專利名稱：卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種花粉萌發(fā)培養(yǎng)基，尤其涉及ー種卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
卡特蘭，屬蘭科(familyOrchideceae)、樹蘭亞科(subfamily Epidendroideae)、樹蘭族(tribe Epidendreae)、蕾莉亞亞族(subtribe Laeliinae),又名嘉德麗亞蘭，附生復(fù)莖性蘭類。其花色五彩斑斕、花型碩大多姿、氣息芬芳可人，顏色豐富多彩，在國(guó)際上有“洋蘭之王”的美稱。原產(chǎn)于美洲熱帶和亞熱帶，其中哥倫比亞和巴西野生最多，哥倫比亞、巴西、哥斯達(dá)黎加等國(guó)更以卡特蘭為國(guó)花?？ㄌ靥m在泰國(guó)、新加坡、印度尼西亞、馬來西亞、菲律賓和我國(guó)臺(tái)灣都有規(guī)模性生產(chǎn)，這些地區(qū)成為世界卡特蘭的主產(chǎn)區(qū)。目前報(bào)道的卡特蘭原生種約有110種(http://apps. kew. org/wcsp/home. do),但其與近緣屬Brassavola (白拉索蘭)、Laelia (蕾利亞蘭)、Sophronitis (索芙羅蘭)等成功進(jìn)行了屬間雜交，已育成大量的雜交種，目前所指的卡特蘭是泛指Cattleya屬及其它相關(guān)近緣屬的所有原種及雜交種，包括卡特蘭屬原種及屬內(nèi)雜交種，卡特蘭近緣屬及屬內(nèi)雜交種，卡特蘭屬與近緣屬的雜交種，以及卡特蘭近緣屬之間的雜交種，形成了龐大的卡特蘭家族品種。由于各種類卡特蘭花期不一致，在雜交育種過程中，常出現(xiàn)花期不遇，需要對(duì)采集的花粉塊進(jìn)行貯藏，貯藏后花粉生活力對(duì)雜交育種的成功具有重要影響。由于蘭科植物的花粉外面包裹類脂膜，使得花粉粒粘連成花粉塊，使花粉不易分散，這不利于對(duì)花粉萌發(fā)進(jìn)行觀察。現(xiàn)有技術(shù)中，對(duì)卡特蘭花粉的萌發(fā)沒有過研究，在蘭科植物中，僅見于對(duì)大花蕙蘭(Cymbidium h ybridium)和臺(tái)灣金線蓮(Anoectochilus formosanus)花粉的萌發(fā)進(jìn)行了研究，并且使用的都是固體培養(yǎng)基，大花蕙蘭的花粉在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)4天才能萌發(fā)，臺(tái)灣金線蓮花粉塊固體培養(yǎng)時(shí)需要48小時(shí)才能萌發(fā)。耗時(shí)長(zhǎng)，萌發(fā)率低，而且固體培養(yǎng)基配制繁瑣
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種耗時(shí)短、萌發(fā)率高的卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。由上述本發(fā)明提供的技術(shù)方案可以看出，本發(fā)明提供的卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基，由于該培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。耗時(shí)短、萌發(fā)率高，大大提高了工作效率。
具體實(shí)施例方式下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例作進(jìn)ー步地詳細(xì)描述。
本發(fā)明的卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基，其較佳的具體實(shí)施方式
是該培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。優(yōu)選的組合為所述蔗糖、H3BO3, CaCl2在液體培養(yǎng)基中的濃度分別為100gじ1、40mg r\l50mgじ1。采用本發(fā)明的卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基，在3小時(shí)后就可以觀察到花粉的萌發(fā)現(xiàn)象，24小時(shí)后花粉塊完全溶解在培養(yǎng)液中，可清晰地觀察到花粉的萌發(fā)，所以使用本發(fā)明的卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基能夠大大提高效率。同吋，也為有效開展卡特蘭雜交育種研究提供技術(shù)支撐，如果再加入合適的激素或其它活性物質(zhì)，卡特蘭萌發(fā)所用時(shí)間可能更短，萌發(fā)率可能會(huì)更高。
