專(zhuān)利名稱(chēng)：一種防治肉種雞脂肪肝出血綜合征的中藥組方的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中獸醫(yī)領(lǐng)域，尤其涉及的是一種防治肉種雞脂肪肝出血綜合征的中藥組方。
背景技術(shù)：
肉種雞是專(zhuān)門(mén)培育后代的雞，是和異性一起交配的，主要用來(lái)生產(chǎn)種蛋后進(jìn)行孵化出肉雞苗。傳統(tǒng)的種雞飼養(yǎng)師通過(guò)地面平養(yǎng)或者網(wǎng)架平養(yǎng)的方式，而目前肉種雞多采用籠養(yǎng)的模式。肉種雞的籠養(yǎng)，雖然節(jié)約墊料，提高了飼養(yǎng)密度，節(jié)省了飼料，而且還減少了種雞生產(chǎn)中最容易發(fā)生的疾病感染和傳播，但也存在著很多不足之處。由于肉種雞本身體型大，在籠內(nèi)飼養(yǎng)活動(dòng)量少，從而造成體質(zhì)下降，對(duì)疾病的抵抗力減弱，出現(xiàn)雞只過(guò)肥而引起脂肪肝出血綜合癥。目前發(fā)病率通常為雞群的1%_2%，有的高達(dá)5%-7%，甚至15%以上；死亡率一般低于5%，有時(shí)高達(dá)20%-60%，還能導(dǎo)致肉種雞群的產(chǎn)蛋量下降，影響產(chǎn)蛋高峰期 的出現(xiàn)，影響種蛋的入孵率，目前己成為許多國(guó)家養(yǎng)殖業(yè)的常見(jiàn)病。大量研究資料顯示，導(dǎo)致肉種雞肪肝綜合征的發(fā)生主要因素包括食用高能低蛋白飼料；飼料中脂肪(動(dòng)物油脂、油渣)含量過(guò)多；某些親脂肪性因子如蛋氨酸、膽堿、生物素、維生素等營(yíng)養(yǎng)素缺乏；機(jī)體內(nèi)激素失調(diào)如血液中兒茶酚胺等水平偏低；雞舍溫過(guò)高、飲水不足、光照過(guò)少、更換飼料、通風(fēng)不良、受驚等應(yīng)激因素；飼料霉敗產(chǎn)生的真菌毒素(黃曲霉毒素、紅青霉毒素等)也可致肝機(jī)能損傷而引起脂肪沉積于肝臟而發(fā)?。换\養(yǎng)肉種雞因采食量大，活動(dòng)空間缺少，運(yùn)動(dòng)不足，能量消耗少更容易發(fā)生脂肪過(guò)度沉積。其特征病變?yōu)楦闻K腫大，肝呈黃色油膩狀，表面有出血點(diǎn)和白色壞死灶，質(zhì)脆易碎，用刀切時(shí)，在刀的表面有脂滴附著；突然死亡的雞只肝包膜破裂，表面和腹腔內(nèi)有血塊；皮下、腹腔臟器表面、骨盆腔及輸卵管周?chē)写罅康闹尽；即瞬〉碾u普遍過(guò)肥，體重一般超出正常的25% 30%，產(chǎn)蛋率下降，死亡率增加，高溫季節(jié)此病尤為明顯。目前預(yù)防肉種雞脂肪肝出血綜合征的有效方法是嚴(yán)格執(zhí)行育成期母雞的限飼程序，以保持適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)體重；應(yīng)注意保證日糧中足夠的營(yíng)養(yǎng)成分，對(duì)發(fā)病雞群可在每IOOOkg飼料中添加氯化膽堿500g、蛋氨酸500g、多種維生素50g,連續(xù)用IOd ;也可在每噸飼料中添加硫酸銅63g、膽堿550g、維生素B233mg、維生素E 5500IU、蛋氨酸550g，同時(shí)將日糧中粗蛋白提高I % _2 %，能量水平適當(dāng)降低，對(duì)發(fā)病雞群有較好的療效，但養(yǎng)殖戶(hù)對(duì)藥物的混合均勻度有困難，同時(shí)膽堿劑量控制不好反而影響會(huì)引起不良反應(yīng)。也有學(xué)者使用一些中藥配方進(jìn)行預(yù)防取得一定的療效，但使用中藥組份多，配方復(fù)雜，機(jī)理不清，成本高；多采用拌飼料的方式，雞群吸收困難，起效慢。