黃酮類化合物theaflavanoside Ⅲ在防治植物線蟲病害上的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及黃酮類化合物theaflavanoside III (分子式C33H42O19)在防治植物線 蟲病害上的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物線蟲是植物重要病原生物之一，隨著農(nóng)業(yè)向產(chǎn)業(yè)化，基地化發(fā)展，長期大面 積種植單一農(nóng)作物，以及常年連作及土地重復(fù)利用率的提高，線蟲在土壤中的數(shù)量迅速累 積，線蟲病害問題日益突出。在我國北方地區(qū)，小麥孢囊線蟲（Heterodera. avenarea，H. filipjevi)、大豆孢囊線蟲（Heterodera glycines)普遍發(fā)生且危害嚴(yán)重，對我國小麥和 大豆的生產(chǎn)造成重大損失和影響（彭德良，張東升，齊淑華，陳品三.小麥禾谷孢囊線蟲最 佳調(diào)查時期和方法.植物保護(hù)，1993, 19(5) :48;彭德良，李惠霞，王錫鋒，Ian RelayJulie Nicol，候生英，歐師琪.我國小麥禾谷孢囊線蟲的新發(fā)生分布地區(qū).中國線蟲學(xué)研宄（第 二卷），2008, 2:344-345 ;彭德良，黃文坤，孫建華，劉崇俊，張輝民.我國天津發(fā)現(xiàn)小麥禾谷 孢囊線蟲.中國線蟲學(xué)研宄（第四卷），2012, 4:162-163 ;馮志新.植物線蟲學(xué)〔M〕.北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社，2001)，南方地區(qū)的蔬菜、果樹上根結(jié)線蟲（Meloidogyne)發(fā)生普遍而且 相當(dāng)嚴(yán)重，北方地區(qū)現(xiàn)在采用大棚生產(chǎn)蔬菜，根結(jié)線蟲病害也相當(dāng)普遍而嚴(yán)重。殺線劑是目 前防治線蟲病害的有效措施之一，但當(dāng)前的化學(xué)殺線劑均為高毒高殘留農(nóng)藥，極易造成對 農(nóng)作物及生態(tài)環(huán)境的污染，而目前毒性較低的生物農(nóng)藥阿維菌素也在生產(chǎn)上出現(xiàn)了抗藥性 問題。因此尋求新的，多種類型的生物防治殺線劑，是目前防治農(nóng)作物線蟲病害的研宄熱點(diǎn) 之一。
[0003] 植物是生物活性化合物的的天然寶庫，直接將天然產(chǎn)物（如植物的全株或某部 分）加工成制劑用以控制害蟲（如魚藤酮，印楝素），或在充分研宄植物天然殺蟲活性成分、 構(gòu)效關(guān)系、毒殺機(jī)理的基礎(chǔ)上，模擬合成新的高效低毒殺蟲劑，這在植物殺蟲劑方面已經(jīng)有 很成功的先例（如擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的研發(fā)），與此相比，植物源殺線劑的研宄相對落后， 直到20世紀(jì)80年代以后，從植物中尋找天然殺線蟲活性物質(zhì)的研宄才開始受到關(guān)注（文 艷華，馮志新，徐漢虹.植物粗提物對幾種植物病原線蟲的殺線活性篩選[J].華中農(nóng)業(yè) 大學(xué)學(xué)報，2001，20(3) :235-238.)，公開號為CN201210050127. 5的中國發(fā)明專利公開了茶 皂素對蔬菜根結(jié)線蟲的防治方法，申請?zhí)枮?014103322825的專利申請公開了茶皂素在防 治大豆孢囊線蟲病害上的應(yīng)用；公開號CN1660848的中國發(fā)明專利公開了三尖杉酯類生物 堿防治植物線蟲病害的應(yīng)用，但目前還未見黃酮類化合物對植物線蟲防治應(yīng)用的專利。
[0004] 黃酮類（flavonoid)化合物廣泛存在于自然界的多種植物和漿果中，泛指兩個具 有酚羥基的苯環(huán)（A、B環(huán)）通過中央三碳原子相互連結(jié)而成的一系列化合物，其基本母核為 2-苯基色原酮。目前分離出的黃酮類化合物已超過4000種，少數(shù)以游離態(tài)存在，大多與糖 結(jié)合以黃酮苷的形式存在（楊紅.中藥化學(xué)實(shí)用技術(shù)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2004)。 根據(jù)中央三碳鏈的氧化程度，B環(huán)連接位置（2或3位）以及三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀等特點(diǎn)， 可將黃酮類化合物分為黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇、花色素、查耳酮、黃烷醇及異 黃酮、二氫異黃酮類等十五種。
