人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體及低溫保存方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，且特別設(shè)及一種人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體 及低溫保存方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，如何構(gòu)建理想的人類(lèi)分裂期胚胎和囊胚冷凍保存體系，提高凍融分裂期胚 胎和囊胚成功率是輔助生殖技術(shù)中提高活產(chǎn)率的重要課題之一。
[0003] 玻璃化冷凍是指使細(xì)胞及其保護(hù)劑溶液W足夠快的降溫速度，形成一種高黏度的 介于液態(tài)和固態(tài)之間、非晶體的、透明的玻璃化狀態(tài)。玻璃化冷凍技術(shù)同慢速冷凍法相比， 需要更快的冷凍降溫速度，因此，對(duì)玻璃化冷凍載體提出很高的要求。
[0004] 目前通用的玻璃化冷凍方法是采用開(kāi)放式載體或封閉式載體進(jìn)行，使用開(kāi)放式載 體可W使分裂期胚胎和囊胚直接與液氮接觸，從而能夠很好地實(shí)現(xiàn)冷凍和復(fù)蘇過(guò)程中的迅 速降溫和復(fù)溫的目的。但開(kāi)放式載體使分裂期胚胎和囊胚直接與液氮接觸，因而液氮中的 病毒(包括乙肝病毒，丙肝病毒、航病毒或人免疫缺陷病毒等)及其他病原微生物可能會(huì)感 染分裂期胚胎和囊胚，對(duì)后代安全性帶來(lái)巨大隱患。而封閉式玻璃化冷凍方法由于液氮和 分裂期胚胎(囊胚)間有冷凍管壁相隔，阻礙了溫度傳遞，其結(jié)果降低了冷凍速率，影響玻璃 化冷凍效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體，該冷凍載體既 能實(shí)現(xiàn)人分裂期胚胎及囊胚的快速凍融，同時(shí)也能分隔人分裂期胚胎及囊胚與液氮，防止 液氮中病原微生物污染人分裂期胚胎及囊胚。
[0006] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種人分裂期胚胎及囊胚深低溫保存的方法，W提高 人分裂期胚胎及囊胚的凍融成功率。
[0007] 本發(fā)明是采用W下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[000引一種人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體，包括管體，所述管體包括依次連接的 第一管體、第二管體和第=管體，所述第一管體遠(yuǎn)離第二管體的一端設(shè)置第一開(kāi)口，所述第 =管體遠(yuǎn)離第二管體的一端設(shè)置第二開(kāi)口，所述第一開(kāi)口設(shè)置有用于封堵所述第一開(kāi)口的 第一封堵裝置，所述第二開(kāi)口設(shè)置有用于封堵所述第二開(kāi)口的第二封堵裝置，所述第二管 體由金屬制成。
[0009] 在本發(fā)明較佳實(shí)施例中，上述管體由=段不同的管體構(gòu)成，在使用時(shí)，人分裂期胚 胎及囊胚是保存于第二管體中，由于第二管體采用金屬材料制成，其溫度傳導(dǎo)速率快，相較 于使用普通的塑料制冷凍管，溫度傳導(dǎo)速率高出數(shù)倍。
[0010] 第一管體和第=管體分別位于第二管體的兩端，在將整個(gè)管體放入液氮環(huán)境中 時(shí)，通過(guò)第一封堵裝置和第二封堵裝置將液氮與人分裂期胚胎及囊胚分隔，運(yùn)樣液氮不會(huì) 與人分裂期胚胎及囊胚進(jìn)行直接接觸，也就杜絕了液氮中的病原微生物對(duì)人分裂期胚胎及 囊胚的污染問(wèn)題，防止對(duì)后代安全性帶來(lái)隱患。
[0011] 為了提高冷凍速率，第二管體優(yōu)選采用熱傳導(dǎo)效率更高的金屬制成。
[0012] 進(jìn)一步地，所述第一封堵裝置包括封口棉塞，所述封口棉塞卡設(shè)于所述第一管體 的內(nèi)壁，所述封口棉塞位于所述第一管體的中部。
[0013] 封口棉塞在與液態(tài)的液氮接觸后，會(huì)發(fā)生膨脹并將第一管體封閉。
[0014] 使用上述的冷凍載體，本發(fā)明同時(shí)提出一種人分裂期胚胎及囊胚低溫保存的方 法，其包括W下步驟:將所述分裂期胚胎及囊胚置于上述的人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷 凍載體的所述第二管體中，分別利用所述第一封堵裝置封堵所述第一管體的所述第一開(kāi)口 和利用所述第二封堵裝置封堵所述第=管體的所述第二開(kāi)口，將所述人分裂期胚胎及囊胚 封閉式冷凍載體置于液氮環(huán)境中。
[0015] 將人分裂期胚胎及囊胚放入第二管體中后，通過(guò)第一封堵裝置和第二封堵裝置封 閉第一開(kāi)口和第二開(kāi)口，實(shí)現(xiàn)整個(gè)冷凍載體與外界的隔絕，利用金屬材質(zhì)的第二管體進(jìn)行 熱傳導(dǎo)，使人分裂期胚胎及囊胚能被迅速冷凍，同時(shí)又不會(huì)與液氮接觸，防止人分裂期胚胎 及囊胚被污染。
