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胚胎玻璃化冷凍器的制作方法

文檔序號(hào):11532780閱讀:465來(lái)源:國(guó)知局
胚胎玻璃化冷凍器的制造方法與工藝

本實(shí)用新型涉及一種生殖醫(yī)學(xué)醫(yī)療衛(wèi)生技術(shù)領(lǐng)域,特別是一種胚胎玻璃化冷凍器。



背景技術(shù):

患者在進(jìn)行IVF(ICSI)----體外受精(卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射技術(shù))治療時(shí),在一個(gè)超排治療周期中一般會(huì)獲得多個(gè)質(zhì)量好的胚胎,但在本周期中往往不能一次全部移植或不宜移植,可以將剩余或全部的優(yōu)質(zhì)胚胎進(jìn)行冷凍保存。胚胎冷凍保存可使病人在一個(gè)治療周期中獲得多次胚胎移植的機(jī)會(huì),使胚胎的利用率達(dá)到了最大的限度,大大提高了IVF(ICSI)治療的成功率。

胚胎冷凍保存技術(shù)是指采用慢速或快速的降溫方法,將胚胎低溫冷凍,然后超低溫保存在-196℃的液氮中。目前胚胎冷凍保存技術(shù)有慢速程序化冷凍技術(shù)和玻璃化冷凍技術(shù)兩種,玻璃化冷凍技術(shù)比慢速程序化冷凍技術(shù)具有簡(jiǎn)單、快速、臨床妊娠率和胚胎著床率高的優(yōu)點(diǎn),因此目前各大生殖中心基本上采用玻璃化冷凍胚胎進(jìn)行保存。在進(jìn)行玻璃化冷凍的過(guò)程中,在最后一步胚胎放入冷凍液后要在60秒內(nèi)置于載桿上并投入液氮,但胚胎會(huì)浮在冷凍液上層難以在60秒內(nèi)吸取,尤其是對(duì)剛參加工作操作不熟練的實(shí)驗(yàn)室工作人員,如何簡(jiǎn)化胚胎玻璃化冷凍操作,避免操作失誤,提高玻璃化冷凍胚胎復(fù)蘇后的存活率(目前的存活率為94%)成為本行業(yè)急需解決的問題。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

本實(shí)用新型所要解決的問題是提供一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、使用方便的胚胎玻璃化冷凍器。

為了解決上述技術(shù)問題,本實(shí)用新型提供一種胚胎玻璃化冷凍器,包括殼體、拉桿、壓桿、拉桿活塞、壓桿活塞、彈簧、冷凍液吸管及胚胎針;所述殼體內(nèi)腔的上半部被分隔形成了相互獨(dú)立的壓縮腔Ⅰ和壓縮腔Ⅱ,殼體內(nèi)腔的下半部為廢液腔,所述壓縮腔Ⅰ和壓縮腔Ⅱ均與廢液腔相連通;

所述殼體頂端設(shè)置有兩個(gè)各自連通壓縮腔Ⅰ、壓縮腔Ⅱ的開口;

位于壓縮腔Ⅰ內(nèi)的拉桿活塞與壓縮腔Ⅰ的內(nèi)側(cè)壁密封的滑動(dòng)相連,拉桿的底部穿過(guò)連通壓縮腔Ⅰ的開口后與拉桿活塞固定相連;在壓縮腔Ⅰ的上下端分別設(shè)置用于限定拉桿活塞滑動(dòng)位置的拉桿活塞上限限定環(huán)、拉桿活塞下限限定環(huán);

位于壓縮腔Ⅱ內(nèi)的壓桿活塞與壓縮腔Ⅱ的內(nèi)側(cè)壁密封的滑動(dòng)相連,壓桿的底部穿過(guò)連通壓縮腔Ⅱ的開口后與壓桿活塞固定相連;在壓縮腔Ⅱ的上下端分別設(shè)置用于限定壓桿活塞滑動(dòng)位置的壓桿活塞上限限定環(huán)和彈簧固定環(huán),在壓桿活塞和彈簧固定環(huán)之間設(shè)置彈簧,所述彈簧的兩端分別抵接壓桿活塞和彈簧固定環(huán);

