1.一種牛冷凍精液稀釋液制備方法，其特征在于，按照以下步驟進(jìn)行：
步驟1：精液稀釋液配置；
按比例，稱取果糖5～8g、檸檬酸鈉19.8～26.6 g，無損耗地移入1000 mL的燒杯內(nèi)，加入蒸餾水800 mL，用消毒過的玻璃棒或磁力攪拌器攪拌，使果糖和檸檬酸鈉充分溶解，然后將溶液用濾紙過濾于三角燒瓶或鹽水瓶中，扎好或塞緊瓶口，置75～80℃水浴鍋中消毒30 min，冷卻至常溫后再加入180～220 mL的新鮮卵黃，以及再加入青霉素、鏈霉素各40～50萬IU單位，按此比例配置的溶液稱為第一液；
取第一液430 mL加入65～75 mL甘油，并用磁力攪拌器充分?jǐn)嚢杈鶆蚝蠓湃?～5℃的冰箱或生化培養(yǎng)箱內(nèi)待用，按此比例配置的溶液稱之為第二液；
步驟2：精液稀釋；
用35℃的第一液緩慢地加入原合格精液中，輕輕搖勻，用燒杯盛適量的35℃水，把稀釋管放入后送0～5℃低溫柜內(nèi)降溫，與此同時(shí)把第二液也放入；平衡2 h后水杯中加冰塊促使其快速降溫，當(dāng)降溫至10℃時(shí)加入第二液，加入第二液后再平衡30 min以上，才能在低溫柜中進(jìn)行細(xì)管分裝，分裝后的細(xì)管即可進(jìn)行冷凍；
步驟3：精液冷凍；
將平衡、封裝后的細(xì)管精液按棉塞封口端靠近操作者的方向上架碼放，碼放在平衡架上，超聲波封口端遠(yuǎn)離操作者，細(xì)管放入冷凍儀時(shí)也應(yīng)如此放置；每個(gè)平衡架上放一根細(xì)管的標(biāo)記物，為了便于識(shí)別，一頭種公牛用同一顏色的標(biāo)記物；如果同一個(gè)平衡架上有不同種公牛的細(xì)管精液，須分開碼放，且要隔開一些距離，以免混淆；
在細(xì)管凍精生產(chǎn)過程中，使用由計(jì)算機(jī)控制的全自動(dòng)冷凍儀，首先在電腦中設(shè)置好最佳冷凍溫度曲線，冷凍儀與低溫柜應(yīng)盡量靠近，開啟液氮罐閥門把冷凍儀降溫至4℃，關(guān)閉風(fēng)扇電源，待風(fēng)扇完全停止后把已排滿待凍細(xì)管的平衡架迅速輕放人冷凍儀，蓋好蓋子，按預(yù)先設(shè)定的程序自動(dòng)完成冷凍過程；
步驟4：凍精解凍與抽檢；
預(yù)先把水浴箱水溫加熱至38～40℃，用鑷子夾取一支冷凍后的細(xì)管凍精迅速浸入38～40℃水中并輕輕晃動(dòng)，待溶解后立即取出，用吸水紙或紗布擦干水珠，再用細(xì)管專用剪剪去超聲波封口端，滴一小滴精液于經(jīng)過預(yù)熱的載玻片上即可進(jìn)行鏡檢，評價(jià)精子活率；
步驟5：凍精包裝；
在-140℃以下的環(huán)境中，用細(xì)管計(jì)數(shù)分裝機(jī)進(jìn)行包裝，包裝后的細(xì)管其棉塞端在塑料管的底部，不得倒置，塑料包裝管的內(nèi)徑應(yīng)均勻一致，不得用上口大、底部小的塑料管，包裝好的細(xì)管凍精人庫貯存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牛冷凍精液稀釋液制備方法，其特征在于，所述步驟2中，細(xì)管分裝使用細(xì)管灌封一體機(jī)進(jìn)行。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牛冷凍精液稀釋液制備方法，其特征在于，還包括步驟6，凍精貯存；凍精貯存在液氮罐的液氮中，每周定時(shí)加一次液氮，當(dāng)發(fā)現(xiàn)液氮罐外殼出現(xiàn)白霜時(shí)，應(yīng)立即將精液轉(zhuǎn)移人其他液氮罐內(nèi)保存；包裝好的凍精液氮罐間轉(zhuǎn)換時(shí)，在液氮罐外停留時(shí)間不能超過3s；取存凍精后要蓋好液氮罐塞，在取放蓋塞時(shí)，要垂直輕拿輕放，不得用力過猛，防止液氮罐塞折斷或損壞；移動(dòng)液氮罐時(shí)，應(yīng)提握液氮罐手柄抬起罐體后再移動(dòng)，不得在地上拖行。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牛冷凍精液稀釋液制備方法，其特征在于，還包括步驟7：凍精運(yùn)輸；凍精運(yùn)輸過程不得橫倒、碰撞和強(qiáng)烈振動(dòng)，保證凍精始終浸在液氮中。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牛冷凍精液稀釋液制備方法，其特征在于，所述步驟2中，所加第一液的量=[（稀釋液總量+合格精液量）／2] -合格精液量；
稀釋液總量=原精液量×（稀釋倍數(shù)-1）；
稀釋倍數(shù)=(原精液精子密度×原精液精子活力×冷凍后精子活力)/每頭份輸精量所含有效精子數(shù)/ 0.25；
所加第二液的量=（所加稀釋液總量一所加第一液的量）。