一種光葉菝葜組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種光葉菝葜組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括光葉菝葜無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根誘導(dǎo)、煉苗移栽等步驟，本發(fā)明采用組織培養(yǎng)的方法可以大批量的獲得光葉菝葜幼苗，生產(chǎn)可控，品質(zhì)優(yōu)良，為光葉菝葜的開發(fā)和利用提供基礎(chǔ)。
【專利說明】 一種光葉菝葜組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及光葉菝葜組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]光葉菝葜,corbularia Kunth,百合科,攀援灌木,產(chǎn)甘肅(南部)和長江流域以南各省區(qū)，直到臺灣、海南島和云南，越南、泰國和印度也有分布，生于海拔1800米以下的林中、灌叢下、河岸或山谷中，也見于林緣與疏林中。根莖中含落新婦甙，黃杞甙，3 -O-咖啡酰莽草酸，莽草酸，阿魏酸，谷留醇，葡萄糖。葉中含槲皮素，山奈酚，味微甘，性平，功效清熱利濕，消腫散結(jié)，壯筋骨，治療腹瀉、月經(jīng)不調(diào)、風(fēng)濕痹痛、淋癥、白濁、白帶、瘰疬，目前對其利用主要是野外采集，開發(fā)利用率低。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種光葉菝葜植株再生的快速繁殖方法，本發(fā)明采用組織培養(yǎng)的方法可以大批量的獲得光葉菝葜幼苗，生產(chǎn)可控，品質(zhì)優(yōu)良，為光葉菝葜的開發(fā)和利用提供基礎(chǔ)。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實(shí)現(xiàn)的:
取光葉菝葜幼嫩的葉片，流水沖洗15min，超凈工作臺上次氯酸鈉消毒處理9min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的光葉菝葜幼嫩葉片先放入-1°C的冰箱中進(jìn)行低溫預(yù)處理再接入 ER+IBA0.8mg/L+ZT3mg/L+S-33070.3-0.5mg/L+0.7% 瓊脂 +30g/L 蔗糖的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，PH5.85，暗光照培養(yǎng)，溫度26±2°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基ER+IBA0.5mg/L+ZT0.8mg/L+0.02mg/LTDZ進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.85，光照 27001x，溫度 26±2°C，分化出來的芽苗接入 1/4MS+ S-33070.7-0.9mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖25g/L，瓊脂7g/L，pH5.85，光強(qiáng)ΙΟΟΟΟΙχ，光照時(shí)間16h/d，溫度26±2°C，待試管苗長約5cm，根長約2cm時(shí)，放入高壓滅菌過的沙壤土鋪設(shè)的基質(zhì)中，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔10天噴施3000倍的水合霉素，溫度控制在28 0C，濕度90%，一個月后統(tǒng)計(jì)成活率。
[0005]采用本發(fā)明制備的光葉菝葜成活率高，周期短，產(chǎn)量大，能耗少，利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取光葉菝葜幼嫩的葉片，流水沖洗15min，超凈工作臺上次氯酸鈉消毒處理9min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的光葉菝葜幼嫩葉片先放入-1°C的冰箱中進(jìn)行低溫預(yù)處理再接入 ER+IBA0.8mg/L+ZT3mg/L+S-33070.3mg/L+0.7% 瓊脂 +30g/L 蔗糖的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，PH5.85，暗光照培養(yǎng)，溫度26±2°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基ER+IBA0.5mg/L+ZT0.8mg/L+0.02mg/LTDZ進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.85，光照27001x，溫度26±2°C，分化出來的芽苗接入1/4MS+S-33070.7mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖25g/L，瓊脂7g/L，pH5.85，光強(qiáng)ΙΟΟΟΟΙχ，光照時(shí)間16h/d，溫度26±2°C，待試管苗長約5cm，根長約2cm時(shí)，放入高壓滅菌過的沙壤土鋪設(shè)的基質(zhì)中，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔10天噴施3000倍的水合霉素，溫度控制在28°C，濕度90%，一個月后統(tǒng)計(jì)成活率，成活率85%。
[0008]實(shí)施例2
