一種預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的飼料添加劑及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的飼料添加劑及其應(yīng)用。本發(fā)明（1）在產(chǎn)蛋雞飼料中添加安全有效劑量的吡咯并喹啉醌和/或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯作為活性成分（2）飼料存放時(shí)采用內(nèi)襯（黑色）塑膜的避光編織袋包裝（3）飼喂時(shí)間4周以上。本發(fā)明的飼料添加劑應(yīng)用能夠提高由高能低蛋白日糧誘發(fā)的脂肪肝蛋雞的產(chǎn)蛋率、降低料蛋比、改善雞蛋品質(zhì)，抑制肝臟組織中肝細(xì)胞空泡樣變性和氣球樣變性，降低血液中甘油三酯和總膽固醇的含量，降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性。因此，吡咯并喹啉醌在預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的形成和發(fā)展中具有良好的應(yīng)用前景，具有經(jīng)濟(jì)效益。
【專利說(shuō)明】一種預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的飼料添加劑及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的飼料添加劑及其應(yīng)用，屬于畜牧養(yǎng)殖業(yè)中的飼料生產(chǎn)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]蛋雞脂肪肝綜合征(FLS )是由于營(yíng)養(yǎng)代謝障礙、內(nèi)分泌失調(diào)、脂肪代謝紊亂導(dǎo)致肝臟發(fā)生脂肪變性的一種蛋雞常見的營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病。它主要是脂肪在肝細(xì)胞內(nèi)過(guò)分堆積，從而影響肝臟的正常功能，嚴(yán)重的甚至引起肝細(xì)胞破裂，最終導(dǎo)致肝內(nèi)出血而死亡。肝臟是物質(zhì)代謝的核心器官，是僅次于大腦和心臟的機(jī)體重要器官，肝臟健康是維持機(jī)體正常代謝和健康的前提。保證肝臟健康對(duì)產(chǎn)蛋雞尤其關(guān)鍵。高產(chǎn)蛋雞由于幾乎每天要產(chǎn)I枚蛋，肝臟代謝負(fù)擔(dān)沉重，極易發(fā)生代謝性氧化損傷，其中高產(chǎn)蛋雞死亡的90%以上是由于肝臟破裂所致?；贾靖蔚碾u群很難出現(xiàn)產(chǎn)蛋高峰，產(chǎn)蛋率一般上升到85%左右，而后逐漸下降。近年來(lái)，隨著蛋雞養(yǎng)殖業(yè)的集約化、規(guī)模化的高效生產(chǎn)，該病的發(fā)生呈逐年升高的趨勢(shì)，在我國(guó)蛋雞場(chǎng)頻頻發(fā)生，占全部死亡雞的8%?10%，有的雞群發(fā)病率可高達(dá)30%，且雞群一旦患上該病，則需要很長(zhǎng)時(shí)間的治療，給蛋雞業(yè)帶來(lái)重大經(jīng)濟(jì)損失。采用營(yíng)養(yǎng)調(diào)控的途徑改善蛋雞肝臟健康是蛋雞業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展的重大技術(shù)需求。
[0003]蛋雞脂肪肝的臨床癥狀:此病高產(chǎn)籠養(yǎng)母雞多發(fā)，病雞多為肥胖、體重較大的蛋雞。急性病例會(huì)突然死亡，慢性病例常喜窩、站立不穩(wěn)。病雞冠髯、肉垂萎縮蒼白，有時(shí)發(fā)紺；腹部柔軟下垂有時(shí)可摸到大的肝臟。死雞剖檢可見皮下脂肪厚，腹內(nèi)脂肪大量沉積，內(nèi)臟器官被脂肪包被，肝臟腫大，色澤變黃，質(zhì)脆易碎，有油膩感，肝表面有條狀破裂紋和小出血點(diǎn)；膽囊腫大。
