含有芽孢桿菌的菌劑及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了含有解淀粉芽孢桿菌（bacillusamyloliquefaciens）的菌劑及其制備方法,涉及微生物領(lǐng)域。該菌劑中水含量不高于35%，是將芽孢桿菌發(fā)酵液用載體吸附后制得的。本發(fā)明菌劑兼有有機(jī)肥、微生物肥的優(yōu)點(diǎn)，能提高肥料利用率，增加土壤有機(jī)質(zhì)，促進(jìn)作物根際微生物繁殖，改善土壤的理化性質(zhì)和生物活性，為作物的生長提供全面、均衡的營養(yǎng)，并能預(yù)防和降低土傳病害的發(fā)生，使作物的產(chǎn)量和品質(zhì)得到顯著提升。
【專利說明】含有芽孢桿菌的菌劑及應(yīng)用
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，更具體地說是涉及到一種芽孢桿菌(如amyloliquefaciens )的菌劑及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0003]隨著化肥的大量使用，其利用率不斷降低、土壤板結(jié)及鹽潰化已是眾所周知的事實(shí)。這說明，僅靠大量增施化肥來提高作物產(chǎn)量及品質(zhì)是有限的，更何況還有污染環(huán)境等一系列的問題。為此各國的科研工作者一直在努力探索各種方法以解決上述弊端。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供含有芽孢桿菌活菌的菌劑，該菌劑兼有有機(jī)肥、微生物肥的優(yōu)點(diǎn)，能提高肥料利用率，增加土壤有機(jī)質(zhì)，促進(jìn)作物根際微生物繁殖，改善土壤的理化性質(zhì)和生物活性，為作物的生長提供全面、均衡的營養(yǎng)，并能預(yù)防和降低土傳病害的發(fā)生，使作物的產(chǎn)量和品質(zhì)得到顯著提升。
[0005]本發(fā)明的另一目的是提供上述菌劑用于農(nóng)作物栽培時(shí)的肥料或基質(zhì)方面的應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明的目的采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)。
[0007]含有芽孢桿菌的菌劑，水含量不高于35%，是將芽孢桿菌發(fā)酵液用載體吸附后制得的。
[0008]所述芽孢桿菌為解淀粉芽孢桿菌amyloli quefaci ens ) K_8,其微生物保藏號(hào)為 CGMCC N0.6486。
[0009]所述芽孢桿菌發(fā)酵液與載體的質(zhì)量比為(I~50): 100。
[0010]芽孢桿菌發(fā)酵液的活菌含量不低于I X 107cfu/mL,芽孢率高于10%。
[0011 ] 所述發(fā)酵液是將解淀粉芽孢桿菌{bacillus amyloli quefaci ens )K_8接種發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)后獲得的；所述發(fā)酵培養(yǎng)基含有下述成分:葡萄糖5~10g/L,糖蜜10~30g/L,蠶蛹粉5~10g/L，玉米漿5~20g/L，氯化鈉10~20g/L，碳酸鈣I~10g/L，硫酸鎂0.1~lg/L，硫酸錳 0.01 ~0.lg/L，氯化亞鐵 0.02 ~0.08g/L, ρΗ7.0 ~7.5。
[0012]選擇稻殼、鋸末、麥殼中一種物質(zhì)，過篩，得到所述載體；或者選擇稻殼、鋸末、麥殼中兩種以上物質(zhì)混合均勻，過篩，得到所述載體。
[0013]所述篩的篩孔直徑為I~5mm。
[0014]所述載體還可以采用如下方法制備:選擇稻殼、鋸末、麥殼、樹葉、雜草和秸桿中的一種或兩種以上物質(zhì)作為基質(zhì)；在所述基質(zhì)中添加米糠、酒糟、玉米粉或麩皮，接種復(fù)合菌劑，得到發(fā)酵床；將發(fā)酵床平鋪在豬圈中，進(jìn)豬飼養(yǎng)，得到所述載體。
[0015]所述菌劑用于農(nóng)作物栽培時(shí)的肥料或基質(zhì)方面的應(yīng)用。
