專利名稱：地衣芽孢桿菌ts-01對(duì)蛋雞脂肪肝出血綜合征的預(yù)防作用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種地衣芽孢桿菌TS-01及其在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用，特別涉及地衣芽孢桿菌TS-Ol對(duì)蛋雞脂肪肝出血綜合征的預(yù)防作用。
背景技術(shù)：
蛋雞脂肪肝出血綜合征(FattyLiver Hemorrhagic Syndrome,FLHS)是一種營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病，常見于產(chǎn)蛋高峰期的籠養(yǎng)蛋雞。其典型特征是產(chǎn)蛋高峰期蛋雞群體死亡率的上升和產(chǎn)蛋率的突然下降。近年來，在養(yǎng)殖追求高效生產(chǎn)的情況下，該病的發(fā)生呈逐年升高的趨勢(shì)，給蛋雞養(yǎng)殖帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。蛋雞脂肪肝出血綜合征的產(chǎn)生是由多方面的原因造成的，包括營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境、遺傳、內(nèi)分泌和有毒物質(zhì)等。目前，對(duì)蛋雞脂肪肝出血綜合征的防治尚無理想的方法，因此尋找一種經(jīng)濟(jì)、安全、有效的防治方法是當(dāng)務(wù)之急。
近年來，動(dòng)物微生態(tài)制劑在畜禽生產(chǎn)中得到了廣泛的應(yīng)用。微生態(tài)制劑是由許多有益微生物及其代謝物構(gòu)成，可直接飼喂動(dòng)物，能夠在數(shù)量或種類上補(bǔ)充腸道內(nèi)減少或缺乏的有益微生物，調(diào)節(jié)或維持腸道內(nèi)微生態(tài)平衡。地衣芽孢桿菌作為農(nóng)業(yè)部規(guī)定允許使用的飼料級(jí)微生物添加劑之一，主要應(yīng)用于防病治病、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、促進(jìn)生長(zhǎng)、提高飼料利用率，從而達(dá)到提高畜禽生產(chǎn)性能之目的。有研究表明，地衣芽孢桿菌應(yīng)用于蛋雞生產(chǎn)中，可以降低血清中總膽固醇和總甘油三酯的水平。發(fā)明人受此啟示進(jìn)行研究，將其應(yīng)用范圍擴(kuò)大到預(yù)防蛋雞脂肪肝出血綜合征的發(fā)生領(lǐng)域。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供地衣芽孢桿菌TS-Ol的一種新的用途，特別是用地衣芽孢桿菌預(yù)防蛋雞脂肪肝出血綜合征的發(fā)生。
本發(fā)明的主要內(nèi)容是應(yīng)用微生物飼料添加劑地衣芽孢桿菌TS-Ol預(yù)防蛋雞脂肪肝出血綜合征。
本發(fā)明的有益效果是所述的菌株培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單、容易保存，易于工業(yè)化生產(chǎn)，對(duì)蛋雞脂肪肝出血綜合征有良好的預(yù)防效果，具 有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。
為證明本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)效果，下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 探討地衣芽孢桿菌TS-Ol對(duì)蛋雞脂肪肝出血綜合征的預(yù)防作用。
I材料和方法
1.1日糧與試劑
基礎(chǔ)日糧:玉米62. 00%，豆柏23. 70%，石粉9. 00%，食鹽O. 30%，預(yù)混料5. 00% (代謝能10. 74兆焦每千克，粗蛋白15.82%);處理日糧玉米61. 99%，豆柏23. 70%，石粉9. 00 %，食鹽O. 30 %，地衣芽孢桿菌0.01% (含地衣芽孢桿菌7. 60 X IO9每千克配合日糧)，預(yù)混料5. 00% (代謝能10. 74兆焦每千克，粗蛋白15. 82%)。β -雌二醇(純度> 98% )、玉米油均為sigma(中國(guó)，上海)產(chǎn)品，地衣芽孢桿菌7. 60X IOltl菌落單位每克(菌種為中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所飼料添加劑研究室制備，并經(jīng)過中國(guó)科學(xué)院微生物研究所鑒定為地衣芽孢桿菌，保藏于中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所飼料添加劑研究室，保藏號(hào)為TS-01)。
1. 2試驗(yàn)動(dòng)物及分組
40只54周齡海蘭褐蛋雞，隨機(jī)平均分為4個(gè)處理，每個(gè)處理10只雞，每個(gè)重復(fù)I 只雞。對(duì)照組和處理一飼喂基礎(chǔ)日糧，處理二和處理三飼喂處理日糧。均自由采食和飲水， 單籠飼養(yǎng)。6周后，對(duì)照組和處理二肌肉注射玉米油，處理一和處理三肌肉注射β -雌二醇， 試驗(yàn)第42、45、48、51和54天各肌肉注射一次，共注射5次，每次肌肉注射劑量為玉米油O. 5 毫升每千克體重，β -雌二醇7. 5毫克每O. 5毫升玉米油每千克體重。試驗(yàn)期共8周。
