本發(fā)明涉及蔬菜雜交育種技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種秋葵組合雜交方法。
背景技術(shù)：
秋葵屬異花授粉作物，具有明顯的雜種優(yōu)勢。常規(guī)雜交育種，也稱組合育種。通過人工雜交，把分散于不同親本上的優(yōu)良性狀組合到雜種中，對其后代進(jìn)行多代培育選擇，獲得基因型純合或接近純合的新品種。但我國的秋葵雜交育種技術(shù)不規(guī)范，存在若干不足之處：1)種質(zhì)資源匱乏，遺傳基礎(chǔ)狹窄，真正適合華南氣候和土質(zhì)的優(yōu)質(zhì)品種較少；2)秋葵雜交方法還不完善，雜交操作存在缺點(diǎn)例如去除雄蕊時(shí)候由于選用工具不當(dāng)或操作不規(guī)范傷及柱頭，致使去雄失敗降低了工作效率；3)去雄后沒有對母本花朵與外界之間進(jìn)行很好的隔離，導(dǎo)致外界因素對花柱造成傷害或者提前被其它花粉污染，導(dǎo)致雜種純度和雜交成莢率降低。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是：提供一種秋葵組合雜交方法，保持雜交種的純度和優(yōu)良種性，為秋葵雜交種業(yè)的產(chǎn)業(yè)化提供技術(shù)支撐。
一種秋葵組合雜交方法，包括以下步驟：
(1)育種基地選擇：選擇東、西、南三面無遮蔽物，地基堅(jiān)實(shí)、平坦，避風(fēng)向陽，土壤疏松肥沃、無鹽和其他污染，水質(zhì)干凈之地；
(2)浸種：用40～55℃的溫水浸種讓水溫在空氣自然下降，催芽溫度25～28℃，露白節(jié)氣后播種；
(3)土壤準(zhǔn)備：對土壤進(jìn)行深耕30～40cm，同時(shí)施入有機(jī)肥，清除硬物；
(4)播種：父本、母本分別選用紅秋葵與黃秋葵組合進(jìn)行栽培，苗具有2葉一心移植，行距50～80cm，株距80～100cm；
(5)父、母本田間配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本種在兩行母本之間；
(6)去雜去劣：在苗期和開始雜交前，根據(jù)父、母本的典型性，嚴(yán)格拔除制種田內(nèi)的雜株、劣株、變異株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔離：在去雄前一天，將母本植物上所有已經(jīng)開放的花和已經(jīng)結(jié)的果摘除，同時(shí)對未開放及將要開放的父、母本進(jìn)行套袋，并在去雄的當(dāng)天上午摘除當(dāng)天母本所有新開放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼飽滿，微露出黃色花冠或紅色花冠的花苞為去雄對象，在天氣晴朗的下午兩點(diǎn)后進(jìn)行去雄工作，用75％的酒精對雙手和去雄工具鑷子進(jìn)行消毒，然后用手把花萼花瓣掰開并用尖頭15cm或彎頭15cm的鑷子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸紙進(jìn)行套袋；去雄要徹底，花柱上不殘留農(nóng)藥，不得損傷子房和花柱，保持子房外白膜與苞葉的完整；
(9)授粉：在去雄步驟后的第二天上午8:30～9:30進(jìn)行授粉，用毛刷輕輕沾同一品種的多朵花粉收集于硫酸紙袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱頭上使其均勻分布在花柱上，授粉量充足均勻，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸紙袋，標(biāo)記掛牌；
(10)去除無效花莢：授粉結(jié)束后，徹底去除母本株上的所有無效花莢，并在此后12天內(nèi)每隔3天檢查一次，嚴(yán)格去除新出的花莢；
(11)采摘：當(dāng)秋葵莢全部變褐開裂，種子顏色較深時(shí)，進(jìn)行采摘，采摘圓溜飽滿果實(shí)，將采收的果實(shí)放在太陽下曝曬致果實(shí)自然開裂，用機(jī)械進(jìn)行渣、種分離，把收集的秋葵種子份若干次在早上8～11點(diǎn)進(jìn)行曬干至適合貯存含水率條件，之后進(jìn)行密閉干燥后置于0℃冷藏。
為提高秋葵的產(chǎn)量、抗性等指標(biāo)，使其含有較高的vc、多糖、蛋白質(zhì)及花青素，可通過紅秋葵與黃秋葵進(jìn)行雜交，具體為：所述母本為紅星紅秋葵，父本為陽春黃秋葵或綠星黃秋葵；或者所述母本為綠星黃秋葵，父本為華寶紅秋葵或紅星紅秋葵。
其中，步驟(9)授粉前進(jìn)行花粉活力測定。
步驟(11)采摘前，對母本田逐棵逐莢進(jìn)行拉網(wǎng)式檢查，嚴(yán)格去除自交莢。
本發(fā)明所述的育種基地田間早、晚各澆一次水，半個(gè)月施一次肥。