為有效治療肉種雞脂肪肝出血綜合征，本試驗(yàn)應(yīng)用中獸醫(yī)理論，運(yùn)用中草藥趕黃草、丹參、垂盆草、山楂、虎杖、郁金、甘草合理組方，達(dá)到活血化瘀、疏肝解郁、健脾導(dǎo)滯為主，同時(shí)輔以清熱解毒，利膽化濕、消脂清肝，添加到患病雞群飲水中，觀察其對(duì)肉種雞脂肪肝出血綜合征的影響，為該病的診斷和中草藥治療提供理論依據(jù)，更好地為肉種雞生產(chǎn)服務(wù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足提供一種防治肉種雞脂肪肝出血綜合征的中藥組方。本發(fā)明的技術(shù)方案如下—種防治肉種雞脂肪肝出血綜合征的中藥組方，組方為趕黃草900重量份，丹參900重量份、垂盆草800重量份、山楂800重量份、虎杖750重量份、郁金650重量份、甘草500重量份。本發(fā)明具有以下有益效果I選用了獸醫(yī)臨床少用的趕黃草、垂盆草、虎杖、郁金等中草藥，里面的藥物都有較好的的保肝作用，還能抑菌、抗病毒、降血脂、血糖，并采用中獸醫(yī)理論科學(xué)按照君、臣、佐、 使進(jìn)行組方，目前未見(jiàn)相同組方報(bào)道。2使用現(xiàn)代制劑技術(shù)，使用現(xiàn)代中藥制劑技術(shù)乙醇回流法提取藥物中的脂溶性成分，并利用水煎法提取水溶性成分，達(dá)到有效成分的完全提取制備成口服液，減少了藥物的使用劑量。改變了文獻(xiàn)報(bào)道中使用原藥材直接粉碎后拌料的方法，而直接飲水，吸收更快，解決了雞腸道短，中草藥粉吸收困難的特點(diǎn)。3療效高，對(duì)肉種雞脂肪肝出血綜合征的治療效果明顯，優(yōu)于膽堿，同時(shí)純中藥制劑沒(méi)有耐受性和有害物殘留。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。I試驗(yàn)材料與方法1.1試驗(yàn)藥物中藥趕黃草900g購(gòu)自古藺趕黃草合作社，丹參900g、垂盆草800g、山楂800g、虎杖750g、郁金650g、甘草500g購(gòu)自雅安惠民堂藥店，經(jīng)鑒定為正品藥材后分別60目粉碎，
裝袋備用。取以上7 B未，其中趕黃草加6倍量(ml/g，下同)65% (V/V)乙醇回流提取2次，每次1. 5小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液回收乙醇，濃縮至無(wú)乙醇味備用；丹參加入6倍量的70% (V/V)乙醇回流提取2次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇，濃縮至無(wú)乙醇味；山楂、虎杖加入6倍量的80% (V/V)乙醇回流提取2次，每次1. 5小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇，濃縮至無(wú)乙醇味；其余垂盆草、郁金、甘草，與乙醇提取后的趕黃草、丹參、山楂、虎杖藥渣加6倍量水煎煮2次，每次1. 5小時(shí)，合并煎液，并加入上述趕黃草、丹參、山楂、虎杖提取物，力口水稀釋至大約5300mL，相當(dāng)于每mL藥液含有生藥lg，攪拌溶解，靜置12小時(shí)，用747濾布過(guò)濾2次即得(命名為黃丹保肝湯)。1. 2試驗(yàn)動(dòng)物選擇四川農(nóng)業(yè)大學(xué)家禽育種場(chǎng)中疑似雞脂肪肝出血綜合征自然發(fā)病的產(chǎn)蛋肉種雞，不少于700只。1. 3器材和儀器電子天平；高速冷凍臺(tái)式離心機(jī)；低溫冰箱；光學(xué)顯微鏡；照相機(jī)；烘箱。1. 4試驗(yàn)方法