所述殼體側(cè)壁上設(shè)置有連通廢液腔頂部的冷凍液吸管;所述冷凍液吸管下端設(shè)置有冷凍腔,胚胎針的端部位于冷凍腔內(nèi)。

作為本實(shí)用新型的胚胎玻璃化冷凍器的改進(jìn):所述胚胎針包括均中空且上下相連通的胚胎針上段和胚胎針下段,胚胎針上段的頂部伸入冷凍腔內(nèi);

所述胚胎針上段的頂部為網(wǎng)狀半球形,網(wǎng)孔的孔徑小于胚胎的直徑;

胚胎針下段的下端為開口端。

備注說(shuō)明:胚胎針上段的頂部為網(wǎng)狀半球形;這樣的結(jié)構(gòu)既可以攔截住胚胎,使胚胎始終位于胚胎針上段的頂部,而不會(huì)進(jìn)入冷凍腔和冷凍液吸管;又能確保液體的通過(guò)。

胚胎針上段和胚胎針下段的內(nèi)腔橫截面大于胚胎的直徑,從而胚胎在胚胎針內(nèi)的移動(dòng)。

作為本實(shí)用新型的胚胎玻璃化冷凍器的進(jìn)一步改進(jìn):所述胚胎針上段與胚胎針下段的夾角為145~155°(較佳為150°)。

作為本實(shí)用新型的胚胎玻璃化冷凍器的進(jìn)一步改進(jìn):

拉桿頂端設(shè)置有拉板,拉板的尺寸大于連通壓縮腔Ⅰ的開口的尺寸,拉板位于壓縮腔Ⅰ的上方;

壓桿頂端設(shè)置有壓板,壓板的尺寸大于連通壓縮腔Ⅱ的開口的尺寸,壓板位于壓縮腔Ⅱ的上方。

作為本實(shí)用新型的胚胎玻璃化冷凍器的進(jìn)一步改進(jìn):壓縮腔Ⅰ的容積大于壓縮腔Ⅱ的容積。

作為本實(shí)用新型的胚胎玻璃化冷凍器的進(jìn)一步改進(jìn):壓縮腔Ⅰ的橫截面大于壓縮腔Ⅱ的橫截面。

作為本實(shí)用新型的胚胎玻璃化冷凍器的進(jìn)一步改進(jìn):所述殼體的外表面設(shè)置有平衡液刻度線。

作為本實(shí)用新型的胚胎玻璃化冷凍器的進(jìn)一步改進(jìn):冷凍腔(15)為球狀空腔。

本實(shí)用新型還同時(shí)提供了上述胚胎玻璃化冷凍器的使用方法,包括以下步驟:

1)、先向下按動(dòng)拉板,使拉桿在壓縮腔Ⅰ中向下移動(dòng),直至拉桿活塞與拉桿活塞下限限定環(huán)相接觸為止;然后向下按動(dòng)壓板,壓桿在壓縮腔Ⅱ中向下移動(dòng),壓桿活塞壓縮彈簧,直至彈簧被壓縮至極限為止;殼體內(nèi)的空氣被壓縮后通過(guò)冷凍液吸管、再經(jīng)胚胎針排出殼體外;

先將胚胎針下段開口端置入含有胚胎的培養(yǎng)液中,之后松開壓板,壓桿在彈簧彈力的作用下復(fù)原,使殼體內(nèi)的壓力小于環(huán)境壓力,產(chǎn)生的吸力吸取含有胚胎的培養(yǎng)液;含有胚胎的培養(yǎng)液依次經(jīng)過(guò)胚胎針下段、胚胎針上段進(jìn)入位于冷凍腔內(nèi)的胚胎針上段的頂部;胚胎被截留在胚胎針上段的頂部;培養(yǎng)液先通過(guò)胚胎針上段頂部的網(wǎng)孔進(jìn)入冷凍腔內(nèi),再沿著冷凍液吸管流入廢液腔內(nèi);

2)、將胚胎針下段開口端置入平衡液中,向上拉動(dòng)拉板,使拉桿在壓縮腔Ⅰ中向上移動(dòng),在殼體內(nèi)外空氣壓差的作用下胚胎針下段開口端吸取平衡液,平衡液依次經(jīng)過(guò)胚胎針下段、胚胎針上段、胚胎針上段頂部的網(wǎng)孔進(jìn)入冷凍腔從而實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)液的被置換;當(dāng)于拉桿的作用下拉桿活塞被拉升至底端與平衡液刻度線平行時(shí),保持6~10分鐘(例如為8分鐘)然后進(jìn)行下述步驟3);

