一種木賊組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明研究了一種木賊組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括木賊無(wú)菌外植體的獲得、腋芽的誘導(dǎo)、腋芽的增值、生根誘導(dǎo)等步驟，本發(fā)明通過(guò)生產(chǎn)組培試管苗，繁殖速度快，繁殖系數(shù)高，大量快速的獲取木賊的無(wú)性繁殖體系，成為研究和應(yīng)用開(kāi)發(fā)中的現(xiàn)實(shí)問(wèn)題。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種木賊組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及木賊組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物栽培【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]Equisetum,木賊科,別稱(chēng):千峰草、挫草、筆頭草等,多年生常綠草本，高30?100厘米。根狀莖粗短，黑褐色，橫生地下，節(jié)上生黑褐色的根。地睛莖直立，單一或僅于基部分枝，直徑6-8毫米，中空，有節(jié)，表面灰綠色或黃綠色，有縱棱溝壑0-30條，粗糙。喜生于山坡林下陰濕處，易生河岸濕地、溪邊，或雜草地。主產(chǎn)于中國(guó)東北、華北、內(nèi)蒙古和長(zhǎng)江流域各省。藥用為木賊科植物木賊的全草，木賊味甘、苦，性平。歸肺、肝經(jīng)，具有疏散風(fēng)熱、明目退翳、止血的功效。木賊夏季采收，除去雜質(zhì)，曬干或陰干貯藏，藥用炮制:除去枯莖及殘根，噴淋清水，稍潤(rùn)，切段，干燥，切段。功能主治:疏風(fēng)散熱，解肌，退翳。治目生云翳，迎風(fēng)流淚，腸風(fēng)下血，血痢，脫肝，瘧疾，喉痛，癰腫。采用孢子繁殖:采下孢子后立即播于土壤表面，稍覆土保持濕度。分莖繁殖:將根莖切成3-6cm長(zhǎng)的節(jié)段，栽于土壤中，覆土
4-5cm，常澆水，很易生根成活。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種木賊組織培養(yǎng)的快繁方法，本發(fā)明通過(guò)生產(chǎn)組培試管苗，繁殖速度快，繁殖系數(shù)高，大量快速的獲取木賊的無(wú)性繁殖體系，成為研究和應(yīng)用開(kāi)發(fā)中的現(xiàn)實(shí)問(wèn)題。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)以下方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的:
取木賊幼嫩的枝芽，去掉多余葉片，在漂白液中浸泡5min，流水沖洗30min，超凈工作臺(tái)上1%溴水處理12min，無(wú)菌水沖洗5次，消毒處理過(guò)的木賊帶芽莖段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+ 桿菌肽 50mg/L+0.7% 瓊脂 +35g/L 蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，PH5.8，光照強(qiáng)度12001x，光期12h/d，溫度28°C，誘導(dǎo)出來(lái)的腋芽放入Η+ΖΤ0.3-0.5mg/L+IAA0.001-0.005mg/L+2iP0.02-0.lmg/L+0.7% 瓊脂 +35g/L 蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的繼代培養(yǎng)，附加蔗糖35g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，溫度28°C，將繼代后長(zhǎng)勢(shì)良好的叢生芽接種到HE+NAA0.01mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，25天一個(gè)周期，食用糖50g/L，瓊脂7g/L，溫度28°C，濕度75%，光照強(qiáng)度200001x，I個(gè)周期后統(tǒng)計(jì)生根率。
[0005]采用本發(fā)明制備的木賊生根率高，能耗少，品質(zhì)高。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取木賊幼嫩的枝芽，去掉多余葉片，在漂白液中浸泡5min，流水沖洗30min，超凈工作臺(tái)上1%溴水處理12min，無(wú)菌水沖洗5次，消毒處理過(guò)的木賊帶芽莖段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+桿菌肽50mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，PH5.8，光照強(qiáng)度12001x，光期12h/d，溫度28°C，誘導(dǎo)出來(lái)的腋芽放入H+ZT0.3mg/L+IAA0.001mg/L+2iP0.02mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的繼代培養(yǎng)，附加蔗糖35g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，溫度28°C，將繼代后長(zhǎng)勢(shì)良好的叢生芽接種到HE+NAA0.0lmg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，25天一個(gè)周期，食用糖50g/L，瓊脂7g/L，溫度28°C，濕度75%，光照強(qiáng)度200001x，I個(gè)周期后統(tǒng)計(jì)生根率，生根率90%。
[0008]實(shí)施例2
