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一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法與流程

文檔序號(hào):12309431閱讀:636來(lái)源:國(guó)知局

本發(fā)明涉及一種雜交泡桐苗的培養(yǎng)方法。



背景技術(shù):

泡桐屬玄參科泡桐屬(Paulownia)植物,在我國(guó)分布較廣,為主要的闊葉速生樹(shù)種。泡桐生長(zhǎng)十分迅速,成材早,民間有“一年一根桿,兩年像把傘,五年可鋸板”之說(shuō)。雜交泡桐“9501”是國(guó)家林業(yè)局泡桐研究所十五重大科技攻關(guān)項(xiàng)目成果之一,是泡桐屬中的優(yōu)勢(shì)種,是我國(guó)著名的速生優(yōu)質(zhì)用材樹(shù)種,適應(yīng)性強(qiáng),生長(zhǎng)快、成材早,在條件適宜的情況下,1年樹(shù)齡樹(shù)生長(zhǎng)高達(dá)7-8米,地徑15-20公分以上,3-4年即可輪伐或齊伐,5年采伐時(shí)單株可高達(dá)18米,胸木材胸徑達(dá)40公分以上,材積0.5-0.6立方米,而且木材紋理通直,花紋美觀,色澤悅目,材質(zhì)輕軟,密度低,尺寸穩(wěn)定,不翹不裂,具有制作單板材如膠合板、拼板、集成材的優(yōu)良材質(zhì)特性;泡桐材保溫隔熱絕緣性能優(yōu)良,共振性能好,輻射阻尼高,內(nèi)摩擦小,是優(yōu)良的弦樂(lè)器用材,可與著名的樂(lè)器用材魚(yú)鱗云杉齊名;泡桐材的木纖維含量高達(dá)50%以上,是刨花板、生態(tài)板、造紙等優(yōu)良原料用材;葉又是良好的飼料等。因此,泡桐一直是廣大群眾所喜愛(ài)的用材和改善環(huán)境的主要樹(shù)種之一,其產(chǎn)品供不應(yīng)求,市場(chǎng)前景廣,經(jīng)濟(jì)價(jià)值高,泡桐樹(shù)為本土樹(shù)種,是生態(tài)環(huán)境友好樹(shù)種。因此,雜交泡桐的工業(yè)化種植栽培成為人們關(guān)注的問(wèn)題。

目前,雜交泡桐的種植栽培主要是采用傳統(tǒng)的苗圃育苗法進(jìn)行實(shí)生育苗或分根移植,育苗生產(chǎn)周期長(zhǎng),占地面積大,難以實(shí)現(xiàn)高效快速的大規(guī)模工業(yè)化種植栽培。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于,提供一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,克服現(xiàn)有技術(shù)難以實(shí)現(xiàn)高效快速的大規(guī)模工業(yè)化種植栽培的缺陷。本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是:

提供一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于,包括如下步驟:

S1、無(wú)菌芽培養(yǎng):

以雜交泡桐嫩莖或嫩芽為外植體,先經(jīng)酒精消毒,后用無(wú)菌水清洗1次,再采用HgCl2溶液進(jìn)行滅菌后,經(jīng)無(wú)菌水清洗3-5次,然后接在無(wú)菌芽培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)12~18天,培養(yǎng)溫度為15~30℃,光照強(qiáng)度2000~3000LUX,光照時(shí)間6~12小時(shí)/天,獲得無(wú)菌芽;

或?qū)傞L(zhǎng)出1-2.5mm長(zhǎng)嫩芽的雜交泡桐樹(shù)苗放入生化培養(yǎng)箱中,在38~40℃條件下培養(yǎng)6~8天后,剪取雜交泡桐嫩芽經(jīng)酒精消毒和HgCl2溶液滅菌后,經(jīng)無(wú)菌水洗3-5次后,切取1.8-2.2mm長(zhǎng)的芽尖接入新配置好的培養(yǎng)基中培養(yǎng),嫩芽生長(zhǎng)2.5mm長(zhǎng)后,再切取1.8-2.2mm長(zhǎng)的芽尖接入培養(yǎng)基中培養(yǎng),反復(fù)三次或三次以上,得到脫毒的無(wú)菌芽;

所述培養(yǎng)基成分包括植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS;

S2、.叢生芽培養(yǎng):

剪取長(zhǎng)出的無(wú)菌芽,接種到叢生芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)15~20天/代,可連續(xù)繼代4-5次,芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月,獲得大量的叢生芽;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1的培養(yǎng)基成分等同;

步驟S2的培養(yǎng)溫度為15~30℃,光照強(qiáng)度2000~3000LUX,光照時(shí)間6~12小時(shí)/天;