備注說(shuō)明:該步驟2)的作用是將胚胎針、冷凍腔和冷凍液吸管中的培養(yǎng)液全部替換成平衡液;被替換的培養(yǎng)液以及多余的平衡液會(huì)從冷凍腔經(jīng)過(guò)冷凍液吸管流入廢液腔中;

3)、將胚胎針下段開口端置入冷凍液中,往上繼續(xù)拉動(dòng)拉板,直至拉桿活塞與拉桿活塞上限限定環(huán)相接觸為止,在殼體內(nèi)外空氣壓差的作用下胚胎針下段開口端吸取冷凍液;冷凍液依次經(jīng)過(guò)胚胎針下段、胚胎針上段、胚胎針上段頂部的網(wǎng)孔進(jìn)入冷凍腔從而實(shí)現(xiàn)平衡液的被置換;保持30±3秒然后進(jìn)行下述的步驟4)

備注說(shuō)明:該步驟3)的作用是將胚胎針、冷凍腔和冷凍液吸管中的平衡液迅速的全部替換冷凍液;被替換的平衡液以及多余的冷凍液會(huì)從冷凍腔經(jīng)過(guò)冷凍液吸管流入廢液腔中;

4)、向下按動(dòng)壓板,壓桿在壓縮腔Ⅱ中向下移動(dòng),在殼體內(nèi)外空氣壓差的作用下,殼體內(nèi)的氣體將位于胚胎針上段頂部?jī)?nèi)的胚胎從胚胎針中排出至載桿的胚胎載片上,之后將載桿迅速投入液氮中(迅速投入液氮中,此為常規(guī)技術(shù))。

作為上述胚胎玻璃化冷凍器的使用方法的改進(jìn):

當(dāng)在拉桿的作用下拉桿活塞被拉升至底端與平衡液刻度線平行時(shí),從胚胎針下段開口端吸入的平衡液為200μL;

當(dāng)拉桿活塞被繼續(xù)拉升至與拉桿活塞上限限定環(huán)相接觸時(shí),從胚胎針下段開口端吸入的冷凍液為200μL。

本實(shí)用新型具有如下技術(shù)優(yōu)勢(shì):

1、本實(shí)用新型在冷凍胚胎過(guò)程中只需在顯微鏡下吸放胚胎各1次,無(wú)需像現(xiàn)有技術(shù)需要在顯微鏡下吸放胚胎3次,簡(jiǎn)化了操作;

2、分別設(shè)置了大容積的壓縮腔Ⅰ和小容積的壓縮腔Ⅱ,大容積的壓縮腔Ⅰ用于較大體積的平衡液和冷凍液的吸取,是通過(guò)抽拉拉桿實(shí)現(xiàn)的;小容積的壓縮腔Ⅱ可以提供較為靈敏的吸放力用于體積極小的胚胎(即,含有胚胎的培養(yǎng)液)吸放,是通過(guò)壓縮彈簧實(shí)現(xiàn)的;

3、冷凍液吸管下端設(shè)置有球狀的冷凍腔,該形狀的冷凍腔中可以容納足夠多的平衡液或冷凍液,可以將胚胎細(xì)胞胞質(zhì)中的水替換成平衡液中的低溫保護(hù)劑;胚胎針伸入冷凍腔的一端為網(wǎng)狀半球形,其允許液體通過(guò)又可以將胚胎攔截在胚胎針內(nèi)的處于網(wǎng)狀半球形一端,使胚胎一直在胚胎針中,不會(huì)流入冷凍液吸管內(nèi)。

4、胚胎針分為胚胎針下段與胚胎針上段,胚胎針下段與胚胎針上段呈一定角度(即,夾角為145~155°,較佳為150°),在將胚胎置于載桿上的胚胎載片時(shí),胚胎針下段可與顯微鏡載物臺(tái)平行,可以清楚觀察到胚胎在其中的位置。

