本發(fā)明涉及一種植物生根壯苗培養(yǎng)基及其制備方法和應(yīng)用，屬于植物組織培養(yǎng)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

植物組織培養(yǎng)技術(shù)是20世紀(jì)初發(fā)展起來(lái)的技術(shù)，是指在無(wú)菌條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體等在合適的條件進(jìn)行離體培養(yǎng)，誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織、不定芽等，之后形成完整植株的過程。組織培養(yǎng)技術(shù)因其具有可以利用各種人工培養(yǎng)條件控制細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化等優(yōu)點(diǎn)，有力地推動(dòng)了植物生理學(xué)、病理學(xué)、藥學(xué)、遺傳學(xué)、育種以及生物化學(xué)等學(xué)科的交叉發(fā)展，并廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、林業(yè)、園藝、工業(yè)、醫(yī)藥業(yè)等多種行業(yè)，產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，歸納起來(lái)，有以下幾個(gè)方面：1、苗木的離體快繁；2、培育脫毒苗；3、應(yīng)用于植物育種如單倍體育種、原生質(zhì)體融合、胚和胚乳的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)基因育種等；4、生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物如中藥成分等；5、人工種子和種質(zhì)保存；6、基因功能研究等。

在合適的離體培養(yǎng)條件下，原來(lái)已經(jīng)組織特異化的細(xì)胞，重新分裂形成具備全能性的細(xì)胞團(tuán)，即愈傷組織，這一過程稱為“脫分化”；經(jīng)“脫分化”的全能細(xì)胞，重新形成根、芽以及輸導(dǎo)系統(tǒng)等各種類型細(xì)胞的過程稱為“再分化”。脫分化和分化是植物組織培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)，對(duì)組織培養(yǎng)效率起著決定性影響。除此之外，組織培養(yǎng)和基因轉(zhuǎn)化所獲得的試管苗往往長(zhǎng)勢(shì)較弱，根系不發(fā)達(dá)，移栽后成活率低，嚴(yán)重影響試管苗的培養(yǎng)效率和進(jìn)一步的應(yīng)用效果。因此，建立一種高效的植物生根壯苗系統(tǒng)，就顯得尤為重要。

烯效唑(Uniconazole)是一種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，是內(nèi)源赤霉素合成的抑制劑，具有延緩植物生長(zhǎng)，抑制莖桿伸長(zhǎng)，縮短節(jié)間；減弱稻苗頂端生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)，促進(jìn)側(cè)芽(分蘗)滋生，促進(jìn)花芽分化；增加植物抗逆性能，提高產(chǎn)量等效果。烯效唑用量小、活性強(qiáng)，較低濃度就有良好的作用，能被種子、葉、根部吸收，噴施后，秧苗外觀表現(xiàn)矮壯多蘗，葉色濃綠，根系發(fā)達(dá)，但不會(huì)使植株畸形，持效期長(zhǎng)，對(duì)人畜安全。且其在土壤中的殘留量?jī)H為烯效唑的1/10，因此對(duì)后茬作物影響小，適用于水稻、小麥、玉米、花生、大豆、棉花、果樹、花卉等作物等增加分蘗，控制株高，提高抗倒伏能力。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的是提供一種植物生根壯苗培養(yǎng)基。本發(fā)明通過探索不同的添加物對(duì)植物試管苗的作用，篩選出一種生根壯苗培養(yǎng)基，使植物幼苗和對(duì)照比，不僅幼苗變矮壯且葉色深綠，生根快、變粗且根毛增多變長(zhǎng)，移栽后，幼苗返青快，長(zhǎng)勢(shì)好，從而提高植物試管苗的移栽存活率，最終提高研究基因功能和組培育種的效率。

本發(fā)明提供的植物生根壯苗培養(yǎng)基，其為含有烯效唑的生根培養(yǎng)基。

所述生根培養(yǎng)基包括但不限于MS培養(yǎng)基、N6培養(yǎng)基或B5培養(yǎng)基等，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，采用的生根培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基。本發(fā)明的生根培養(yǎng)基包括但不限于1/2MS培養(yǎng)基。本發(fā)明實(shí)施例中所述1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基為本領(lǐng)域通用術(shù)語(yǔ)，可市售獲得，也可自行配制，其配方為公知常識(shí)。

