本發(fā)明屬于香蕉組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種提高香蕉花藥萌發(fā)率的培養(yǎng)基。

背景技術(shù)：

香蕉（學(xué)名：musananalour.）芭蕉科芭蕉屬植物，又指其果實。熱帶地區(qū)廣泛栽培食用。香蕉味香、富含營養(yǎng)，終年可收獲，在溫帶地區(qū)也很受重視。植株為大型草本，從根狀莖發(fā)出，由葉鞘下部形成高3～6公尺(10～20尺)的假桿；葉長圓形至橢圓形，有的長達(dá)3～3.5公尺(10～11.5尺)，寬65公分(26寸)，10～20枚簇生莖頂。穗狀花序下垂^[1]，由假桿頂端抽出，花多數(shù)，淡黃色；果序彎垂，結(jié)果10～20串，約50～150個。植株結(jié)果后枯死，由根狀莖長出的吸根繼續(xù)繁殖，每一根株可活多年。原產(chǎn)亞洲東南部：臺灣、海南、廣東、廣西等地區(qū)均有栽培。目前香蕉是一種廣受歡迎的水果，也是部分地區(qū)的主要糧食，擁有極大市場需求量，對香蕉進(jìn)行快速繁殖的研究具有一定的必要性，不僅能解決龐大的市場需求量，也能在一定程度上保存優(yōu)良的香蕉品種，組織培養(yǎng)是香蕉快速繁殖的方法之一，然而現(xiàn)有的香蕉培養(yǎng)基中多是采用ms培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基再添加植物激素制成，但這種培養(yǎng)的誘導(dǎo)已經(jīng)無法滿足目前的需求增長速度。

稀土元素是17種特殊的元素的統(tǒng)稱，它的得名是因為瑞典科學(xué)家在提取稀土元素時應(yīng)用了稀土化合物，所以得名稀土元素。然而稀土是歷史遺留下來的名稱，稀土是從18世紀(jì)末開始陸續(xù)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)時人們常把不溶于水的固體氧化物稱為土，例如，將氧化鋁稱為“陶土”，氧化鈣稱為”堿土“等。稀土一般是以氧化物狀態(tài)分離出來的，當(dāng)時比較稀少，因而得名為稀土（rareearth，簡稱re或r），然而經(jīng)過大量的科學(xué)研究，在組織培養(yǎng)當(dāng)中添加了稀土元素會大大地提高組織培養(yǎng)的質(zhì)量。

鈰是周期系第ιιι族副族鑭系元素，一種稀土元素。原子序數(shù)58。穩(wěn)定同位素：136、138、140、142?；疑饘?，有展性。密度：正方晶體6.9，立方晶體6.7。熔點799℃，沸點3426℃。鈰是一種銀灰色的活潑金屬，粉末在空氣中易自燃，易溶于酸。鈰的名稱來源于小行星谷神星的英文名。鈰在地殼中的含量約0.0046%，是稀土元素中豐度最高的。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

基于現(xiàn)有技術(shù)中香蕉的需求量巨大但供給品質(zhì)參差不齊，且現(xiàn)有培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效率低的問題，本發(fā)明提供一種提高香蕉花藥萌發(fā)率的培養(yǎng)基，其以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加tdz(噻苯隆)、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）、活性炭、硝酸鈰、維生素、瓊脂粉和白砂糖，其以香蕉的花藥作為外植體，避免了外植體帶有病毒而影響植物品質(zhì)的問題，以n6培養(yǎng)基替代ms培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基更加適合對花藥的誘導(dǎo)，本發(fā)明具有萌發(fā)率高和成本低的優(yōu)點。

一種提高香蕉花藥萌發(fā)率的培養(yǎng)基，其以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加tdz(噻苯隆)、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）、活性炭、硝酸鈰、維生素、瓊脂粉和白砂糖。