[0016]解淀粉芽抱桿菌amyloliquefaci ens) K-8 已于 2012 年 08 月 28 日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡稱CGMCCJia:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編100101)，其保藏號(hào)為CGMCC N0.6486。
[0017]有益效果:
本發(fā)明含有芽孢桿菌的菌劑兼有有機(jī)肥、微生物肥的優(yōu)點(diǎn)，該菌劑不僅含有解淀粉芽孢桿菌(Mcillus還含有其發(fā)酵過程中的代謝物,能夠顯著提高
農(nóng)作物產(chǎn)量和品質(zhì)。本發(fā)明含有芽孢桿菌的菌劑中芽孢含量很高，對高溫、紫外線、干燥、電離輻射和很多有毒的化學(xué)物質(zhì)都有很強(qiáng)的抗性，在加工過程中菌體存活率高，獲得的制劑活芽孢含量高、貨架期長、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。如果，采用發(fā)酵床載體，那么菌劑中還含有光合菌、乳酸菌、酵母菌、放線菌、雙歧桿菌、解磷解鉀菌等其它有益微生物，以及發(fā)酵床腐熟和發(fā)酵后產(chǎn)生的糖類、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、氨基酸、維生素、微量元素、N、P、K等物質(zhì)。
[0018]本發(fā)明菌劑用作農(nóng)作物栽培時(shí)的肥料或基質(zhì)作物肥料時(shí)，增加土壤有機(jī)質(zhì)，促進(jìn)作物根際微生物繁殖，改善土壤的理化性質(zhì)和生物活性，為作物的生長提供全面、均衡的營養(yǎng)，而且生物利用率高，能預(yù)防和降低土傳病害的發(fā)生，使作物的產(chǎn)量和品質(zhì)得到顯著提升，降低成本、減少污染。
【具體實(shí)施方式】
[0019]以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0020]本發(fā)明培養(yǎng)基中使用的溶劑為水，通氣比是指每分鐘通氣量(m3)與發(fā)酵液體積Cm3)之比。
[0021]實(shí)施例1 本實(shí)施例介紹了采用稻殼、鋸末、麥殼作為載體制備含有解淀粉芽孢桿菌(如amyloli quefaci ens ) K-8 的活菌制劑。解淀粉芽抱桿菌(bad Ilus amyloli quefaci ens )K-8縮寫為菌株Κ-8。
[0022]1、稻殼、鋸末、麥殼作為載體
選擇新鮮、無霉變、無團(tuán)塊、無蟲、疏松干燥的稻殼或麥殼作為原材料，機(jī)械粉碎后過孔徑為2mm的振動(dòng)篩,得到稻殼或麥殼載體。
[0023]選用新鮮、無霉變、無團(tuán)塊、無蟲、疏松干燥的鋸末直接過孔徑為2mm的振動(dòng)篩，得到鋸末載體。
[0024]上述載體可以單獨(dú)使用，也可以混合使用。本實(shí)施例1中是單獨(dú)使用。
[0025]2、菌株K-8發(fā)酵液的制備 菌株K-8發(fā)酵液的制備如下:
(I)一級種子液制備:挑取LB固體培養(yǎng)基上的菌株K-8單菌落接種于一級種子搖瓶中，在30°C、150r/min下培養(yǎng)24h，得到一級種子液。一級種子搖瓶體積為250mL，LB液態(tài)培養(yǎng)基的裝液量50ml。
[0026](2) 二級種子液制備:二級種子液培養(yǎng)基配方(g/L)為:葡萄糖25、蔗糖25、蛋白粉10、酵母粉15、磷酸二氫鉀0.5、硫酸錳0.05。將一級種子液接入二級種子液培養(yǎng)基中，接種量為2% (V/V)，得到二級種子液。培養(yǎng)條件為:通氣比為1:1，攪拌轉(zhuǎn)速為200r/min，培養(yǎng)溫度30°C，罐壓0.01MPa，培養(yǎng)時(shí)間為18h_20h。
[0027](3)菌株K-8發(fā)酵液的制備:發(fā)酵培養(yǎng)基成分及含量:葡萄糖5g/L、糖蜜20g/L，蠶蛹粉5g/L、玉米漿15g/L，氯化鈉15g/L，碳酸鈣 5g/L，硫酸鎂 0.5g/L，硫酸錳 0.05g/L，氯化亞鐵 0.04g/L, pH7.0 ~7.5。
