一種紫香蘭組培快繁方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種紫香蘭組培快繁方法，其特征在于，主要步驟包括：人工授粉、無菌播種、原球莖繼代增殖、原球莖分化、組培苗生根和煉苗；本發(fā)明通過逐步誘導種子萌發(fā)和培養(yǎng)，能夠培育出大量紫香蘭幼苗上市；本發(fā)明采用同株異花授粉得到的種子，提高了種子在特定條件下的發(fā)芽率；并且種子萌發(fā)培養(yǎng)基配方簡單并且原料易得，通過實驗證明可以提高紫香蘭種子的萌發(fā)率；本發(fā)明的組培快繁方法具有極高的推廣價值。
【專利說明】-種紫香蘭組培快繁方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物栽培及育苗【技術領域】，尤其涉及一種紫香蘭組培快繁方法。

【背景技術】
[0002] 紫香蘭，拉丁學名Zygopetalums，原產美國加州一帶。又名軛瓣蘭或接瓣蘭，因花 瓣以紫色為基調色，偶有香味，故得名。紫香蘭花期長，花姿美，又伴有芳香，其唇瓣大而成 扇形，紫色斑紋點綴其上，整朵花顯得高貴典雅。由于紫香蘭株型較小，適合做成小盆栽排 放于辦公桌上，更是受到都市白領的喜愛，市場銷量也在逐步提升。
[0003] 但是由于紫香蘭為國外引進種，國內生產種植紫香蘭盆栽的公司還很少，量也不 大，紫香蘭種苗主要還是依靠進口，國內鮮有生產紫香蘭種苗的公司。主要原因是紫香蘭 種子發(fā)育不完全，自然條件下難以萌發(fā)，種苗稀缺，目前國內對紫香蘭種苗繁殖方法掌握 較少，中國科學院華南植物園在2009年申請了"接瓣蘭種苗的試管繁殖方法"，專利號： CN200910039928.X，但該方法操作復雜，選用種子較為隨意，對后續(xù)的播種成功率產生影 響；尤其是對培養(yǎng)基的配制配方較復雜，而且需要用試管苗移栽，移栽仍需專用的基質，生 產成本高，不利于大規(guī)模生產。
[0004] 本課題組經過兩年研究，總結出一套成熟的紫香蘭組培快繁方法，能夠操作相對 簡單并且成萌發(fā)以及生根、成苗功率較高，所繁殖的組培苗健壯耐性強，可滿足市場的需 要。


【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明旨在提供一種操作簡單，產生經濟價值高的紫香蘭組培快繁方法。
[0006] 本發(fā)明目的通過以下技術方案來予以實現(xiàn)： 一種紫香蘭組培快繁方法，其特征在于，步驟包括a、同株異花授粉：取同一植株上 開花2-4天的紫香蘭花粉小心剝下，接到另一朵花的花柱上，并將該花上本身的花粉剝 掉；b、無菌播種：授粉成功后80-120天，取成熟果莢中的種子撥到配好的誘導種子萌發(fā) 培養(yǎng)基上，放置于培養(yǎng)室內誘導種子萌發(fā)；c、原球莖繼代增殖：無菌播種1.5-3個月，種 子萌發(fā)出綠色的原球莖；將原球莖轉到增殖培養(yǎng)基上繼代增殖，原球莖增殖培養(yǎng)基為： 1/2MS+NAA0. 5-1. 0 mg/L+ 蔗糖 2%+ 卡拉膠 0? 7%，pH 為 5. 6-5. 8 ;繼代周期為 40-50d ;d、原 球莖分化：原球莖經過幾次繼代增殖后，數(shù)量已達到生產所需要的量；此時將原球莖轉到 分化培養(yǎng)基上誘導原球莖分化成苗；e、組培苗生根：原球莖分化成苗后，生長到3-5cm高， 葉片3-4片時，從基部切下轉到生根培養(yǎng)基上生根；生根培養(yǎng)20-40天，組培苗長出3-4條 根，根長3cm左右時，從組培室轉到煉苗室煉苗5-9天，然后移植到土壤里即得到紫香蘭組 培苗。
[0007] 所述無菌播種的方法為：先用飽和洗衣粉溶液擦洗表面，流水沖洗一遍后轉到超 凈工作臺上；將果莢尾部花蒂殘留切去，然后放在70%酒精中浸泡3-8S，立即用無菌水洗一 遍；將果莢浸泡于〇. 01%升汞溶液中消毒5-10min，最后用無菌水洗4-5次；用無菌濾紙吸 干果莢表面水分，用解剖刀將果莢從中間縱切，將里面的種子用鑷子小心撥到配好的誘導 種子萌發(fā)培養(yǎng)基上。
