本實用新型屬于新型醫(yī)療器械領域，確切地說是一種符合無菌操作要求的新型細胞凍存袋，即一種醫(yī)用生物樣品深低溫凍存保護袋（簡稱凍存袋）。

背景技術：

干細胞，是一類具有自我更新和分化潛能的細胞，具有再生各種組織器官和人體的潛在功能。臍帶血造血干細胞來源于胎兒娩出后殘留在胎盤和臍帶中的血液，臨床上可用于重建人體造血和免疫系統(tǒng)，治療多種疾病。截至目前，衛(wèi)生部批準設置北京、天津、上海、廣東、四川、山東、浙江七家臍帶血庫，存儲臍帶血已逾80萬份。為了進一步提高臍帶血造血干細胞保存的質量，與國際臍帶血庫管理規(guī)范接軌，國內多家臍血庫已開始申請美國血庫協(xié)會AABB等國際干細胞庫管理資質認證。這標志著國內臍帶血庫的管理已十分重視與國際接軌，但在接受國際標準審查時，發(fā)現(xiàn)國內臍帶血庫在制備和凍存中存在者若干質量隱患，包括干細胞灌裝和抗凝劑加注中的開放操作等問題，亟待得到解決。

一般臍帶血造血干細胞庫采用-196℃液氮容器長期儲存臨床可用的造血干細胞，因此高質量地制備和深低溫保存干細胞成了臍帶血造血干細胞的儲存和應用的重要前提。臍帶血干細胞制備完成后，需從制備袋轉移至深低溫專用的凍存袋中，此期間的操作存在開放操作，是造成臍帶血干細胞污染病原微生物的重要環(huán)節(jié)。而且，隨著臍帶血干細胞儲存的廣泛普及以及采集制備水平的提高，大體積的臍帶血干細胞也越來越多。對于大體積臍帶血樣本，只能進行多袋保存，目前干細胞保存普遍使用的單聯(lián)凍存袋已逐漸不能滿足實際需要。因此，如何實用新型一種新型符合無菌操作要求細胞凍存袋成了亟待解決的問題。

常規(guī)使用的凍存袋存在問題如下；

（1）臍帶血干細胞制備后，需轉移至凍存袋冰凍保存。目前這一過程一般先采用醫(yī)用無菌注射器抽取干細胞，再注入到單獨的凍存袋中。該操作環(huán)節(jié)較多，且存在明顯的開放性操作增加了污染的風險。

（2）臍帶血造血干細胞長期凍存必須要添加凍存保護劑保護細胞。目前加入保護劑的常用方法為：先用注射器抽取適量的凍存保護劑，再通過凍存袋支管將保護劑注入到細胞中。該過程也存在開放操作，而且未對加入的凍存保護劑做無菌控制，使通過凍存保護劑引入污染源的風險增大。

（3）目前使用較為普遍的進口凍存袋一般附帶“資料袋”、多個并列支管等實際操作中不采用的部件，而且需要經過裁剪、熱合等多余操作，不利于提高工作效率，甚至會帶來裁剪時損壞凍存袋的隱患。

（4）目前使用較為普遍的凍存袋的連接管用于保存檢測樣本的長度不夠，凍存袋到連接導管分支處的長度太短，在實際操作中不能滿足用于熱合密封留存足量的檢測樣本的要求。

技術實現(xiàn)要素：

本實用新型要解決的技術問題是：（1）臍帶血干細胞制備后，需轉移至凍存袋冰凍保存。目前這一過程一般先采用醫(yī)用無菌注射器抽取干細胞，再注入到單獨的凍存袋中。該操作環(huán)節(jié)較多，且存在明顯的開放性操作增加了污染的風險。（2）臍帶血造血干細胞長期凍存必須要添加凍存保護劑保護細胞。目前加入保護劑的常用方法為：先用注射器抽取適量的凍存保護劑，再通過凍存袋支管將保護劑注入到細胞中。該過程也存在開放操作，而且未對加入的凍存保護劑做無菌控制，使通過凍存保護劑引入污染源的風險增大。（3）目前使用較為普遍的進口凍存袋一般附帶“資料袋”、多個并列支管等實際操作中不采用的部件，而且需要經過裁剪、熱合等多余操作，不利于提高工作效率，甚至會帶來裁剪時損壞凍存袋的隱患。（4）目前使用較為普遍的凍存袋的連接管用于保存檢測樣本的長度不夠，凍存袋到連接導管分支處的長度太短，在實際操作中不能滿足用于熱合密封留存足量的檢測樣本的要求。

