專利名稱：用于刺激花粉粒萌發(fā)的組合物和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有作為活性成分的至少一種可以刺激花粉粒萌發(fā)的植物檢疫學(xué)制品類型的組合物。
本發(fā)明也涉及通過所說組合物的施用特別是對葉片的施用而刺激花粉粒的萌發(fā)的對植物進(jìn)行處理的方法。
最后，在新工業(yè)產(chǎn)品的名稱下，由于預(yù)料其可用于所說刺激，本發(fā)明還涉及構(gòu)成所說組合物的活性成分的植物檢疫學(xué)制品。
在花粉粒轉(zhuǎn)移到花上并保持在柱頭(stigma)的接受表面期間的授粉之后發(fā)生花粉粒的萌發(fā)，這使其受精并由于源于該花粉的稱為花粉管的器官的形成而組成胚胎組織；該器官被植入到柱頭中，然后按此方式并最后進(jìn)入已受精的胚胎液囊中。
眾所周知，一旦其發(fā)生授粉之后花粉粒的壽命便非常短，一般不超過24小時(參見BIOLOGIE VEGETALE第405頁，”CroissanceMorphogenese Reproduction”作者P.Champagnat，P.Ozenda和L.Baillaud，由Masson & Cie于1969年出版)。
當(dāng)在此短的時間內(nèi)沒有發(fā)生所給花粉粒的萌發(fā)時，本來已經(jīng)可以誘導(dǎo)的受精沒有發(fā)生，便失去了一個可能的植物后代。
因此本領(lǐng)域技術(shù)人員對用于支持花粉粒的萌發(fā)并提高種植收率的方法進(jìn)行了研究。
已經(jīng)有人建議通過對種植物施用硼酸鹽溶液來刺激花粉粒的萌發(fā)。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其所記錄的結(jié)果不能使用戶滿意。
可以進(jìn)一步注意到，植物中最豐富的糖類蔗糖在一定濃度下可以刺激花粉粒的萌發(fā)；但由于效果很差，該研究結(jié)果從來沒有超出實驗室階段的水平。
因此本發(fā)明的目的是改善這一狀況并以一種滿意的方式和在任何情況下對于各種實際需要都比蔗糖和硼酸鹽溶液好的條件下提供可以解決所說問題的類型的植物檢疫學(xué)制品。
本申請人通過全面研究發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的目的可以通過一種令人驚奇的難以預(yù)料的方式，通過求助于由一定的寡糖所組成的組的物質(zhì)作為所討論的類型的植物檢疫學(xué)制品而達(dá)到，該寡糖的結(jié)構(gòu)不同于蔗糖，甚至可以不必預(yù)知它們是否具有所希望的刺激性能，因為具有結(jié)構(gòu)非常接近于所說組的代表物的某些寡糖對花粉粒的萌發(fā)沒有活性。
下面描述按照本發(fā)明的特別是應(yīng)用于葉片的組合物，該組合物含有一種賦形劑，特別應(yīng)用于葉片的組合物的常規(guī)組分，和一種活性成分，其特征在于該活性成分由至少一種可以刺激花粉粒萌發(fā)的植物檢疫學(xué)制品構(gòu)成，該植物檢疫學(xué)制品選自含有下列物質(zhì)的組中-具有小于等于10的聚合度，含有小于等于10個，優(yōu)選小于等于5個，更優(yōu)選含有2個糖單元的由β1-3、β1-4和α1-3連接的寡糖，特別是選自含有昆布二糖、纖維二糖、黑曲糖、昆布三糖、昆布四糖和昆布五糖的組中的那些寡糖，-在自由端基碳原子或帶有一個自由羥基的所有碳原子上被含有下列基團(tuán)的組中的基團(tuán)所取代的上述寡糖的衍生物-C1～C5烷基，優(yōu)選甲基，-C1～C5?；?，優(yōu)選乙?；?，