S3、壯苗、生根培養(yǎng):

待叢生芽長(zhǎng)到1-2cm長(zhǎng)后分苗接入新配置好的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)15~20天后,獲得健壯的生根苗;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1中培養(yǎng)基成分等同;

步驟S3的培養(yǎng)溫度為15~30℃,光照強(qiáng)度2000~3000LUX,光照時(shí)間6~12小時(shí)/天;

S4、煉苗移栽;

將步驟S3得到的泡桐壯苗移栽至大田煉苗,所述煉苗采用的基質(zhì)為園土和泥炭混合而成,并對(duì)煉苗基質(zhì)用遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰。

優(yōu)選的,所述步驟S1中使用的酒精體積分?jǐn)?shù)為70%~80%,所采用的HgCl2溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%~0.15%。

優(yōu)選的,所述步驟S1-S3中的培養(yǎng)基中的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS的配制方法為:以1/2MS和/或MS為基本培養(yǎng)基,加入適量植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和碳源配制而成;該無(wú)菌芽培養(yǎng)基的pH為6.5~7.2。

優(yōu)選的,所述步驟S1、S2、S3中的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為6-BA和/或NAA和/或IBA,配置成培養(yǎng)基后所述6-BA濃度為0.1mg/L-2.0mg/L,NAA濃度為0.1mg/L -1.0mg/L,IBA濃度為0.1mg/L-1.0mg/L。

優(yōu)選的,所述步驟S1、S2、S3中的培養(yǎng)基的還需要加入凝固劑,可加入瓊脂粉或卡拉膠,若選用瓊脂粉,瓊脂粉的加入量為5-6g/L;若選用卡拉膠,卡拉膠的加入量為8-15g/L。

優(yōu)選的,所述步驟S1、S2、S3中的培養(yǎng)基最佳的培養(yǎng)條件是pH為6.8,此PH為最適利于叢生芽和生根培養(yǎng)的酸堿度,培養(yǎng)溫度為25±2℃,光照強(qiáng)度為2800~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天,這個(gè)培養(yǎng)室溫度和光照強(qiáng)度和時(shí)間使組培苗分蘗增殖系數(shù)最好,葉片大小適中,葉色濃綠,莖相對(duì)粗壯,又可縮短培養(yǎng)時(shí)間1~2天。

優(yōu)選的,所述步驟S2中剪取長(zhǎng)出的無(wú)菌芽的最適高度為1-2cm,這樣長(zhǎng)度利于接苗操作,也利于繼代培養(yǎng),過(guò)短則苗太小,培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)還有剩余,過(guò)長(zhǎng)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)已耗凈,不利于繼代苗的生長(zhǎng),所述步驟S2的叢生芽培養(yǎng)的生長(zhǎng)速度為15~20天/代,連續(xù)培養(yǎng)繼代4-5次,所述叢生芽的芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月。

優(yōu)選的,所述碳源為蔗糖或葡萄糖,使用蔗糖時(shí)配置成的培養(yǎng)基蔗糖濃度為18~30g/L,使用葡萄糖時(shí)配置成的培養(yǎng)基葡萄糖濃度為25~40g/L。

優(yōu)選的,所述步驟S4的煉苗基質(zhì)中園土和泥炭質(zhì)量配比為(1.5~2.5):1,煉苗區(qū)濕度為60-70%。

實(shí)施本發(fā)明雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,與現(xiàn)有技術(shù)比較,其有益效果是:

1、本發(fā)明所采用的方法使得泡桐培育生長(zhǎng)速度和種植效益大大提高;本發(fā)明的方法雜交泡桐芽的一個(gè)月平均增殖系數(shù)達(dá)10~14.8,而現(xiàn)有的雜交泡桐分根株移栽方法一根株最多只能長(zhǎng)成一株苗;

2、本發(fā)明采用的方法中無(wú)菌芽經(jīng)過(guò)脫毒處理后,生長(zhǎng)速度和種植效益顯著提高;本發(fā)明的方法,經(jīng)脫毒處理一個(gè)月后植株叢生生長(zhǎng),高度均勻,平均葉寬1.4cm,葉片數(shù)4~6片,移栽后生長(zhǎng)較快;未脫毒處理分根株繁殖方法多數(shù)單株生長(zhǎng),高度大小不均勻,平均葉寬0.4~1.0cm,葉片數(shù)1~3片,移栽后生長(zhǎng)較慢;

3、本發(fā)明采用的方法所采用的原料成本低,在培育過(guò)程中不產(chǎn)生危害環(huán)境的因素,皆使用環(huán)保原料,使得環(huán)境污染?。?/p>