優(yōu)選地，tdz(噻苯隆)的濃度為0.1-0.8mg/l、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為1-4mg/l、活性炭的濃度為0.05-0.2mg/l、硝酸鈰的濃度為1-5g/l，維生素的濃度為0.1-0.5mg/l，瓊脂粉的濃度為8-12g/l、白砂糖的濃度為5-10g/l。

優(yōu)選地，tdz(噻苯隆)的濃度為0.4-0.6mg/l、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為2-3mg/l、活性炭的濃度為0.1-0.15mg/l、硝酸鈰的濃度為2-4g/l，維生素的濃度為0.2-0.4mg/l，瓊脂粉的濃度為9-11g/l、白砂糖的濃度為6-8g/l。

優(yōu)選地，所述的培養(yǎng)基的ph值為5.8-6.8，使用微酸性的組培環(huán)境更加符合天然環(huán)境的酸堿度，從而提高組織培養(yǎng)的質(zhì)量。

優(yōu)選地，所述的培養(yǎng)基的ph值為6.2，經(jīng)過大量的實驗統(tǒng)計得出ph值為6.2時最適合香蕉花藥的誘導(dǎo)。

優(yōu)選地，所述的維生素是維生素c。

一種提高香蕉花藥萌發(fā)率的培養(yǎng)基的配制方法，其包括以下步驟：

步驟s10，使用電子秤按照n6培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方配制1000倍n6培養(yǎng)基母液；

步驟s20，取n6培養(yǎng)基母液配制n6培養(yǎng)基，并按配方添加活性炭、硝酸鈰、瓊脂粉和白砂糖，使用鹽酸或者氫氧化鈉調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph值；

步驟s30，使用高溫高壓蒸汽滅菌鍋用121℃對培養(yǎng)基滅菌20分鐘，取出培養(yǎng)基并在超凈工作臺中靜置冷卻；

步驟s40，按照配方配制tdz(噻苯隆)、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）和維生素溶液，并進(jìn)行過濾滅菌；

步驟s50，待培養(yǎng)基冷卻到60℃時向培養(yǎng)基中加入步驟s40配制好的試劑，搖晃均勻，靜置，冷卻凝固。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。

實施例一：

按以下步驟配制對照組的ms培養(yǎng)基和實驗組n6培養(yǎng)基：

步驟s10，使用電子秤按照n6培養(yǎng)基和ms培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方配制1000倍n6培養(yǎng)基母液和ms培養(yǎng)基母液。

步驟s20，取n6培養(yǎng)基母液配制n6培養(yǎng)基，并按配方添加活性炭、硝酸鈰、瓊脂粉和白砂糖；取ms培養(yǎng)基母液配制ms培養(yǎng)基添加iaa（吲哚乙酸）和naa（萘乙酸），使用鹽酸或者氫氧化鈉調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph值為6.2。

步驟s30，使用高溫高壓蒸汽滅菌鍋用121℃對培養(yǎng)基滅菌20分鐘，取出培養(yǎng)基并在超凈工作臺中靜置冷卻。

步驟s40，按照配方配制tdz(噻苯隆)、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）和維生素c溶液，并進(jìn)行過濾滅菌。

步驟s50，待培養(yǎng)基冷卻到60℃時向n6培養(yǎng)基中加入步驟s40配制好的n6試劑，搖晃均勻，靜置，冷卻凝固。

其中培養(yǎng)基的配方如下：以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加tdz(噻苯隆)的濃度為0.1mg/l、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為1mg/l、活性炭的濃度為0.05mg/l、硝酸鈰的濃度為1g/l，維生素的濃度為0.1mg/l，瓊脂粉的濃度為8g/l、白砂糖的濃度為5g/l。

將已經(jīng)消毒的外植體分別接種到對照組的ms培養(yǎng)基和實驗組n6培養(yǎng)基中出行常規(guī)組織培養(yǎng)，20天后統(tǒng)計萌發(fā)率得出對照組的萌發(fā)率為86%，實驗組萌發(fā)率為93%，實驗組萌發(fā)率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組。