-芳香基，優(yōu)選吡啶氨基，-Cx～Cy的環(huán)烷基，-胺類，-N-乙?；?硫酸酯或磷酸酯基。
用于處理植物以刺激花粉粒萌發(fā)的方法其特征在于該方法包括按照本發(fā)明的組合物的應(yīng)用，特別是對葉片的應(yīng)用。
按照本發(fā)明的組合物的一種優(yōu)選的具體實施方式
，該組合物含有與由能夠刺激花粉粒萌發(fā)的植物檢疫學(xué)制品構(gòu)成的活性成分結(jié)合的至少一種另外的植物檢疫學(xué)制品，特別是殺菌劑。
通過下面的進(jìn)一步的描述和作為優(yōu)選的具體實施方式
提供的非限定性的實施例，可以對本發(fā)明有更好的理解。
因此，對于刺激花粉粒的萌發(fā)，建議采用下面的方法或者相當(dāng)?shù)姆椒ā?br> 需要刺激的植物用本發(fā)明的組合物進(jìn)行處理，特別是施用于葉片上，該組合物除了含有賦形劑和這種組合物的常規(guī)組分以外，還含有至少一種可以刺激花粉粒萌發(fā)的植物檢疫學(xué)制品，該植物檢疫學(xué)制品選自前面所定義的組中。
該處理步驟在開花以后進(jìn)行，特別是在授粉以后進(jìn)行。
該處理步驟優(yōu)選的是在花粉囊打開之前或打開期間進(jìn)行。
該處理步驟可以通過將本發(fā)明的組合物噴霧而進(jìn)行。
可以采用一次噴霧的方法；但是更有利的是補(bǔ)充進(jìn)行該操作至少一次；在此情況下，第一次噴霧優(yōu)選的是在花粉囊打開之前兩天進(jìn)行，而第二次噴霧在打開的那一天進(jìn)行。
具體的處理時間將根據(jù)所處理的植物來選擇。
所說植物可以是任何農(nóng)業(yè)植物或觀賞植物，該植物的受精按照交叉授粉(稱為異源授粉)的機(jī)理進(jìn)行，或者按照其中花粉和柱頭屬于同一個體的直接授粉(稱為自體授粉)的機(jī)理進(jìn)行。與本發(fā)明不相關(guān)的植物是那些具有不打開的外部花苞并且不是通過花粉來進(jìn)行授粉，而是在花粉囊中自由地直接萌發(fā)的植物；這是閉花受精花的情況。
用下列各種植物可以獲得良好的效果-煙草，-蔬菜植物如胡蘿卜、西紅柿、菜花和馬鈴薯，-果樹如蘋果、櫻桃和李子，-油脂性植物如大豆、向日葵和油菜籽，-谷類植物如玉米，-花如百合。
按照本發(fā)明的施用于葉片的組合物中活性成分的濃度為1～20重量％，優(yōu)選1.5～10重量％，更優(yōu)選2～8重量％。
每公頃耕地施用的組合物的量為10～1000克活性成分，優(yōu)選20～500克活性成分，更優(yōu)選50～250克活性成分。
當(dāng)組合物為液體時，賦形劑一般是水。
但是可以使用一種選自含有礦物油、植物油、所有液態(tài)脂肪和醇，特別是丙二醇和丙三醇的組中的賦形劑以代替水。
本發(fā)明的組合物中的主要的常規(guī)組分根據(jù)所處理的植物的活性體來決定；這些常規(guī)組分一般選自含有固體膨脹劑、溶劑、表面活性劑、分散劑和乳化劑的組中。
當(dāng)本發(fā)明的組合物為粉末狀時，賦形劑優(yōu)選的是由一種膨脹劑，特別是無機(jī)膨脹劑組成。