[0004]目前關(guān)于FLS的預(yù)防和治療的研究發(fā)現(xiàn)日糧中添加膽堿、維生素B12、維生素B6、生物素、殼聚糖、肉毒堿、甜菜堿、杜仲、二氫嘧啶等營(yíng)養(yǎng)素可以通過(guò)促進(jìn)脂蛋白代謝，減少或防止不飽和脂肪酸的氧化，達(dá)到減輕肝脂變的作用。然而，這些防治脂肪肝的添加劑尚不能取得令人不滿意的效果，目前關(guān)于脂肪肝的研究認(rèn)為，線粒體在脂肪肝的發(fā)生中具有重要作用，藥物通過(guò)直接作用于線粒體來(lái)發(fā)揮作用可能更有效。因此，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)新型安全有效的脂肪肝治療和預(yù)防藥物。
[0005]吡咯并喹啉醌(PQQ)是自然界中廣泛存在的一種營(yíng)養(yǎng)物，能與一系列細(xì)菌醌蛋白脫氫酶中非共價(jià)結(jié)合，是一種新型的類維生素，在動(dòng)植物和人體內(nèi)發(fā)揮著重要的作用。它的分子量是330道爾頓，其結(jié)構(gòu)式見圖1。PQQ是繼黃素核苷酸(FMN，F(xiàn)AD)和煙酰胺核苷酸(MAD，NADP)之后，在膜束縛的細(xì)菌脫氫酶中發(fā)現(xiàn)的第三種輔基。PQQ最先是從細(xì)菌中分出來(lái)的，隨后在動(dòng)、植物體內(nèi)也得到發(fā)現(xiàn)。日本科學(xué)家測(cè)定了 26種常見食物中的PQQ含量，發(fā)現(xiàn)I克食物中PQQ的含量在3.65?61納克不等。例如，蔬菜中歐芹、青椒，水果中的奇異果、木瓜，飲品中的綠茶、烏龍茶，以及人們常吃的豆腐中含量都約為30納克/克。美國(guó)研究人員檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，人乳中PQQ含量高達(dá)140?180納克/毫升。目前，科學(xué)界普遍認(rèn)為，動(dòng)物和人類腸道中雖然也有種類數(shù)量不等的細(xì)菌，但這些細(xì)菌都不能合成PQQ或合成量極少，根本無(wú)法滿足身體需要。因此，動(dòng)物和人類只能通過(guò)食物獲取PQQ。目前PQQ的生產(chǎn)主要有化學(xué)合成法和微生物合成法，兩者所產(chǎn)的PQQ在相同純度基礎(chǔ)上生理活性無(wú)差異。
[0006]PQQ是一種水溶性類維生素，生產(chǎn)中一般以鹽或酯的形式使用，但其發(fā)揮作用的根本仍是PQQ本身。目前關(guān)于PQQ的生理功研究發(fā)現(xiàn):PQQ可作為一種促生長(zhǎng)因子促進(jìn)小鼠的生長(zhǎng)和繁殖；作為抗氧化劑，自由基清除劑，PQQ可通過(guò)提高體內(nèi)抗氧化酶活性或直接中和自由基，減少線粒體內(nèi)ROS含量并能減少機(jī)體氧化損傷；作為一種促神經(jīng)生長(zhǎng)因子發(fā)揮作用，對(duì)神經(jīng)退行疾病、帕金森綜合癥等起到一定的治療作用；此外PQQ能促進(jìn)線粒體生成，提高線粒體內(nèi)酶的活性，活化線粒體功能。PQQ可維持細(xì)胞內(nèi)線粒體的動(dòng)態(tài)平衡，當(dāng)線粒體受損時(shí)，PQQ能通過(guò)激活線粒體合成PPAR-PGC-1 α通路，促進(jìn)線粒體快速合成；PQQ可通過(guò)提高線粒體內(nèi)檸檬酸合酶和細(xì)胞色素C氧化酶等活性，改善線粒體功能。在乙醇在體內(nèi)的代謝過(guò)程中，雖不能增加乙醇轉(zhuǎn)變成乙醛的速率，但可加快乙醛向乙酸的代謝。PQQ可作為一種護(hù)肝因子，對(duì)四氯化碳、乙醇胺等毒素引起的小鼠肝損傷起到一定的保護(hù)作用。本發(fā)明人前期研究發(fā)現(xiàn)，PQQ具有良好的降低蛋雞肝臟內(nèi)脂肪含量，減少肝損傷作用。
