本發(fā)明涉及抗菌劑。

背景技術(shù)：

蜂蜜不僅可供食用，而且還可發(fā)揮其抗菌活性而被用于各種用途中。例如，正在研究含有蜂蜜的創(chuàng)傷治療用組合物、化妝品用組合物等(專利文獻1、2)。

松紅梅(Leptospermum scoparium)是主要生長于新西蘭的桃金娘科木本植物。蜂蜜中，來源于松紅梅的蜂蜜具有特別高的抗菌性是已知的，其被用于牙周炎治療用藥劑等醫(yī)療用途(專利文獻3)。

現(xiàn)有技術(shù)文獻

專利文獻

專利文獻1：日本特表2003-516357號公報

專利文獻2：日本特開2003-63984號公報

專利文獻3：日本特開2007-277210號公報

技術(shù)實現(xiàn)要素：

發(fā)明要解決的課題

蜂蜜自古以來被用作食用，因此即使攝取也沒有問題，還可作為抗菌劑而用于各種用途中。來源于松紅梅的蜂蜜由于具有高抗菌活性而為人所知，其主要對于金黃色葡萄球菌顯示高抗菌活性，但對于其他菌的抗菌活性尚不能說是充分的。

本發(fā)明的目的在于提供以蜂蜜作為有效成分的、具有優(yōu)異的抗菌活性的新型抗菌劑。

用于解決課題的手段

本申請的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)來源于歐亞櫟(Quercus hartwissiana)的蜂蜜具有非常優(yōu)異的抗菌活性。本發(fā)明提供含有蜂蜜作為有效成分的抗菌劑，所述蜂蜜以歐亞櫟為蜜源。

上述抗菌劑對于選自由金黃色葡萄球菌、耐藥性金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌及大腸桿菌組成的組中的至少1種具有抗菌活性。

發(fā)明的效果

本發(fā)明涉及的抗菌劑具有優(yōu)異的抗菌活性。

具體實施方式

本發(fā)明的抗菌劑含有以歐亞櫟為蜜源的蜂蜜。所謂以歐亞櫟為蜜源的蜂蜜，詳細而言，是指以歐亞櫟的花蜜或樹液、寄生于歐亞櫟的昆蟲的分泌液、或者它們的組合為蜜源的蜂蜜。歐亞櫟是主要天然生長于歐洲至黑海周邊、及亞洲局部的桃金娘科櫟屬木本植物。對于蜂蜜的蜜源而言，例如，可通過對蜂蜜中所含花粉的形態(tài)特征的顯微鏡觀察分析、對花粉中含有的DNA的序列信息的分析等來推定。

以歐亞櫟為蜜源的蜂蜜可通過以歐亞櫟為蜜源飼養(yǎng)蜜蜂、并利用已知的方法采集蜂蜜而得到。上述蜂蜜優(yōu)選僅以歐亞櫟為蜜源。另一方面，并不完全排除其他植物等作為蜜源而混入的情況，上述蜂蜜只要是實質(zhì)上以歐亞櫟為蜜源的蜂蜜即可。例如，通過將蜜蜂的巢箱設(shè)置在歐亞櫟的生長區(qū)域內(nèi)，可使蜂蜜的主要蜜源為歐亞櫟。此外，例如，利用在溫室等密閉空間內(nèi)使蜜蜂的巢箱與歐亞櫟植被共存的方法等，可使蜜蜂的采蜜范圍內(nèi)全部被歐亞櫟占據(jù)。

上述蜂蜜可以是采集后的原蜜，也可以是實施了蛋白質(zhì)、蠟、污物、巢渣等的除去、過濾等精制處理、殺菌、干燥、濃縮等處理后的蜂蜜。為了采集蜂蜜而利用的蜜蜂的種類沒有特別限制。