本發(fā)明的植物生根壯苗培養(yǎng)基中，烯效唑的濃度為0.05-1mg/L。

優(yōu)選地，烯效唑的終濃度為0.1-0.5mg/L。

更優(yōu)選地，烯效唑的終濃度為0.1-0.2mg/L。

進(jìn)一步地，本發(fā)明的植物生根壯苗培養(yǎng)基還含有糖分，所述糖分在所述植物生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為15-25g/L，優(yōu)選20g/L。

本發(fā)明的植物生根壯苗培養(yǎng)基pH值為5.7-6.0。

本發(fā)明的植物生根壯苗培養(yǎng)基還含有凝固劑，優(yōu)選的凝固劑為Phytagel植物凝膠或瓊脂粉。Phytagel植物凝膠是從假單胞菌分泌而來(lái)的一種瓊脂的替代物，又名Gelrite,Geuam Gum等。可從市售獲得，例如SIGMA公司。

所述Phytagel植物凝膠在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為3-4g/L。優(yōu)選為3g/L。所述瓊脂粉在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為6-8g/L，優(yōu)選為7.5g/L。

較佳地，上述生根壯苗培養(yǎng)基，是在1/2MS生根培養(yǎng)基中添加烯效唑、蔗糖和Phytagel植物凝膠而制得；其中，所述烯效唑、蔗糖和Phytagel植物凝膠在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度分別為0.1-0.2mg/L、20g/L、3g/L；所述生根壯苗培養(yǎng)基其pH值為5.7-6.0。

本發(fā)明提供了上述植物生根壯苗培養(yǎng)基在培育植物試管苗、組織培養(yǎng)或基因轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用，所述植物為水稻、玉米、小麥、大麥、小米、高粱、花生、大豆、甘薯、馬鈴薯、棉花或油菜。

上述應(yīng)用中，培養(yǎng)條件為溫度28-35℃，光照培養(yǎng)，培養(yǎng)周期7-15d。

本發(fā)明提供了烯效唑在制備植物生根壯苗培養(yǎng)基中的應(yīng)用，在生根培養(yǎng)基中添加烯效唑，烯效唑的終濃度為0.05-1mg/L，所述植物生根壯苗培養(yǎng)基能夠使植物幼苗生根快，根變粗，根毛增多變長(zhǎng)，移栽存活率高，移栽后，幼苗返青快，長(zhǎng)勢(shì)好。

所述生根培養(yǎng)基包括但不限于1/2MS培養(yǎng)基、1/2N6培養(yǎng)基或1/2B5培養(yǎng)基。

本發(fā)明還提供上述生根壯苗培養(yǎng)基在植物試管苗、組織培養(yǎng)及基因轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供一種培養(yǎng)生根壯苗的方法，包括以下步驟：將經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的幼苗置于提前準(zhǔn)備好的上述生根壯苗培養(yǎng)基上培養(yǎng)；優(yōu)選地，上述培養(yǎng)條件為溫度28-35℃，光照培養(yǎng)，培養(yǎng)周期7-15d。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：

1、本發(fā)明在培養(yǎng)基內(nèi)添加0.05-1mg/L的烯效唑，使試管苗變矮壯，葉色深綠，移栽后幼苗返青快，長(zhǎng)勢(shì)好，提高試管苗的移栽存活率。

2、本發(fā)明培養(yǎng)條件為28-35℃，光照培養(yǎng)，在該條件下誘導(dǎo)試管苗生根，生根快，根粗且根毛增多變長(zhǎng)。

本發(fā)明通過摸索和實(shí)踐，進(jìn)一步優(yōu)化植物生根壯苗培養(yǎng)基，最終摸索出一種高效的植物生根壯苗培養(yǎng)基。該生根培養(yǎng)基對(duì)水稻、玉米、小麥、大麥、花生、大豆、棉花等作物的試管苗、組織培養(yǎng)和基因功能研究等具有較強(qiáng)的實(shí)用價(jià)值。本發(fā)明所述的生根壯苗培養(yǎng)基具有使植物試管苗生根快，普通培養(yǎng)基用于生根培養(yǎng)時(shí)，長(zhǎng)出新的根需要2d，而使用本發(fā)明培養(yǎng)基則只需1d，新根粗且根毛多而長(zhǎng)(見圖3)，苗矮壯、葉色深綠(見圖4、5)以及移栽后返青快，移栽2d后就返青、長(zhǎng)勢(shì)好的優(yōu)點(diǎn)(見圖7)、長(zhǎng)勢(shì)好的優(yōu)點(diǎn)，從而顯著提高試管苗的移栽存活率，存活率可達(dá)到98％，最終提高研究基因功能和組培育種的效率。