該膨脹劑可以選自含有高嶺土、細(xì)分散的粘土和滑石的組中。
在組合物為粉末狀的情況下，常規(guī)組分一般選自含有葡聚糖的組中。
應(yīng)該注意的是，粉末狀態(tài)的組合物在使用時是稀釋在一種由，特別是，水所構(gòu)成的賦形劑中。
本發(fā)明的組合物也可以以前面定義的組中的至少一種植物檢疫學(xué)制品為基礎(chǔ)，或者與一種或多種可選自含有鉬和錳的鹽的組中的平衡低聚單元結(jié)合，而起液體肥料的作用。
本發(fā)明組合物的一些實施例描述如下。實施例1用于農(nóng)業(yè)的基于昆布二糖的組合物。
在該組合物中，昆布二糖以液體肥料的形式與低聚單元相結(jié)合。
1千克(kg)的該組合物由下列重量的組分構(gòu)成-硫酸鎂七水合物0.3010kg-硫酸錳一水合物0.0510kg
-硫酸鋅七水合物0.1060kg-昆布二糖 0.0350kg-吐溫800.0050kg-水0.5020kg1.0000kg該組合物可以以3升/公頃的劑量在果樹的開花階段使用。實施例2用于農(nóng)業(yè)的基于纖維二糖和黑曲糖的組合物。
該組合物是含有與硼和鉬相結(jié)合的活性成分的液體肥料的形式。
1kg的該組合物由下列重量的組分構(gòu)成-硼酸 0.150kg-鉬酸鈉 0.005kg-纖維二糖 0.030kg-黑曲糖 0.030kg-水 0.780kg-甲基對羥基苯甲酸(paraben)鈉0.005kg1.000kg該組合物可以以3升/公頃的劑量在蘋果樹的授粉時使用。實施例3用于農(nóng)業(yè)的基于昆布二糖的組合物。
該可溶性組合物為粉末狀并含有與硼和鉬相聯(lián)合的活性材料。
1kg的該組合物由下列重量的組分構(gòu)成
-硼酸 0.300kg-鉬酸鈉 0.010kg-昆布二糖 0.170kg-高嶺土 0.520kg1.000kg該組合物可以按照10克/升的濃度在水中稀釋后以1千克/公頃的劑量在蔬菜植物的開花階段使用。實施例4用于農(nóng)業(yè)的基于黑曲糖和一種殺菌劑的組合物。
將1克黑曲糖溶于699克水中。
將300克由Bourgeois公司出售的，商標(biāo)為Manganil 80的，N°APV7000073的殺菌劑懸浮在該溶液中；該殺菌劑含有80％的由代森錳(manebe)構(gòu)成的活性材料。
由此獲得的懸浮體具有0.1％的黑曲糖濃度和24％的代森錳濃度。
該懸浮體可以在其以0.1～50毫升/升的濃度稀釋在水中后通過噴霧而施用到葉片的表面。
施用量為5升/公頃。
該組合物對受精具有刺激作用，同時具有殺菌作用。
該組合物更有利的是用于防止葡萄和西紅柿的霉變。
為了便于運輸和儲存，開始時制備成濃縮物是有利的，可以在使用時用合適量的賦形劑稀釋以提供備用的組合物。
該濃縮物含有本發(fā)明組合物的所有組分，其重量比例與實際使用時組合物中這些組分的重量比例相同；但賦形劑僅僅以與噴霧方式相適應(yīng)的量存在。
也可以使用油基可噴霧組合物或者可乳化組合物，特別是與加入的水不相溶的物質(zhì)的混合物。
在不能從市場上獲得本發(fā)明組合物中使用的活性材料時，可以通過含有它們的物質(zhì)的已知的酶或酸降解反應(yīng)而獲得。
作為實例，下面將描述纖維二糖、昆布二糖和黑曲糖的制備。實施例5纖維二糖(β1-4二葡萄糖)的制備所用的原料為纖維素。
將100克商業(yè)纖維素即由Fluka公司出售的名為“纖維素粉”的纖維素，在溶解于1000毫升水后，與β1-4葡聚糖酶或商購纖維素酶即由Sigma化學(xué)品公司出售的EC3.2.1.4纖維素酶進(jìn)行反應(yīng)。