本發(fā)明具有如下有益效果：
1)用合適長度的鑷子去除雄蕊，不會(huì)傷及柱頭，避免花蕾的粘液扯斷細(xì)弱的花柱，提高去雄成功率和工作效率；
2)去雄前后對父、母本套上透光率好的硫酸紙袋進(jìn)行父、母本隔離，可有效阻止非父本花粉落于母本柱頭上，減少外界對花柱的傷害，提高雜種純度和雜交成莢率，最大程度上保證花粉的活力，使受精充分，種子飽滿度提高，提高了芽率；
3)采用混合花粉進(jìn)行授粉提高了授粉效率，收集花粉時(shí)保留父本花朵，父本植株可收獲嫩莢，增加經(jīng)濟(jì)效益；
4)種子含油量高，可以用于榨油，打造成一個(gè)新的營養(yǎng)健康的黃秋葵植物油，創(chuàng)造經(jīng)濟(jì)價(jià)值；
5)為雜交育種栽培和父、母本組合配對提供了一套包括母本植株的整理、母本去雄、人工授粉、果實(shí)管理和種子采收的雜交育種方法。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件(例如參考j.薩姆布魯克等著，黃培堂等譯的《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》，第三版，科學(xué)出版社)或者按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
實(shí)施例1
一種秋葵組合雜交方法，包括以下步驟：
(1)育種基地選擇：選擇東、西、南三面無遮蔽物，地基堅(jiān)實(shí)、平坦，避風(fēng)向陽，土壤疏松肥沃、無鹽和其他污染，水質(zhì)干凈之地；
(2)浸種：用40～55℃的溫水浸種讓水溫在空氣自然下降，催芽溫度25～28℃，露白節(jié)氣后播種；
(3)土壤準(zhǔn)備：對土壤進(jìn)行深耕30～40cm，同時(shí)施入有機(jī)肥，清除硬物；
(4)播種：父本選用陽春黃秋葵，母本選用紅星紅秋葵組合進(jìn)行栽培，苗具有2葉一心移植，行距50cm，株距80cm；
(5)父、母本田間配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本種在兩行母本之間；
(6)去雜去劣：在苗期和開始雜交前，根據(jù)父、母本的典型性，嚴(yán)格拔除制種田內(nèi)的雜株、劣株、變異株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔離：在去雄前一天，將母本植物上所有已經(jīng)開放的花和已經(jīng)結(jié)的果摘除，同時(shí)對未開放及將要開放的父、母本進(jìn)行套袋，并在去雄的當(dāng)天上午摘除當(dāng)天母本所有新開放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼飽滿，微露出黃色花冠或紅色花冠的花苞為去雄對象，在天氣晴朗的下午兩點(diǎn)后進(jìn)行去雄工作，用75％的酒精對雙手和去雄工具鑷子進(jìn)行消毒，然后用手把花萼花瓣掰開并用尖頭15cm或彎頭15cm的鑷子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸紙進(jìn)行套袋；去雄要徹底，花柱上不殘留農(nóng)藥，不得損傷子房和花柱，保持子房外白膜與苞葉的完整；
(9)授粉：在去雄步驟后的第二天上午8:30～9:30進(jìn)行授粉，先進(jìn)行花粉活力測定，測定及格后，用毛刷輕輕沾同一品種的多朵花粉收集于硫酸紙袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱頭上使其均勻分布在花柱上，授粉量充足均勻，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸紙袋，標(biāo)記掛牌；
(10)去除無效花莢：授粉結(jié)束后，徹底去除母本株上的所有無效花莢，并在此后12天內(nèi)每隔3天檢查一次，嚴(yán)格去除新出的花莢；
(11)采摘：當(dāng)秋葵莢全部變褐開裂，種子顏色較深時(shí)，進(jìn)行采摘，采摘前對母本田逐棵逐莢進(jìn)行拉網(wǎng)式檢查，嚴(yán)格去除自交莢，采摘圓溜飽滿果實(shí)，將采收的果實(shí)放在太陽下曝曬致果實(shí)自然開裂，用機(jī)械進(jìn)行渣、種分離，把收集的秋葵種子份若干次在早上8～11點(diǎn)進(jìn)行曬干至適合貯存含水率條件，之后進(jìn)行密閉干燥后置于0℃冷藏。
育種基地田間早、晚各澆一次水，半個(gè)月施一次肥。
實(shí)施例2
一種秋葵組合雜交方法，包括以下步驟：
(1)育種基地選擇：選擇東、西、南三面無遮蔽物，地基堅(jiān)實(shí)、平坦，避風(fēng)向陽，土壤疏松肥沃、無鹽和其他污染，水質(zhì)干凈之地；
