本發(fā)明涉及化工
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體涉及一種具有殺菌消毒作用的中藥揮發(fā)油組合物以及空氣殺菌消毒劑。
背景技術(shù):
:目前國(guó)內(nèi)常用的空氣消毒方法有化學(xué)試劑法,如過氧乙酸、過氧化氫、甲醛、84消毒液、戊二醛等,以及紫外線照射、臭氧發(fā)生器等物理方法。這些方法雖然能夠殺滅致病微生物,作用迅速,有效濃度低,但各有一定的缺陷,如毒性、刺激性、金屬腐蝕性、持續(xù)效果差;許多本身又構(gòu)成污染物,不同程度地影響人體健康,不適合有人環(huán)境;消毒時(shí)所有人員必須離場(chǎng),操作系統(tǒng)要有防護(hù)措施;消毒后異味不能很快消除,長(zhǎng)期使用會(huì)對(duì)人體有蓄積中毒的危險(xiǎn)等。經(jīng)空氣傳播致病菌所引發(fā)的傳染性疾病屬中醫(yī)“溫病”范疇,治療藥物以清熱解毒和芳香化濕兩類中藥為主。而蒼術(shù)和艾葉屬芳香化濕類中藥?,F(xiàn)代研究表明,兩種中藥均有較強(qiáng)的體外抗菌作用,對(duì)環(huán)境及人體皮膚黏膜消毒或者清潔衛(wèi)生具有廣泛的使用價(jià)值。以蒼術(shù)和艾葉為原料開發(fā)空氣殺菌消毒劑目前尚無文獻(xiàn)報(bào)道。蒼術(shù)現(xiàn)載入《中國(guó)藥典》2015年版一部,為菊科植物茅蒼術(shù)atractylodeslancea(thunb.)dc.或北蒼術(shù)atractylodeschinensis(dc.)koidz.的干燥根莖。具有燥濕健脾,祛風(fēng)散寒、明目的功效。研究表明,蒼術(shù)提取液對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用較明顯,對(duì)白色念珠菌和大腸桿菌的抑菌作用次之。艾葉現(xiàn)載入《中國(guó)藥典》2015年版一部,為菊科植物艾artemisiaargyilevl.etvan.var.argyi的干燥葉。具有散寒止痛,溫經(jīng)止血的功效。研究表明,艾葉揮發(fā)油體外對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌具有抑菌作用,其抑菌作用優(yōu)于或等同于紅霉素。以蒼術(shù)和艾葉為原料,利用中藥現(xiàn)代化技術(shù)手段開發(fā)出其中的抗菌成分,然后應(yīng)用于空氣殺菌消毒劑中,具有廣闊的市場(chǎng)前景。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明為了克服現(xiàn)有技術(shù)中天然活性來源的空氣殺菌消毒劑種類稀少的問題,提供一種具有殺菌消毒作用的中藥揮發(fā)油組合物以及包含該組合物的空氣殺菌消毒劑。本發(fā)明所要解決的上述技術(shù)問題,通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):一種具有殺菌消毒作用的中藥揮發(fā)油組合物,包含蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油;所述的蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油的質(zhì)量比為1~3:1~3。發(fā)明人經(jīng)大量實(shí)驗(yàn)表明,將蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油混合后能產(chǎn)生協(xié)同的抗菌消毒作用。優(yōu)選地,所述的蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油的質(zhì)量比為2:1。優(yōu)選地,所述的蒼術(shù)揮發(fā)油為從中藥茅蒼術(shù)或北蒼術(shù)中提取的揮發(fā)油。優(yōu)選地,所述的蒼術(shù)揮發(fā)油通過包含如下步驟的方法制備得到:(1)將中藥茅蒼術(shù)或北蒼術(shù)粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得茅蒼術(shù)或北蒼術(shù)超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為40~60兆帕,萃取溫度為50~60℃,流速為30~40升/小時(shí),提取時(shí)間為1~3小時(shí),同時(shí)加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的茅蒼術(shù)或北蒼術(shù)超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為98:2~90:10的石油醚和丙酮組成的混合溶劑體系進(jìn)行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的蒼術(shù)揮發(fā)油。最優(yōu)選地,所述的蒼術(shù)揮發(fā)油通過包含如下步驟的方法制備得到:(1)將中藥茅蒼術(shù)或北蒼術(shù)粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得茅蒼術(shù)或北蒼術(shù)超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為50兆帕,萃取溫度為55℃,流速為35升/小時(shí),提取時(shí)間為2小時(shí),同時(shí)加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的茅蒼術(shù)或北蒼術(shù)超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為95:5的石油醚和丙酮組成的混合溶劑體系進(jìn)行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的蒼術(shù)揮發(fā)油。