4、本發(fā)明采用的方法工藝較簡(jiǎn)單,一年四季均可生產(chǎn),適合大規(guī)模育苗生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。

實(shí)施例一

本發(fā)明一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法包括如下步驟:

S1、進(jìn)行無(wú)菌芽培養(yǎng):以雜交泡桐嫩莖或嫩芽為外植體,先體積比為70-80%的酒精消毒,后用無(wú)菌水清洗1次,再采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05-0.15%HgCl2的溶液進(jìn)行滅菌后,經(jīng)無(wú)菌水清洗3-5次,然后接在無(wú)菌芽培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),培育16~18天后獲得無(wú)菌芽。

培養(yǎng)天數(shù)主要決定于雜交泡桐嫩芽的生長(zhǎng)速度,一般無(wú)菌芽生長(zhǎng)至1厘米左右為宜。當(dāng)然,無(wú)菌芽長(zhǎng)于1厘米(例如生長(zhǎng)至1.5厘米)或短于1厘米(例如生長(zhǎng)至0.5厘米),不影響本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)。

培養(yǎng)基包括植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS,配制方法為:以1/2MS和/或MS為基本培養(yǎng)基,加入適量植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和碳源配制而成,所述無(wú)菌芽培養(yǎng)基的pH6.8。

所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可采用包括但不限于6-BA、NAA或IBA同時(shí)使用6-BA和NAA,IBA。配置成培養(yǎng)基后6-BA的加入量為(0.1mg/L-2.0mg/L),NAA或IBA的加入量為(0.1mg/L-1.0mg/L)。

碳源可以采用包括但不限于蔗糖、葡萄糖。使用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為18-30g/L;使用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為25-40g/L。

培養(yǎng)基要加入凝固劑,可加入瓊脂粉、卡拉膠等,若選用瓊脂粉,瓊脂粉的加入量為5-6g/L;若選用卡拉膠,卡拉膠的加入量為8-15g/L。

雜交泡桐的無(wú)菌芽培養(yǎng)基按配置成培養(yǎng)基后的配方可采用包括但不限于:

MS+6-BA1.0mg/L

MS+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L

所述培養(yǎng)基中,還須加入碳源,碳源采用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為30g/L,碳源采用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為40g/L。

注:

MS培養(yǎng)基:是Murashige和Skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的,其特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿(mǎn)足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。故這種培養(yǎng)基就用他們的名字來(lái)命名。

1/2MS培養(yǎng)基:是MS培養(yǎng)基中的鈣鹽和大量元素的量減半的培養(yǎng)基,也是常用的培養(yǎng)基。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA:6-芐氨基嘌呤,是一種細(xì)胞分裂素,英文通用名為6-Benzylaminopurine,分子式為C12H11N5。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA:1-Naphthaleneacetic acid,萘乙酸,簡(jiǎn)稱(chēng)NAA,是一種植物生長(zhǎng)素。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑吲哚丁酸IBA分子式為C12H13NO2,是一種植物生長(zhǎng)素。

步驟S1的培養(yǎng)溫度為15~30℃,光照強(qiáng)度2000~3000LUX,光照時(shí)間6~12小時(shí)/天;

S2、叢生芽培養(yǎng):

剪取長(zhǎng)出的無(wú)菌芽,接種到叢生芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)15~20天/代,可連續(xù)繼代4-5次,芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月,獲得大量的叢生芽;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1的培養(yǎng)基成分等同;

步驟S2的培養(yǎng)溫度為15~30℃,光照強(qiáng)度2000~3000LUX,光照時(shí)間6~12小時(shí)/天;

S3、壯苗、生根培養(yǎng):

待叢生芽長(zhǎng)到1-2cm長(zhǎng)后分苗接入新配置好的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)15~20天后,獲得健壯的生根苗;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1中培養(yǎng)基成分等同;

步驟S3的培養(yǎng)溫度為為15~30℃,光照強(qiáng)度2000~3000LUX,光照時(shí)間6~12小時(shí)/天;

S4、進(jìn)行煉苗移栽:

將步驟S3的得到的泡桐苗進(jìn)行移栽,步驟S4的培養(yǎng)條件為:煉苗基質(zhì)園土+泥炭質(zhì)量配比(1.5-2.5):1,遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰,濕度為60-70%。

實(shí)施例二

本發(fā)明一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法包括如下步驟:

