本發(fā)明涉及一種基于真菌提取物的草莓表面殺菌劑。

背景技術(shù)：

真菌來源為植物射干，產(chǎn)地四川雅安某種植基地，二年生根莖中分離得到。經(jīng)鑒定真菌為細極鏈格孢(alternariatenuissima)。其保藏編號為cgmccno.4443。

而草莓是冬春間市場中上銷售最火爆的水果之一，其鮮美紅嫩，果肉多汁，此外還含有豐富的維生和人體必需的礦物質(zhì)和部分微量元素。草莓因其營養(yǎng)豐富且有特殊的濃郁水果芳香受到人們的喜愛。草莓的高營養(yǎng)、高含水量和含糖量加之質(zhì)地柔軟一方面為草莓提供食用基礎(chǔ)，另一方面也為微生物的繁殖生長提供了良好的條件，這為草莓的食用帶來了嚴重的安全隱患。

由于草莓極易受微生物感染存在食用安全的隱患，對其微生物的控制也有大量的研究，傳統(tǒng)方法為農(nóng)藥殺菌劑應(yīng)用于草莓生長階段，冷激、氯化鈣、植酸、過氧乙酸、低溫等用于草莓采摘后保鮮生物制劑在草莓保鮮上有所應(yīng)用，例如中藥提取劑，抗生素，防腐劑，精油熏蒸，膜技術(shù)等。現(xiàn)有中藥提取劑包括鹿蹄草、黃芩、黃柏、半邊蓮、北豆根、丁香對等中草藥的單一或組配制劑等，中藥提取物現(xiàn)有茶皂素、茶多酚等；精油有茶樹、黃花、小茴香、百里香、羅勒、迷迭香百里香精油等；主要的防腐劑為檸檬酸鈉、檸檬酸鈣和山梨酸鉀等。

除防腐劑外，現(xiàn)有的保鮮殺菌單劑或組方劑都真對的草莓致腐真菌青霉、灰霉菌等真菌進行控制，采用腐敗率、感官評價等指標判斷其殺菌保鮮能力，對其表面腸道致病菌的作用都沒有進行專門的研究。

現(xiàn)有的生物技術(shù)雖然能對草莓進行一定的保鮮作用，但中藥制劑和精油制劑成本較高，往往控制成本大于草莓本身的成本。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所解決的技術(shù)問題在于提供一種基于真菌提取物的草莓表面殺菌劑，以解決上述背景技術(shù)中的缺點。

本發(fā)明所解決的技術(shù)問題采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：一種基于真菌提取物的草莓表面殺菌劑，該提取物的提取步驟如下；

用直徑為4mm的無菌打孔器打取已活化的細極鏈格孢菌株的菌餅2個，接種于含50mlczapek培養(yǎng)基的150ml錐形瓶中，于28℃、120r·min^-1培養(yǎng)7d，無菌濾紙過濾，加入等體積的乙酸乙酯萃取上清液3次，合并乙酸乙酯相，于40℃、8×10³pa條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，蒸餾水定容至3mg·ml^-1，4℃；得到細極鏈格孢scsg15提取物的水溶液。

本發(fā)明中，進一步的，所述培養(yǎng)基為mgso4·7h2o0.5g，k2hpo41g，kcl0.5g，feso4·7h2o0.01g，蔗糖30g，nano33g，定容至1000ml，ph＝7.0。

本發(fā)明的有益效果：scsg15為中藥植物內(nèi)生真菌提取物，相較下生物安全性較高，scsg15為微生物發(fā)酵液提取物相對成本較低廉，易于推廣。

附圖說明

圖1為scsg15分子量圖譜；

圖2為采用scsg15對草莓抑菌實驗后實測細菌總數(shù)的散點圖；

圖3為采用scsg15對草莓抑菌實驗后大腸菌群對數(shù)值的散點圖；

圖4為scsg15its序列鑒定結(jié)果圖。

具體實施方式

為了使本發(fā)明實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體圖示，進一步闡述本發(fā)明。