優(yōu)選地,所述的艾葉揮發(fā)油通過包含如下步驟的方法制備得到:(1)將艾葉粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得艾葉超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為20~30兆帕,萃取溫度為30~40℃,流速為20~30升/小時(shí),提取時(shí)間為1~3小時(shí),同時(shí)加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的艾葉超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為99:1~95:5的氯仿和甲醇組成的混合溶劑體系進(jìn)行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的艾葉揮發(fā)油。最優(yōu)選地,所述的艾葉揮發(fā)油通過包含如下步驟的方法制備得到:(1)將艾葉粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得艾葉超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為25兆帕,萃取溫度為35℃,流速為25升/小時(shí),提取時(shí)間為2小時(shí),同時(shí)加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的艾葉超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為97:3的氯仿和甲醇組成的混合溶劑體系進(jìn)行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的艾葉揮發(fā)油。發(fā)明人經(jīng)大量的實(shí)驗(yàn)研究表明在上述方法下制備得到的蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油能夠最大程度的富集蒼術(shù)和艾葉中的抗菌消毒成分。一種空氣殺菌消毒劑,包含權(quán)利要求1~7任一項(xiàng)所述的中藥揮發(fā)油組合物。優(yōu)選地,空氣殺菌消毒劑中所述的中藥揮發(fā)油組合物的質(zhì)量百分比為0.1~20%。優(yōu)選地,所述的空氣殺菌消毒劑為液體殺菌劑,還包含酒精。有益效果:本發(fā)明提供了一種具有全新殺菌消毒作用的中藥組合物,通過本發(fā)明所述方法制備得到的蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油具有非常好的抗菌和抗流感病毒作用;尤其是將其二者混合后能夠產(chǎn)生協(xié)同抗菌消毒作用;使用二者天然成分為原料配制空氣殺菌消毒劑效果顯著且不會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害。具體實(shí)施方式以下結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步解釋本發(fā)明,但實(shí)施例對(duì)本發(fā)明不做任何形式的限定。實(shí)施例中未注明具體條件者,按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。其中,所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者,均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。實(shí)施例1原料揮發(fā)油的制備1、茅蒼術(shù)揮發(fā)油的制備(1)將中藥茅蒼術(shù)粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得茅蒼術(shù)超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為50兆帕,萃取溫度為55℃,流速為35升/小時(shí),提取時(shí)間為2小時(shí),同時(shí)加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的茅蒼術(shù)超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為95:5的石油醚和丙酮組成的混合溶劑體系進(jìn)行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的茅蒼術(shù)揮發(fā)油。2、北蒼術(shù)揮發(fā)油的制備(1)將中藥北蒼術(shù)粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得北蒼術(shù)超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為50兆帕,萃取溫度為55℃,流速為35升/小時(shí),提取時(shí)間為2小時(shí),同時(shí)加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的北蒼術(shù)超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為95:5的石油醚和丙酮組成的混合溶劑體系進(jìn)行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的北蒼術(shù)揮發(fā)油。3、艾葉揮發(fā)油的制備(1)將艾葉粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得艾葉超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為25兆帕,萃取溫度為35℃,流速為25升/小時(shí),提取時(shí)間為2小時(shí),同時(shí)加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的艾葉超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為97:3的氯仿和甲醇組成的混合溶劑體系進(jìn)行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的艾葉揮發(fā)油。