1.一種GHR基因敲除純合香豬的選育方法,其特征在于:包括如下步驟:
1)父母本的選擇:將香豬利用鋅指核酸酶基因組編輯技術(shù)對(duì)生長(zhǎng)激素受體基因GHR進(jìn)行修飾敲除,獲得父本;以從江香豬作為母本;
2)F1代的選育:將父本與母本進(jìn)行雜交,獲得F1代,對(duì)F1代的血液樣品進(jìn)行DNA提取、PCR擴(kuò)增、測(cè)序,選留F1中測(cè)序結(jié)果為陽(yáng)性雜合子的群體;
3)F2代的選育:將F1代選留的群體進(jìn)行群內(nèi)雜交,獲得F2代,對(duì)F2代的血液樣品進(jìn)行DNA提取、PCR擴(kuò)增、測(cè)序后,選留出測(cè)序結(jié)果中缺失了4bp的堿基的群體,即獲得GHR基因敲除純合香豬。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的GHR基因敲除純合香豬的選育方法,其特征在于:用于PCR擴(kuò)增GHR的引物序列為:上游引物:5’
-AAGCGGTGTCTATGTGCTGATTCTC-3’,
下游引物:5’-TCAGTGGCTAGACTATATGATGTTG-3’。