綜上所述,本實(shí)用新型大大簡(jiǎn)化了胚胎玻璃化冷凍的過(guò)程,使用時(shí)將需要玻璃化冷凍保存的胚胎(即,含胚胎的培養(yǎng)液)吸入胚胎針,再依次吸取平衡液和冷凍液,最后將胚胎置于載桿上并迅速投入液氮中,這個(gè)優(yōu)化后的冷凍過(guò)程無(wú)需像傳統(tǒng)冷凍過(guò)程需要重復(fù)吸放胚胎,特別是解決了胚胎放入冷凍液后會(huì)上浮難以在60秒內(nèi)吸取的難題。采用本實(shí)用新型后存活率能達(dá)到98%。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。

圖1為本實(shí)用新型中胚胎玻璃化冷凍器的整體結(jié)構(gòu)示意圖;

圖2為圖1的剖面示意圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步描述,但本實(shí)用新型的保護(hù)范圍并不僅限于此。

實(shí)施例1、一種胚胎玻璃化冷凍器,如圖1~2所示,包括殼體1、拉桿2、壓桿3、拉桿活塞4、壓桿活塞5、彈簧6、拉桿活塞上限限定環(huán)7、拉桿活塞下限限定環(huán)11、壓桿活塞上限限定環(huán)8、彈簧固定環(huán)12、冷凍液吸管14及胚胎針10。

殼體1為圓柱形空腔(帶有頂和底),殼體1內(nèi)腔的上半部設(shè)置有兩個(gè)直徑一大一小的平行的圓柱形空腔,大的圓柱形空腔為壓縮腔Ⅰ91,小的圓柱形空腔為壓縮腔Ⅱ92,壓縮腔Ⅰ91的容積大于壓縮腔Ⅱ92的容積,且,壓縮腔Ⅰ91的橫截面大于壓縮腔Ⅱ92的橫截面。

壓縮腔Ⅰ91和壓縮腔Ⅱ92被相互隔離,互不相通。殼體1內(nèi)腔的下半部為廢液腔93,所述壓縮腔Ⅰ91和壓縮腔Ⅱ92均與廢液腔93相連通;廢液腔93用于吸收廢棄/多余的胚胎培養(yǎng)液、平衡液或冷凍液。

殼體1頂端設(shè)置有兩個(gè)各自連通壓縮腔Ⅰ91和壓縮腔Ⅱ92的開口。

位于壓縮腔Ⅰ91內(nèi)的拉桿活塞4與壓縮腔Ⅰ91的內(nèi)側(cè)壁密封的滑動(dòng)相連,拉桿2的底部穿過(guò)連通壓縮腔Ⅰ91的開口后與拉桿活塞4固定相連;在壓縮腔Ⅰ91的上下端分別設(shè)置用于限定拉桿活塞4滑動(dòng)位置的拉桿活塞上限限定環(huán)7、拉桿活塞下限限定環(huán)11。拉桿活塞上限限定環(huán)7和拉桿活塞下限限定環(huán)11將拉桿活塞4的位置限定在兩者之間,具有防止拉桿活塞4脫出壓縮腔Ⅰ91的作用。拉桿2頂端設(shè)置有拉板21,拉板21的尺寸大于連通壓縮腔Ⅰ91的開口的尺寸,拉板21位于壓縮腔Ⅰ91的上方。

位于壓縮腔Ⅱ92內(nèi)的壓桿活塞5與壓縮腔Ⅱ92的內(nèi)側(cè)壁密封的滑動(dòng)相連,壓桿3的底部穿過(guò)連通壓縮腔Ⅱ92的開口后與壓桿活塞5固定相連;在壓縮腔Ⅱ92的上下端分別設(shè)置用于限定壓桿活塞5滑動(dòng)位置的壓桿活塞上限限定環(huán)8和彈簧固定環(huán)12,在壓桿活塞5和彈簧固定環(huán)12之間設(shè)置彈簧6,所述彈簧6的兩端分別抵接壓桿活塞5和彈簧固定環(huán)12。當(dāng)壓桿活塞5與壓桿活塞上限限定環(huán)8相接觸時(shí),壓桿活塞5恰好與彈簧6接觸,但是沒有對(duì)彈簧6產(chǎn)生壓力。彈簧6的同心圓直徑比壓桿活塞5略小,能防止彈簧6與壓縮腔Ⅱ92內(nèi)壁接觸。壓桿活塞上限限定環(huán)8和彈簧固定環(huán)12將壓桿活塞5的位置限定在兩者之間,具有防止壓桿活塞5脫出壓縮腔Ⅱ92的作用。壓桿3頂端設(shè)置有壓板31,壓板31的尺寸大于連通壓縮腔Ⅱ92的開口的尺寸,壓板31位于壓縮腔Ⅱ92的上方。