實(shí)施例2本發(fā)明揮發(fā)油抑菌實(shí)驗(yàn)待測(cè)樣品:茅蒼術(shù)揮發(fā)油、北蒼術(shù)揮發(fā)油、艾葉揮發(fā)油、茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=2:1、茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=1:1、茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=1:3、北蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=2:1、乳酸諾氟沙星。上述比例為質(zhì)量比。在無菌條件下在培養(yǎng)基中加入0.2ml濃度為1×107個(gè)/ml的菌液(具體菌種見表1),用滅菌的l型涂抹棒涂抹均勻,在室溫下干燥5min,用無菌鑷子將牛津杯放入培養(yǎng)皿中,然后在牛津杯中加入200μl濃度為1g/ml的待測(cè)樣品溶液,將培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱中,在37℃中培養(yǎng)24h,測(cè)量抑菌圈圈直徑。測(cè)試效果見表1所示。表1本發(fā)明提取抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果(單位mm)白葡萄球菌結(jié)核桿菌肺炎球菌大腸桿菌茅蒼術(shù)揮發(fā)油28.43±1.1525.33±1.7821.11±1.1220.01±1.25北蒼術(shù)揮發(fā)油27.12±1.2126.12±1.8222.03±1.2020.75±1.33艾葉揮發(fā)油29.01±1.3026.82±1.9422.81±1.2521.12±1.45茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=2:114.43±0.8711.33±1.018.14±0.679.44±0.86茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=1:116.26±0.9312.16±1.128.87±0.729.75±1.03茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=1:317.12±0.9913.44±1.219.02±0.8610.24±1.12北蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=2:115.28±0.8811.12±1.098.34±0.719.48±0.97乳酸諾氟沙星29.12±1.2226.33±2.4322.34±1.4621.17±1.52從表1數(shù)據(jù)體外抗菌數(shù)據(jù)可以看出,按本發(fā)明所述方法制備得到的茅蒼術(shù)揮發(fā)油、北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油具有非常好的抗菌效果,其對(duì)白葡萄球菌、結(jié)核桿菌、肺炎球菌和大腸桿菌的抑菌效果與陽性對(duì)照藥乳酸諾氟沙星相當(dāng)。這說明將茅蒼術(shù)、北蒼術(shù)和艾葉在本發(fā)明所述方法參數(shù)下先進(jìn)行二氧化碳超臨界萃取再進(jìn)行硅膠柱層析富集能夠得到具有非常優(yōu)異抗菌效果的有效成分。此外,從表1數(shù)據(jù)中可以看出,茅蒼術(shù)揮發(fā)油或北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油組合后的到的組合物的抗菌效果進(jìn)一步加強(qiáng),表1數(shù)據(jù)顯示,茅蒼術(shù)揮發(fā)油或北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油組合后的抗菌作用都遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于單獨(dú)一種揮發(fā)油的抗菌作用,這說明茅蒼術(shù)揮發(fā)油或北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油組合后再抗菌作用上發(fā)生了協(xié)同作用,從而進(jìn)一步提高了抗菌效果。其中,從表1數(shù)據(jù)中還可以看出將茅蒼術(shù)揮發(fā)油或北蒼術(shù)揮發(fā)油與艾葉揮發(fā)油以質(zhì)量比2:1組合后的協(xié)同效果更明顯。實(shí)施例3本發(fā)明揮發(fā)油抗甲型流感病毒活性測(cè)試待測(cè)樣品:茅蒼術(shù)揮發(fā)油、北蒼術(shù)揮發(fā)油、艾葉揮發(fā)油、茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=2:1、茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=1:1、茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=1:3、北蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=2:1、利巴韋林。上述比例為質(zhì)量比。取mdck細(xì)胞生長(zhǎng)至單層的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,棄去上清液,用pbs洗兩遍,每孔分別加入用mem二倍稀釋的藥液與病毒液100μl,另外設(shè)細(xì)胞對(duì)照組、病毒對(duì)照組,置于37℃、飽和濕度、5%co2培養(yǎng)箱中孵育。72h后,0.5mmwst-1溶液加入到每孔中(wst-1的濃度為0.25mm)。4小時(shí)后,用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)吸光度。ic50計(jì)算方式如下:細(xì)胞存活率=(細(xì)胞對(duì)照孔o(hù)d值-加藥孔o(hù)d值)×100%;以藥物濃度為x軸,細(xì)胞存活率為y軸,在origin作圖,求出50%細(xì)胞存活率對(duì)應(yīng)的濃度則為ic50。將待測(cè)樣品進(jìn)行抗甲型流感病毒活性測(cè)試,結(jié)果見表2。表2.