取木賊幼嫩的枝芽，去掉多余葉片，在漂白液中浸泡5min，流水沖洗30min，超凈工作臺(tái)上1%溴水處理12min，無(wú)菌水沖洗5次，消毒處理過(guò)的木賊帶芽莖段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+桿菌肽50mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，PH5.8，光照強(qiáng)度12001x，光期12h/d，溫度28°C，誘導(dǎo)出來(lái)的腋芽放入H+ZT0.5mg/L+IAA0.005mg/L+2iP0.lmg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的繼代培養(yǎng)，附加蔗糖35g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，溫度28°C，將繼代后長(zhǎng)勢(shì)良好的叢生芽接種到HE+NAA0.01mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，25天一個(gè)周期，食用糖50g/L，瓊脂7g/L，溫度28°C，濕度75%，光照強(qiáng)度200001x，I個(gè)周期后統(tǒng)計(jì)生根率，生根率90%。
[0009]實(shí)施例3
取木賊幼嫩的枝芽，去掉多余葉片，在漂白液中浸泡5min，流水沖洗30min，超凈工作臺(tái)上1%溴水處理12min，無(wú)菌水沖洗5次，消毒處理過(guò)的木賊帶芽莖段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+桿菌肽50mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，PH5.8，光照強(qiáng)度12001x，光期12h/d，溫度28°C，誘導(dǎo)出來(lái)的腋芽放入H+ZT0.4mg/L+IAA0.003mg/L+2iP0.05mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的繼代培養(yǎng)，附加蔗糖35g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，溫度28°C，將繼代后長(zhǎng)勢(shì)良好的叢生芽接種到HE+NAA0.01mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，25天一個(gè)周期，食用糖50g/L，瓊脂7g/L，溫度28°C，濕度75%，光照強(qiáng)度200001x，I個(gè)周期后統(tǒng)計(jì)生根率，生根率92%。
[0010]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)以下方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的:
取木賊幼嫩的枝芽，去掉多余葉片，在漂白液中浸泡5min，流水沖洗30min，超凈工作臺(tái)上1%溴水處理12min，無(wú)菌水沖洗5次，消毒處理過(guò)的木賊帶芽莖段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+ 桿菌肽 50mg/L+0.7% 瓊脂 +35g/L 蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，PH5.8，光照強(qiáng)度12001x，光期12h/d，溫度28°C，誘導(dǎo)出來(lái)的腋芽放入Η+ΖΤ0.3-0.5mg/L+IAA0.001-0.005mg/L+2iP0.02-0.lmg/L+0.7% 瓊脂 +35g/L 蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的繼代培養(yǎng)，附加蔗糖35g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，溫度28°C，將繼代后長(zhǎng)勢(shì)良好的叢生芽接種到HE+NAA0.01mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，25天一個(gè)周期，食用糖50g/L，瓊脂7g/L，溫度28°C，濕度75%，光照強(qiáng)度200001x，I個(gè)周期后統(tǒng)計(jì)生根率。
[0011]采用本發(fā)明制備的木賊生根率高，能耗少，品質(zhì)高。
[0012]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
【具體實(shí)施方式】
[0013]實(shí)施例1
取木賊幼嫩的枝芽，去掉多余葉片，在漂白液中浸泡5min，流水沖洗30min，超凈工作臺(tái)上1%溴水處理12min，無(wú)菌水沖洗5次，消毒處理過(guò)的木賊帶芽莖段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+桿菌肽50mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，PH5.8，光照強(qiáng)度12001x，光期12h/d，溫度28°C，誘導(dǎo)出來(lái)的腋芽放入H+ZT0.3mg/L+IAA0.001mg/L+2iP0.02mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的繼代培養(yǎng)，附加蔗糖35g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，溫度28°C，將繼代后長(zhǎng)勢(shì)良好的叢生芽接種到HE+NAA0.01mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，25天一個(gè)周期，食用糖50g/L，瓊脂7g/L，溫度28°C，濕度75%，光照強(qiáng)度200001x，I個(gè)周期后統(tǒng)計(jì)生根率，生根率90%。
