9月29日
發(fā)明者李寶健, 程度, 徐志祥 申請人:李寶健, 程度, 徐志祥