S1、進(jìn)行無(wú)菌芽培養(yǎng):以雜交泡桐嫩莖或嫩芽為外植體,先體積比為75%的酒精浸泡消毒,后用無(wú)菌水清洗1次,再采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.15%HgCl2的溶液進(jìn)行滅菌后,經(jīng)無(wú)菌水清洗3-5次,然后接在無(wú)菌芽培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),培育16~18天后獲得無(wú)菌芽。

培養(yǎng)天數(shù)主要決定于雜交泡桐嫩芽的生長(zhǎng)速度,一般無(wú)菌芽生長(zhǎng)至1厘米左右為宜。當(dāng)然,無(wú)菌芽長(zhǎng)于1厘米(例如生長(zhǎng)至1.5厘米)或短于1厘米(例如生長(zhǎng)至0.5厘米),不影響本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)。

培養(yǎng)基包括植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS,配制方法為:以1/2MS和/或MS為基本培養(yǎng)基,加入適量植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和碳源配制而成,所述無(wú)菌芽培養(yǎng)基的pH6.8。

所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可采用包括但不限于6-BA、NAA或IBA同時(shí)使用6-BA和NAA,IBA。配置成培養(yǎng)基后6-BA的加入量為(0.1mg/L-2.0mg/L),NAA或IBA的加入量為(0.1mg/L-1.0mg/L)。

碳源可以采用包括但不限于蔗糖、葡萄糖。使用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為30g/L;使用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為40g/L。

培養(yǎng)基要加入凝固劑,可加入瓊脂粉、卡拉膠等,若選用瓊脂粉,瓊脂粉的加入量為6g/L;若選用卡拉膠,卡拉膠的加入量為15g/L。

雜交泡桐的無(wú)菌芽培養(yǎng)基按配置成培養(yǎng)基后的配方可采用包括但不限于:

MS+6-BA1.0mg/L

MS+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L

所述培養(yǎng)基中,還須加入碳源,碳源采用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為30g/L,碳源采用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為40g/L。

注:

MS培養(yǎng)基:是Murashige和Skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的,其特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿(mǎn)足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。故這種培養(yǎng)基就用他們的名字來(lái)命名。

1/2MS培養(yǎng)基:是MS培養(yǎng)基中的鈣鹽和大量元素的量減半的培養(yǎng)基,也是常用的培養(yǎng)基。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA:6-芐氨基嘌呤,是一種細(xì)胞分裂素,英文通用名為6-Benzylaminopurine,分子式為C12H11N5。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA:1-Naphthaleneacetic acid,萘乙酸,簡(jiǎn)稱(chēng)NAA,是一種植物生長(zhǎng)素。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑吲哚丁酸IBA分子式為C12H13NO2,是一種植物生長(zhǎng)素。

步驟S1的培養(yǎng)溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度2500~3000LUX,光照時(shí)間6~9小時(shí)/天;

S2、叢生芽培養(yǎng):

剪取長(zhǎng)出的無(wú)菌芽,接種到叢生芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)15~20天/代,可連續(xù)繼代4-5次,芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月,獲得大量的叢生芽;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1的培養(yǎng)基成分等同;

步驟S2的培養(yǎng)溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度2500~3000LUX,光照時(shí)間6~9小時(shí)/天;

S3、壯苗、生根培養(yǎng):

待叢生芽長(zhǎng)到1-2cm長(zhǎng)后分苗接入新配置好的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)15~20天后,獲得健壯的生根苗;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1中培養(yǎng)基成分等同;

步驟S3的培養(yǎng)溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度2500~3000LUX,光照時(shí)間6~9小時(shí)/天;

S4、進(jìn)行煉苗移栽:

將步驟S3的得到的泡桐苗進(jìn)行移栽,步驟S4的培養(yǎng)條件為:煉苗基質(zhì)園土+泥炭質(zhì)量配比2.5:1,遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰,濕度為62-65%。

實(shí)施例三

本發(fā)明一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法包括如下步驟:

S1、進(jìn)行無(wú)菌芽培養(yǎng):

將剛長(zhǎng)出嫩芽的雜交泡桐放入生化培養(yǎng)箱中,在38~40℃條件下培養(yǎng)6~8天后,剪取雜交泡桐嫩芽經(jīng)體積比70-80%酒精浸泡1min消毒和質(zhì)量比0.05-0.15%的HgCl2溶液滅菌后,經(jīng)無(wú)菌水洗3-5次后,切取1.8mm長(zhǎng)的芽尖接入培養(yǎng)基中培養(yǎng),嫩芽生長(zhǎng)后,再切取1.8mm長(zhǎng)的芽尖接入新配置好的培養(yǎng)基培養(yǎng),如此反復(fù)三次或三次以上,得到脫毒的無(wú)菌芽;因?yàn)榻?jīng)過(guò)高溫培養(yǎng)可殺死一定病毒,2mm長(zhǎng)的芽尖生長(zhǎng)點(diǎn)的輸導(dǎo)組織還未發(fā)育完整,不利于病毒傳導(dǎo),得到較好的脫毒無(wú)菌芽,這樣的脫毒小苗在種植過(guò)程中的優(yōu)勢(shì)是生長(zhǎng)較好較快。