本申請發(fā)明的抗菌劑雖然將以歐亞櫟為蜜源的蜂蜜作為有效成分，但也可以進一步含有其他種類的蜂蜜。對于抗菌劑中的以歐亞櫟為蜜源的蜂蜜的含量而言，例如可以為抗菌劑固態(tài)成分中的20質(zhì)量％以上，優(yōu)選為60質(zhì)量％以上?？咕鷦┲械囊詺W亞櫟為蜜源的蜂蜜的含量的上限沒有特別限制，例如可以為抗菌劑固態(tài)成分中的100質(zhì)量％。

抗菌劑可以進一步包含除蜂蜜以外的其他已知的具有抗菌活性的成分。其他具有抗菌活性的成分優(yōu)選為能夠攝取的天然抗菌成分，例如殼多糖(chitin)、脫乙酰殼多糖(chitosan)、兒茶素(catechin)等?？咕鷦┯糜诜强诜z取的用途時，作為其他具有抗菌活性的成分，可含有有機系抗菌成分、無機系抗菌成分等。

本實施方式涉及的抗菌劑具有優(yōu)異的抗菌活性?？咕钚允侵敢种萍毦姆敝车幕钚浴Ｗ鳛轱@示抗菌活性的對象的菌沒有特別限制，但本實施方式涉及的抗菌劑優(yōu)選對于選自由金黃色葡萄球菌、耐藥性金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌及大腸桿菌組成的組中的至少1種具有抗菌活性，更優(yōu)選對于金黃色葡萄球菌、耐藥性金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌及大腸桿菌全部具有抗菌活性。本實施方式涉及的抗菌劑尤其對于大腸桿菌及綠膿桿菌具有高的抗菌活性。雖然作為抗菌活性高的蜂蜜而已知的松紅梅蜂蜜對于金黃色葡萄球菌顯示抗菌活性是已知的，但本實施方式涉及的抗菌劑在對于上述4種菌全部具有高的抗菌活性方面是有利的。

本實施方式涉及的抗菌劑的抗菌活性非常高，對于各種菌均具有與作為抗菌活性高的蜂蜜而已知的松紅梅蜂蜜同等或其以上的抗菌活性。作為慣例，松紅梅蜂蜜的抗菌活性的強度可由1kg蜂蜜中的甲基乙二醛(MGO)的mg量、或者對于金黃色葡萄球菌顯示與蜂蜜同等的抗菌活性的苯酚水溶液的濃度等各種數(shù)值表示。較之例如甲基乙二醛濃度至少為300mg/kg、450mg/kg或790mg/kg的市售的松紅梅蜂蜜而言，本實施方式涉及的抗菌劑具有更高的抗菌活性。對于蜂蜜中的甲基乙二醛濃度而言，可以將例如0.05％(w/v)鄰苯二胺水溶液作為溶劑，使用HPLC進行測定。對于本實施方式涉及的抗菌劑而言，例如，可制成對于選自由金黃色葡萄球菌、耐藥性金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌及大腸桿菌組成的組中的1種的抗菌活性至少高于甲基乙二醛濃度為450mg/kg的松紅梅蜂蜜的抗菌劑，并可制成對于大腸桿菌及/或綠膿桿菌的抗菌活性至少高于甲基乙二醛濃度為790mg/kg的松紅梅蜂蜜的抗菌劑。

本實施方式涉及的抗菌劑對于金黃色葡萄球菌的抗菌活性以苯酚濃度換算值計優(yōu)選為4.0質(zhì)量％以上，更優(yōu)選為5.0質(zhì)量％以上。上述抗菌劑對于大腸桿菌的抗菌活性以最小抑菌濃度計優(yōu)選為180mg/ml以下，更優(yōu)選為120mg/ml以下，進一步優(yōu)選為80mg/ml以下，特別優(yōu)選為60mg/ml以下。上述抗菌劑對于耐藥性金黃色葡萄球菌的抗菌活性以最小抑菌濃度計優(yōu)選為120mg/ml以下，更優(yōu)選為80mg/ml以下，進一步優(yōu)選為60mg/ml以下。上述抗菌劑對于綠膿桿菌的抗菌活性優(yōu)選為180mg/ml以下，更優(yōu)選為120mg/ml以下，進一步優(yōu)選為90mg/ml以下。