酶的加入量為1克，即300個單位。
水解的條件如下-PH5-溫度37℃-水解時間5小時。
在該5小時的溫育后，通過在100℃下加熱15分鐘而將酶抑制。
將由此獲得的溶液在一個由Millipore公司出售的商標(biāo)名為PELLICON的系統(tǒng)上進(jìn)行離心超濾，該系統(tǒng)裝備有一個孔隙率為1000道爾頓(Dalton)的暗盒，該暗盒與一個由Millipore公司出售的商標(biāo)名為PROCON的泵相連。
將獲得的濾液通過真空蒸發(fā)進(jìn)行濃縮，然后冷凍干燥；得到50克與純纖維二糖相對應(yīng)的粉末；該纖維二糖的純度用高壓液相色譜，特別是帶有電流滴定的離子色譜進(jìn)行檢定，該離子色譜使用由Dionex化學(xué)品公司的Dow分公司出售的商標(biāo)名為DIONEX的離子交換樹脂。實施例6昆布二糖(β1-3二葡萄糖)的制備所用的原料為curdlan，即從糞產(chǎn)鹼桿菌中提取的一種聚合物。
將100克由Sigma化學(xué)品公司出售的索引號為C7821的curdlan溶解于1000毫升水后，與一種由Sigma化學(xué)品公司出售的索引號為C4511的β1-3內(nèi)葡聚糖酶EC3.2.1.2.1進(jìn)行反應(yīng)。
酶的加入量為1克，即60個單位。
水解的條件如下-PH6-溫度40℃-水解時間6小時。
在該6小時的溫育后，通過在100℃下加熱15分鐘而停止該酶反應(yīng)。
將由此獲得的溶液在一個由Millipore公司出售的商標(biāo)名為PELLICON的系統(tǒng)上進(jìn)行離心超濾，該系統(tǒng)裝備有一個孔隙率為1000道爾頓(Dalton)的暗盒，該暗盒與一個由Millipore公司出售的商標(biāo)名為PROCON的泵相連。
然后將濾液通過反滲透法進(jìn)行濃縮，然后冷凍干燥，得到70克由葡萄糖和昆布二糖以50/50的比例構(gòu)成的粉末。
通過在該混合物中加入一種酵母而分離昆布二糖，該酵母從Shizo酵母屬稷酒(Shizosaccharomyces pombe)菌株IFO0358得到，它對葡萄糖進(jìn)行特定的新陳代謝而不會降解昆布二糖。
在除去酵母細(xì)胞后，得到純度為90％的昆布二糖。實施例7黑曲糖(α-1-3二葡萄糖)的制備。
原料為商業(yè)黑曲酶多糖。
將100克由Sigma化學(xué)品公司出售的索引號為N2888的黑曲酶多糖與0.1M的硫酸溶液在大約80℃反應(yīng)6小時。
在該水解反應(yīng)后，接著通過加入一種強(qiáng)堿如NaOH進(jìn)行中和步驟，直至pH為6～8，然后將中和產(chǎn)物通過離子交換樹脂進(jìn)行脫鹽步驟，最后通過粉碎細(xì)化成粉末。
由此得到含有大約35克黑曲糖和35克葡萄糖的70克混合粉末。
通過將該黑曲糖+葡萄糖的混合物經(jīng)過一個用樹脂填充的色譜柱而分離出黑曲糖，該樹脂由Pharmacia出售，商標(biāo)名為SEPHADEXG10。
因分子量的不同而得到兩種分離組分，一種為葡萄糖，另一種為純度90％的黑曲糖。
其它優(yōu)選的低聚糖即昆布三糖、昆布四糖和昆布五糖可以用實施例6中描述的方法通過β-1-3葡聚糖的酶降解方法接著進(jìn)行純化而得到制備。