[0008] 所述種子萌發(fā)培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+椰汁5%-10%+蔗糖2%+卡拉膠 0. 7%，pH5. 6-5. 8。培養(yǎng)室溫度 25-26°C，光照時間 12h/d，光照強度 50-90 ii mol
[0009] 所述原球莖增殖培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 5-1. 0 mg/L+蔗糖2%+卡拉膠0. 7%， pH5. 6-5. 8 ； 所述分化培養(yǎng)基為：l/2MS+6-BAl. 0-2. 0 mg/L+蔗糖2%+卡拉膠0. 7%，pH5. 6-5. 8。培 養(yǎng)溫度 25-261：，光照時間1411/(1，光照強度 80-12011111〇1111-28-1。
[0010]所述生根培養(yǎng)基為：1/3MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+IBA0. 5-1. 0mg/L+ 香蕉泥 6%+ 活性炭 2g/L+ 鹿糖 15mg/L+ 卡拉膠 0? 7%，pH5. 6-5. 8。
[0011] 所述生根培養(yǎng)的溫度為20-29°C，光照時間8-14h/d，光照強度50-90 y mol n^s-1。
[0012] 本發(fā)明的有益效果：1、本發(fā)明采用同株異花授粉得到的種子，提高了種子在特定 條件下的發(fā)芽率；2、本發(fā)明的種子萌發(fā)培養(yǎng)基配方簡單并且原料易得，通過實驗證明可以 提高紫香蘭種子的萌發(fā)率；3、原球莖增殖培養(yǎng)基和種子萌發(fā)培養(yǎng)基配方相同，無需更換配 方，僅需更換培養(yǎng)皿即可，降低了材料和人工操作成本；4、分化培養(yǎng)基配方簡單易得，降低 了材料成本；5、生根培養(yǎng)基中加入了香蕉泥，不僅因為香蕉泥中含有乙烯利的催熟化合物， 香蕉泥的其他成分也對生根產生了非常重要的作用。

【具體實施方式】
[0013] 下面結合具體實施例來進一步說明本發(fā)明。
[0014] 實施例1 一種紫香蘭組培快繁方法，其特征在于，步驟包括a、同株異花授粉：取同一植株 上開花4天的紫香蘭花粉小心剝下，接到另一朵花的花柱上，并將該花上本身的花粉剝 掉；b、無菌播種：授粉成功后100天，取成熟果莢；先用飽和洗衣粉溶液擦洗表面，流水沖 洗一遍后轉到超凈工作臺上；將果莢尾部花蒂殘留切去，然后放在70%酒精中浸泡5S， 立即用無菌水洗一遍；將果莢浸泡于〇. 01%升汞溶液中消毒8min，最后用無菌水洗4-5 次；用無菌濾紙吸干果莢表面水分，用解剖刀將果莢從中間縱切，將里面的種子用鑷子 小心撥到配好的種子萌發(fā)培養(yǎng)基上，放置于培養(yǎng)室內誘導種子萌發(fā)，種子萌發(fā)培養(yǎng)基為： 1/2MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+ 椰汁 5%-10%+ 蔗糖 2%+ 卡拉膠 0. 7%，pH5. 6-5. 8。培養(yǎng)室溫度 25-261：，光照時間1211/(1，光照強度50-9011111〇1111_ 28_1。（3、原球莖繼代增殖：無菌播種2個 月，種子基本均萌發(fā)出綠色的原球莖；此時將原球莖轉到增殖培養(yǎng)基上繼代增殖，繼代周期 為40-50d ;d、原球莖分化：原球莖經過幾次繼代增殖后，數(shù)量已達到生產所需要的量；此 時將原球莖轉到分化培養(yǎng)基上誘導原球莖分化成苗；分化培養(yǎng)基為：l/2MS+6-BAl. 0-2. 0 mg/L+蔗糖2%+卡拉膠0? 7%，pH5. 6-5. 