專利名稱：飼用超級(jí)益生素的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品的生產(chǎn)方法，在對(duì)不同的益生芽孢桿菌、益生乳酸桿菌進(jìn)行定向的功能篩選的基礎(chǔ)上，經(jīng)過嚴(yán)格的組合設(shè)計(jì)，將具有抗菌、分泌淀粉酶、膽鹽水解酶活性的3類乳酸桿菌以及具有分泌抗菌肽功能的I類芽孢桿菌與含有特定比例寡糖、低聚糖、多糖的復(fù)合功能性糖按特定比例有機(jī)組合，得到飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品，使之能從免疫、微生態(tài)、機(jī)體代謝等多種途徑保證畜禽健康，提高畜禽生產(chǎn)力，確保產(chǎn)品安全、健康、高效，屬于新型綠色飼料添加劑生產(chǎn)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
在實(shí)際生產(chǎn)中，人們?yōu)榱诉_(dá)到一定的生產(chǎn)及經(jīng)濟(jì)目的，往往人為地在飼料中添加抗生素?？股鼐哂杏昧可?，成本低，但作用效果明顯的特點(diǎn)，故而很快受到了生產(chǎn)者的青睞，并在生產(chǎn)中廣泛使用。然而，抗生素的殘留、毒副作用、耐藥性等卻是危害人們健康的重要因素。尤其在實(shí)際生產(chǎn)中，為了達(dá)到一定經(jīng)濟(jì)目的，加大使用劑量、超期使用(忽略抗生素停藥期的限定)和違禁使用的現(xiàn)象相當(dāng)普遍。隨著人們生活水平和健康意識(shí)的提高，食品安全問題已經(jīng)在全球范圍得到廣泛關(guān)注，禁止在畜牧生產(chǎn)中使用抗生素的呼聲越來越高。目前，歐盟已明令禁止在動(dòng)物飼料中使用抗生素作為促生長(zhǎng)劑，包括中國(guó)在內(nèi)的許多國(guó)家也正在逐步禁止使用部分抗生素。因此，尋求開發(fā)天然、綠色和環(huán)保的抗生素替代品，成為畜牧業(yè)關(guān)注的重點(diǎn)。食品安全是保證人們身體健康，提高身體素質(zhì)的重要保證。隨著人們生活水平的提高，畜禽產(chǎn)品在數(shù)量上已經(jīng)基本得到保障，人們更加關(guān)注畜禽產(chǎn)品品質(zhì)，呼喚“放心肉”，“無抗奶”等綠色安全產(chǎn)品，特別是近年來，瘋牛病、禽流感、“豬流感”的爆發(fā)，口蹄疫的流行，等等，已給人們的生活蒙上了一層陰影，人們對(duì)畜產(chǎn)品的消費(fèi)也已出現(xiàn)了恐懼心理，更加呼喚“安全食品”。然而，沒有畜禽的“安全飼料”，也就無從談起安全的畜禽產(chǎn)品。從食物鏈的角度分析，“飼料安全就是食品安全”，從飼料源保證畜禽產(chǎn)品安全，無疑將是保障肉蛋奶類食品安全的重要措施。因此，如何在不影響正常生產(chǎn)的條件下減免和替代抗生素、使用有效的替代品，便是當(dāng)今人們關(guān)注的焦點(diǎn)，也是研究的熱點(diǎn)。雖然目前世界各國(guó)都在積極探索，但是切實(shí)有效的替代產(chǎn)品依然少之又少，綠色飼料添加劑的開發(fā)使用任務(wù)十分緊迫。目前，一些主要抗生素天然替代品主要有3類，即微生態(tài)制劑、寡糖和植物提取物，其中益生素備受關(guān)注。所謂益生素指的是以活的微生物為主，動(dòng)物攝入一定量后，在胃腸道特定部位有一定數(shù)量的菌株能夠粘附、定植和生長(zhǎng)，從而主要通過改善胃腸道微生態(tài)的平衡，對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)和健康起到有益作用的制劑。益生素的主要作用是通過改善胃腸道的微生物菌群平衡來提聞動(dòng)物的健康水平，進(jìn)而提聞動(dòng)物抵抗病原菌的能力和促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。國(guó)內(nèi)外對(duì)益生素的研究較為廣泛，主要集中在有益微生物在動(dòng)物胃腸道中的分布狀況、益生菌的生理作用、作用機(jī)理以及益生菌制劑的開發(fā)上，并已取得了一定的技術(shù)成果。益生菌的腸道定位、分離、鑒定、定向選育及培養(yǎng)等技術(shù)都已十分成熟?，F(xiàn)在已完成了畜禽胃腸道內(nèi)多種菌的分離鑒定，并研制開發(fā)出了多種益生菌制劑產(chǎn)品。