[0007]目前研究發(fā)現(xiàn)，肝細(xì)胞脂肪變性程度越嚴(yán)重，線粒體損傷越明顯。線粒體是肝臟脂肪酸β -氧化、三磷酸腺苷(ATP)形成及活性氧(ROS)形成的主要部位，也是ROS攻擊的首要靶點(diǎn)。肝細(xì)胞內(nèi)大量脂肪沉積，使其受自由基攻擊增加，線粒體受損，使細(xì)胞內(nèi)正常信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受阻，并導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡增加。脂肪型肝炎患者存在線粒體超微結(jié)構(gòu)損傷，線粒體腫脹、氧化呼吸復(fù)合體功能下降。線粒體內(nèi)過(guò)量游離脂肪酸的氧化是導(dǎo)致線粒體損傷的重要原因:一方面脂肪酸氧化產(chǎn)生的R0S，可引起線粒體膜脂質(zhì)過(guò)氧化同時(shí)促進(jìn)TNF-α生成，加劇線粒體損傷，增加線粒體膜通透性。另一方面ROS也能引起mtDNA堿基的氧化。
[0008]近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)脂肪肝病在某種程度上也是一種線粒體疾病，線粒體脂肪酸β氧化減少、氧化應(yīng)激和炎性細(xì)胞因子生成增加等所形成的惡性循環(huán)是脂肪肝發(fā)生的主要病理過(guò)程。人類臨床研究表明通過(guò)藥物或飲食緩解線粒體內(nèi)氧化應(yīng)激，改善線粒體功能，增加脂肪酸β_氧化等可達(dá)到減輕肝脂變的效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明的目的在于:根據(jù)本發(fā)明人前期研究發(fā)現(xiàn)，吡咯并喹啉醌具有良好的降低蛋雞肝臟內(nèi)脂肪含量、減少肝損傷作用這一特點(diǎn)，將其作為蛋雞的飼料添加劑運(yùn)用于蛋雞飼料中，以減少蛋雞肝臟脂肪變性、蛋雞脂肪肝的發(fā)生和預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征給養(yǎng)雞業(yè)帶來(lái)的重大經(jīng)濟(jì)損失。
[0010]本發(fā)明的實(shí)施方案是:
[0011]1.本發(fā)明涉及的添加劑含有(I)安全有效量的吡咯并喹啉醌和/或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或酯作為活性成分，活性成分含量為0.01%?0.8%，以及(2)藥學(xué)上可接受的載體。
[0012]2.該添加劑中所述藥物吡咯并喹啉醌或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的添加劑中的應(yīng)用。
[0013]3.該添加劑中所述藥物吡咯并喹啉醌或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯添加于蛋雞飼料中預(yù)防蛋雞脂肪肝中的應(yīng)用。
[0014]4.該添加劑中所述藥物吡咯并喹啉醌或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在制備減少蛋雞肝臟脂肪變性的藥物或飼料添加劑中的應(yīng)用。
[0015]本發(fā)明的具體實(shí)施方法
[0016]1.該添加劑含有:
[0017](I)安全有效量的吡咯并喹啉醌和/或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或酯作為活性成分，活性成分含量為0.01%?0.8%，用于本發(fā)明的PQQ可以是天然的、非天然的。較佳的PQQ可以是人工合成或微生物發(fā)酵制備的。
[0018](2)藥學(xué)上可接受的載體組合而成。
[0019]2.含本添加劑的蛋雞飼料制備
[0020]將吡咯并喹啉醌或其鹽、酯在避光的環(huán)境中與淀粉或纖維素等惰性稀釋劑混合，制成0.01?0.8% (質(zhì)量百分比)稀釋劑。配制蛋雞飼料時(shí)，將適量吡咯并喹啉醌或其鹽、酯稀釋劑首先添加于預(yù)混合飼料中，然后隨同其他飼料原料一起混合(使吡咯并喹啉醌在蛋雞飼料中的最終有效含量為0.08mg/kg?0.16mg/kg吡咯喹啉醌二鈉鹽當(dāng)量)。
