1.一種雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于,包括如下步驟:
S1、無菌芽培養(yǎng):
以雜交泡桐嫩莖或嫩芽為外植體,先用酒精浸泡消毒,然后用無菌水清洗1次,再采用HgCl2溶液浸泡進行滅菌后,經(jīng)無菌水清洗3-5次,然后植入新配置好的培養(yǎng)基中培養(yǎng)中進行培養(yǎng)12~18天,培養(yǎng)的溫度為15~30℃,光照強度2000~3000LUX,光照時間6~12小時/天;
所述培養(yǎng)基成分包括植物生長調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS;
S2、叢生芽培養(yǎng):
剪取長出的無菌芽,接種到新配置好的與步驟S1等同成分的培養(yǎng)基上培養(yǎng);所述培養(yǎng)的溫度為15~30℃,光照強度2000~3000LUX,光照時間6~12小時/天;
S3、壯苗、生根培養(yǎng):
待叢生芽長到1-2cm長后分瓶培養(yǎng),用新配置好的與步驟S1等同成分的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),得到泡桐生根的健壯苗;所述壯苗、生根培養(yǎng)的溫度為15~30℃,光照強度2000~3000LUX,光照時間6~12小時/天;
S4、煉苗移栽:
將步驟S3得到的泡桐生根的健壯苗移栽至大田煉苗,所述煉苗采用的基質(zhì)為園土和泥炭混合而成,并對煉苗基質(zhì)用遮陰網(wǎng)進行遮陰。
2.如權(quán)利要求1所述的雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于,還可以通過將剛長出1-2.5mm長嫩芽的雜交泡桐放入生化培養(yǎng)箱中,在38~40℃條件下培養(yǎng)6~8天后,剪取1.5-1.8mm雜交泡桐嫩芽先經(jīng)酒精浸泡消毒、后用無菌水清洗1次、再用HgCl2溶液浸泡滅菌后、經(jīng)無菌水洗3-5次后,切取1.8-2.2mm長的芽尖接入新配置好的培養(yǎng)基中培養(yǎng),嫩芽生長2.5mm長后,再切取1.8-2.2mm長的芽尖接入培養(yǎng)基中培養(yǎng),反復三次或三次以上,得到脫毒的無菌芽,所述培養(yǎng)基中培養(yǎng)條件是溫度為15~30℃,光照強度2000~3000LUX,光照時間6~12小時/天。
3.如權(quán)利要求1或2所述的雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于,所述使用的酒精體積分數(shù)為70%~80%,所采用的HgCl2溶液質(zhì)量分數(shù)為0.05%~0.15%。
4.如權(quán)利要求1所述的雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟S1-S3中的培養(yǎng)基中的植物生長調(diào)節(jié)劑、碳源、1/2MS和/或MS的配制方法為:以1/2MS和/或MS為基本培養(yǎng)基,加入適量植物生長調(diào)節(jié)劑和碳源配制而成;所述培養(yǎng)基的pH為6.5~7.2。
5.如權(quán)利要求1所述的雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于所述步驟S1、S2、S3中的培養(yǎng)基的植物生長調(diào)節(jié)劑為6-BA和/或NAA和/或IBA,配置成培養(yǎng)基后所述6-BA濃度為0.1mg/L-2.0mg/L,NAA濃度為0.1mg/L-1.0mg/L,IBA濃度為0.1mg/L-1.0mg/L。
6.如權(quán)利要求1所述的雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于所述步驟S1、S2、S3中的培養(yǎng)基的還需要加入凝固劑,可加入瓊脂粉或卡拉膠,若選用瓊脂粉,瓊脂粉的加入量為5-6g/L;若選用卡拉膠,卡拉膠的加入量為8-15g/L。
7.如權(quán)利要求1所述的雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于所述步驟S1、S2、S3中的培養(yǎng)基pH為6.8,培養(yǎng)溫度為25±2℃,光照強度為2800~3000LUX,光照時間10~12小時/天。
8.如權(quán)利要求1所述的雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于所述步驟S2中剪取長出的無菌芽的長度1-2cm,所述步驟S2的叢生芽培養(yǎng)的生長速度為15~20天/代,連續(xù)培養(yǎng)繼代4-5次,所述叢生芽的芽增殖系數(shù)為10~14.8倍/月。
9.如權(quán)利要求1所述的雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于所述碳源為蔗糖或葡萄糖,使用蔗糖時配置成的培養(yǎng)基蔗糖濃度為18~30g/L,使用葡萄糖時配置成的培養(yǎng)基葡萄糖濃度為25~40g/L。
10.如權(quán)利要求1所述的雜交泡桐苗培養(yǎng)方法,其特征在于所述步驟S4的煉苗基質(zhì)中園土和泥炭質(zhì)量配比為(1.5~2.5):1,煉苗區(qū)濕度為60-70%。