培養(yǎng)基包括植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS,配制方法為:以1/2MS和/或MS為基本培養(yǎng)基,加入適量植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和碳源配制而成,所述培養(yǎng)基的pH6.5。

所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可采用包括但不限于6-BA、NAA或IBA同時(shí)使用6-BA和NAA,IBA。配置成培養(yǎng)基后6-BA的加入量為(0.1mg/L-2.0mg/L),NAA或IBA的加入量為(0.1mg/L-1.0mg/L)。

碳源可以采用包括但不限于蔗糖、葡萄糖。使用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為18g/L;使用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為25g/L。

培養(yǎng)基要加入凝固劑,可加入瓊脂粉、卡拉膠等,若選用瓊脂粉,瓊脂粉的加入量為5g/L;若選用卡拉膠,卡拉膠的加入量為8g/L。

雜交泡桐的無(wú)菌芽培養(yǎng)基按配置成培養(yǎng)基后的配方可采用包括但不限于:

MS+6-BA1.0mg/L

MS+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L

所述培養(yǎng)基中,還須加入碳源,碳源采用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為18g/L,碳源采用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為25g/L。

注:

MS培養(yǎng)基:是Murashige和Skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的,其特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿(mǎn)足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。故這種培養(yǎng)基就用他們的名字來(lái)命名。

1/2MS培養(yǎng)基:是MS培養(yǎng)基中的鈣鹽和大量元素的量減半的培養(yǎng)基,也是常用的培養(yǎng)基。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA:6-芐氨基嘌呤,是一種細(xì)胞分裂素,英文通用名為6-Benzylaminopurine,分子式為C12H11N5

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA:1-Naphthaleneacetic acid,萘乙酸,簡(jiǎn)稱(chēng)NAA,是一種植物生長(zhǎng)素。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑吲哚丁酸IBA分子式為C12H13NO2,是一種植物生長(zhǎng)素。

步驟S1的培養(yǎng)溫度為15~20℃,光照強(qiáng)度2000~2500LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S2、叢生芽培養(yǎng):

剪取長(zhǎng)出的無(wú)菌芽,接種到叢生芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)15~20天/代,可連續(xù)繼代4-5次,芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月,獲得大量的叢生芽;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1的培養(yǎng)基成分等同;

步驟S2的培養(yǎng)溫度為15~20℃,光照強(qiáng)度2000~2500LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S3、壯苗、生根培養(yǎng):

待叢生芽長(zhǎng)到1-2cm長(zhǎng)后分苗接入新配置好的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)15~20天后,獲得健壯的生根苗;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1中培養(yǎng)基成分等同;

步驟S3的培養(yǎng)溫度為15~20℃,光照強(qiáng)度2000~2500LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S4、進(jìn)行煉苗移栽:

將步驟S3的得到的泡桐苗進(jìn)行移栽,步驟S4的培養(yǎng)條件為:煉苗基質(zhì)園土+ 泥炭質(zhì)量配比1.5:1,遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰,濕度為60-65%。

實(shí)施例四

本發(fā)明一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法包括如下步驟:

S1、進(jìn)行無(wú)菌芽培養(yǎng):以雜交泡桐嫩莖或嫩芽為外植體,先體積比為80%的酒精消毒,后用無(wú)菌水清洗1次,再采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%HgCl2的溶液進(jìn)行滅菌后,經(jīng)無(wú)菌水清洗3-5次,然后接在無(wú)菌芽培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),培育14~15天后獲得無(wú)菌芽。

培養(yǎng)天數(shù)主要決定于雜交泡桐嫩芽的生長(zhǎng)速度,一般無(wú)菌芽生長(zhǎng)至1厘米左右為宜。當(dāng)然,無(wú)菌芽長(zhǎng)于1厘米(例如生長(zhǎng)至1.5厘米)或短于1厘米(例如生長(zhǎng)至0.5厘米),不影響本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)。

培養(yǎng)基包括植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS,配制方法為:以1/2MS和/或MS為基本培養(yǎng)基,加入適量植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和碳源配制而成,所述無(wú)菌芽培養(yǎng)基的pH7.2。