實施例二：

實施例二與實施例一的不同之處在于，調(diào)整了培養(yǎng)基配方濃度。

按以下步驟配制對照組的ms培養(yǎng)基和實驗組n6培養(yǎng)基：

步驟s10，使用電子秤按照n6培養(yǎng)基和ms培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方配制1000倍n6培養(yǎng)基母液和ms培養(yǎng)基母液。

步驟s20，取n6培養(yǎng)基母液配制n6培養(yǎng)基，并按配方添加活性炭、硝酸鈰、瓊脂粉和白砂糖；取ms培養(yǎng)基母液配制ms培養(yǎng)基添加iaa（吲哚乙酸）和naa（萘乙酸），使用鹽酸或者氫氧化鈉調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph值為6.2。

步驟s30，使用高溫高壓蒸汽滅菌鍋用121℃對培養(yǎng)基滅菌20分鐘，取出培養(yǎng)基并在超凈工作臺中靜置冷卻。

步驟s40，按照配方配制tdz(噻苯隆)、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）和維生素c和b1溶液，并進(jìn)行過濾滅菌。

步驟s50，待培養(yǎng)基冷卻到60℃時向n6培養(yǎng)基中加入步驟s40配制好的n6試劑，搖晃均勻，靜置，冷卻凝固。

其中培養(yǎng)基的配方如下：以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加tdz(噻苯隆)的濃度為0.8mg/l、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為4mg/l、活性炭的濃度為0.2mg/l、硝酸鈰的濃度為5g/l，維生素的濃度為0.5mg/l，瓊脂粉的濃度為12g/l、白砂糖的濃度為10g/l。

將已經(jīng)消毒的外植體分別接種到對照組的ms培養(yǎng)基和實驗組n6培養(yǎng)基中出行常規(guī)組織培養(yǎng)，20天后統(tǒng)計萌發(fā)率得出對照組的萌發(fā)率為86%，實驗組萌發(fā)率為90%，實驗組萌發(fā)率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組。

實施例三：

實施例三與實施例一和二的不同之處在于，調(diào)整了培養(yǎng)基配方濃度。

按以下步驟配制對照組的ms培養(yǎng)基和實驗組n6培養(yǎng)基：

步驟s10，使用電子秤按照n6培養(yǎng)基和ms培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方配制1000倍n6培養(yǎng)基母液和ms培養(yǎng)基母液。

步驟s20，取n6培養(yǎng)基母液配制n6培養(yǎng)基，并按配方添加活性炭、硝酸鈰、瓊脂粉和白砂糖；取ms培養(yǎng)基母液配制ms培養(yǎng)基添加iaa（吲哚乙酸）和naa（萘乙酸），使用鹽酸或者氫氧化鈉調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph值為6.2。

步驟s30，使用高溫高壓蒸汽滅菌鍋用121℃對培養(yǎng)基滅菌20分鐘，取出培養(yǎng)基并在超凈工作臺中靜置冷卻。

步驟s40，按照配方配制tdz(噻苯隆)、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）和維生素c和b1溶液，并進(jìn)行過濾滅菌。

步驟s50，待培養(yǎng)基冷卻到60℃時向n6培養(yǎng)基中加入步驟s40配制好的n6試劑，搖晃均勻，靜置，冷卻凝固。

其中培養(yǎng)基的配方如下：以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加tdz(噻苯隆)的濃度為0.5mg/l、2,4-d（2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為2.5mg/l、活性炭的濃度為0.15mg/l、硝酸鈰的濃度為3g/l，維生素的濃度為0.3mg/l，瓊脂粉的濃度為10g/l、白砂糖的濃度為7g/l。

將已經(jīng)消毒的外植體分別接種到對照組的ms培養(yǎng)基和實驗組n6培養(yǎng)基中出行常規(guī)組織培養(yǎng)，20天后統(tǒng)計萌發(fā)率得出對照組的萌發(fā)率為86%，實驗組萌發(fā)率為98%，實驗組萌發(fā)率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組。