[0028]培養(yǎng)工藝:發(fā)酵罐裝液量75%，接種量2%(V/V)，轉(zhuǎn)速150r/min，罐壓0.01Mpa0培養(yǎng)時(shí)間Oh~8h，控制氣液比為0.5:1，溫度28 V ;培養(yǎng)時(shí)間8h~24h，控制氣液比為1:1,溫度300C ;培養(yǎng)時(shí)間24h以后，控制氣液比為0.8:1，溫度32。。。
[0029]培養(yǎng)過程中，發(fā)酵液中的活菌含量及芽孢含量如表1所不。培養(yǎng)時(shí)間為28h_32h,收獲發(fā)酵液，該發(fā)酵液含有發(fā)酵代謝產(chǎn)物，菌株K-8活菌含量為69.3~72.8X 108cfu/mL，芽孢率不低于90%。
[0030]表1發(fā)酵液中的活菌含量及芽孢含量
【權(quán)利要求】
1.一種含有芽孢桿菌的菌劑，其特征在于:該菌劑中水含量不高于35%，是將芽孢桿菌發(fā)酵液用載體吸附后制得的。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述含有芽孢桿菌的菌劑，其特征在于:所述芽孢桿菌為解淀粉芽抱桿菌K-8,其微生物保藏號(hào)為 CGMCC N0.6486。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述含有芽孢桿菌的菌劑，其特征在于:所述芽孢桿菌發(fā)酵液與載體的質(zhì)量比為(I~50):100ο
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述含有芽孢桿菌的菌劑，其特征在于:芽孢桿菌發(fā)酵液的活菌含量不低于I X 107cfu/mL,芽孢率高于10%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述含有芽孢桿菌的菌劑，其特征在于:所述發(fā)酵液是將解淀粉芽孢桿菌amyloliquefaciens) K-8接種發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)后獲得的；所述發(fā)酵培養(yǎng)基含有下述成分:葡萄糖5~10g/L,糖蜜10~30g/L,蠶蛹粉5~10g/L,玉米衆(zhòng)5~20g/L，氯化鈉10~20g/L，碳酸鈣I~10g/L，硫酸鎂0.1~lg/L，硫酸錳0.01~0.lg/L，氯化亞鐵 0.02 ~0.08g/L, ρΗ7.0 ~7.5。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5之一所述含有芽孢桿菌的菌劑,其特征在于:選擇稻殼、鋸末、麥殼中一種物質(zhì)，過篩，得到所述載體；或者選擇稻殼、鋸末、麥殼中兩種以上物質(zhì)混合均勻，過篩，得到所述載體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述含有芽孢桿菌的菌劑，其特征在于:所述篩的篩孔直徑為I~5mm ο
8.根據(jù)權(quán)利要求1-5之一所述含有芽孢桿菌的菌劑，其特征在于所述載體采用如下方法制備:選擇稻殼、鋸末、麥殼、樹葉、雜草和稻桿中的一種或兩種以上物質(zhì)作為基質(zhì)；在所述基質(zhì)中添加米糠、酒糟、玉米粉或麩皮，接種復(fù)合菌劑，得到發(fā)酵床；將發(fā)酵床平鋪在豬圈中，進(jìn)豬飼養(yǎng)，得到所述載體。
9.權(quán)利要求1所述菌劑用于農(nóng)作物栽培時(shí)的肥料或基質(zhì)方面的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C05F11/08GK103626532SQ201310607764
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月27日
【發(fā)明者】李際軍, 魏鴻剛, 王 琦, 溫學(xué)標(biāo), 趙福兵 申請人:江蘇蘇濱生物農(nóng)化有限公司