所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可采用包括但不限于6-BA、NAA或IBA同時(shí)使用6-BA和NAA,IBA。配置成培養(yǎng)基后6-BA的加入量為(0.1mg/L-2.0mg/L),NAA或IBA的加入量為(0.1mg/L-1.0mg/L)。

碳源可以采用包括但不限于蔗糖、葡萄糖。使用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為20g/L;使用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為30g/L。

培養(yǎng)基要加入凝固劑,可加入瓊脂粉、卡拉膠等,若選用瓊脂粉,瓊脂粉的加入量為6g/L;若選用卡拉膠,卡拉膠的加入量為10g/L。

雜交泡桐的無(wú)菌芽培養(yǎng)基按配置成培養(yǎng)基后的配方可采用包括但不限于:

MS+6-BA1.0mg/L

MS+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L

所述培養(yǎng)基中,還須加入碳源,碳源采用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為20g/L,碳源采用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為30g/L。

注:

MS培養(yǎng)基:是Murashige和Skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的,其特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿(mǎn)足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。故這種培養(yǎng)基就用他們的名字來(lái)命名。

1/2MS培養(yǎng)基:是MS培養(yǎng)基中的鈣鹽和大量元素的量減半的培養(yǎng)基,也是常用的培養(yǎng)基。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA:6-芐氨基嘌呤,是一種細(xì)胞分裂素,英文通用名為6-Benzylaminopurine,分子式為C12H11N5。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA:1-Naphthaleneacetic acid,萘乙酸,簡(jiǎn)稱(chēng)NAA,是一種植物生長(zhǎng)素。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑吲哚丁酸IBA分子式為C12H13NO2,是一種植物生長(zhǎng)素;

步驟S1的培養(yǎng)溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度2500~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S2、叢生芽培養(yǎng):

剪取長(zhǎng)出的無(wú)菌芽,接種到叢生芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)15~20天/代,可連續(xù)繼代4-5次,芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月,獲得大量的叢生芽;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1的培養(yǎng)基成分等同;

步驟S2的培養(yǎng)溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度2500~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S3、壯苗、生根培養(yǎng):

待叢生芽長(zhǎng)到1-2cm長(zhǎng)后分苗接入新配置好的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)15~20天后,獲得健壯的生根苗;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1中培養(yǎng)基成分等同;

步驟S3的培養(yǎng)溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度2500~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S4、進(jìn)行煉苗移栽:

步驟S4的培養(yǎng)條件為:煉苗基質(zhì)園土+泥炭質(zhì)量配比2:1,遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰,濕度為67-69%。

實(shí)施例五

本發(fā)明一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法包括如下步驟:

S1、進(jìn)行無(wú)菌芽培養(yǎng):以雜交泡桐嫩莖或嫩芽為外植體,先體積比為70%的酒精消毒,后用無(wú)菌水清洗1次,再采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.15%HgCl2的溶液進(jìn)行滅菌后,經(jīng)無(wú)菌水清洗3-5次,然后接在無(wú)菌芽培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),培育16~18天后獲得無(wú)菌芽。

培養(yǎng)天數(shù)主要決定于雜交泡桐嫩芽的生長(zhǎng)速度,一般無(wú)菌芽生長(zhǎng)至1厘米左右為宜。當(dāng)然,無(wú)菌芽長(zhǎng)于1厘米(例如生長(zhǎng)至1.5厘米)或短于1厘米(例如生長(zhǎng)至0.5厘米),不影響本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)。

培養(yǎng)基包括植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS,配制方法為:以1/2MS和/或MS為基本培養(yǎng)基,加入適量植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和碳源配制而成,所述無(wú)菌芽培養(yǎng)基的pH7.0。

所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可采用包括但不限于6-BA、NAA或IBA同時(shí)使用6-BA和NAA,IBA。配置成培養(yǎng)基后6-BA的加入量為(0.1mg/L-2.0mg/L),NAA或IBA的加入量為(0.1mg/L-1.0mg/L)。

碳源可以采用包括但不限于蔗糖、葡萄糖。使用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為25g/L;使用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為35g/L。

培養(yǎng)基要加入凝固劑,可加入瓊脂粉、卡拉膠等,若選用瓊脂粉,瓊脂粉的加入量為5.5g/L;若選用卡拉膠,卡拉膠的加入量為13g/L。

雜交泡桐的無(wú)菌芽培養(yǎng)基按配置成培養(yǎng)基后的配方可采用包括但不限于:

MS+6-BA1.0mg/L

MS+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L

注:

MS培養(yǎng)基:是Murashige和Skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的,其特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿(mǎn)足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。故這種培養(yǎng)基就用他們的名字來(lái)命名。