設(shè)置拉板21和壓板31均能方便使用操作。

殼體1側(cè)壁上設(shè)置有連通廢液腔93頂部的冷凍液吸管14;所述冷凍液吸管14下端設(shè)置有冷凍腔15,所述冷凍腔15為球狀空腔。

胚胎針10包括均中空且上下相連的胚胎針上段101和胚胎針下段102,胚胎針上段101和胚胎針下段102相連通;胚胎針上段101的頂部伸入冷凍腔15內(nèi),即,胚胎針上段101的頂部位于冷凍腔15內(nèi)。胚胎針10的內(nèi)徑(即,胚胎針上段101的內(nèi)徑和胚胎針下段102的內(nèi)徑)比早期胚胎的直徑略大,從而便于胚胎順利在該胚胎針10中的移動(dòng)。

所述胚胎針上段101的頂部為網(wǎng)狀半球形,網(wǎng)孔的孔徑小于胚胎的直徑;這樣既可以攔截住胚胎,使胚胎始終位于胚胎針上段101的頂部,而不會(huì)進(jìn)入冷凍腔15和冷凍液吸管14;又能確保液體(包括培養(yǎng)液、平衡液、冷凍液)通過(guò)該網(wǎng)孔進(jìn)入冷凍腔15內(nèi)。胚胎針下段102的下端為開口端,該開口端為圓形開口,便于胚胎的吸取。

所述胚胎針上段101與胚胎針下段102的夾角為145~155°(較佳為150°)。此角度時(shí),在立體顯微鏡下,手持胚胎玻璃化冷凍器,胚胎針下段102可與顯微鏡載物臺(tái)平行,在將胚胎置于載桿時(shí),可觀察到胚胎在胚胎針下段102中的位置,可以在胚胎剛剛到達(dá)胚胎針下段102的開口端時(shí),再將胚胎針下段102的開口端置于載桿的胚胎載片上,從而實(shí)現(xiàn)將胚胎置于胚胎載片上,這樣可以讓胚胎載片上冷凍液的量最少。

殼體1的外表面設(shè)置有平衡液刻度線16。

本實(shí)用新型的胚胎玻璃化冷凍器屬于一次性使用器具。

本實(shí)用新型的實(shí)際使用過(guò)程:

1)、先向下按動(dòng)拉板21,使拉桿2在壓縮腔Ⅰ91中向下移動(dòng),直至拉桿活塞4與拉桿活塞下限限定環(huán)11相接觸為止;然后向下按動(dòng)壓板31,壓桿3在壓縮腔Ⅱ92中向下移動(dòng),壓桿活塞5壓縮彈簧6,直至彈簧6被壓縮至極限為止;殼體1內(nèi)的空氣被壓縮后通過(guò)冷凍液吸管14、再經(jīng)胚胎針10排出殼體1外;

先將胚胎針下段102的開口端置入含有胚胎的培養(yǎng)液中;之后松開壓板31,壓桿3在彈簧6彈力的作用下重新復(fù)原,從而使殼體1內(nèi)的壓力小于環(huán)境壓力;產(chǎn)生的吸力吸取含有胚胎的培養(yǎng)液,含有胚胎的培養(yǎng)液依次經(jīng)過(guò)胚胎針下段102、胚胎針上段101,進(jìn)入位于冷凍腔15內(nèi)的胚胎針上段101的頂部;胚胎被截留在胚胎針上段101的頂部;培養(yǎng)液先通過(guò)胚胎針上段101頂部的網(wǎng)孔進(jìn)入冷凍腔15內(nèi),再沿著冷凍液吸管14流入廢液腔93內(nèi)。此過(guò)程需要使用顯微鏡載物臺(tái)觀察,因?yàn)榕咛ト庋蹘缀醪豢梢姟?/p>

2)、將胚胎針下段102開口端置入平衡液中,向上拉動(dòng)拉板21,使拉桿2在壓縮腔Ⅰ91中向上移動(dòng),在殼體1內(nèi)外空氣壓差的作用下胚胎針下段102開口端吸取平衡液,平衡液依次經(jīng)過(guò)胚胎針下段102、胚胎針上段101、胚胎針上段101頂部的網(wǎng)孔進(jìn)入冷凍腔15從而實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)液的被置換;當(dāng)于拉桿2的作用下拉桿活塞4被拉升至底端與平衡液刻度線16平行時(shí),保持8分鐘然后進(jìn)行下述步驟3)。