本實施方式涉及的抗菌劑可以僅由作為有效成分的以歐亞櫟為蜜源的蜂蜜形成，只要不妨礙抗菌效果，則也可以含有其他成分。作為其他成分，例如，可舉出藥學上允許的添加劑(賦形劑、粘合劑、潤滑劑、崩解劑、乳化劑、表面活性劑、基劑、助溶劑、懸浮劑等)等。

本實施方式涉及的抗菌劑可以是固體、液體、糊劑等任意的形狀，也可以是片劑(包括無包衣片、糖衣片、泡騰片、薄膜包衣片、咀嚼片、錠劑等)、膠囊劑、丸劑、粉末劑(散劑)、細粒劑、顆粒劑、液劑、懸濁液、乳濁液、糖漿、糊劑、注射劑(包含在使用時配合到蒸餾水或氨基酸輸注液、電解質(zhì)輸注液等輸注液中而制備成液劑的情況)、噴霧劑等形態(tài)。對于以上各種制劑而言，例如，可通過將蜂蜜與其他成分混合并成型為上述劑型而制備。

本實施方式涉及的抗菌劑可用于食品、醫(yī)藥用途等。

本實施方式涉及的抗菌劑可與其他食品原料組合，作為含有上述抗菌劑的食品組合物而利用。食品組合物包括動物(包括人類)能夠攝取的所有食品組合物。由于本實施方式涉及的抗菌劑具有優(yōu)異的抗菌活性，因此，通過使食品組合物含有上述抗菌劑，能夠制成保存性優(yōu)異的食品組合物。

根據(jù)需要，可在食品組合物中配合礦物質(zhì)類、維生素類、類黃酮類、醌類、多酚類、氨基酸、核酸、必需脂肪酸、清涼劑、粘合劑、甜味劑、崩解劑、潤滑劑、著色劑、香料、穩(wěn)定劑、防腐劑、緩釋調(diào)節(jié)劑、表面活性劑、溶解劑、潤濕劑等。

對于食品組合物的種類沒有特別限定，例如，可舉出飲料類(咖啡、果汁、茶飲料這樣的清涼飲料、乳飲料、乳酸菌飲料、酸奶飲料、碳酸飲料、日本酒、洋酒、果酒、蜂蜜酒等酒等)；涂抹醬類(卡士達醬(custard cream)等)；糊類(果泥等)；西點類(巧克力、面包圈、餡餅(pie)、泡芙、口香糖、果凍(jelly)、糖果、曲奇、蛋糕、布丁等)；日式點心類(糯米團、年糕、有餡面點(日文：饅頭)、長崎式蜂蜜蛋糕(日文：カステラ)、Anmitsu式甜點、羊羹等)；冰點類(冰淇淋、冰棒、冰霜(sherbet)等)；食品類(咖喱、牛肉飯、粥、味噌湯、湯、肉醬(meat sauce)、意大利面、腌菜、果醬、蜂蜜、蜂王漿、蜂膠等)；調(diào)味料類(調(diào)味汁、拌飯調(diào)味料(日文：ふりかけ)、鮮味調(diào)味料、湯料等)等。上述抗菌劑也可制成僅包含抗菌劑的食品組合物。

對食品組合物的制法沒有特別限定，可適當?shù)匕凑找阎姆椒ㄟM行。例如，可以通過向食品組合物的制造工序中的中間產(chǎn)品或最終產(chǎn)品中混合上述蜂蜜等方式，來獲得用于上述目的的食品組合物。

另外，食品組合物也可以用作具有抗菌活性的健康食品、功能性食品、營養(yǎng)輔助食品、補充劑或特定保健用食品。對于作為補充劑使用時的施予單元形態(tài)而言，沒有特別限定，可進行適當選擇，可舉出例如片劑、膠囊劑、顆粒劑、液劑、散劑等。