正是由于本申請文本中的和下面將要描述的實驗室試驗所進(jìn)行的廣泛研究，使得本申請人能夠確定前面所定義的組合物中本發(fā)明所使用的植物檢疫學(xué)制品。
這些試驗也能夠確定所說組合物中活性成分的最佳濃度。
所得結(jié)果已被農(nóng)田試驗所證實。
所討論的試驗的基礎(chǔ)在于從其刺激萌發(fā)活性的方面試驗給定植物的花粉粒在進(jìn)行試驗的植物檢疫學(xué)制品的水溶液中的萌發(fā)情況。
確定進(jìn)行這些試驗所使用的水應(yīng)具有非常高的純度是非常重要的；純度的最低值可以由電阻率大于10兆-Ω×cm來確定。
在使用于特定植物即煙草時的所說試驗描述如下。
從開放得很好的花上的剛裂開的花粉囊中收割煙草的花粉粒；每朵花有五個花粉囊。
在收割時，從其花絲上摘下花粉囊；其中四個花粉囊其花絲的長度相等；具有較短花絲的第五個花粉囊不使用，以保持同種性。
為了更方便起見，該操作在雙目鏡放大鏡下進(jìn)行；在將其放入用上述純度的水充滿的觀察鏡中后，將花粉囊的壁去掉以釋放花粉粒。
通過用相同純度的水對花粉粒進(jìn)行清洗三或四次。
輕輕倒出水并去掉浮在水上的花粉粒。
去除過量的水，得到每毫升水含有大約100個花粉粒的花粉粒懸浮體，記為“SP”。
對從其花粉粒萌發(fā)的可能的刺激活性的方面進(jìn)行試驗的產(chǎn)品的較高濃度的水溶液也進(jìn)行制備；該較高濃度是5微克/毫升，10微克/毫升，50微克/毫升，100微克/毫升，500微克/毫升，1000微克/毫升，1500微克/毫升，2000微克/毫升，2500微克/毫升，3000微克/毫升，4000微克/毫升，5000微克/毫升，6000微克/毫升。
為了實用，使用含有6排，每排有4個直徑1厘米深1厘米的眼的滴定盤。
除了滴定盤以外，也可以使用陪替氏培養(yǎng)皿(Petri dish)。
每個眼中放入100微升含有上述之一濃度的一個需要試驗的產(chǎn)品的溶液。
每個眼中還放入100微升“SP”懸浮體。
將該混合物進(jìn)行均質(zhì)化。
在滴定盤的眼中發(fā)生花粉粒的萌發(fā)，并研究該植物檢疫學(xué)制品的刺激活性。
每個試驗至少進(jìn)行五次，每次試驗對每個產(chǎn)品重復(fù)兩次。
比較有利的是在開始時用500或1000微克/毫升的中間濃度的溶液進(jìn)行試驗，根據(jù)所得到的結(jié)果，再進(jìn)行高濃度或低濃度的試驗。
同時進(jìn)行兩個控制試驗。
第一控制試驗在上述純度的水中進(jìn)行，即直接用懸浮體“SP”進(jìn)行。
第二控制試驗在含有一種萌發(fā)緩沖劑的水中進(jìn)行-濃度為12重量％的蔗糖，-濃度為0.01重量％的硼酸，-濃度為0.3重量％的氯化鈣二水合物。
在該緩沖液中蔗糖以12％的濃度存在；在已知的實驗室試驗中該濃度的蔗糖已有使用；該緩沖液中還含有與已知的用于刺激花粉萌發(fā)的硼酸鹽組合物中的濃度相對應(yīng)的硼離子。
然后將滴定盤在暗處于22～24℃保存24～48小時。
在雙目鏡放大鏡下進(jìn)行5～6小時的第一階段觀察，在試驗開始后進(jìn)行24小時的第二階段觀察和36小時的第三階段觀察。
在每個觀察階段中記錄一定的參數(shù)值，即-萌發(fā)的花粉的密度，-花粉管的長度，用帶有內(nèi)標(biāo)刻度的雙目鏡放大鏡進(jìn)行測量，-花粉粒的聚集強(qiáng)度，和
-這些花粉粒的細(xì)胞溶解性。