[0021]3.含本添加劑的蛋雞飼料保存方法
[0022]含吡咯并喹啉醌的蛋雞飼料使用以下保藏方法，可取得較好的防治脂肪肝效果。采用內(nèi)襯(黑色)塑膜的避光編織袋包裝，存放于陰涼通風(fēng)處，隨喂隨拆。
[0023]4.含吡咯并喹啉醌的蛋雞飼料防治蛋雞脂肪肝效果的試驗(yàn)。
[0024]采用高能低蛋白日糧誘導(dǎo)建立蛋雞脂肪肝模型，通過(guò)對(duì)血脂含量、肝臟組織病理切片、產(chǎn)蛋雞性能以及雞蛋品質(zhì)等指標(biāo)的觀測(cè)，發(fā)現(xiàn)含吡咯并喹啉醌的飼料可顯著降低蛋雞血液脂質(zhì)含量，有效抑制肝細(xì)胞脂肪堆積，并提高產(chǎn)蛋率，表明該種飼料預(yù)防脂肪肝的效果確切可靠(詳見實(shí)施例部分的內(nèi)容)。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0025]圖1吡咯并喹啉醌(PQQ)和PQQ 二鈉鹽結(jié)構(gòu)式。
[0026]圖2各處理組動(dòng)物肝臟組織病理學(xué)觀察。其中:圖2-1為病理模型組；圖2-2為添加0.08mg/kgPQQ 二鈉鹽處理組；圖2-3為添加0.16mg/kgPQQ 二鈉鹽處理組。
[0027]本發(fā)明的積極意義
[0028]本發(fā)明涉及一種預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的飼料添加劑及其應(yīng)用。本發(fā)明(I)在產(chǎn)蛋雞飼料中添加安全有效劑量的吡咯并喹啉醌和/或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯作為活性成分(2)飼料存放時(shí)采用內(nèi)襯(黑色)塑膜的避光編織袋包裝(3)飼喂時(shí)間4周以上。本發(fā)明的飼料添加劑應(yīng)用能夠提高由高能低蛋白日糧誘發(fā)的脂肪肝蛋雞的產(chǎn)蛋率、降低料蛋t匕，抑制肝臟組織中肝細(xì)胞空泡樣變性和氣球樣變性，降低血液中甘油三酯和總膽固醇的含量，降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性。因此，吡咯并喹啉醌在預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的形成和發(fā)展中具有良好的應(yīng)用前景，具有經(jīng)濟(jì)效益。
[0029]實(shí)施例1
[0030]——含本發(fā)明添加劑的蛋雞飼料的配制
[0031]將吡咯并喹啉醌二鈉鹽(由上海醫(yī)學(xué)生命科學(xué)研究中心饋贈(zèng)，化學(xué)合成生產(chǎn)，純度99.9%)在避光的環(huán)境中與淀粉稀釋劑混合，制成0.01%稀釋劑。配制蛋雞飼料時(shí)，將適量吡咯并喹啉醌二鈉鹽稀釋劑(保證吡咯并喹啉醌二鈉鹽在蛋雞飼料中的最終含量為0.08mg/kg?0.16mg/kg)首先添加于預(yù)混合飼料中,然后隨同其他飼料原料一起混合。如配合飼料中吡咯并喹啉醌二鈉鹽的目標(biāo)添加劑量為0.08mg/kg，每噸配合飼料需要添加0.01%稀釋劑 800g。
[0032]將配制好的含吡咯并喹啉醌二鈉鹽的蛋雞飼料使用內(nèi)襯(黑色)塑膜的避光編織袋包裝，存放于陰涼通風(fēng)處，隨喂隨拆封。
[0033]實(shí)施例2
[0034]——含本發(fā)明添加劑的蛋雞飼料的配制
[0035]將吡咯并喹啉醌二鈉鹽(由上海醫(yī)學(xué)生命科學(xué)研究中心饋贈(zèng)，化學(xué)合成生產(chǎn)，純度99.9%)在避光的環(huán)境中與淀粉稀釋劑混合，制成0.8%稀釋劑。配制蛋雞飼料時(shí)，將適量吡咯并喹啉醌二鈉鹽稀釋劑(保證吡咯并喹啉醌二鈉鹽在蛋雞飼料中的最終含量為0.08mg/kg?0.16mg/kg)首先添加于預(yù)混合飼料中,然后隨同其他飼料原料一起混合。如配合飼料中吡咯并喹啉醌二鈉鹽的目標(biāo)添加劑量為0.08mg/kg,每噸配合飼料需要添加0.8%稀釋劑10g。