附圖說(shuō)明

圖1為水稻幼苗在不同培養(yǎng)基中生根壯苗培養(yǎng)15d后的根長(zhǎng)、芽長(zhǎng)及根數(shù)目的變化。添加烯效唑的培養(yǎng)基可抑制莖葉徒長(zhǎng)。1/2MS，生根培養(yǎng)基中不添加任何激素；S0.05，S0.1，S0.2，S0.5，S1，分別為生根培養(yǎng)基中添加烯效唑0.05mg/L；、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L。

圖2為水稻種子在不同培養(yǎng)基中生根壯苗培養(yǎng)15d后的根長(zhǎng)、芽長(zhǎng)及根數(shù)目的變化。添加烯效唑的培養(yǎng)基可抑制莖葉徒長(zhǎng)。1/2MS，生根培養(yǎng)基中不添加任何激素；S0.05，S0.1，S0.2，S0.5，S1，分別為生根培養(yǎng)基中添加烯效唑0.05mg/L；、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L。

圖3為水稻幼苗在不同培養(yǎng)基中生根壯苗培養(yǎng)15d后的幼根顯微結(jié)構(gòu)。幼苗在添加烯效唑的培養(yǎng)基中幼根粗壯且根毛極多且長(zhǎng)。1/2MS，生根培養(yǎng)基中不添加任何激素；S0.05，S0.1，S0.2，分別為生根培養(yǎng)基中添加烯效唑0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L。

圖4為水稻幼苗在不同培養(yǎng)基中生根壯苗培養(yǎng)15d后的生長(zhǎng)狀況。添加烯效唑的培養(yǎng)基中幼苗矮壯、葉片寬厚、葉色深綠。1/2MS，生根培養(yǎng)基中不添加任何激素；S0.05，S0.1，S0.2，S0.5，S1，分別為生根培養(yǎng)基中添加烯效唑0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L。

圖5為水稻種子在不同培養(yǎng)基中生根壯苗培養(yǎng)15d后的生長(zhǎng)狀況。添加烯效唑的培養(yǎng)基中幼苗矮壯、葉片寬厚、葉色深綠。1/2MS，生根培養(yǎng)基中不添加任何激素；S0.05，S0.1，S0.2，S0.5，S1，分別為生根培養(yǎng)基中添加烯效唑0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L。

圖6為水稻幼苗在含0.5mg/L IBA的培養(yǎng)基1/2MSIBA中生根壯苗培養(yǎng)15d后的生長(zhǎng)狀況。添加IBA的培養(yǎng)基中幼苗長(zhǎng)勢(shì)類似1/2MS，幼苗細(xì)長(zhǎng)，幼根短且細(xì)。1/2MS，生根培養(yǎng)基中不添加任何激素；1/2MSIBA，生根培養(yǎng)基中添加0.5mg/L IBA。

圖7為水稻幼苗在不同培養(yǎng)基中生根壯苗培養(yǎng)15d后，移栽7d、15d的生長(zhǎng)狀況。移栽7天時(shí)添加烯效唑培養(yǎng)基中的幼苗已經(jīng)開始生長(zhǎng)，但在1/2MS培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的幼苗仍處于返青期。移栽15天后，添加烯效唑培養(yǎng)基中的幼苗株高已超過1/2MS培養(yǎng)基中的。1/2MS，生根培養(yǎng)基中不添加任何激素；S0.05，S0.1，S0.2，S0.5，S1，分別為生根培養(yǎng)基中添加烯效唑0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L。

圖8為水稻幼苗在不同培養(yǎng)基中生根壯苗培養(yǎng)15d后，移栽后15d的株高。添加烯效唑的培養(yǎng)基中幼苗的株高都比對(duì)照高。1/2MS，生根培養(yǎng)基中不添加任何激素；S0.05，S0.1，S0.2，S0.5，S1，分別為生根培養(yǎng)基中添加烯效唑0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L。