這些參數(shù)不容易定量，即使是給定花粉管的長度也不總是直的。
如果在處理的眼中產(chǎn)生的花粉管的數(shù)量大于含有該控制劑的眼中產(chǎn)生的花粉管的數(shù)量，便認(rèn)為發(fā)生了刺激作用。
為了確定測試產(chǎn)品觀察到的刺激強(qiáng)度，規(guī)定-當(dāng)沒有刺激作用時，規(guī)定其活性為0％，-當(dāng)觀察到全部刺激并完成了花粉粒的萌發(fā)時，規(guī)定其活性為100％，-當(dāng)觀察到部分花粉粒萌發(fā)的刺激時的中間活性值用“％”表示。
在煙草的情況下，本發(fā)明組合物中使用的以及屬于上面定義的優(yōu)選范圍的植物檢疫學(xué)制品的活性，以及對這些產(chǎn)品確定的最佳濃度均列于后面的表A中，其中也列出了每個所討論的產(chǎn)品的化學(xué)組成。
表A
對含有半乳糖、甘露糖和巖藻糖的組中的單糖所進(jìn)行的相同試驗表明這些產(chǎn)品的活性不超過5％，且其最佳濃度為3000微克/毫升的數(shù)量級。
從表A的結(jié)果看出，昆布二糖和黑曲糖是特別優(yōu)選的。
在水中的控制試驗表現(xiàn)出沒有活性；采用萌發(fā)緩沖劑的控制試驗表現(xiàn)出5％的活性并且最佳濃度為3500微克/毫升。
考慮到實驗室試驗所使用的非常特定的條件，列于上表中的最佳濃度接近于前面所建議的濃度范圍的低限的事實不會令人驚奇。
本發(fā)明的效果確實是令人驚奇和難以預(yù)料的，因為迄今為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的結(jié)構(gòu)接近于本發(fā)明所選產(chǎn)品的物質(zhì)沒有表現(xiàn)出活性，即-麥芽糖(葡萄糖-葡萄糖，α1-3)-麥芽三糖(葡萄糖-葡萄糖-葡萄糖，α1-4)-α-海藻糖(葡萄糖-葡萄糖，α1-1)-β-海藻糖(葡萄糖-葡萄糖，β1-1)-槐糖(葡萄糖-葡萄糖，β1-2)-半乳二糖(半乳糖-半乳糖，β1-6)-土冉糖(葡萄糖-果糖，α1-3)-maltitol(葡萄糖-山梨醇，α1-4)-棉子糖(葡萄糖-葡萄糖-果糖，α1-6，α1-2)用于刺激下列植物的花粉粒的昆布二糖的最佳濃度也已經(jīng)測定-百合，-蘋果樹，和-櫻桃樹。
為做此測定，昆布二糖以可噴霧組合物，80重量％的濃度和符合前面所述條件的純度的形式使用。
該組合物在用水稀釋至濃度為1微克/毫升～300微克/毫升后再使用。
在百合的情況下100～300微克/毫升濃度的昆布二糖的活性為80％，在蘋果樹的情況下200～300微克/毫升濃度的昆布二糖的活性為80％，在櫻桃樹的情況下50～300微克/毫升濃度的昆布二糖的活性為50％。
在該方法中使用的植物檢疫學(xué)制品和本發(fā)明組合物對花粉萌發(fā)的刺激作用通過農(nóng)田試驗進(jìn)行證實。實施例8在農(nóng)田中對玉米的處理。
該在農(nóng)田中的試驗通過使用80重量％昆布二糖配方的由下列組分構(gòu)成的組合物而進(jìn)行-昆布二糖 80％-含水量5％-無機(jī)物10％-甘露糖醇 5％100％該組合物為水溶性粉末形式。
為了施用于玉米植物，從上述可噴霧組合物制備成水溶液，其濃度為可使每公頃農(nóng)田施用2.5～100克劑量的昆布二糖。
這些容易施用在具有不同質(zhì)量的玉米種A和種B上；種A不開花，而種B開了大量的花。