取光葉菝葜幼嫩的葉片，流水沖洗15min，超凈工作臺上次氯酸鈉消毒處理9min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的光葉菝葜幼嫩葉片先放入-1°C的冰箱中進(jìn)行低溫預(yù)處理再接入 ER+IBA0.8mg/L+ZT3mg/L+S-33070.5mg/L+0.7% 瓊脂 +30g/L 蔗糖的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，PH5.85，暗光照培養(yǎng)，溫度26±2°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基ER+IBA0.5mg/L+ZT0.8mg/L+0.02mg/LTDZ進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.85，光照27001x，溫度26±2°C，分化出來的芽苗接入1/4MS+S-33070.9mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖25g/L，瓊脂7g/L，pH5.85，光強(qiáng)ΙΟΟΟΟΙχ，光照時(shí)間16h/d，溫度26±2°C，待試管苗長約5cm，根長約2cm時(shí)，放入高壓滅菌過的沙壤土鋪設(shè)的基質(zhì)中，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔10天噴施3000倍的水合霉素，溫度控制在28°C，濕度90%，一個月后統(tǒng)計(jì)成活率，成活率87%。
[0009]實(shí)施例3
取光葉菝葜幼嫩的葉片，流水沖洗15min，超凈工作臺上次氯酸鈉消毒處理9min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的光葉菝葜幼嫩葉片先放入-1°C的冰箱中進(jìn)行低溫預(yù)處理再接入 ER+IBA0.8mg/L+ZT3mg/L+S-33070.4mg/L+0.7% 瓊脂 +30g/L 蔗糖的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，P H 5.8 5，暗光照培養(yǎng)，溫度2 6 ± 2 °C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基ER+IBA0.5mg/L+ZT0.8mg/L+0.02mg/LTDZ進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.85，光照27001x，溫度26±2°C，分化出來的芽苗接入1/4MS+S-33070.8mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖25g/L，瓊脂7g/L，pH5.85，光強(qiáng)ΙΟΟΟΟΙχ，光照時(shí)間16h/d，溫度26±2°C，待試管苗長約5cm，根長約2cm時(shí)，放入高壓滅菌過的沙壤土鋪設(shè)的基質(zhì)中，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔10天噴施3000倍的水合霉素，溫度控制在28°C，濕度90%，一個月后統(tǒng)計(jì)成活率，成活率91%。
【權(quán)利要求】
1.一種光葉菝葜組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括光葉菝葜無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根誘導(dǎo)、煉苗移栽，其主要步驟如下: (1)取光葉菝葜幼嫩的葉片，對其進(jìn)行消毒處理； (2)取步驟(I)消毒處理過的光葉菝葜幼嫩葉片接入ER+IBA0.8mg/L+ZT3mg/L+S-33070.3-0.5mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，pH5.85，暗光照培養(yǎng)，溫度26±2°C ； (3)取步驟(2)誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基ER+IBA0.5mg/L+ZT0.8mg/L+0.02mg/LTDZ進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L,瓊脂7g/L，ρΗ5.85，光照27001χ,溫度26±2°C ； (4)取步驟(3)分化出來的芽苗接入1/4MS+S-33070.7-0.9mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖25g/L，瓊脂7g/L，ρΗ5.85，光強(qiáng)ΙΟΟΟΟΙχ，光照時(shí)間16h/d，溫度26±2°C ； (5)取步驟(4)的試管苗進(jìn)行煉苗移栽。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種光葉菝葜組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述光葉菝葜無菌葉片的獲得為，取光葉菝葜幼嫩的葉片，流水沖洗15min，超凈工作臺上次氯酸鈉消毒處理9min，無菌水沖洗5次。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種光葉菝葜組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述消毒處理過的光葉菝葜幼嫩葉片先放入-1 V的冰箱中進(jìn)行低溫預(yù)處理，可以提高出愈率。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種光葉菝葜組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(5)中光葉菝葜煉苗移栽的方法為待試管苗長約5cm，根長約2cm時(shí)，放入高壓滅菌過的沙壤土鋪設(shè)的基質(zhì)中，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔10天噴施3000倍的水合霉素，溫度控制在28°C，濕度90%，一個月后統(tǒng)計(jì)成活率。
【文檔編號】A01H4/00GK104221881SQ201410540656
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年10月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月14日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司