圖9為水稻種子在不同培養(yǎng)基中生根壯苗培養(yǎng)15d后，移栽后15d的株高。添加一定濃度烯效唑的培養(yǎng)基中幼苗的株高都比對(duì)照高。1/2MS，生根培養(yǎng)基中不添加任何激素；S0.05，S0.1，S0.2，S0.5，S1，分別為生根培養(yǎng)基中添加烯效唑0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明精神和實(shí)質(zhì)的情況下，對(duì)本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明的范圍。

若未特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。

為配制方便，先配制以下母液，再由母液配制成各培養(yǎng)基。各母液由溶劑和溶質(zhì)水組成，溶質(zhì)具體配方如下：

實(shí)施例1

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為MET0.05)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.05mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為6.0。

實(shí)施例2

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.08)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.08mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.7。

實(shí)施例3

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.1)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.1mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.8。

實(shí)施例4

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.12)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.12mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.9。

實(shí)施例5

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.15)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.15mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.8。

實(shí)施例6

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.18)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.18mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.8。

實(shí)施例7

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.22)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.22mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.9。

實(shí)施例8

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.25)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.25mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為6.0。

實(shí)施例9

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.28)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.28mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.7。

實(shí)施例10

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.3)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.3mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.9。

實(shí)施例11

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.4)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.4mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為6.0。

實(shí)施例12

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.5)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.5mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.8。

實(shí)施例13

一種生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S1)，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為1mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為6.0。

實(shí)施例1-13所述生根壯苗培養(yǎng)基，其制備方法包括按配方將各組分添加到1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中即得。

實(shí)施例14

一種生根壯苗培養(yǎng)基，是在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加烯效唑而制得；其中，所述烯效唑在所述生根壯苗培養(yǎng)基中的濃度為0.2mg/L；該生根壯苗培養(yǎng)基中還含有濃度為20g/L的蔗糖，濃度為3g/L的Phytagel植物凝膠，pH值為5.8。

實(shí)施例15

本實(shí)施例提供一種生根壯苗培養(yǎng)基的制備方法，其配方同實(shí)施例14。以配置1L該生根壯苗培養(yǎng)基為例，其制備方法包括：取1/2MS大量(10×)100ml，1/2MS微量(100×)10ml，有機(jī)(100×)10ml，鐵鹽(100×)10ml混合后加入20g蔗糖，添加烯效唑至所需濃度，完全溶解后調(diào)pH 5.8，得混合液。稱取3g Phytagel植物凝膠溶于800ml去離子水，置于微波爐中煮沸至完全溶解，加入上述混合液中定容到1L，分裝至生根管中，116℃滅菌15min。

對(duì)比例1 不添加烯效唑

一種培養(yǎng)基1/2MS，以配置1L該生根壯苗培養(yǎng)基為例，其制備方法包括：取1/2MS大量(10×)100ml，1/2MS微量(100×)10ml，有機(jī)(100×)10ml，鐵鹽(100×)10ml混合后加入20g蔗糖，完全溶解后調(diào)pH 5.8，得混合液。稱取3g Phytagel植物凝膠溶于800ml去離子水，置于微波爐中煮沸至完全溶解，加入上述混合液中定容到1L，分裝至生根管中，116℃滅菌15min。

對(duì)比例2 不添加烯效唑，添加IBA

一種培養(yǎng)基1/2MSIBA，以配置1L該生根壯苗培養(yǎng)基為例，其制備方法包括：取1/2MS大量(10×)100ml，1/2MS微量(100×)10ml，有機(jī)(100×)10ml，鐵鹽(100×)10ml混合后加入20g蔗糖，0.5mg/L的IBA；完全溶解后調(diào)pH 5.8，得混合液。稱取3g Phytagel植物凝膠溶于800ml去離子水，置于微波爐中煮沸至完全溶解，加入上述混合液中定容到1L，分裝至生根管中，116℃滅菌15min。