對于種A和種B的每一種，在含有2×8排的玉米植物的地上進(jìn)行試驗。每個處理模式由20排雄性植物和20排雌性植物組成，雄性植物和雌性植物交叉排列。
構(gòu)成第一處理模式的第一個雙排(雄性排和雌性排)作為參比排。
2～4處理模式的雙排分別用上述組合物以2.5克/公頃、5克/公頃和10克/公頃的昆布二糖劑量進(jìn)行處理。
第五個處理模式再次作為參比排。
6～8處理模式的雙排分別用上述組合物以50克/公頃、75克/公頃和100克/公頃的昆布二糖劑量進(jìn)行處理。
記錄每種情況下萌發(fā)的花粉粒的百分?jǐn)?shù)G。
該試驗在不同的開花階段進(jìn)行。
記錄的最好的結(jié)果是在花粉囊打開時所進(jìn)行的施用。
種A和種B所得最后的結(jié)果繪制在直方圖I和直方圖II中，該圖描述了萌發(fā)的花粉粒的百分?jǐn)?shù)G與昆布二糖的劑量L(克/公頃)之間的關(guān)系。
從直方圖I和直方圖II可以看出，對于50～100克/公頃的昆布二糖劑量，在種A的情況下得到大于40％的活性，在種B的情況下得到大于35％的活性。實施例9對農(nóng)田中不同李子樹的處理。
該農(nóng)田試驗為對15年樹齡的Ente李子樹(無性系P2733)的果園進(jìn)行處理。
使用含65重量％昆布二糖的由下列組分構(gòu)成的組合物-昆布二糖 65％-含水量 7％-無機(jī)物 15％-甘露糖醇 13％100％該組合物為水溶性粉末形式。
為了施用于李子樹，將該組合物制備成水溶液，其濃度為可使每公頃果園施用65克的昆布二糖。
將一片用純水處理的果園作為參比果園。
該施用試驗在滿花期進(jìn)行。
從處理過的果園和參比果園的滿花期的有代表性的李子樹上剪下小枝。
將花粉囊弄碎收集在陪替氏培養(yǎng)皿中，將其在干燥器中放置24小時以加速其裂開。一旦花粉囊“成熟”，便對花粉進(jìn)行試驗并將其放在冰箱中。
在瓊脂糖介質(zhì)(1％瓊脂糖和15％蔗糖)中萌發(fā)以后測定花粉的萌發(fā)速度?；ǚ鄣拿劝l(fā)用干燥刷進(jìn)行。
分別對兩組從參比果園和處理果園得到的花粉進(jìn)行萌發(fā)，每組10個陪替氏培養(yǎng)皿。
然后將陪替氏培養(yǎng)皿在22～23℃進(jìn)行培育，并在萌發(fā)后進(jìn)行24小時的觀察，即記數(shù)。
該觀察用雙目鏡放大鏡進(jìn)行。
對每個陪替氏培養(yǎng)皿的20個花粉粒(相當(dāng)于雙目鏡放大鏡的區(qū)域大小)進(jìn)行10次觀察；從而對處理果園的2000個花粉粒和參比果園的2000個花粉粒進(jìn)行觀察。
在對參比果園的10個陪替氏培養(yǎng)皿進(jìn)行手工記錄的100次觀察過程中，以及在對處理果園的10個陪替氏培養(yǎng)皿進(jìn)行手工記錄的100次觀察過程中，應(yīng)記錄-沒有萌發(fā)的花粉粒數(shù)，-花粉管的骨骼數(shù)，-長度等于花粉粒直徑的1～3倍的花粉管的數(shù)目，-長度大于花粉粒直徑的1～3倍的花粉管的數(shù)目，-萌發(fā)的花粉粒的百分?jǐn)?shù)。
在下面的表B中描述了這些觀察的結(jié)果以及參比果園和用組合物處理的果園所得百分比的變化；這些百分比的變化表明了處理的效果。
表B
權(quán)利要求