1. 4.1病例的診斷和納入標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)雞群的品種、飼料營(yíng)養(yǎng)、發(fā)病年齡、雞群狀況及臨床癥狀進(jìn)行綜合分析做出初步診斷。再結(jié)合剖檢病理變化、血清指標(biāo)檢測(cè)、肝臟系數(shù)、肝脂率、腹脂率、實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果及其它病例的排除來(lái)確診為雞脂肪肝出血綜合癥。當(dāng)雞群中脂肪肝出血綜合征發(fā)病率達(dá)到5%，則判定該雞群得了脂肪肝出血綜合征。臨床癥狀患病雞過(guò)于肥胖，有的超過(guò)正常體重的25%，產(chǎn)蛋量減少，產(chǎn)蛋率下降，通常由75%-85%降低到35%-55%，在下腹部可以摸到厚實(shí)的脂肪組織。雞往往突然發(fā)病，病雞精神沉郁，食欲減少，肉髯、雞冠褪色乃至蒼白，喜臥，不愿走動(dòng)，腹部柔軟下垂。嚴(yán)重的嗜目民、癱瘓，體溫到達(dá)41. 5-42. 8 0C，進(jìn)而雞冠、肉髯及腳變冷，可在數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡。
病理變化剖檢病死雞只，主要表現(xiàn)為腹腔內(nèi)脂肪大量沉積，特別是腹部，以及肌胃和腺胃的外周都有一層厚厚的脂肪存在。除此之外，心臟、腸系膜等處也有多量的脂肪分布。肝臟明顯腫大，呈淺褐色至黃色，質(zhì)脆易碎并有油膩感，肝臟表面常有出血斑點(diǎn)，且周?chē)写罅康难龎K。有的肝臟破裂，肝表面和體腔中有大的出血塊或血凝塊。膽囊腫大或縮小，囊壁因脂肪沉積而變厚。脾臟質(zhì)軟，一般不見(jiàn)腫大。肌胃由于被沉積的脂肪包裹，其容積僅為正常的1/2-1/3，肌胃內(nèi)容物少，雞內(nèi)金薄且易剝離，肌層變薄。腎臟稍腫大，質(zhì)脆。部分病例在輸卵管內(nèi)還有一枚正常形成的硬殼蛋。生理生化指標(biāo)血清指標(biāo)檢測(cè)、肝臟系數(shù)、肝脂率、腹脂率的初步測(cè)定與正常種雞相比較，差異應(yīng)均顯著。肝臟觸片鏡檢取病雞肝臟觸片鏡檢，可見(jiàn)肝細(xì)胞內(nèi)充滿(mǎn)脂肪空泡，胞漿內(nèi)有大量的脂肪沉積及大小不等的出血；有的可見(jiàn)局部肝細(xì)胞壞死，脂肪彌漫分布整個(gè)肝小葉，使肝小葉失去正常的結(jié)構(gòu)，與一般的脂肪組織相似。1.4.2試驗(yàn)分組將確診患有雞脂肪肝出血綜合征的蛋雞672只，隨機(jī)平均分成3組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)各56只。第I組為發(fā)病對(duì)照組，第2組為陽(yáng)性藥物對(duì)照組，氯化膽堿按lg/kg飼料的劑量給藥；第3組為黃丹保肝湯組，按O. 3mL/L的濃度進(jìn)行集中飲水，每天I次；兩試驗(yàn)組先觀察I周，再連續(xù)給藥治療21天后都停藥，整個(gè)試驗(yàn)周期為4周。1. 5 一般性觀察試驗(yàn)期4周，觀察雞群狀況，采食、飲水。1. 6檢測(cè)指標(biāo)試驗(yàn)期4周，試驗(yàn)開(kāi)始前I周和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)各稱(chēng)重I次(空腹12h)，記錄每組雞的平均體重，每日的產(chǎn)蛋率、入孵率、死亡率，結(jié)束后的治愈率，并進(jìn)行I次血清指標(biāo)檢測(cè)，測(cè)定肝臟系數(shù)、肝脂率、腹脂率。1. 6.1樣品采集每次每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取3只雞進(jìn)行下述處理稱(chēng)量每只雞體重，翅靜脈采血(采血前12h禁食)，制備血清。采血后剖殺，觀察并記錄各組雞只內(nèi)臟組織的肉眼變化，剖腹完整剪下肝臟，稱(chēng)取肝臟重量；剝離腹脂(腹部脂肪及肌胃周?chē)?，對(duì)腹脂進(jìn)行稱(chēng)重。1. 6. 2樣品測(cè)定測(cè)定肝臟系數(shù)剖殺雞只后，將肝臟完整的取出，計(jì)算肝臟系數(shù)。肝臟系數(shù)=肝重量(g)/體重(g) X100。