實(shí)驗(yàn)例1

選取水稻經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的幼苗或種子直接作為供體，分別置于實(shí)施例1、3、12、13、14及對(duì)比例1-2制得的培養(yǎng)基上培養(yǎng)誘導(dǎo)生根、壯苗，培養(yǎng)條件控制為溫度28-35℃，光照培養(yǎng)，定期觀察。培養(yǎng)15d后統(tǒng)計(jì)：芽長(zhǎng)、根長(zhǎng)、根數(shù)、移栽后株高及移栽后存活率。

實(shí)施例14生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S 0.2)誘導(dǎo)水稻試管苗生根壯苗結(jié)果如圖1所示：試管苗經(jīng)烯效唑處理后，與1/2MS培養(yǎng)基培養(yǎng)的試管苗相比，幼葉短寬厚，葉色深綠，健壯，生根快、根數(shù)多，根粗壯且根毛增多變長(zhǎng)，結(jié)果見圖1、3、4。因此，試管苗移栽后的抗倒伏能力強(qiáng)，存活率高，存活率可達(dá)到98％，返青快，即移栽2d后就出現(xiàn)返青，生長(zhǎng)快，如圖7。將植物種子直接生根壯苗表現(xiàn)出一致的效果，如圖2。

對(duì)比例1培養(yǎng)基1/2MS和實(shí)施例1、3、12、13、14制得的培養(yǎng)基誘導(dǎo)結(jié)果見圖1、4：試管苗在對(duì)比例1培養(yǎng)基1/2MS上培養(yǎng)生長(zhǎng)較快，幼葉生長(zhǎng)快但細(xì)長(zhǎng)瘦弱，幼根細(xì)弱，容易造成幼葉徒長(zhǎng)，移栽后存活率偏低，最高只能達(dá)到80％，返青時(shí)間長(zhǎng)，一周后生長(zhǎng)勢(shì)顯著弱于實(shí)施例14中幼苗，如圖7。將植物種子直接生根壯苗表現(xiàn)出一致的效果，如圖2和圖5。

對(duì)比例1培養(yǎng)基1/2MS和對(duì)比例2培養(yǎng)基1/2MSIBA誘導(dǎo)試管苗生根壯苗結(jié)果如圖6所示：試管苗在這些培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，幼葉生長(zhǎng)快但細(xì)長(zhǎng)瘦弱，根雖多但細(xì)弱且短，容易造成幼葉徒長(zhǎng)，移栽后存活率偏低，最高只能達(dá)到80％，且返青期長(zhǎng)，約7-10天，如圖7。

實(shí)施例14生根壯苗培養(yǎng)基(簡(jiǎn)寫為S0.2)誘導(dǎo)水稻試管苗生根壯苗后的移栽結(jié)果見圖7所示：經(jīng)烯效唑處理的試管苗返青快，移栽7d后葉片比對(duì)照1/2MS綠，有明顯的分蘗，且長(zhǎng)勢(shì)好，株高超過對(duì)照，如圖7所示。

15d后測(cè)量株高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖8：盡管經(jīng)烯效唑處理后的試管苗在移栽前明顯矮于對(duì)照1/2MS，但移栽后，經(jīng)烯效唑處理后的試管苗迅速適應(yīng)環(huán)境，2天即開始返青，體現(xiàn)出生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)，其株高漸漸超過對(duì)照，如圖8所示。因此，本發(fā)明提供的培養(yǎng)基適用于水稻等植物的組培苗生根壯苗及后續(xù)移栽。將植物種子直接生根壯苗表現(xiàn)出一致的效果，如圖9所示。

綜合上述幾種培養(yǎng)基生根壯苗效果對(duì)比可以發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明使用的培養(yǎng)基試管苗矮壯、根壯且根毛增多變長(zhǎng)，葉色深綠，寬厚，移栽后返青快，7d后試管苗葉色比對(duì)照綠，有明顯的分蘗，且長(zhǎng)勢(shì)好。

綜上，本發(fā)明提供的生根壯苗培養(yǎng)基通過合理添加不同濃度的烯效唑，使植物幼苗和對(duì)照比幼苗變矮壯，其葉色深綠，寬厚，且生根快、根粗且根毛多而長(zhǎng)，移栽后，幼苗返青快，長(zhǎng)勢(shì)好，從而提高植物試管苗的移栽存活率，最終提高研究基因功能和組培育種的效率，且烯效唑?qū)Νh(huán)境和植物本身也不會(huì)產(chǎn)生不良的影響。

雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。