本發(fā)明揮發(fā)油抗甲型流感病毒活性測(cè)試結(jié)果h1n1病毒ic50(μg/ml)茅蒼術(shù)揮發(fā)油45.3±9.6北蒼術(shù)揮發(fā)油46.3±9.8艾葉揮發(fā)油48.2±10.3茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=2:124.1±7.1茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=1:125.2±7.5茅蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=1:325.9±7.9北蒼術(shù)揮發(fā)油:艾葉揮發(fā)油=2:124.5±7.8利巴韋林42.5±9.0從表2數(shù)據(jù)體外抗h1n1流感病毒數(shù)據(jù)可以看出,按本發(fā)明所述方法制備得到的茅蒼術(shù)揮發(fā)油、北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油具有非常好的抗h1n1流感病毒效果,其抗h1n1流感病毒的效果與陽性對(duì)照藥利巴韋林相當(dāng)。此外,從表2數(shù)據(jù)中可以看出,茅蒼術(shù)揮發(fā)油或北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油組合后的到的組合物的抗h1n1流感病毒效果進(jìn)一步加強(qiáng),表2數(shù)據(jù)顯示,茅蒼術(shù)揮發(fā)油或北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油組合后的抗h1n1流感病毒作用都遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于單獨(dú)一種揮發(fā)油的抗h1n1流感病毒作用,這說明茅蒼術(shù)揮發(fā)油或北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油組合后再抗h1n1流感病毒作用上發(fā)生了協(xié)同作用,從而進(jìn)一步提高了抗h1n1流感病毒效果。實(shí)施例4一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發(fā)油占10重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發(fā)油由實(shí)施例1制備得到的茅蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油按質(zhì)量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發(fā)油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實(shí)施例5一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發(fā)油占10重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發(fā)油由實(shí)施例1制備得到的北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油按質(zhì)量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發(fā)油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實(shí)施例6一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發(fā)油占5重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發(fā)油由實(shí)施例1制備得到的北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油按質(zhì)量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發(fā)油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實(shí)施例7一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發(fā)油占1重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發(fā)油由實(shí)施例1制備得到的北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油按質(zhì)量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發(fā)油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實(shí)施例8一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發(fā)油占20重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發(fā)油由實(shí)施例1制備得到的北蒼術(shù)揮發(fā)油和艾葉揮發(fā)油按質(zhì)量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發(fā)油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實(shí)施例9空氣殺菌消毒劑殺菌效果測(cè)試選擇25m2的密閉房間,在室內(nèi)無人情況下進(jìn)行殺菌效果觀察。采樣:(1)消毒前采樣:用六級(jí)篩孔空氣撞擊式采樣器進(jìn)行空氣中自然菌采樣,作為消毒前樣本。(2)消毒后采樣:取實(shí)施例6制備的空氣殺菌消毒劑,對(duì)密閉房間進(jìn)行消毒,噴霧量均為1ml/m3,15min后采樣,作為消毒后樣本。采樣平板直接放入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)生長(zhǎng)菌落數(shù)以及消毒率。消毒效率=(消毒前樣本菌數(shù)-消毒后樣本菌數(shù))/消毒前樣本菌數(shù)×100%。結(jié)果顯示:消毒前樣本菌數(shù)為24615cfu/m3,消毒后的樣本菌數(shù)為48cfu/m3,消毒率為99.80%,上述結(jié)果表明,本發(fā)明制備的空氣殺菌消毒劑具有非常好的除菌效果。當(dāng)前第1頁12