1.用于施用特別是應(yīng)用于葉片的組合物，該組合物含有一種賦形劑、用于施用特別是應(yīng)用于葉片的組合物的常規(guī)組分、和一種活性成分，其特征在于該活性成分由至少一種可以刺激花粉粒萌發(fā)的植物檢疫學(xué)制品構(gòu)成，該植物檢疫學(xué)制品選自-具有小于等于10的聚合度，含有小于等于10個，優(yōu)選小于等于5個，更優(yōu)選含有2個糖單元的由β1-3、β1-4和α1-3連接的寡糖，特別是選自含有昆布二糖、纖維二糖、黑曲糖、昆布三糖、昆布四糖和昆布五糖的組中的那些寡糖，-在自由端基碳原子或帶有一個自由羥基的所有碳原子上被選自含有下列基團(tuán)的組中的基團(tuán)所取代的上述寡糖的衍生物-C1～C5烷基，優(yōu)選甲基，-C1～C5酰基，優(yōu)選乙?；?芳香基，優(yōu)選吡啶氨基，-Cx～Cy的環(huán)烷基，-胺類，-N-乙?；?硫酸鹽或磷酸鹽基。
2.按照權(quán)利要求1的組合物，其特征在于該組合物除含有由能夠刺激花粉粒萌發(fā)的植物檢疫學(xué)制品構(gòu)成的活性成分外，還有至少一種另外的植物檢疫學(xué)制品。
3.按照權(quán)利要求1的組合物，其特征在于該組合物除含有由能夠刺激花粉粒萌發(fā)的植物檢疫學(xué)制品構(gòu)成的活性成分外，還有至少一種殺真菌劑。
4.按照權(quán)利要求1～3之一的組合物，其特征在于活性成分的濃度為1～20重量％，優(yōu)選1.5～10重量％，更優(yōu)選2～8重量％。
5.按照權(quán)利要求1～4中的任意一種的組合物，其特征在于活性成分含有昆布二糖和/或黑曲糖。
6.用于刺激花粉粒萌發(fā)的對植物進(jìn)行處理的方法，其特征在于該方法包括將權(quán)利要求1～5之一的一種組合物進(jìn)行施用，特別是施用于葉片。
7.按照權(quán)利要求6的方法，其特征在于該方法包括將權(quán)利要求1～5之一的組合物以每公頃施用10～1000克活性成分，優(yōu)選20～500克活性成分，更優(yōu)選50～250克活性成分的量進(jìn)行施用。
8.按照權(quán)利要求6和7之一的方法，其特征在于權(quán)利要求1～5之一的組合物的施用是在開花時，特別是在授粉時，優(yōu)選在花粉囊打開之前或打開時通過噴霧的方法進(jìn)行。
全文摘要
用于施用,特別是應(yīng)用于葉片的組合物,該組合物含有一種賦形劑、用于施用特別是應(yīng)用于葉片的組合物的常規(guī)組分和一種活性成分,其特征在于該活性成分由至少一種可以刺激花粉粒萌發(fā)的植物檢疫學(xué)制品構(gòu)成,該植物檢疫學(xué)制品選自含有下列物質(zhì)的組中:－具有小于等于10的聚合度,含有小于等于10個,優(yōu)選小于等于5個,更優(yōu)選含有二個糖單元的由β1－3、β1－4和α1－3連接的寡糖,特別是含有昆布二糖、纖維二糖、黑曲糖、昆布三糖、昆布四糖和昆布五糖的組中的那些寡糖,－在自由端基碳原子或帶有一個自由羥基的所有碳原子上被含有下列基團(tuán)的組中的基團(tuán)所取代的上述寡糖的衍生物:－C
文檔編號A01N43/16GK1254254SQ9880349
公開日2000年5月24日 申請日期1998年3月19日 優(yōu)先權(quán)日1997年3月19日
發(fā)明者讓-克洛德·伊溫, 弗洛朗斯·勒瓦瑟, 基姆－恩戈克·特拉塔恩, 瓦·勒·布伊 申請人:格瑪實驗室股份有限公司