血清生化指標(biāo)的測(cè)定用一次性注射器空腹翅靜脈采血2 5ml于離心管，在室溫下傾斜放置30min, 3500r/min離心IOmin,血清放在_20°C保存。按照診斷試驗(yàn)盒的說(shuō)明測(cè)定血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量。肝脂率的測(cè)定(I)將低溫下保存的肝臟于常溫下解凍。(2)將肝臟放入105°C的烘箱中烘至恒重；同時(shí)將脫脂濾紙?jiān)?05°C烘箱中烘至恒重，用電子天平稱(chēng)出其重量(絕干濾紙重)。(3)將樣品從烘箱中取出磨碎后，取2g包在濾紙中，標(biāo)記好，再次放入烘箱中烘至恒重，在電子天平上稱(chēng)出各濾紙包的準(zhǔn)確重量(脫脂前樣包重)。(4)將濾紙包放入干燥器中冷卻至室溫，用長(zhǎng)鑷子將濾紙包放入索氏提取器抽提筒中，注入一次虹吸量的1. 67倍的無(wú)水乙醚，使樣品包完全浸沒(méi)在乙醚中。連接好抽提器 各部分，接通冷凝水水流，在恒溫水浴中進(jìn)行抽提，調(diào)節(jié)水溫在70°C 80°C之間，使冷凝下滴的乙醚成連珠狀(120 150滴/min或回流7次/h以上)，抽提至抽取筒內(nèi)的乙醚用濾紙點(diǎn)滴檢查無(wú)油跡為止(約需6 12h)。(5)抽提完畢后，用長(zhǎng)鑷子取出濾紙包，在通風(fēng)處使乙醚揮發(fā)。提取瓶中的乙醚另行回收。待乙醚揮發(fā)之后，將濾紙包置于105°C烘箱中干燥2h，放入干燥器冷卻至恒重為止，最后進(jìn)行稱(chēng)重(脫脂后樣包重)。(6)計(jì)算肝脂率肝脂率(%)=(脫脂前樣包重一脫脂后樣包重)(g)/(脫脂前樣包重一絕干濾紙重)(g)X100。腹脂率的測(cè)定將放有大平皿的電子天平進(jìn)行調(diào)零；將宰殺稱(chēng)重后的雞從腹部進(jìn)行開(kāi)膛，先剝離腹部脂肪，再將肌胃周?chē)闹緞冸x出來(lái)，放于大平皿中；稱(chēng)出并計(jì)錄腹脂重，計(jì)算腹脂率。腹脂重=腹部脂肪重+肌胃周?chē)闹局?；腹脂?%) =腹脂重(g)/活體重(g)X100。1. 7試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)均按統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)以平均值X土標(biāo)準(zhǔn)差(SD)表示，用方差分析進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。2結(jié)果與分析2.1病例的選擇選自四川農(nóng)業(yè)大學(xué)家禽育種場(chǎng)350日齡肉種雞，產(chǎn)蛋率由早期的75%下降到目前的43%，病雞精神沉郁，食欲減少，肉髯、雞冠褪色乃至蒼白，喜臥，不愿走動(dòng)，腹部柔軟下垂。經(jīng)解剖后發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)脂肪大量沉積，特別是腹部，以及肌胃和腺胃的外周都有一層厚厚的脂肪存在。除此之外，心臟、腸系膜等處也有多量的脂肪分布。肝臟明顯腫大，呈淺褐色至黃色，質(zhì)脆易碎并有油膩感，肝臟表面常有出血斑點(diǎn)，且周?chē)写罅康难龎K。有的肝臟破裂，肝表面和體腔中有大的出血塊或血凝塊。膽囊腫大或縮小，囊壁因脂肪沉積而變厚。脾臟質(zhì)軟，一般不見(jiàn)腫大。肌胃由于被沉積的脂肪包裹，其容積僅為正常的1/2 1/3，肌胃內(nèi)容物少，雞內(nèi)金薄且易剝離，肌層變薄。腎臟稍腫大，質(zhì)脆。血清指標(biāo)檢測(cè)、肝臟系數(shù)、肝脂率、腹脂率與正常種雞相比較，差異應(yīng)均顯著；取病雞肝臟觸片鏡檢，可見(jiàn)肝細(xì)胞內(nèi)充滿(mǎn)脂肪空泡，胞漿內(nèi)有大量的脂肪沉積。初步判定該雞群患上脂肪肝出血綜合征，可以作為試驗(yàn)動(dòng)物。