1/2MS培養(yǎng)基:是MS培養(yǎng)基中的鈣鹽和大量元素的量減半的培養(yǎng)基,也是常用的培養(yǎng)基。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA:6-芐氨基嘌呤,是一種細(xì)胞分裂素,英文通用名為6-Benzylaminopurine,分子式為C12H11N5。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA:1-Naphthaleneacetic acid,萘乙酸,簡(jiǎn)稱(chēng)NAA,是一種植物生長(zhǎng)素。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑吲哚丁酸IBA分子式為C12H13NO2,是一種植物生長(zhǎng)素;

步驟S1的培養(yǎng)溫度為23~27℃,光照強(qiáng)度2800~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S2、叢生芽培養(yǎng):

剪取長(zhǎng)出的無(wú)菌芽,接種到叢生芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)15~20天/代,可連續(xù)繼代4-5次,芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月,獲得大量的叢生芽;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1的培養(yǎng)基成分等同;

步驟S2的培養(yǎng)溫度為23~27℃,光照強(qiáng)度2800~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S3、壯苗、生根培養(yǎng):

待叢生芽長(zhǎng)到1-2cm長(zhǎng)后分苗接入新配置好的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)15~20天后,獲得健壯的生根苗;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1中培養(yǎng)基成分等同;

步驟S3的培養(yǎng)溫度為23~27℃,光照強(qiáng)度2800~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S4、進(jìn)行煉苗移栽:

步驟S4的培養(yǎng)條件為:煉苗基質(zhì)園土+泥炭質(zhì)量配比2.5:1,遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰,濕度為66-70%。

實(shí)施例六

本發(fā)明一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法包括如下步驟:

S1、進(jìn)行無(wú)菌芽培養(yǎng):以雜交泡桐嫩莖或嫩芽為外植體,先體積比為75%的酒精消毒,后用無(wú)菌水清洗1次,再采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.15%HgCl2的溶液進(jìn)行滅菌后,經(jīng)無(wú)菌水清洗3-5次,然后接在無(wú)菌芽培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),培育16~18天后獲得無(wú)菌芽。

培養(yǎng)天數(shù)主要決定于雜交泡桐嫩芽的生長(zhǎng)速度,一般無(wú)菌芽生長(zhǎng)至1厘米左右為宜。當(dāng)然,無(wú)菌芽長(zhǎng)于1厘米(例如生長(zhǎng)至1.5厘米)或短于1厘米(例如生長(zhǎng)至0.5厘米),不影響本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)。

培養(yǎng)基包括植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS,配制方法為:以1/2MS和/或MS為基本培養(yǎng)基,加入適量植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和碳源配制而成,所述無(wú)菌芽培養(yǎng)基的pH7.2。

所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可采用包括但不限于6-BA、NAA或IBA同時(shí)使用6-BA和NAA,IBA。配置成培養(yǎng)基后6-BA的加入量為(0.1mg/L-2.0mg/L),NAA或IBA的加入量為(0.1mg/L-1.0mg/L)。

碳源可以采用包括但不限于蔗糖、葡萄糖。使用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為30g/L;使用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為40g/L。

培養(yǎng)基要加入凝固劑,可加入瓊脂粉、卡拉膠等,若選用瓊脂粉,瓊脂粉的加入量為6g/L;若選用卡拉膠,卡拉膠的加入量為15g/L。

雜交泡桐的無(wú)菌芽培養(yǎng)基按配置成培養(yǎng)基后的配方可采用包括但不限于:

MS+6-BA1.0mg/L

MS+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L

所述培養(yǎng)基中,還須加入碳源,碳源采用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為30g/L,碳源采用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為40g/L。

注:

MS培養(yǎng)基:是Murashige和Skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的,其特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿(mǎn)足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。故這種培養(yǎng)基就用他們的名字來(lái)命名。

1/2MS培養(yǎng)基:是MS培養(yǎng)基中的鈣鹽和大量元素的量減半的培養(yǎng)基,也是常用的培養(yǎng)基。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA:6-芐氨基嘌呤,是一種細(xì)胞分裂素,英文通用名為6-Benzylaminopurine,分子式為C12H11N5

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA:1-Naphthaleneacetic acid,萘乙酸,簡(jiǎn)稱(chēng)NAA,是一種植物生長(zhǎng)素。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑吲哚丁酸IBA分子式為C12H13NO2,是一種植物生長(zhǎng)素;

步驟S1的培養(yǎng)溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度2500~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S2、叢生芽培養(yǎng):

剪取長(zhǎng)出的無(wú)菌芽,接種到叢生芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)15~20天/代,可連續(xù)繼代4-5次,芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月,獲得大量的叢生芽;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1的培養(yǎng)基成分等同;