8 ;培養(yǎng)溫度25-26°C，光照時間14h/d，光照強度 80-120 ii mol nrS' e、組培苗生根：原球莖分化成苗后，生長到3-5cm高，葉片3-4片 時，從基部切下轉到生根培養(yǎng)基上生根。培養(yǎng)溫度25-26°C，光照時間12h/d，光照強度 50-90 ii mol nT2s_1;經過1個月，組培苗長出3-4條根，根長3cm左右時，從組培室轉到 煉苗室煉苗1周左右即可種植到合適的基質上；生根培養(yǎng)基為：1/3MS+NAA0. 2-0. 5mg/ L+IBAO. 5-1. 0mg/L+ 香蕉泥 6%+ 活性炭 2g/L+ 鹿糖 15mg/L+ 卡拉膠 0? 7%，pH5. 6-5. 8。生根 培養(yǎng)的溫度為20-29°C，光照時間8-14h/d，光照強度50-90 y mol n^s-1。
[0015] 實施例2 一種紫香蘭組培快繁方法，其特征在于，步驟包括a、同株異花授粉：取同一植株上開 花4天的紫香蘭花粉小心剝下，接到另一朵花的花柱上，并將該花上本身的花粉剝掉；b、無 菌播種：授粉成功后90天，取成熟果莢；先用飽和洗衣粉溶液擦洗表面，流水沖洗一遍后轉 到超凈工作臺上；將果莢尾部花蒂殘留切去，然后放在70%酒精中浸泡7S，立即用無菌水洗 一遍；將果莢浸泡于0. 01%升汞溶液中消毒8min，最后用無菌水洗4-5次；用無菌濾紙吸干 果莢表面水分，用解剖刀將果莢從中間縱切，將里面的種子用鑷子小心撥到配好的種子萌 發(fā)培養(yǎng)基上，放置于培養(yǎng)室內誘導種子萌發(fā)，種子萌發(fā)培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+ 椰汁5%-10%+蔗糖2%+卡拉膠0. 7%，pH5. 6-5. 8。培養(yǎng)室溫度25-26°C，光照時間12h/d，光 照強度50-90 y mol nT2s' c、原球莖繼代增殖：無菌播種1.5個月，種子基本均萌發(fā)出綠色 的原球莖；此時將原球莖轉到增殖培養(yǎng)基上繼代增殖，繼代周期為40-50d ;d、原球莖分化： 原球莖經過幾次繼代增殖后，數(shù)量已達到生產所需要的量；此時將原球莖轉到分化培養(yǎng)基 上誘導原球莖分化成苗；分化培養(yǎng)基為：l/2MS+6-BAl. 0-2. 0 mg/L+蔗糖2%+卡拉膠0. 7%， 口冊.6-5.8;培養(yǎng)溫度25-261：，光照時間1411/(1，光照強度80-12011111〇1111- 28-1。6、組培苗生 根：原球莖分化成苗后，生長到3-5cm高，葉片3-4片時，從基部切下轉到生根培養(yǎng)基上生 根。培養(yǎng)溫度25-26°C，光照時間12h/d，光照強度50-90 ii mol n^s-1;經過1個月，組培苗 長出3-4條根，根長3cm左右時，從組培室轉到煉苗室煉苗1周左右即可種植到合適的基質 上；生根培養(yǎng)基為：1/3MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+IBA0. 5-1. 0mg/L+ 香蕉泥 6%+ 活性炭 2g/L+ 蔗 糖15mg/L+卡拉膠0. 7%，pH5. 6-5. 8。生根培養(yǎng)的溫度為20-29°C，光照時間8-14h/d，光照 強度 50-90 u mol m 2s、
[0016] 對比例1 一種紫香蘭組培快繁方法，其特征在于，步驟包括a、同株異花授粉：取同一植株上開 花4天的紫香蘭花粉小心剝下，接到另一朵花的花柱上，并將該花上本身的花粉剝掉；b、無 菌播種：授粉成功后90天，取成熟果莢；先用飽和洗衣粉溶液擦洗表面，流水沖洗一遍后轉 到超凈工作臺上；將果莢尾部花蒂殘留切去，然后放在70%酒精中浸泡7S，立即用無菌水洗 一遍；將果莢浸泡于0. 