具體實(shí)驗(yàn)例首先通過單因子試驗(yàn)，研究了蔗糖、硼、鈣、鎂、鉀等因素對(duì)雜種卡特蘭花粉萌發(fā)的影響。在單因子試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取對(duì)雜種卡特蘭花粉萌發(fā)影響較大的蔗糖、H3BO3和CaCl23個(gè)因子，各設(shè)5水平，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)。結(jié)果表明，蔗糖的作用極顯著，H3BO3次之，CaCl2是在蔗糖和H3BO3的主導(dǎo)作用下起輔助作用?？ㄌ靥m花粉培養(yǎng)的最佳組合為蔗糖IOOgr1+H3B0340mg ^+CaCl2ISOmgじ1，在此培養(yǎng)液中培養(yǎng)花粉塊，3小時(shí)后就可以觀察到花粉管的萌發(fā)，但此時(shí)萌發(fā)量小，而且花粉相互粘連，不利于觀察計(jì)數(shù)。在培養(yǎng)24小時(shí)后，花粉塊能夠充分溶解在培養(yǎng)液中，花粉也大量萌發(fā)，萌發(fā)率最高能達(dá)到68. 7%。以后隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)液中微生物含量逐漸增加，對(duì)觀察效果產(chǎn)生影響。蔗糖濃度是影響蘭花花粉在人工培養(yǎng)基上萌發(fā)的重要而且獨(dú)立的因素，蔗糖在花粉萌發(fā)過程中，除了能夠?yàn)榛ǚ厶峁┠茉赐?，還能起到調(diào)節(jié)滲透壓的作用，但若濃度過高，則會(huì)造成原生質(zhì)體脫水，反而抑制了花粉萌發(fā)。本申請(qǐng)的研究結(jié)果表明，蔗糖是影響雜種卡特蘭花粉萌發(fā)的主要因子，當(dāng)蔗糖濃度為IOOgじ1時(shí)最有利于花粉的萌發(fā)。硼能促進(jìn)糖的吸收與代謝，并促使花粉管的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。Ca2+主要影響花粉萌發(fā)速度和花粉管的生長(zhǎng)速度。本申請(qǐng)的研究結(jié)果表明，雜種卡特蘭花粉萌發(fā)的適宜H3BO3濃度為40mgじ1，CaCl2濃度為150mgじ1，H3BO3和CaCl2濃度過高和過低，都不利于花粉管的萌發(fā)和生長(zhǎng)。當(dāng)鈣和硼酸與糖共同存在時(shí)，糖起主要作用，硼酸起次要作用，鈣處于附屬地位。在優(yōu)選出的最佳培養(yǎng)液蔗糖IOOg r1+H3B0340mg ^+CaCl2ISOmgじ1中培養(yǎng)花粉塊，3小時(shí)后就可以觀察到花粉管的萌發(fā)，但此時(shí)萌發(fā)量小，而且花粉相互粘連，不利于觀察計(jì)數(shù)。在培養(yǎng)24小時(shí)后，花粉塊能夠充分溶解在培養(yǎng)液中，花粉也大量萌發(fā)。以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式
，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.ー種卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基，其特征在干，該培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基，其特征在于，所述蔗糖、H3B03、CaCl2在液體培養(yǎng)基中的質(zhì)量濃度分別為=IOOg r\40mgじ1、150mgじ1。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基中包含蔗糖、H3BO3、CaCl2。優(yōu)選的組合為所述蔗糖、H3BO3、CaCl2在液體培養(yǎng)基中的濃度分別為100g L-1、40mg L-1、150mg L-1。采用本發(fā)明的卡特蘭花粉萌發(fā)培養(yǎng)基，在3小時(shí)后就可以觀察到花粉的萌發(fā)現(xiàn)象，24小時(shí)后花粉塊完全溶解在培養(yǎng)液中，可清晰地觀察到花粉的萌發(fā)，能夠大大提高效率。
文檔編號(hào)C12N5/04GK102618483SQ201210066900
公開日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年3月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月14日
發(fā)明者王雁, 鄭寶強(qiáng) 申請(qǐng)人:中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)研究所