[0036]實(shí)施例3
[0037]用于本發(fā)明的PQQ可以是天然的、非天然的。較佳的PQQ可以是人工合成或微生物發(fā)酵制備的吡咯并喹啉醌和/或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或酯作為活性成分。
[0038]稀釋劑為藥學(xué)上可接受的載體。
[0039]實(shí)施例4
[0040]—含吡咯并喹啉醌蛋雞飼料防治脂肪肝功效試驗(yàn)
[0041]試驗(yàn)I——吡咯并喹啉醌對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響
[0042]選取30周齡海蘭褐蛋雞216只，隨機(jī)分為3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只雞。第I組為病理模型組，飼喂高能低蛋白日糧(代謝能12.75MJ/kg，粗蛋白13.0%);后2組在飼喂病理組日糧基礎(chǔ)上分別按質(zhì)量百分比0.08mg/kg、0.16mg/kg添加PQQ 二鈉鹽。PQQ 二鈉鹽由上海醫(yī)學(xué)生命科學(xué)研究中心饋贈(zèng)，化學(xué)合成生產(chǎn)。試驗(yàn)期8周。飼料存放時(shí)采用內(nèi)襯(黑色)塑膜的避光編織袋包裝。試驗(yàn)期間，每天以重復(fù)為單位記錄產(chǎn)蛋數(shù)和蛋重，并計(jì)算平均蛋重、產(chǎn)蛋量和產(chǎn)蛋率。每?jī)芍芤灾貜?fù)為單位計(jì)算耗料量和料蛋比(見表I)。
[0043]表IPQQ對(duì)脂肪肝蛋雞生產(chǎn)性能的影響
【權(quán)利要求】
1.一種預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的飼料添加劑，其特征在于該添加劑含有(I)安全有效量的吡咯并喹啉醌和/或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或酯作為活性成分，活性成分含量為0.01%~0.8%，以及(2)藥學(xué)上可接受的載體。
2.如權(quán)利要求1所述的一種預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于該添加劑中所述藥物吡咯并喹啉醌或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的添加劑中的用途。
3.如權(quán)利要求2所述的一種預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于該添加劑中所述藥物吡咯并喹啉醌或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯添加于蛋雞飼料中預(yù)防蛋雞脂肪肝中的應(yīng)用。
4.如權(quán)利要求2所述的一種預(yù)防蛋雞脂肪肝綜合征的飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于該添加劑中所述藥物吡咯并喹啉醌或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在制備減少蛋雞肝臟脂肪變性的藥物或飼料添加劑中的應(yīng)`用。
【文檔編號(hào)】A23K1/16GK103598484SQ201310629554
【公開日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2013年12月2日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月2日
【發(fā)明者】武書庚, 齊廣海, 趙芹, 張海軍, 岳洪源, 王晶 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所