一種基于真菌提取物的草莓表面殺菌劑，該提取物的提取步驟如下；用直徑為4mm的無菌打孔器打取已活化的細極鏈格孢菌株的菌餅2個，接種于含50mlczapek培養(yǎng)基的150ml錐形瓶中，于28℃、120r·min^-1培養(yǎng)7d，無菌濾紙過濾，加入等體積的乙酸乙酯萃取上清液3次，合并乙酸乙酯相，于40℃、8×10³pa條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，蒸餾水定容至3mg·ml^-1，4℃；得到細極鏈格孢scsg15提取物的水溶液，對scsg15its序列采用mega6.0進行系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建獲得真菌分子鑒定相關(guān)內(nèi)容，鑒定結(jié)果如圖4所示。所述培養(yǎng)基為mgso4·7h2o0.5g，k2hpo41g，kcl0.5g，feso4·7h2o0.01g，蔗糖30g，nano33g，定容至1000ml，ph＝7.0。

一、對scsg15提取物有效成分研究

對scsg15水溶液進行maldi-tof-ms質(zhì)譜法分析，分子量圖譜見圖1，其中分別在分子量190，212，228，379,418有物質(zhì)峰，可能為其有效物質(zhì)成分。

scsg15的抗氧化能力為低濃度存在就能有效抑制自由基的氧化反應(yīng)的物質(zhì)，其作用機理可以是直接作用在自由基，或是間接消耗掉容易生成自由基的物質(zhì)，防止發(fā)生進一步反應(yīng)。食品中的保鮮劑的保鮮的原理就是其具有抗氧化能力。就是對scsg15進行抗氧化能力測試，實驗結(jié)果見圖，可見其抗氧化能力較強，抗氧化能力與中藥射干根提取物的抗氧化能力相當。其抗氧化能力如表1：(表1中scsg莖1、scsg根1、scsg莖5、scsg根5、sg根30、sg根33為中藥射干鮮品均質(zhì)后乙酸乙酯萃取后，40℃、8×10³pa條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，甲醇定容至3mg·ml^-1后測定其抗氧化能力，采用二苯代苦味酰基自由基(dpph)法測定其自由基清除能力,四次平行試驗，

表1

二、scsg15對草莓品質(zhì)的影響

分別對噴施scsg15和未噴施草莓進行vc，總糖和可溶性固形物進行檢測，方法標準施用gb5009.86-2016，ny/t2742-2015，檢測樣品分別為草莓噴施scsg15當天，4℃保藏2d，5d，常溫保藏2d，5d數(shù)據(jù)如表2，試驗結(jié)果表明噴施scsg15對其品質(zhì)指標無影響，隨著保藏時間增加scsg15可以延緩其腐敗，保證其品質(zhì)。

表2

三、scsg15對草莓表面常見致病微生物的影響

對草莓進行連續(xù)3年的微生物收集和整理，獲得草莓表面微生物主體群落信息，包括常見致腐微生物：假單胞菌屬，沙雷菌屬，陰溝腸桿菌等；常見致病微生物：阪崎腸桿菌，沙門氏菌；細菌總數(shù)的數(shù)量級在10⁵-10⁸，大腸菌群計數(shù)的整體水平在10⁴-10⁶。施用scsg15對細菌總數(shù)和大腸生長有一定的抑制作用，表現(xiàn)如表3，紅色的為細菌總數(shù)和大腸菌群的常溫生長預(yù)測學(xué)模型，如圖2、圖3中的散點圖為實測細菌總數(shù)和大腸菌群的對數(shù)值，試驗結(jié)果表明scsg15不會清除草莓表面全部微生物，但可以使微生物數(shù)量以對數(shù)值減少，起到抑菌作用。此外對20份施用scsg15草莓樣品進行沙門氏菌添加試驗，僅有8份樣品檢出沙門氏菌，可見scsg15對草莓表面的致病微生物有一定的抑制作用，對沙雷菌屬和假擔(dān)保菌屬也有一定的抑菌作用。

表3

以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征及本發(fā)明的優(yōu)點，本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)，本發(fā)明要求保護范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。