01%升汞溶液中消毒8min，最后用無菌水洗4-5次；用無菌濾紙吸干 果莢表面水分，用解剖刀將果莢從中間縱切，將里面的種子用鑷子小心撥到配好的種子萌 發(fā)培養(yǎng)基上，放置于培養(yǎng)室內誘導種子萌發(fā)，種子萌發(fā)培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+ 椰汁5%-10%+蔗糖2%+卡拉膠0. 7%，pH5. 6-5. 8。培養(yǎng)室溫度25-26°C，光照時間12h/d，光 照強度50-90 y mol nT2s' c、原球莖繼代增殖：無菌播種2個月，種子基本均萌發(fā)出綠色 的原球莖；此時將原球莖轉到增殖培養(yǎng)基上繼代增殖，繼代周期為40-50d ;d、原球莖分化： 原球莖經過幾次繼代增殖后，數(shù)量已達到生產所需要的量；此時將原球莖轉到分化培養(yǎng)基 上誘導原球莖分化成苗；分化培養(yǎng)基為：l/2MS+6-BAl. 0-2. 0 mg/L+蔗糖2%+卡拉膠0. 7%， pH5. 6-5. 8 ;培養(yǎng)溫度25-26°C，光照時間14h/d，光照強度80-120 ii mol n^s-1。e、組培苗 生根：原球莖分化成苗后，生長到3-5cm高，葉片3-4片時，從基部切下轉到生根培養(yǎng)基上 生根。培養(yǎng)溫度25-26°C，光照時間12h/d，光照強度50-90 y mol n^s-1;經過1個月，組培 苗長出3-4條根，根長3cm左右時，從組培室轉到煉苗室煉苗1周左右即可種植到合適的基 質上；生根培養(yǎng)基為：1/3MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+IBA0. 5-1. 0mg/L+ 乙烯利 0? 001g/L+ 活性炭 2g/L+蔗糖15mg/L+卡拉膠0? 7%，pH5. 6-5. 8。生根培養(yǎng)的溫度為20-29°C，光照時間8-14h/ d，光照強度 50-90 y mol nr2s'
[0017] 對比例2 一種紫香蘭組培快繁方法，其特征在于，步驟包括a、同株同花授粉：取同一植株上開 花4天的紫香蘭花粉小心剝下，接到同一朵花的花柱上；b、無菌播種：授粉成功后90天，取 成熟果莢；先用飽和洗衣粉溶液擦洗表面，流水沖洗一遍后轉到超凈工作臺上；將果莢尾 部花蒂殘留切去，然后放在70%酒精中浸泡7S，立即用無菌水洗一遍；將果莢浸泡于0. 01% 升汞溶液中消毒8min，最后用無菌水洗4-5次；用無菌濾紙吸干果莢表面水分，用解剖刀 將果莢從中間縱切，將里面的種子用鑷子小心撥到配好的種子萌發(fā)培養(yǎng)基上，放置于培養(yǎng) 室內誘導種子萌發(fā)，種子萌發(fā)培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+椰汁5%-10%+蔗糖2%+ 卡拉膠0.7%，pH5. 6-5. 8。培養(yǎng)室溫度25-26 °C，光照時間12h/d，光照強度50-90ii mol nT2S' c、原球莖繼代增殖：無菌播種2個月，種子基本均萌發(fā)出綠色的原球莖；此時將原 球莖轉到增殖培養(yǎng)基上繼代增殖，繼代周期為40-50d ;d、原球莖分化：原球莖經過幾次繼 代增殖后，數(shù)量已達到生產所需要的量；此時將原球莖轉到分化培養(yǎng)基上誘導原球莖分化 成苗；分化培養(yǎng)基為：l/2MS+6-BAl. 0-2. 0 mg/L+蔗糖2%+卡拉膠0? 7%，pH5. 6-5. 8 ;培養(yǎng) 溫度25-26°C，光照時間14h/d，光照強度80-120iimol n^s-1。e、組培苗生根：原球莖分 化成苗后，生長到3-5cm高，葉片3-4片時，從基部切下轉到生根培養(yǎng)基上生根。培養(yǎng)溫度 25-26°C，光照時間12h/d，光照強度50-90 y mol m-Y1;經過1個月，組培苗長出3-4條根， 根長3cm左右時，從組培室轉到煉苗室煉苗1周左右即可種植到合適的基質上；生根培養(yǎng)基 為：1/3MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+IBA0. 5-1. 0mg/L+ 香蕉泥 6%+ 活性炭 2g/L+ 蔗糖 15mg/L+ 卡拉 膠0. 7%，pH5. 6-5. 8。生根培養(yǎng)的溫度為20-29°C，光照時間8-14h/d，光照強度50-90 ii mol m 2s、