[0005] 黃酮類化合物具有保護(hù)心腦血管、抗腫瘤、抗氧化、抗炎抗菌抗病毒、清除氧 自由基、降低膽固醇及調(diào)節(jié)免疫力等藥理活性（Bent H，Havsteen.The bioehemistry and medieal signifieanee of the flavonoids [J].Pharmacology&TheraPeuti es，2002, 96:67-202)，且毒性較低，因此近年來，黃酮類化合物成為國內(nèi)外天然藥物、天然 添加劑、保健品開發(fā)等領(lǐng)域的開發(fā)利用研宄熱點(diǎn)（董彩軍，李鋒.黃酮類化合物的研宄進(jìn) 展[J].農(nóng)產(chǎn)品加工，2010, 2 (2) : 65-69.)。油茶籽中的黃酮具有許多藥用活性。張乃鋒等在 多賽特羊的精料補(bǔ)充料中添加300mg/kg的茶柏黃酮，與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組羔羊的增重提 高了 9. 8個百分點(diǎn)，且呼吸道疾病減少了 64% ;實(shí)驗(yàn)組育成羊的增重提高了 6. 1個百分點(diǎn)， 呼吸道疾病減少了 50% (張乃鋒，張仲倫，刁其玉等.茶黃酮對羔羊增重和健康狀況的影 響[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，2005,8:18-19.);馮猛等在蛋雞詞料中添加藤茶黃酮，長期食用沒 有副作用，沒有藥殘，并具有抑菌殺菌的作用，且能提高蛋雞的成活率及產(chǎn)蛋率（馮猛，周 健，黃業(yè)咸.藤茶黃酮對海蘭蛋雞生產(chǎn)性能的影響[J].飼料與畜牧，2008, 40(1) :48-50)。 本發(fā)明中的黃酮類化合物theaflavanoside III (分子式C33H42O19)是本實(shí)驗(yàn)室從山茶科 (Camelliaceae)植物油茶（Camefera Oleifera))的種子中提取分離純化而得到的，該化 合物于2007年首次由Li Ning等從山茶花（Camellia sinensis)的種子中提取得到并 報道（LiN，Morikawa T, Matsuda H, et al. New flavanone oligoglycosides, theaflava nosides I,II,III,and IV, with hepatoprotective activity from the seeds of tea plant (Camellia sinensis) [J] · Heterocycles· 2007, 71 (5) : 1193-1201.)。該黃酮類化合 物還未見有對線蟲的作用研宄。該化合物的結(jié)構(gòu)式見（I)所述：
[0006]
[0007] 該化合物的制備是以山茶科植物的種子為材料，采用常規(guī)的已知方法，即有機(jī)溶 劑提取，大孔樹脂、硅膠柱層析分離，高效液相色譜分離純化，同時進(jìn)行殺線蟲活性生測，從 而得到具有強(qiáng)殺線蟲活性的黃酮類單體化合物theaflavanoside III。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于開發(fā)上述化合物（1)的黃酮類化合物theaflavanoside III的 新用途，即在防治植物線蟲病害中的新用途。
[0009] 黃酮類化合物theaflavanoside III (分子式C33H42O19)作為殺線蟲有效成分在防 治植物線蟲病害中的應(yīng)用，黃酮類化合物theaflavanoside III的結(jié)構(gòu)如式（1)所示。
[0010]
[0011] 所述植物線蟲為孢囊線蟲、根結(jié)線蟲、短體線蟲、水稻干尖線蟲。
[0012] 所述孢囊線蟲為小麥孢囊線蟲（Heterodera. avenarea)或大豆孢囊線蟲 (Heterodera glycines)〇
[0013] 所述的應(yīng)用是將黃酮類化合物theaflavanoside III制成農(nóng)藥施于發(fā)病植物表面 或根部。
[0014] 所述的防治植物線蟲病害為抑制線蟲卵孵化或殺死植物線蟲及有效減少線蟲侵 染。
[0015] 本發(fā)明化合物（1)所述的黃酮類化合物theaflavanoside III作為有效成分，添加 到農(nóng)藥用載體或組合物中，制成農(nóng)藥，可以采用通常的農(nóng)藥劑型和使用方法，用于防治植物 線蟲病害。或者將含有這種成分的茶籽提取物、部位提取物（如茶籽黃酮）、分離部位添加 到農(nóng)藥用載體或組合物中，制成農(nóng)藥制劑，用于防治植物線蟲病害?？梢圆捎猛ǔ５霓r(nóng)藥劑 型和使用方法。
[0016] 化合物（1)所述的黃酮類化合物theaflavanoside III對植物線蟲具有強(qiáng)毒殺活 性，對小麥孢囊線蟲（Heterodera. avenarea)室內(nèi)毒殺活性生測結(jié)果表明，處理36h,對小 麥孢囊線蟲的致死中濃度為LC5tl= 4. 326 μ g/ml，處理36h，對大豆孢囊線蟲（Heterodera glycines)的致死中濃度為LC5tl= 90. 275 μ g/ml，說明化合物（1)所述的黃酮類化合物 theaflavanoside III對孢囊線蟲的毒殺活性很強(qiáng)；室內(nèi)生測，處理南方根結(jié)線蟲二齡幼蟲 24h和48h的致死中濃度分別為LC5tl= 105. 38 μ g/ml和LC 5Q= 81. 25 μ g/ml，說明對根結(jié) 線蟲也具有強(qiáng)毒殺活性。含有化合物（1)所述的黃酮類化合物theaflavanoside III的油茶 籽餅粉田間防治大豆孢囊線蟲病害，其防效與化學(xué)殺線劑噻唑磷的藥效相當(dāng)。
[0017] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0018] 1)本發(fā)明所述的黃酮類化合物theaflavanoside III來源于山茶科的種子，在茶 葉中也有少量存在，證明是對人體比較安全的。
[0019] 2)室內(nèi)生測及大田防治研宄結(jié)果表明，黃酮類化合物theaflavanoside III對孢 囊線蟲、根結(jié)線蟲、短體線蟲、水稻干尖線蟲均有強(qiáng)毒殺活性，特別是對孢囊線蟲的毒力非 常強(qiáng)