益生素可根據(jù)菌種種類進(jìn)行分類，也可根據(jù)益生素中所含微生物菌種數(shù)量分為單一菌種益生素和復(fù)合菌種益生素，單一菌種益生素主要有乳酸菌類、芽孢桿菌類和酵母類等，復(fù)合菌種的益生素則是由兩種以上菌種復(fù)合成的益生素。目前益生素作用效果變異很大，主要原因有:產(chǎn)品中活菌數(shù)少；產(chǎn)品針對(duì)性差；復(fù)合制劑中的微生物組成無明確的科學(xué)依據(jù)等。因此，我們認(rèn)為，只有經(jīng)過嚴(yán)格設(shè)計(jì)組合的復(fù)合益生素，才能攜帶更多的益生特性，才能在胃腸道中具有更大的定殖定位潛力，才能具有更好的應(yīng)用效果，因此，本發(fā)明在國(guó)家星火計(jì)劃“飼用超級(jí)益生素產(chǎn)業(yè)化開發(fā)(2010GA690108)”、江蘇省科技型企業(yè)創(chuàng)新資金“飼用超級(jí)益生素生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)研究及產(chǎn)業(yè)化開發(fā)(BC2010142)”、淮安市科技支撐計(jì)劃“仔豬益生乳酸桿菌的選育及其飼料添加劑研發(fā)(SN0874)”等國(guó)家、省、市項(xiàng)目的支持下，經(jīng)過多年的研究開發(fā)，提出建立在不同益生菌株及復(fù)合功能性糖特定功能組合基礎(chǔ)上的飼用超級(jí)益生素生產(chǎn)方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提出一種飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品的生產(chǎn)方法，在對(duì)不同的益生芽孢桿菌、益生乳酸桿菌進(jìn)行定向的功能篩選的基礎(chǔ)上，選擇具有抗菌、分泌淀粉酶、膽鹽水解酶活性的3類乳酸桿菌以及具有分泌抗菌肽功能的I類芽孢桿菌，經(jīng)過3級(jí)放大發(fā)酵、絮凝沉降后，分別獲得菌體濃縮漿液，菌體濃縮漿液添加包被壁材并進(jìn)行噴霧干燥，得到各自的微膠囊菌粉；將蝦殼或蟹殼用酸堿先后處理后，制備得到殼聚糖，將殼聚糖酶解，通過控制酶濃度和水解時(shí)間，得到含有特定比例寡糖、低聚糖、多糖的混合水解液，水解液濃縮、干燥后得到復(fù)合功能性糖；將微膠囊菌粉和復(fù)合功能性糖按特定比例混合均勻，得到飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品。產(chǎn)品中不同菌株發(fā)揮各自特有的益生作用，并且通過這些菌株的復(fù)合作用，產(chǎn)生更多的益生效果，與此同時(shí)，芽孢桿菌對(duì)乳酸菌具有“生物奪氧”作用，消耗動(dòng)物胃腸道的氧氣，顯著促進(jìn)乳酸桿菌的生長(zhǎng)，功能性殼聚糖、殼寡糖和益生菌之間有很好的協(xié)同作用，能夠促進(jìn)益生菌的增殖，起到“益生元”的作用。在生產(chǎn)菌株的選擇上，要求所選用的菌種具有特定的功能，選擇具有抗菌、分泌淀粉酶、膽鹽水解酶活性的乳酸桿菌菌種各I株以上，選擇具有具有益生作用及分泌抗菌肽雙重功能的芽孢桿菌I株以上；所有菌株均能耐受PH 3.0的胃酸水平、0.3%膽鹽及250mg/kg的飼料高銅，具各菌株之間有良好的兼容性，不會(huì)相互拮抗。產(chǎn)品中3類乳酸桿菌及I類芽孢桿菌4種益生菌的活菌含量比例控制為1:1:1:1 2，且總活菌數(shù)不少于1010個(gè)/g。產(chǎn)品中復(fù)合功能性糖含量控制為為10(T500g/kg，且含2 6單糖的殼寡糖含量為5(Tl00g/kg。


附圖為飼用超級(jí)益生素生產(chǎn)技術(shù)路線圖。
具體實(shí)施例方式通過如下的實(shí)施例來對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的闡述。實(shí)施例: 在搜集大量的乳酸桿菌和枯草芽孢桿菌菌種的基礎(chǔ)上，通過試驗(yàn)篩選，得到符合以下特征的乳酸桿菌9株，芽孢桿菌3株:
①耐酸性:經(jīng)過PH3.0處理12 h，活菌數(shù)不會(huì)顯著降低；
②耐膽鹽:在含有0.3%膽鹽的環(huán)境中能夠良好生長(zhǎng)；
③耐高銅:在含250mg/kg銅的營(yíng)養(yǎng)肉湯中能夠良好生長(zhǎng)；