步驟S2的培養(yǎng)溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度2500~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S3、壯苗、生根培養(yǎng):

待叢生芽長(zhǎng)到1-2cm長(zhǎng)后分苗接入新配置好的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)15~20天后,獲得健壯的生根苗;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1中培養(yǎng)基成分等同;

步驟S3的培養(yǎng)溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度2500~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S4、進(jìn)行煉苗移栽:

步驟S4的培養(yǎng)條件為:煉苗基質(zhì)園土+泥炭質(zhì)量配比2.5:1,遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰,濕度為66-70%。

實(shí)施例七

本發(fā)明一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法包括如下步驟:

S1、進(jìn)行無(wú)菌芽培養(yǎng):以雜交泡桐嫩莖或嫩芽為外植體,先體積比為78%的酒精消毒,后用無(wú)菌水清洗1次,再采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.13%HgCl2的溶液進(jìn)行滅菌后,經(jīng)無(wú)菌水清洗3-5次,然后接在無(wú)菌芽培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),培育16~18天后獲得無(wú)菌芽。

培養(yǎng)天數(shù)主要決定于雜交泡桐嫩芽的生長(zhǎng)速度,一般無(wú)菌芽生長(zhǎng)至1厘米左右為宜。當(dāng)然,無(wú)菌芽長(zhǎng)于1厘米(例如生長(zhǎng)至1.5厘米)或短于1厘米(例如生長(zhǎng)至0.5厘米),不影響本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)。

培養(yǎng)基包括植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS,配制方法為:以1/2MS和/或MS為基本培養(yǎng)基,加入適量植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和碳源配制而成,所述無(wú)菌芽培養(yǎng)基的pH6.8。

所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可采用包括但不限于6-BA、NAA或IBA同時(shí)使用6-BA和NAA,IBA。配置成培養(yǎng)基后6-BA的加入量為(0.1mg/L-2.0mg/L),NAA或IBA的加入量為(0.1mg/L-1.0mg/L)。

碳源可以采用包括但不限于蔗糖、葡萄糖。使用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為28g/L;使用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后濃度為38g/L。

培養(yǎng)基要加入凝固劑,可加入瓊脂粉、卡拉膠等,若選用瓊脂粉,瓊脂粉的加入量為6g/L;若選用卡拉膠,卡拉膠的加入量為15g/L。

雜交泡桐的無(wú)菌芽培養(yǎng)基按配置成培養(yǎng)基后的配方可采用包括但不限于:

MS+6-BA1.0mg/L

MS+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

1/2MS或MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L

所述培養(yǎng)基中,還須加入碳源,碳源采用蔗糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為28g/L,碳源采用葡萄糖時(shí),配置成培養(yǎng)基后加入量為38g/L。

注:

MS培養(yǎng)基:是Murashige和Skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的,其特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿(mǎn)足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。故這種培養(yǎng)基就用他們的名字來(lái)命名。

1/2MS培養(yǎng)基:是MS培養(yǎng)基中的鈣鹽和大量元素的量減半的培養(yǎng)基,也是常用的培養(yǎng)基。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA:6-芐氨基嘌呤,是一種細(xì)胞分裂素,英文通用名為6-Benzylaminopurine,分子式為C12H11N5。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA:1-Naphthaleneacetic acid,萘乙酸,簡(jiǎn)稱(chēng)NAA,是一種植物生長(zhǎng)素。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑吲哚丁酸IBA分子式為C12H13NO2,是一種植物生長(zhǎng)素。

S2、叢生芽培養(yǎng):

剪取長(zhǎng)出的無(wú)菌芽,接種到叢生芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)15~20天/代,可連續(xù)繼代4-5次,芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月,獲得大量的叢生芽;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1的培養(yǎng)基成分等同;

步驟S2的培養(yǎng)溫度為28~30℃,光照強(qiáng)度2800~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S3、壯苗、生根培養(yǎng):

待叢生芽長(zhǎng)到1-2cm長(zhǎng)后分苗接入新配置好的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)15~20天后,獲得健壯的生根苗;所述培養(yǎng)基成分與步驟S1中培養(yǎng)基成分等同;

步驟S3的培養(yǎng)溫度為28~30℃,光照強(qiáng)度2800~3000LUX,光照時(shí)間10~12小時(shí)/天;

S4、進(jìn)行煉苗移栽:

將步驟S3的得到的泡桐苗進(jìn)行移栽,步驟S4的培養(yǎng)條件為:煉苗基質(zhì)園土+泥炭質(zhì)量配比1.8:1,遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰,濕度為66-70%。

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