[0016] 本發(fā)明的有益效果是：（1)通過(guò)將冷凍管設(shè)置成分段式的結(jié)構(gòu)，將人分裂期胚胎及 囊胚置于中間的第二管體中進(jìn)行保存，利用金屬介質(zhì)良好的熱傳導(dǎo)效果，實(shí)現(xiàn)人分裂期胚 胎及囊胚的快速冷凍，避免人分裂期胚胎及囊胚上出現(xiàn)冰晶，造成不可逆損傷。
[0017] (2)通過(guò)第一管體和第=管體上的第一封堵裝置和第二封堵裝置將整個(gè)管體封 閉，隔絕外界液氮，有效的防止了液氮中的病原微生物對(duì)人分裂期胚胎及囊胚進(jìn)行污染，為 后代帶來(lái)安全隱患。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例中所需要使用的附 圖作簡(jiǎn)單地介紹，應(yīng)當(dāng)理解，W下附圖僅示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例，因此不應(yīng)被看作是對(duì) 范圍的限定，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可W根據(jù)運(yùn) 些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。
[0019] 圖1是本發(fā)明實(shí)施例提供的人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0020] 圖2是本發(fā)明實(shí)施例提供的人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體中第一管體的結(jié) 構(gòu)示意圖；
[0021] 圖3是本發(fā)明實(shí)施例提供的人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體中第=管體的結(jié) 構(gòu)示意圖。
[00。]圖中標(biāo)記分別為：
[0023] 冷凍載體100;管體101;第一管體110;第一開(kāi)口 111;第一封堵裝置112;第二管體 120;第S管體130;第二開(kāi)口 131;第二封堵裝置132。
【具體實(shí)施方式】
[0024] 為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例 中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例是 本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。因此，W下對(duì)在附圖中提供的本發(fā)明的實(shí)施例 的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本發(fā)明的范圍，而是僅僅表示本發(fā)明的選定實(shí)施例。 基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有 其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0025] W下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
[0026] 本實(shí)施例提供一種人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體100,圖1是本實(shí)施例提供 的人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體的結(jié)構(gòu)示意圖，冷凍載體100包括管體101，管體101 包括依次連接的第一管體110、第二管體120和第=管體130,第一管體110、第二管體120和 第=管體130是相互連通的。
[0027] 第一管體110和第=管體130均使用麥管，麥管是通常用于封閉式冷凍法的冷凍用 載體，其由聚對(duì)苯二甲酸乙二醇醋-1,4-環(huán)己燒二甲醇醋（cylclohexyIenedimethyIene， PETG)制成。陽(yáng)TG塑料制品高度透明，抗沖擊性能優(yōu)異，較適宜成型厚壁透明制品。
[0028] 圖2是本實(shí)施例提供的人分裂期胚胎及囊胚封閉式冷凍載體中第一管體的結(jié)構(gòu)示 意圖，第一管體110遠(yuǎn)離第二管體120的一端設(shè)置第一開(kāi)口 111，第一開(kāi)口 111設(shè)置有用于封 堵第一開(kāi)口 111的第一封堵裝置112，第一封堵裝置112采用封口棉塞，封口棉塞在遇有液體 時(shí)，會(huì)發(fā)生膨脹并將第一管體110的管壁完全密封，密封性能好，可W在液氮環(huán)境下有效的 隔絕液氮，防止液氮與人分裂期胚胎及囊胚接觸造成污染。使用時(shí)，封口棉塞卡設(shè)于第一管 體110的內(nèi)壁，并且封口棉塞位于第一管體110的中部。第一管體110長(zhǎng)為30mm，管壁厚為 0.14mm。
[0029] 第二管體120位于第一管體110和第=管體