(2)浸種：用40～55℃的溫水浸種讓水溫在空氣自然下降，催芽溫度25～28℃，露白節(jié)氣后播種；
(3)土壤準(zhǔn)備：對土壤進(jìn)行深耕30～40cm，同時(shí)施入有機(jī)肥，清除硬物；
(4)播種：父本選用綠星黃秋葵，母本選用紅星紅秋葵組合進(jìn)行栽培，苗具有2葉一心移植，行距55cm，株距80cm；
(5)父、母本田間配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本種在兩行母本之間；
(6)去雜去劣：在苗期和開始雜交前，根據(jù)父、母本的典型性，嚴(yán)格拔除制種田內(nèi)的雜株、劣株、變異株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔離：在去雄前一天，將母本植物上所有已經(jīng)開放的花和已經(jīng)結(jié)的果摘除，同時(shí)對未開放及將要開放的父、母本進(jìn)行套袋，并在去雄的當(dāng)天上午摘除當(dāng)天母本所有新開放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼飽滿，微露出黃色花冠或紅色花冠的花苞為去雄對象，在天氣晴朗的下午兩點(diǎn)后進(jìn)行去雄工作，用75％的酒精對雙手和去雄工具鑷子進(jìn)行消毒，然后用手把花萼花瓣掰開并用尖頭15cm或彎頭15cm的鑷子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸紙進(jìn)行套袋；去雄要徹底，花柱上不殘留農(nóng)藥，不得損傷子房和花柱，保持子房外白膜與苞葉的完整；
(9)授粉：在去雄步驟后的第二天上午8:30～9:30進(jìn)行授粉，先進(jìn)行花粉活力測定，測定及格后，用毛刷輕輕沾同一品種的多朵花粉收集于硫酸紙袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱頭上使其均勻分布在花柱上，授粉量充足均勻，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸紙袋，標(biāo)記掛牌；
(10)去除無效花莢：授粉結(jié)束后，徹底去除母本株上的所有無效花莢，并在此后12天內(nèi)每隔3天檢查一次，嚴(yán)格去除新出的花莢；
(11)采摘：當(dāng)秋葵莢全部變褐開裂，種子顏色較深時(shí)，進(jìn)行采摘，采摘前對母本田逐棵逐莢進(jìn)行拉網(wǎng)式檢查，嚴(yán)格去除自交莢，采摘圓溜飽滿果實(shí)，將采收的果實(shí)放在太陽下曝曬致果實(shí)自然開裂，用機(jī)械進(jìn)行渣、種分離，把收集的秋葵種子份若干次在早上8～11點(diǎn)進(jìn)行曬干至適合貯存含水率條件，之后進(jìn)行密閉干燥后置于0℃冷藏。
育種基地田間早、晚各澆一次水，半個(gè)月施一次肥。
實(shí)施例3
一種秋葵組合雜交方法，包括以下步驟：
(1)育種基地選擇：選擇東、西、南三面無遮蔽物，地基堅(jiān)實(shí)、平坦，避風(fēng)向陽，土壤疏松肥沃、無鹽和其他污染，水質(zhì)干凈之地；
(2)浸種：用40～55℃的溫水浸種讓水溫在空氣自然下降，催芽溫度25～28℃，露白節(jié)氣后播種；
(3)土壤準(zhǔn)備：對土壤進(jìn)行深耕30～40cm，同時(shí)施入有機(jī)肥，清除硬物；
(4)播種：父本選用華寶紅秋葵，母本選用綠星黃秋葵組合進(jìn)行栽培，苗具有2葉一心移植，行距60cm，株距90cm；
(5)父、母本田間配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本種在兩行母本之間；
(6)去雜去劣：在苗期和開始雜交前，根據(jù)父、母本的典型性，嚴(yán)格拔除制種田內(nèi)的雜株、劣株、變異株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔離：在去雄前一天，將母本植物上所有已經(jīng)開放的花和已經(jīng)結(jié)的果摘除，同時(shí)對未開放及將要開放的父、母本進(jìn)行套袋，并在去雄的當(dāng)天上午摘除當(dāng)天母本所有新開放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼飽滿，微露出黃色花冠或紅色花冠的花苞為去雄對象，在天氣晴朗的下午兩點(diǎn)后進(jìn)行去雄工作，用75％的酒精對雙手和去雄工具鑷子進(jìn)行消毒，然后用手把花萼花瓣掰開并用尖頭15cm或彎頭15cm的鑷子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸紙進(jìn)行套袋；去雄要徹底，花柱上不殘留農(nóng)藥，不得損傷子房和花柱，保持子房外白膜與苞葉的完整；