[0018] 將以上實施例培養(yǎng)的秧苗煉苗1周后移至花盆栽培，通過以下表格對實施例中的 結果進行統(tǒng)計和對比如下：

【權利要求】
1. 一種紫香蘭組培快繁方法，其特征在于，步驟包括a、同株異花授粉：取同一植株上 開花2-4天的紫香蘭花粉剝下，接到另一朵花的花柱上，并將該花上本身的花粉剝掉；b、無 菌播種：授粉成功后80-120天，取成熟果莢中的種子撥到配好的誘導種子萌發(fā)培養(yǎng)基上， 放置于培養(yǎng)室內誘導種子萌發(fā)；c、原球莖繼代增殖：無菌播種1. 5-3個月，種子萌發(fā)出綠色 的原球莖；將原球莖轉到增殖培養(yǎng)基上繼代增殖，繼代周期為40-50d ;d、原球莖分化：原球 莖經過幾次繼代增殖后，數(shù)量已達到生產所需要的量；此時將原球莖轉到分化培養(yǎng)基上誘 導原球莖分化成苗；e、組培苗生根：原球莖分化成苗后，生長到3-5cm高，葉片3-4片時，從 基部切下轉到生根培養(yǎng)基上生根；生根培養(yǎng)20-40天，組培苗長出3-4條根，根長3cm左右 時，從組培室轉到煉苗室煉苗5-9天，然后移植到土壤里即得到紫香蘭組培苗； 所述無菌播種的方法為：先用飽和洗衣粉溶液擦洗表面，流水沖洗一遍后轉到超凈工 作臺上；將果莢尾部花蒂殘留切去，然后放在70%酒精中浸泡3-8S，用無菌水洗；將果莢浸 泡于0. 01%升汞溶液中消毒5-10min，最后用無菌水洗4-5次；用無菌濾紙吸干果莢表面水 分，用解剖刀將果莢從中間縱切，將里面的種子用鑷子撥到配好的誘導種子萌發(fā)培養(yǎng)基上。
2. 根據(jù)權利要求1所述的紫香蘭組培快繁方法，所述誘導種子萌發(fā)培養(yǎng)基為： 1/2MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+ 椰汁 5%-10%+ 蔗糖 2%+ 卡拉膠 0? 7%，pH 為 5. 6-5. 8 ;培養(yǎng)室溫度 25-26°C，光照時間 12h/d，光照強度 50-90 ii mol
3. 根據(jù)權利要求1所述的紫香蘭組培快繁方法，所述原球莖增殖培養(yǎng)基為： 1/2MS+NAA0. 5-1. 0 mg/L+ 蔗糖 2%+ 卡拉膠 0? 7%，pH 為 5. 6-5. 8。
4. 根據(jù)權利要求1所述的紫香蘭組培快繁方法，所述分化培養(yǎng)基為： 1/2MS+6-BA1. 0-2. 0 mg/L+ 蔗糖 2%+ 卡拉膠 0. 7%，pH5. 6-5. 8 ;培養(yǎng)溫度 25-26°C，光照時間 14h/d，光照強度 80-120 nmol m S1。
5. 根據(jù)權利要求1所述的紫香蘭組培快繁方法，所述生根培養(yǎng)基為： 1/3MS+NAA0. 2-0. 5mg/L+IBA0. 5-1. 0mg/L+ 香蕉泥 6%+ 活性炭 2g/L+ 鹿糖 15mg/L+ 卡拉膠 0? 7%，pH 為 5. 6-5. 8。
6. 根據(jù)權利要求1所述的紫香蘭組培快繁方法，所述生根培養(yǎng)的溫度為20-29°C，光照 時間 8_14h/d，光照強度 50-90 y mol m 2s、
【文檔編號】A01H4/00GK104429964SQ201410757483
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月12日 優(yōu)先權日:2014年12月12日
【發(fā)明者】范俊強, 張善信, 鄭貴朝 申請人:東莞市生物技術研究所