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一種綿羊顆粒凍精的制作?保存一體化裝置及其應(yīng)用方法與流程

文檔序號:11880961閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置,其特征在于它由冷凍氟板、冷凍支架、冷凍托架和保存提漏四部分組成;

所述冷凍氟板:邊長5cm、厚度0.1cm的正方形,冷凍氟板的四角分別設(shè)置直徑0.2cm的穿孔(1),穿孔(1)的中心距離邊距1cm,冷凍氟板的中央平均分布16個直徑為0.25cm的半球型冷凍槽(2);冷凍氟板厚度為0.1cm,底部設(shè)置高度0.1cm的底座(3);半球型冷凍槽(2)與冷凍氟板邊間、半球型冷凍槽(2)之間覆蓋單面膠紙(4);

冷凍支架:支架鐵芯(5)高20cm,四根支架鐵芯(5)分別從冷凍氟板的穿孔(1)穿過;支架鐵芯(5)最高點記為第0cm,在第18cm處焊接固定裝置;

冷凍托架:托架(6)高8cm,邊長4cm,四根托架(6)的頂端分別設(shè)置支架插槽(7),底端設(shè)置微型腳托(8);

冷凍提漏:提漏(9)高20cm,邊長6cm,底部密封;提漏提手(10)總長度50cm,提漏提手(10)的底部10cm的長度用于焊接在提漏(9)外側(cè)面中間位置,其余40cm長度高出提漏(9),并在提漏提手(10)的頂端設(shè)置掛鉤(11)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置,其特征在于所述半球型冷凍槽(2)用于滴定待冷凍的精液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置,其特征在于所述冷凍氟板的底座(3)用于防止冷凍過程中相鄰的兩塊冷凍氟板大面積接觸而產(chǎn)生粘連。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置,其特征在于所述單面膠紙(4)用于記錄精液信息。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置,其特征在于所述掛鉤(11)用于固定在液氮罐口。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置,其特征在于所述固定裝置用于固定安裝冷凍氟板,冷凍氟板可依次疊加安裝。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置,其特征在于所述支架插槽(7)用于支架鐵芯(5)的插拔。

8.如權(quán)利要求1所述一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置的應(yīng)用方法,其特征在于它按以下步驟進行:

一、利用假陰道方法收集綿羊精液,然后用預(yù)熱至40℃的冷凍稀釋液進行2倍的稀釋;

二、冷凍:將步驟一稀釋后的綿羊精液樣品裹8-10層紗布并置于4℃冰箱中平衡2h;平衡過程中,在泡沫盒中注入6cm高度的液氮,把冷凍托架放置于泡沫盒子中央,然后把支架鐵芯(5)插入支架插槽(7);

在第一塊冷凍氟板的單面膠紙(4)上標記待冷凍精液信息,用鑷子夾著第一塊冷凍氟板穿過支架鐵芯(5)固定于18cm處的固定裝置,此位置距離液氮面4cm,預(yù)冷3-5min后,用250μL移液器在每個半球型冷凍槽(2)中滴入0.1mL平衡后的精液;

在第二塊冷凍氟板的單面膠紙(4)上標記待冷凍精液信息,置于第一塊冷凍氟板上;預(yù)冷3-5min后,用250μL移液器在每個半球型冷凍槽(2)中滴入0.1mL平衡后的精液,重復(fù)操作至放入第5塊氟板后,添加液氮,重新校對液氮面與待滴定冷凍氟板高度至4cm,重復(fù)滴入精液疊加冷凍氟板的步驟至距離支架鐵芯(5)頂端1cm處結(jié)束,液氮熏蒸5min,然后用大鑷子把帶有冷凍氟板的冷凍支架從冷凍托架中提出,放入裝滿液氮的冷凍提漏中,提漏掛置于裝滿液氮的罐口;

三、解凍:在液氮中提出冷凍提漏,上提冷凍支架,然后用鑷子捏取凍精顆粒,在空氣中停留20s,平行的浸入40℃解凍液中10s,搖動至融化,完成解凍;

其中步驟一中冷凍稀釋液由94mL基礎(chǔ)稀釋液和6mL甘油組成;基礎(chǔ)稀釋液按體積比80:20由基礎(chǔ)液和卵黃組成,所述基礎(chǔ)液由3.2g葡萄糖、3.2g檸檬酸鈉、10IU青霉素和10IU鏈霉素溶于100mL超純水制成;

步驟三中解凍液按體積比80:20由基礎(chǔ)液和卵黃組成,所述基礎(chǔ)液由3.2g葡萄糖、3.2g檸檬酸鈉、10IU青霉素和10IU鏈霉素溶于100mL超純水制成。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置的應(yīng)用方法,其特征在于步驟二中每一塊使用的冷凍氟板的單面膠紙(4)上均要標記待冷凍精液信息;標記待冷凍精液信息為公羊品種、公羊耳標號和冷凍日期。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種綿羊顆粒凍精的制作-保存一體化裝置的應(yīng)用方法,其特征在于步驟三解凍液中精子的終濃度為原精稀釋6倍。

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