本實施方式涉及的抗菌劑可以以醫(yī)藥(特別是口服醫(yī)藥)的形式利用。在制備成醫(yī)藥組合物時，可以將上述抗菌劑與醫(yī)藥品中允許的無毒性的載體、稀釋劑或賦形劑一同制備成片劑(包括無包衣片、糖衣片、泡騰片、薄膜包衣片、咀嚼片、錠劑等)、膠囊劑、丸劑、粉末劑(散劑)、細粒劑、顆粒劑、液劑、懸濁液、乳濁液、糖漿、糊劑、注射劑(包含在使用時配合到蒸餾水或氨基酸輸注液、電解質(zhì)輸注液等輸注液中而制備成液劑的情況)等形態(tài)，從而制成醫(yī)藥用制劑。

實施例

在以下的實施例中對本發(fā)明更詳細地進行說明。但是，本發(fā)明不受以下實施例等的任何限定。

(試驗例1)

將稀釋成50w/v％的蜂蜜添加至用于培養(yǎng)菌的培養(yǎng)基中，使用根據(jù)形成的抑菌圈的大小來比較抗菌活性的紙片擴散法，針對各種蜂蜜對于金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus subsp.aureus(NBRC13276))的抗菌活性，利用換算成苯酚水溶液濃度而算出的方法來進行確認。具體而言，在已固化的含有金黃色葡萄球菌的米勒-海頓(Mueller Hinton)II瓊脂培養(yǎng)基的中心部開設(shè)直徑為8mm的孔，向該孔中接種濃度為50％的測試樣品(蜂蜜)，并于37℃培養(yǎng)18小時。培養(yǎng)后，測定抑菌圈的直徑。利用使用苯酚作為測試樣品的情況下的苯酚濃度與抑菌圈直徑的相關(guān)關(guān)系，算出了測試樣品(蜂蜜)的苯酚濃度換算值(質(zhì)量％)。作為蜂蜜，使用了以歐亞櫟為蜜源的蜂蜜(從ALEXANDER&SUN株式會社購得)(實施例1)、1kg蜂蜜中的甲基乙二醛濃度分別為302.3mg/kg(商品名：MARUKA HONEY UMF10+，Comvita Japan株式會社)、458.5mg/kg(商品名：松紅梅蜜，雙日食料株式會社)、790.9mg/kg(商品名：STRONG MARUKA HONEY，株式會社TCN)的松紅梅蜂蜜(比較例1～3)。對于各蜂蜜中的甲基乙二醛濃度，將0.05％(w/v)鄰苯二胺水溶液作為溶劑，使用HPLC來測定。將結(jié)果示于表1。苯酚濃度換算值的數(shù)值越大，意味著抗菌活性越高。

(試驗例2)

利用最小抑菌濃度(MIC)法，確認各種蜂蜜對于大腸桿菌(Escherichia coli(ATCC 10536))、耐藥性(耐青霉素)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus(ATCC 6538P))、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa(ATCC 43504))的抗菌活性。具體而言，以使得測試樣品(蜂蜜)的濃度成為53～900mg/mL的方式用CAMHB培養(yǎng)基稀釋，并接種各種菌液。于36℃培養(yǎng)20小時，然后對各種菌的生長狀態(tài)進行確認，并評價最小抑菌濃度。將結(jié)果示于表1。最小抑菌濃度的數(shù)值越低，意味著抗菌活性越高。

[表1]

抗菌活性試驗的結(jié)果如下：對于以歐亞櫟為蜜源的蜂蜜而言，與甲基乙二醛濃度為790.9mg/kg的松紅梅蜂蜜相比，其對于大腸桿菌及綠膿桿菌顯示出更高的抗菌活性，對于耐藥性金黃色葡萄球菌顯示出同等的抗菌活性；對于金黃色葡萄球菌顯示出較之甲基乙二醛濃度為458.5mg/kg的松紅梅蜂蜜而言更高的抗菌活性。