當(dāng)拉桿活塞4被拉升至底端與平衡液刻度線16平行時(shí),從胚胎針下段102開口端吸入的平衡液的體積為200μL。吸入的平衡液的體積過(guò)大會(huì)浪費(fèi)平衡液,也會(huì)讓后續(xù)需要吸取的冷凍液不足200μL;過(guò)低會(huì)使吸取的平衡液不足200μL,從而影響胚胎的預(yù)平衡。

備注說(shuō)明:該步驟2)的作用是將胚胎針10、冷凍腔15和冷凍液吸管14中的培養(yǎng)液全部替換成平衡液;被替換的培養(yǎng)液以及多余的平衡液會(huì)從冷凍腔15經(jīng)過(guò)冷凍液吸管14流入廢液腔93中。

3)、將胚胎針下段102開口端置入冷凍液中,往上繼續(xù)拉動(dòng)拉板21,直至拉桿活塞4與拉桿活塞上限限定環(huán)7相接觸為止,在殼體1內(nèi)外空氣壓差的作用下胚胎針下段102開口端吸取冷凍液;冷凍液依次經(jīng)過(guò)胚胎針下段102、胚胎針上段101、胚胎針上段101頂部的網(wǎng)孔進(jìn)入冷凍腔15從而實(shí)現(xiàn)平衡液的被置換;保持30秒然后進(jìn)行下述的步驟4)。

此步驟中,從胚胎針下段102開口端吸入的冷凍液的體積為200μL。

備注說(shuō)明:該步驟3)的作用是將胚胎針10、冷凍腔15和冷凍液吸管14中的平衡液迅速替換冷凍液;被替換的平衡液以及多余的冷凍液會(huì)從冷凍腔15經(jīng)過(guò)冷凍液吸管14流入廢液腔93中;

4)、向下按動(dòng)壓板31,壓桿3在壓縮腔Ⅱ92中向下移動(dòng),在殼體1內(nèi)外空氣壓差的作用下,殼體1內(nèi)的氣體將位于胚胎針上段101頂部(此胚胎針上段101頂部位于冷凍腔15中)內(nèi)的胚胎從胚胎針10中排出至載桿的胚胎載片上,之后將載桿迅速投入液氮中。此過(guò)程需要使用顯微鏡載物臺(tái)觀察,因?yàn)榕咛ト庋蹘缀醪豢梢姟?/p>

載桿例如可選用KITAZATO Biopharma公司生產(chǎn)的玻璃化冷凍載桿。載桿作為冷凍胚胎的載體,可以在載桿上標(biāo)記胚胎信息,置入液氮中保存,需要復(fù)蘇胚胎時(shí),可以根據(jù)標(biāo)記的信息從液氮中取出需要的冷凍胚胎進(jìn)行解凍。

實(shí)際使用時(shí),先把胚胎放入較低濃度的玻璃化溶液(平衡液)中,平衡一定時(shí)間,使平衡液中的低溫保護(hù)劑滲入胞質(zhì);然后將胚胎移入較高濃度的玻璃化溶液(冷凍液)中,既可縮短平衡時(shí)間又可防止低溫保護(hù)劑的化學(xué)毒性并限制其過(guò)度滲透。

采用本實(shí)用新型,胚胎的存活率能達(dá)到98%。

對(duì)比例1、僅僅取消實(shí)施例1中的位于壓縮腔Ⅱ92的彈簧6的使用,其余等同于實(shí)施例1。

使用該裝置進(jìn)行胚胎玻璃化冷凍實(shí)驗(yàn)時(shí),會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)吸放胚胎時(shí),推拉壓桿3產(chǎn)生的吸放力難以控制,不能很好的吸取和釋放胚胎;還會(huì)導(dǎo)致將含胚胎的冷凍液置于載桿的胚胎載片上時(shí)液滴過(guò)大的不利情況;因此,使用該裝置最終的胚胎存活率僅為78%。