1. 3檢測(cè)指標(biāo)與方法
剖檢變化剖檢所有試驗(yàn)雞，觀察肝臟顏色、肝臟是否增大及出血狀況。
肝脂脂肪含量測(cè)定分別取同一部位肝臟樣品約30克左右，置于冷凍干燥管中_80°C冷凍保存用于肝臟脂肪含量的測(cè)定。將_80°C下保存的肝臟樣品于常溫下解凍，用生理鹽水清洗外周血潰，濾紙吸干后勻漿，電子天平稱取2克左右的肝臟，記錄肝濕重，濾紙包好在105°C下烘干至恒重，用電子天平稱出抽提前的濾紙樣包重，放入索氏抽提器中用乙醚提取12小時(shí)，控制乙醚的回流速度在10次每分鐘，然后再在105°C烘箱中烘至恒重， 稱出其脫脂后濾紙樣包重，脂肪含量的計(jì)算公式如下肝臟脂肪含量(％)=(脫脂前樣包重-脫脂后樣包重)/ (脫脂前樣包重-絕干濾紙重)X 100 %
肝臟出血指數(shù)根據(jù)該試驗(yàn)中的肝臟出血情況，將出血程度劃分為4級(jí)0 =沒有出血，1 =有少數(shù)出血點(diǎn)或斑，2 =有明顯的出血區(qū)或血腫,3 =有廣泛的局灶性出血區(qū)或大出血。2級(jí)以上判為脂肪肝出血綜合征雞，其余為亞臨床雞。Vx
肝臟出血指數(shù)=k，x =出血級(jí)數(shù)，N =每組雞數(shù)。N
脂肪肝發(fā)生率的測(cè)定將肝臟脂肪含量25%以上且出血指數(shù)2級(jí)以上判為脂肪肝出血綜合征雞，其余為亞臨床雞。
肝臟組織切片大脂滴性脂肪變性觀察肝細(xì)胞內(nèi)是否存在大脂滴空泡。
1. 4理據(jù)處理
采用SAS8. 2軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，檢驗(yàn)方法為單因素方差分析，均值的多重比較用 Duncan法進(jìn)行，以P < O. 05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。
2試驗(yàn)結(jié)果
2.1剖檢變化
剖檢可見正常肝無出血點(diǎn)及彌散性出血區(qū)。異常肝出血多見于肝臟邊緣，尤其是右肝下緣和左肝右邊緣，多呈彌散性出血區(qū)或出血斑，出血肝多呈棕褐色、質(zhì)脆、面泥狀。
大體剖檢變化如圖所示。
2. 2肝臟出血指數(shù)雞和肝臟脂肪含量
由表I可知，肝臟出血指數(shù)在處理二和處理三組分別比處理一組降低了 66. 47% 和52. 1% (P < O. 05);肝臟脂肪含量在處理三組比處理一組降低了 26. 40% (P < O. 05)； 脂肪肝出血綜合征發(fā)生率處理二和處理三分別比處理一降低了 50%%和50%。
表I地衣芽孢桿菌TS-Ol對(duì)蛋雞脂肪肝出血綜合征預(yù)防作用試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)TS-Ol在預(yù)防蛋雞脂肪肝出血綜合征中的應(yīng)用，其特征在于在蛋雞配合飼料中加入地衣芽孢桿菌。
2.根據(jù)權(quán)力要求I所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)TS-Ol在預(yù)防蛋雞脂肪肝出血綜合征中的應(yīng)用，其特征在于地衣芽孢桿菌在蛋雞配合飼料中含量為O. 01%。
3.根據(jù)權(quán)力要求I或2所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis) TS-01,其特征是地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)TS-01粉劑。
4.根據(jù)權(quán)力要求3所示的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis) TS-O粉劑I,其特征在于活菌7.6Χ1(Γ菌落單位每克。
5.一種如權(quán)力要求I所述蛋雞，其特征在于50周齡后產(chǎn)蛋雞。
全文摘要
本發(fā)明涉及一株地衣芽孢桿菌及其新的用途，特別涉及地衣芽孢桿菌對(duì)蛋雞脂肪肝出血綜合征中的預(yù)防作用。該地衣芽孢桿菌為地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)TS-01。本發(fā)明公開的地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)TS-01可直接應(yīng)用于蛋雞飼料生產(chǎn)。本發(fā)明試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，地衣芽孢桿菌TS-01可以有效預(yù)防蛋雞脂肪肝出血綜合征的發(fā)生。
文檔編號(hào)A23K1/16GK102987100SQ201110247179
公開日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2011年8月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月26日
發(fā)明者董曉芳, 佟建明, 徐鵬 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所