④黏附能力:非特異性黏附力(菌體疏水性)為對(duì)十六燒(Hexadecane)的表面疏水力>85% ;特異性黏附力為每個(gè)豬回腸上皮細(xì)胞黏附的細(xì)胞數(shù)超過15個(gè)。通過對(duì)菌株生物學(xué)功能的試驗(yàn)，篩選出分別具有抗菌、分泌淀粉酶、膽鹽水解酶活性的乳酸桿菌各I株以及具有分泌抗菌肽功能的枯草芽孢桿菌I株，以其為生產(chǎn)菌種，經(jīng)過3級(jí)放大發(fā)酵、絮凝沉降后，分別獲得菌體濃縮漿液，菌體濃縮漿液添加β -環(huán)糊精作為包被壁材并進(jìn)行噴霧干燥，得到各自的微膠囊菌粉；將4種菌粉按1:1:1:1的比例均勻混合，得到復(fù)合微膠囊菌粉。將干燥蝦殼粉用5%的稀鹽酸浸泡24 h，水洗后在濃度為5%的NaOH稀溶液中煮沸4 h，水洗后在50%的NaOH溶液中110°C下處理1.5 h，水洗干燥得到殼聚糖，將殼聚糖用乙酸液配制成0.03g/ mL的殼聚糖乙酸溶液，加纖維素酶水解4 h，水解液真空濃縮、噴霧干燥后得到復(fù)合功能性糖。將復(fù)合微膠囊菌粉和復(fù)合功能性糖按2:1比例混合均勻，得到飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品O在全價(jià)混合飼料中添加0.1 % 0.2%飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品，可達(dá)到與抗生素相似的使用效果，飼料轉(zhuǎn)化率對(duì)雞提高6% 11%，對(duì)豬提高7% 15%，可以替代飼料抗生素的使用，生產(chǎn)綠色安全的“無抗”畜禽產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品的生產(chǎn)方法，在對(duì)不同的益生芽孢桿菌、益生乳酸桿菌進(jìn)行定向的功能篩選的基礎(chǔ)上，選擇具有抗菌、分泌淀粉酶、膽鹽水解酶活性的3類乳酸桿菌以及具有分泌抗菌肽功能的I類芽孢桿菌，經(jīng)過3級(jí)放大發(fā)酵、絮凝沉降后，分別獲得菌體濃縮漿液，菌體濃縮漿液添加包被壁材并進(jìn)行噴霧干燥，得到各自的微膠囊菌粉；將蝦殼或蟹殼用酸堿先后處理后，制備得到殼聚糖，將殼聚糖酶解，通過控制酶濃度和水解時(shí)間，得到含有特定比例寡糖、低聚糖、多糖的混合水解液，水解液濃縮、干燥后得到復(fù)合功能性糖；將微膠囊菌粉和復(fù)合功能性糖按特定比例混合均勻，得到飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:在生產(chǎn)菌株的選擇上，所選用的菌種具有特定的功能，要求選擇具有抗菌、分泌淀粉酶、膽鹽水解酶活性的乳酸桿菌菌種各I株以上，選擇具有具有益生作用及分泌抗菌肽雙重功能的芽孢桿菌I株以上；所有菌株均能耐受pH 3.0的胃酸水平、0.3%膽鹽及250 mg/kg的飼料高銅，且各菌株之間有良好的兼容性，不會(huì)相互拮抗。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品中3類乳酸桿菌及I類芽孢桿菌4種益生菌的活菌含量比例為1:1:1: f 2，且總活菌數(shù)不少于101°個(gè)/g。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品中復(fù)合功能性糖含量為100 500 g/kg，且含2 6單糖的殼寡糖含量為50 100 g/kg。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種飼用超級(jí)益生素產(chǎn)品的生產(chǎn)方法，在對(duì)不同的益生乳酸桿菌、益生芽孢桿菌進(jìn)行定向的功能篩選的基礎(chǔ)上，選擇具有抗菌、分泌淀粉酶、膽鹽水解酶活性的3類乳酸桿菌以及具有分泌抗菌肽功能的1類芽孢桿菌，經(jīng)過3級(jí)放大發(fā)酵、絮凝沉降后，分別獲得菌體濃縮漿液，菌體濃縮漿液添加包被壁材并進(jìn)行噴霧干燥，得到各自的微膠囊菌粉；將蝦殼或蟹殼用酸堿先后處理后，制備得到殼聚糖，將殼聚糖酶解，通過控制酶濃度和水解時(shí)間，得到含有特定比例寡糖、低聚糖、多糖的混合水解液，水解液濃縮、干燥后得到復(fù)合功能性糖；將微膠囊菌粉和復(fù)合功能性糖按特定比例混合均勻，得到飼用超級(jí)益生素新型綠色飼料添加劑產(chǎn)品。
文檔編號(hào)A23K1/00GK103202385SQ201310083370
公開日2013年7月17日 申請(qǐng)日期2013年3月16日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月16日
發(fā)明者袁書林, 郭小華 申請(qǐng)人:袁書林