本發(fā)明涉及組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體是矮珍珠的組織培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
矮珍珠雖屬有莖水草，但莖部卻不是直立的，而是爬行在底部生長(zhǎng)。由于爬行生長(zhǎng)的匍匐枝會(huì)呈擴(kuò)散狀蔓延開(kāi)來(lái)，最后鋪滿整個(gè)底部，而匍匐枝上的葉片又是濃密地生長(zhǎng)，感覺(jué)起來(lái)宛如草坪一般。一般在種植矮珍珠時(shí)了避免柔軟的細(xì)根無(wú)法頤利攀附在底砂之中，因此在底砂的選擇上應(yīng)盡量使用較細(xì)的砂子。矮珍珠，幾乎不到1cm高，綠色匍匐嫩枝附有短根組織，對(duì)稱(chēng)生長(zhǎng)的匙型葉片長(zhǎng)0.8cm寬0.3cm，葉尖較鈍，稍呈鋸齒狀，葉柄幾乎與葉片等長(zhǎng)。氣生葉腺可長(zhǎng)出短莖的白色單瓣花，直徑0.3cm，有5片花瓣、4株雄蕊。雖然生長(zhǎng)蔓延頗為緩慢，但是，可以長(zhǎng)得很濃密，其一旦長(zhǎng)好后的密植度，猶如碧綠的草原，是一種裝飾性非常強(qiáng)的前景草。然而，矮珍珠傳統(tǒng)的育苗繁殖方法產(chǎn)量降低，病毒積累嚴(yán)重，品種退化，品質(zhì)和產(chǎn)量大幅度下降，種植效益下降。組培快繁技術(shù)已在很多植物上作為經(jīng)濟(jì)、高效的繁殖方法應(yīng)用，周期短、繁殖系數(shù)高、成本低，并不受時(shí)間和空間的制約。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，滿足人工快速繁育、大面積豐產(chǎn)栽培的需要，提供一種矮珍珠的組織培養(yǎng)基。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：
矮珍珠的組織培養(yǎng)基，包括不同階段的三種培養(yǎng)基，各培養(yǎng)基的原料及其成分濃度如下，
初代培養(yǎng)基為：在ER培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，再添加碘酸鉀0.1～0.5mg/L，添加2,4-D 0.6～0.8mg/L，添加多效唑1.2～1.3mg/L；
繼代培養(yǎng)基為：在MS培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，先將硝酸銨的濃度調(diào)整為1200～1300mg/L，另外再添加尿素100～120mg/L，添加ABA3～3.5mg/L，添加吲哚乙酸0.5～0.8mg/L，添加谷氨酰胺5.0～5.5mg/L，添加活性炭200～300mg/L；
生根培養(yǎng)基為：在N6培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，另外再添加鉬酸銨0.01～0.02mg/L，添加TDZ 1.5～2.0mg/L，添加支鏈淀粉130～150mg/L，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0～7.2。
與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明具備的有益效果：
本發(fā)明培養(yǎng)基針對(duì)矮珍珠生長(zhǎng)特點(diǎn)而設(shè)計(jì)，能夠滿足矮珍珠組織培養(yǎng)各個(gè)階段的營(yíng)養(yǎng)需要，利用本發(fā)明所述離體培養(yǎng)基對(duì)矮珍珠進(jìn)行組織培養(yǎng)，存活率高，獲得的矮珍珠幼苗健壯生命力頑強(qiáng)，移栽后能夠快速適應(yīng)自然生長(zhǎng)條件，有效地提高矮珍珠的繁殖系數(shù)，為矮珍珠商業(yè)化生產(chǎn)提供充足的種苗源。與播種繁殖相比，組織培養(yǎng)法能有效縮短育苗周期，能夠在室內(nèi)大量連續(xù)地生產(chǎn)，實(shí)現(xiàn)工廠化、專(zhuān)業(yè)化和規(guī)?；岣叻N苗的載培成活率，提高產(chǎn)量和品質(zhì)。
具體實(shí)施方式
下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步闡述。
實(shí)施例1
矮珍珠的組織培養(yǎng)基，包括不同階段的三種培養(yǎng)基，各培養(yǎng)基的原料及其成分濃度如下，
初代培養(yǎng)基為：在ER培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，再添加碘酸鉀0.1mg/L，添加2,4-D 0.6mg/L，添加多效唑1.2mg/L；
繼代培養(yǎng)基為：在MS培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，先將硝酸銨的濃度調(diào)整為1200mg/L，另外再添加尿素100mg/L，添加ABA3mg/L，添加吲哚乙酸0.5mg/L，添加谷氨酰胺5.0mg/L，添加活性炭200mg/L；
生根培養(yǎng)基為：在N6培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，另外再添加鉬酸銨0.01mg/L，添加TDZ 1.5mg/L，添加支鏈淀粉130mg/L，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0～7.2。
實(shí)施例2
矮珍珠的組織培養(yǎng)基，包括不同階段的三種培養(yǎng)基，各培養(yǎng)基的原料及其成分濃度如下，