為解決上述技術問題，本實用新型采用如下技術手段：

一種符合無菌操作要求的新型細胞凍存袋，包括凍存袋、進樣管，所述的進樣管一端連接凍存袋，進樣管的另一端設有支管，支管設有進樣管管口；所述的進樣管管口包括第一進樣管管口和第二進樣管管口，第一進樣管管口為凍存保護劑加注口，第二進樣管管口為雙頭，其中一頭為穿刺針，另一頭為取樣管管口，進樣管管口設有密封結構，進樣管設有濾菌防污結構。

作為優(yōu)選，本實用新型更進一步的技術方案是：

所述的凍存袋包括獨立的單聯(lián)袋，凍存袋上方設有穿刺口，單聯(lián)袋液體容量在30-50mL。

所述的凍存袋包括大凍存袋和小凍存袋，大凍存袋和小凍存袋上方均設有穿刺口。

所述的凍存袋中大凍存袋液體容量在30-50mL，小凍存袋液體容量在10-25mL，小凍存袋通過導管與大凍存袋連通，大凍存袋和小凍存袋之間導管長5-10cm。

所述的密封結構包括螺絲、螺栓和螺絲帽，螺絲固定于螺栓上，外側設有螺絲帽密封，凍存保護劑加注口處設有凍存保護劑加注口螺絲、凍存保護劑加注口螺栓和凍存保護劑加注口螺絲帽，取樣管管口處設有取樣管管口螺絲、取樣管管口螺栓和取樣管管口螺絲帽，穿刺針設有螺絲、卡扣密封連接針帽。

所述的濾菌防污結構為第一進樣管管口設有過濾器，所述的過濾器可分為兩種，一種為設在第一進樣管管口內的內置過濾器，另一種為設置在第一進樣管管口外的外接過濾器。

所述的濾菌防污結構中的內置過濾器為0.22μm針頭式過濾器，0.22μm針頭式過濾器設置在凍存保護劑加注口處，0.22μm針頭式過濾器一端無縫連接于支管，另一端設有外螺紋，外螺紋可配合設有內螺紋的螺絲帽形成密封腔體，進樣管設有導管卡夾，所述的導管卡夾為兩個，分別設置在兩個支管的上端。

所述的進樣管設有三通，三通分別設置在支管和進樣管連接處、凍存袋和進樣管連接處。

所述的進樣管管口與凍存袋連接處導管長度為18-25厘米，從0.22μm針頭式過濾器連接三通處到凍存袋連接處的導管長度不少于18厘米，所述的進樣管管口內徑稍大于注射器乳頭外徑。

本實用新型的有益效果是：（1）三頭的連接導管包含三種連接口，分別對應不同的需求，既能夠減少冗余部分以減少工作量，還有利于進行有針對性的操作。

（2）連接導管中的含過濾器的連接口，能對加入袋中的細胞保護劑進行細菌過濾，避免注入凍存保護劑所帶來的污染風險，更加符合無菌操作和質量管理的要求。

（3）連接導管中的含穿刺針頭的連接口，可直接與裝有臍帶血干細胞制備袋穿刺連接，進行取樣，避免了開放性操作，能夠降低因開放性操作所帶來的污染風險。

（4）從連接導管中近過濾器連接頭的三通連接處到凍存袋連接處的導管長度不少于18厘米，方便熱合導管時密封留取足量的復核細胞樣本。

（5）本實用新型還包括一個包含一大一小的組合凍存袋,期中大凍存袋與小凍存袋之間采用同樣口徑的導管連接，可避免市場已有的分體凍存袋(如圖)，冰凍后需取用其中一袋時，可防止因兩袋分離易造成樣本泄露的問題，減少了細胞凍存中污染的風向。樣本分袋保存，兩袋之間以導管連接減少分別灌裝帶來的污染風險；同時，分袋保存的細胞可先后多次出庫使用，使一次凍存的細胞根據需要可用于體外干細胞擴增和細胞功能檢測等用途成為可能。

附圖說明

圖1為本實用新型的一種具體實施方式的結構示意圖。

圖2為本實用新型的另一種具體實施方式的結構示意圖。

圖3為本實用新型的凍存袋穿刺針與臍帶血干細胞制備袋連接示意圖。

附圖標記說明：1－取樣管管口螺絲帽；2－取樣管管口螺栓；3－取樣管管口；4－針帽；5－穿刺針；6－凍存袋；7－三通；8－凍存保護劑加注口；9－0.22μm針頭式過濾器；10－凍存保護劑加注口螺絲帽；11－凍存保護劑加注口螺栓；12－導管；13－導管卡夾；14－穿刺口；15－大凍存袋；16－小凍存袋。