2. 2 一般觀察試驗(yàn)前各組主要表現(xiàn)為食欲下降，站立不穩(wěn)，喜臥，腹大柔軟下垂，嚴(yán)重者嗜睡，癱瘓，單側(cè)臥地，體溫升至42°C ;少數(shù)病例雞冠、肉髯蒼白，偶見(jiàn)雞冠增大。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)照組仍然保持虛弱狀態(tài)，無(wú)好轉(zhuǎn)；膽堿組和黃丹保肝湯組在用藥10天以后死亡率逐漸減少，雞冠開(kāi)始變紅，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)雞群基本恢復(fù)正常的飲水采食，產(chǎn)蛋率和入孵率有一定的上升。2. 3生產(chǎn)性能情況從表I可以看出，試驗(yàn)前各組各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著差異(P > O. 05)。3周結(jié)束時(shí),從表2看出，對(duì)照組分別比膽堿組、黃丹保肝湯組體重增加13. 88%、13. 25%差異極顯著(P< O. 01)。產(chǎn)蛋率比較對(duì)照組分別膽堿組和黃丹保肝湯組降低46. 70%、67. 11%差異極顯著(P <0.01);膽堿組比黃丹保肝湯組降低13. 91%差異顯著(P < O. 05)。入孵率比較，對(duì)照組分別膽堿組和黃丹保肝湯組降低32. 84%,38. 92%差異極顯著(P < O. 01)。死亡率比較， 對(duì)照組分別膽堿組和黃丹保肝湯組增加48. 99%,68. 59%差異極顯著(P < O. 01);膽堿組比黃丹保肝湯組增加38. 42%差異極顯著(P < O. 01)。治愈率比較，對(duì)照組分別膽堿組和黃丹保肝湯組降低79. 64%,98. 05%差異極顯著(P < O. 01)。通過(guò)用藥后，膽堿組和黃丹保肝湯組雞群逐漸恢復(fù)，體重趨于正常，產(chǎn)蛋率、入孵率上升，死亡率降低，治愈率較高病情得到有效控制，而對(duì)照組生產(chǎn)成績(jī)繼續(xù)下降，表現(xiàn)為體重增加，產(chǎn)蛋率、入孵率下降，死亡率上升。表I給藥前I周內(nèi)雞群情況
權(quán)利要求
1.一種防治肉種雞脂肪肝出血綜合征的中藥組方，其特征在于，組方為趕黃草900重量份，丹參900重量份、垂盆草800重量份、山楂800重量份、虎杖750重量份、郁金650重量份、甘草500重量份。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種防治肉種雞脂肪肝出血綜合征的中藥組方，組方為趕黃草900重量份，丹參900重量份、垂盆草800重量份、山楂800重量份、虎杖750重量份、郁金650重量份、甘草500重量份。療效較好，對(duì)肉種雞脂肪肝出血綜合征的治療效果明顯，優(yōu)于膽堿，同時(shí)純中藥制劑沒(méi)有耐受性和有害物殘留。
文檔編號(hào)A61K36/9066GK103007208SQ201310018500
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2013年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月18日
發(fā)明者舒剛, 趙小玲, 汪開(kāi)毓, 林居純, 符華林, 呂程, 張偉, 賀常亮, 范巧佳, 李英倫, 殷中瓊, 楊志勤, 朱慶, 古小云, 張露 申請(qǐng)人:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)