初代培養(yǎng)基為：在ER培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，再添加碘酸鉀0.5mg/L，添加2,4-D 0.8mg/L，添加多效唑1.3mg/L；
繼代培養(yǎng)基為：在MS培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，先將硝酸銨的濃度調(diào)整為1300mg/L，另外再添加尿素120mg/L，添加ABA 3.5mg/L，添加吲哚乙酸0.8mg/L，添加谷氨酰胺5.5mg/L，添加活性炭300mg/L；
生根培養(yǎng)基為：在N6培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，另外再添加鉬酸銨0.02mg/L，添加TDZ 2.0mg/L，添加支鏈淀粉150mg/L，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.2。
實(shí)施例3
矮珍珠的組織培養(yǎng)基，包括不同階段的三種培養(yǎng)基，各培養(yǎng)基的原料及其成分濃度如下，
初代培養(yǎng)基為：在ER培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，再添加碘酸鉀0.3mg/L，添加2,4-D 0.7mg/L，添加多效唑1.25mg/L；
繼代培養(yǎng)基為：在MS培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，先將硝酸銨的濃度調(diào)整為1250mg/L，另外再添加尿素110mg/L，添加ABA 3.2mg/L，添加吲哚乙酸0.7mg/L，添加谷氨酰胺5.2mg/L，添加活性炭250mg/L；
生根培養(yǎng)基為：在N6培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，另外再添加鉬酸銨0.015mg/L，添加TDZ 1.8mg/L，添加支鏈淀粉140mg/L，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.1。
實(shí)施例4
矮珍珠的組織培養(yǎng)方法，包括如下步驟：
(1)獲取外植體并消毒
選取健壯植株新生的幼嫩枝芽，自來(lái)水洗滌枝芽表面污垢塵土，先酒精浸泡，再升汞消毒，最后無(wú)菌水沖洗干凈后得到消毒外植體，
(2)初代培養(yǎng)
將消毒外植體分割成帶芽莖段，然后接入初代培養(yǎng)基中培養(yǎng)32～36天獲得不定芽，
初代培養(yǎng)條件為：溫度為24±2℃，濕度為63～68％，光照時(shí)間為8～10小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為2200～25001x，初代培養(yǎng)第1～7天，每天施加超聲場(chǎng)1～2小時(shí)，超聲場(chǎng)功率為8～12W/cm2，超聲場(chǎng)頻率為20～22KHz，初代培養(yǎng)第8～15天，每天施加超聲場(chǎng)4～5小時(shí)，超聲場(chǎng)功率為15～18W/cm2，超聲場(chǎng)頻率為25～26KHz；
初代培養(yǎng)基為：在ER培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，再添加碘酸鉀0.1～0.5mg/L，添加2,4-D 0.6～0.8mg/L，添加多效唑1.2～1.3mg/L；
(3)繼代培養(yǎng)
將不定芽轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)40～45天獲得繼代培養(yǎng)苗，
繼代培養(yǎng)條件為：溫度為24±2℃，濕度為70～75％，光照時(shí)間為10～12小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為2800～32001x，
繼代培養(yǎng)基為：在MS培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，先將硝酸銨的濃度調(diào)整為1200～1300mg/L，另外再添加尿素100～120mg/L，添加ABA3～3.5mg/L，添加吲哚乙酸0.5～0.8mg/L，添加谷氨酰胺5.0～5.5mg/L，添加活性炭200～300mg/L；
(4)生根培養(yǎng)
將繼代培養(yǎng)苗轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)20～25天得到矮珍珠幼苗，
生根培養(yǎng)條件為：溫度為30±2℃，濕度為40～50％，光照時(shí)間為12～15小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為3500～42001x，
生根培養(yǎng)基為：在N6培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，另外再添加鉬酸銨0.01～0.02mg/L，添加TDZ 1.5～2.0mg/L，添加支鏈淀粉130～150mg/L，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0～7.2；
(5)煉苗和移栽
生根培養(yǎng)結(jié)束后，打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，在自然光下進(jìn)行開(kāi)瓶練苗5～7天，然后將矮珍珠幼苗用清水多次沖洗去除殘留培養(yǎng)基，移栽至自然水體中。