對(duì)比例2、取消實(shí)施例1中整個(gè)壓縮腔Ⅱ92,包括相應(yīng)的取消以下所有部件:連通壓縮腔Ⅱ92的開口、壓桿3、壓桿活塞5、彈簧6、壓桿活塞上限限定環(huán)8和彈簧固定環(huán)12。其余等同于實(shí)施例1。

使用該裝置進(jìn)行胚胎玻璃化冷凍實(shí)驗(yàn)時(shí),會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)推拉拉桿2產(chǎn)生的吸放力太大,可能導(dǎo)致胚胎損傷或丟失不利情況;因此,使用該裝置最終的胚胎存活率僅為61%。

對(duì)比例3-1、將平衡液刻度線16在殼體1上的位置相對(duì)于實(shí)施例1而言向上移動(dòng),即,當(dāng)拉桿活塞4被拉升至底端與平衡液刻度線16平行時(shí),從胚胎針下段102開口端吸入的平衡液的體積由200μL改為300μL。其余等同于實(shí)施例1。

使用該裝置進(jìn)行胚胎玻璃化冷凍實(shí)驗(yàn)時(shí),會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)在步驟3)中不能很好排盡平衡液,從而稀釋冷凍液的不利情況;因此,使用該裝置最終的胚胎存活率僅為85%。

對(duì)比例3-2、將平衡液刻度線16在殼體1上的位置相對(duì)于實(shí)施例1而言向下移動(dòng),即,當(dāng)拉桿活塞4被拉升至底端與平衡液刻度線16平行時(shí),從胚胎針下段102開口端吸入的平衡液的體積由200μL改為100μL。其余等同于實(shí)施例1。

使用該裝置進(jìn)行胚胎玻璃化冷凍實(shí)驗(yàn)時(shí),會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)平衡液未填滿冷凍腔15,低溫保護(hù)劑不能完全滲入胚胎細(xì)胞胞質(zhì),后續(xù)放入液氮中細(xì)胞內(nèi)會(huì)形成冰晶,從而造成細(xì)胞損傷的不利情況;因此,使用該裝置最終的胚胎存活率僅為80%。

對(duì)比例4、將壓縮腔Ⅰ91、壓縮腔Ⅱ92的橫截面改成大小一致,當(dāng)然,壓縮腔Ⅰ91的高度仍然大于壓縮腔Ⅱ92,即,壓縮腔Ⅰ91的容積仍然大于壓縮腔Ⅱ92的容積。其余等同于實(shí)施例1。

使用該裝置進(jìn)行胚胎玻璃化冷凍實(shí)驗(yàn)時(shí),會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)吸放含胚胎的培養(yǎng)液時(shí)敏感度下降,將胚胎置于載桿的胚胎載片上時(shí)會(huì)出現(xiàn)液滴的大小難以掌握的不利情況;因此,使用該裝置最終的胚胎存活率僅為76%。

對(duì)比例5、將實(shí)施例1中的“冷凍液吸管14連通廢液腔93的頂部”改成“冷凍液吸管14連通廢液腔93的中間部位”;其余等同于實(shí)施例1。

使用該裝置進(jìn)行胚胎玻璃化冷凍實(shí)驗(yàn)時(shí),會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)當(dāng)廢液的液面超過(guò)冷凍液吸管14連通廢液腔93的位置時(shí),廢液會(huì)稀釋冷凍液吸管14中甚至冷凍腔15的冷凍液的不利情況;因此,使用該裝置最終的胚胎存活率僅為82%。

對(duì)比例6、僅僅取消實(shí)施例1中與冷凍液吸管14連接的冷凍腔15,其余等同于實(shí)施例1。

使用該裝置進(jìn)行胚胎玻璃化冷凍實(shí)驗(yàn)時(shí),會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)低溫保護(hù)劑不能很好的置換胚胎中的水分,后續(xù)放入液氮中細(xì)胞內(nèi)會(huì)形成冰晶,從而造成細(xì)胞損傷的不利情況;因此,使用該裝置最終的胚胎存活率僅為66%。

最后應(yīng)說(shuō)明的是:以上各實(shí)施例僅用于說(shuō)明本實(shí)用新型的技術(shù)方案,而非對(duì)其限制;盡管參照簽署各實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解:其依然可以對(duì)前處各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改,或者對(duì)其中部分或者全部技術(shù)特征進(jìn)行等同替換;而這些修改或者替換,并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離實(shí)用新型各實(shí)施例方案的范圍。

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