具體實施方式

下面結合實施例，進一步說明本實用新型。

具體實施例1：

參見圖1、圖2、圖3可知，本實用新型一種符合無菌操作要求的新型細胞凍存袋6及使用方法，由凍存袋6、進樣管組成，進樣管一端連接凍存袋6，進樣管的另一端設有支管，支管設有進樣管管口；進樣管管口包括第一進樣管管口和第二進樣管管口，第一進樣管管口為凍存保護劑加注口8，第二進樣管管口為雙頭，其中一頭為穿刺針5，另一頭為取樣管管口3，進樣管管口設有密封結構，進樣管設有濾菌防污結構，凍存袋6包括大凍存袋15和小凍存袋16，凍存袋6上方設有穿刺口14，凍存袋6中大凍存袋15液體容量在30-50mL，小凍存袋16液體容量在10-25mL，小凍存袋16通過導管12與大凍存袋15連通，大凍存袋15和小凍存袋16之間導管12長5-10cm，密封結構包括螺絲、螺栓和螺絲帽，螺絲固定于螺栓上，外側設有螺絲帽密封，凍存保護劑加注口8處設有凍存保護劑加注口螺絲、凍存保護劑加注口螺栓11和凍存保護劑加注口螺絲帽10，取樣管管口3處設有取樣管管口螺絲、取樣管管口螺栓2和取樣管管口螺絲帽1，穿刺針5設有螺絲、卡扣密封連接針帽4，濾菌防污結構為第一進樣管管口設有過濾器，所述的過濾器可分為兩種，一種為設在第一進樣管管口內的內置過濾器，另一種為設置在第一進樣管管口外的外接過濾器，濾菌防污結構為0.22μm針頭式過濾器9，0.22μm針頭式過濾器9設置在凍存保護劑加注口8處，0.22μm針頭式過濾器9一端無縫連接于支管，另一端設有外螺紋，外螺紋可配合設有內螺紋的螺絲帽形成密封腔體，進樣管設有導管卡夾13，所述的導管卡夾13為兩個，分別設置在兩個支管的上端，進樣管設有三通7，三通7分別設置在支管和進樣管連接處、凍存袋6和進樣管連接處，進樣管管口與凍存袋6連接處導管12長度為18-25厘米，從0.22μm針頭式過濾器9連接三通7處到凍存袋6連接處的導管12長度不少于18厘米，進樣管管口內徑稍大于注射器乳頭外徑。

具體實施例2：

參見圖1、圖2和團3可知，樣品進樣管管口，采用螺絲結構，螺絲固定于螺栓上，外加螺絲帽密封。導管卡夾13可防止凍存袋6內外連通造成污染，取樣管口和凍存保護劑加注口螺栓11的接口內徑應適合于注射器去針頭后連接，一般為3.8-4.0mm；過濾器可以根據實際需要配備，過濾器為0.22μm針頭式過濾器9，應的接口內徑應適合連接過濾器細口端，一般要求接口內徑或過濾器粗口徑端內徑為3.8-4.0mm。凍存保護劑進樣管的0.22μm針頭式過濾器9，用于加注凍存保護劑時對凍存保護劑進行細菌過濾，滿足細胞凍存的無菌操作要求。穿刺針5和針帽4，針帽4與穿刺針螺絲或卡扣密封連接，類似于市場已有的采血針設計，用于臍帶血干細胞制備袋和凍存袋6之間進行連接。凍存袋6以及三通7連接導管12的長度不少于18cm，便于熱合時密封留存細胞樣品。大凍存袋15和小凍存袋16之間導管12長5-10cm，大凍存袋15，建議液體容量在30-40ml，最大不超過50mL，小凍存袋16，液體容量在10-20mL，最大不超過25mL，小凍存袋16經導管12與大凍存袋15連通，以避免兩袋分別加入細胞時多次操作可能對細胞造成的污染。

凍存袋6使用時的工作流程：取下針帽4，將穿刺針5插入臍帶血干細胞制備袋取樣管口中，打開導管卡夾13，將樣本緩慢轉移至凍存袋6中。使用一次性使用無菌注射器吸取適量的凍存保護劑，并固定于進樣管管口；若采用外置細菌濾器，則在一次性使用無菌注射器吸取凍存保護劑后，將0.22μm細菌濾器連接在一次性使用無菌注射器上，并固定于進樣管管口，將凍存袋6置于低溫操作臺上，并將注射器固定于注射泵上緩慢添加凍存保護劑。凍存保護劑注入完成后，使用熱合儀進行熱合一小段進行留樣，并將多余導管12熱合棄掉。做好條形碼標記后進行深低溫儲存。

由于以上所述僅為本實用新型的具體實施方式，但本實用新型的保護不限于此，任何本技術領域的技術人員所能想到本技術方案技術特征的等同的變化或替代，都涵蓋在本實用新型的保護范圍之內。