[0014]實(shí)施例2
取木賊幼嫩的枝芽，去掉多余葉片，在漂白液中浸泡5min，流水沖洗30min，超凈工作臺(tái)上1%溴水處理12min，無(wú)菌水沖洗5次，消毒處理過(guò)的木賊帶芽莖段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+桿菌肽50mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，PH5.8，光照強(qiáng)度12001x，光期12h/d，溫度28°C，誘導(dǎo)出來(lái)的腋芽放入H+ZT0.5mg/L+IAA0.005mg/L+2iP0.lmg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的繼代培養(yǎng)，附加蔗糖35g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，溫度28°C，將繼代后長(zhǎng)勢(shì)良好的叢生芽接種到HE+NAA0.01mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，25天一個(gè)周期，食用糖50g/L，瓊脂7g/L，溫度28°C，濕度75%，光照強(qiáng)度200001x，I個(gè)周期后統(tǒng)計(jì)生根率，生根率90%。
[0015]實(shí)施例3
取木賊幼嫩的枝芽，去掉多余葉片，在漂白液中浸泡5min，流水沖洗30min，超凈工作臺(tái)上1%溴水處理12min，無(wú)菌水沖洗5次，消毒處理過(guò)的木賊帶芽莖段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+桿菌肽50mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，PH5.8，光照強(qiáng)度12001x，光期12h/d，溫度28°C，誘導(dǎo)出來(lái)的腋芽放入H+ZT0.4mg/L+IAA0.003mg/L+2iP0.05mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的繼代培養(yǎng)，附加蔗糖35g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，溫度28°C，將繼代后長(zhǎng)勢(shì)良好的叢生芽接種到HE+NAA0.01mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，25天一個(gè)周期，食用糖50g/L，瓊脂7g/L，溫度28°C，濕度75%，光照強(qiáng)度200001X，I個(gè)周期后統(tǒng)計(jì)生根率，生根率92%。
【權(quán)利要求】
1.一種木賊組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括木賊無(wú)菌外植體的獲得、腋芽的誘導(dǎo)、腋芽的增值、生根誘導(dǎo)，其主要步驟如下: (1)取木賊的帶芽莖段，對(duì)其進(jìn)行消毒處理； (2)取步驟(I)消毒處理過(guò)的木賊帶芽莖段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.0Olmg/L+TDZ0.02mg/L+桿菌肽50mg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，pH5.8，光照強(qiáng)度12001x，光期12h/d，溫度28°C ； (3)取步驟(2)誘導(dǎo)出來(lái)的腋芽放入Η+ΖΤ0.3-0.5mg/L+IAA0.001-0.005mg/L+2iP0.02-0.lmg/L+0.7%瓊脂+35g/L蔗糖培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的繼代培養(yǎng)，附加蔗糖35g/L，瓊脂 7g/L，ρΗ5.8，光照 30001χ，光期 14h/d，溫度 28 °C ； (4)取步驟(3)繼代后的叢生芽進(jìn)行生根誘導(dǎo)。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種木賊組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述木賊的獲得為，取木賊幼嫩的枝芽，去掉多余葉片，在漂白液中浸泡5min，流水沖洗30min，超凈工作臺(tái)上1%溴水處理12min，無(wú)菌水沖洗5次。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種木賊組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)中木賊生根誘導(dǎo)的方法為將繼代后長(zhǎng)勢(shì)良好的叢生芽接種到HE+NAA0.01mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，25天一個(gè)周期，食用糖50g/L，瓊脂7g/L，溫度28°C，濕度75%，光照強(qiáng)度200001x, I個(gè)周期后統(tǒng)計(jì)生根率。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104221879SQ201410540627
【公開(kāi)日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年10月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月14日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請(qǐng)人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司