(9)授粉：在去雄步驟后的第二天上午8:30～9:30進(jìn)行授粉，先進(jìn)行花粉活力測定，測定及格后，用毛刷輕輕沾同一品種的多朵花粉收集于硫酸紙袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱頭上使其均勻分布在花柱上，授粉量充足均勻，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸紙袋，標(biāo)記掛牌；
(10)去除無效花莢：授粉結(jié)束后，徹底去除母本株上的所有無效花莢，并在此后12天內(nèi)每隔3天檢查一次，嚴(yán)格去除新出的花莢；
(11)采摘：當(dāng)秋葵莢全部變褐開裂，種子顏色較深時(shí)，進(jìn)行采摘，采摘前對母本田逐棵逐莢進(jìn)行拉網(wǎng)式檢查，嚴(yán)格去除自交莢，采摘圓溜飽滿果實(shí)，將采收的果實(shí)放在太陽下曝曬致果實(shí)自然開裂，用機(jī)械進(jìn)行渣、種分離，把收集的秋葵種子份若干次在早上8～11點(diǎn)進(jìn)行曬干至適合貯存含水率條件，之后進(jìn)行密閉干燥后置于0℃冷藏。
育種基地田間早、晚各澆一次水，半個(gè)月施一次肥。
實(shí)施例4
一種秋葵組合雜交方法，包括以下步驟：
(1)育種基地選擇：選擇東、西、南三面無遮蔽物，地基堅(jiān)實(shí)、平坦，避風(fēng)向陽，土壤疏松肥沃、無鹽和其他污染，水質(zhì)干凈之地；
(2)浸種：用40～55℃的溫水浸種讓水溫在空氣自然下降，催芽溫度25～28℃，露白節(jié)氣后播種；
(3)土壤準(zhǔn)備：對土壤進(jìn)行深耕30～40cm，同時(shí)施入有機(jī)肥，清除硬物；
(4)播種：父本選用紅星紅秋葵，母本選用綠星黃秋葵組合進(jìn)行栽培，苗具有2葉一心移植，行距70cm，株距100cm；
(5)父、母本田間配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本種在兩行母本之間；
(6)去雜去劣：在苗期和開始雜交前，根據(jù)父、母本的典型性，嚴(yán)格拔除制種田內(nèi)的雜株、劣株、變異株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔離：在去雄前一天，將母本植物上所有已經(jīng)開放的花和已經(jīng)結(jié)的果摘除，同時(shí)對未開放及將要開放的父、母本進(jìn)行套袋，并在去雄的當(dāng)天上午摘除當(dāng)天母本所有新開放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼飽滿，微露出黃色花冠或紅色花冠的花苞為去雄對象，在天氣晴朗的下午兩點(diǎn)后進(jìn)行去雄工作，用75％的酒精對雙手和去雄工具鑷子進(jìn)行消毒，然后用手把花萼花瓣掰開并用尖頭15cm或彎頭15cm的鑷子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸紙進(jìn)行套袋；去雄要徹底，花柱上不殘留農(nóng)藥，不得損傷子房和花柱，保持子房外白膜與苞葉的完整；
(9)授粉：在去雄步驟后的第二天上午8:30～9:30進(jìn)行授粉，先進(jìn)行花粉活力測定，測定及格后，用毛刷輕輕沾同一品種的多朵花粉收集于硫酸紙袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱頭上使其均勻分布在花柱上，授粉量充足均勻，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸紙袋，標(biāo)記掛牌；
(10)去除無效花莢：授粉結(jié)束后，徹底去除母本株上的所有無效花莢，并在此后12天內(nèi)每隔3天檢查一次，嚴(yán)格去除新出的花莢；
(11)采摘：當(dāng)秋葵莢全部變褐開裂，種子顏色較深時(shí)，進(jìn)行采摘，采摘前對母本田逐棵逐莢進(jìn)行拉網(wǎng)式檢查，嚴(yán)格去除自交莢，采摘圓溜飽滿果實(shí)，將采收的果實(shí)放在太陽下曝曬致果實(shí)自然開裂，用機(jī)械進(jìn)行渣、種分離，把收集的秋葵種子份若干次在早上8～11點(diǎn)進(jìn)行曬干至適合貯存含水率條件，之后進(jìn)行密閉干燥后置于0℃冷藏。
育種基地田間早、晚各澆一次水，半個(gè)月施一次肥。
以上對本發(fā)明的較佳實(shí)施方式進(jìn)行了具體說明，但本發(fā)明創(chuàng)造并不限于所述實(shí)施例，熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不違背本發(fā)明精神的前提下還可作出種種的等同變型或替換，這些等同的變型或替換均包含在本申請權(quán)利要求所限定的范圍內(nèi)。