用于生物控制假單胞菌的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于控制假單胞菌的增殖的方法，其中向人體或動(dòng)物體施加的處理方法除外，其特征在于其使用Willaertia magna種的原生動(dòng)物，并且還涉及包含這種原生動(dòng)物的消毒劑。
PTA-7824
2006.08.21

PTA-7825
2006.08.21
【專利說(shuō)明】用于生物控制假單胞菌的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及用于生物控制假單胞菌（Pseudomonas)的存在及其增殖的新方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 假單胞菌是屬于假單胞菌科的革蘭氏陰性細(xì)菌。在人中，這種細(xì)菌是形成各種皮 膚、內(nèi)臟和肺部感染，特別是囊性纖維化的原因（4, 19)。這些細(xì)菌能夠抵抗眾多防腐劑和抗 生素（2) (7)，這無(wú)疑部分解釋了它們?cè)卺t(yī)院的日益頻繁的存在，在那里它們可以從潮濕的 環(huán)境（水槽、U型彎、花瓶、毛巾和洗滌物、含水容器等）分離到。一些種（species)也具有 對(duì)于植物（8)、線蟲(chóng)（10)和變形蟲(chóng)（1，11，16)的致病能力。因此，這種細(xì)菌的監(jiān)測(cè)和控制構(gòu) 成了日益重要的當(dāng)務(wù)之急。
[0003] 通常，已知在環(huán)境中，假單胞菌具有普遍分布（5)，因?yàn)檫@種細(xì)菌已經(jīng)從土壤、從污 水或從工業(yè)廢水和生物膜分離到，其特征在于它與自由生活的變形蟲(chóng)共享。幾種潛在的致 病細(xì)菌（嗜肺軍團(tuán)菌（Legionella pneumophila)、分枝桿菌屬（Mycobacterium spp)和大 腸桿菌0157:H7)已經(jīng)發(fā)展了在自由生活的變形蟲(chóng)內(nèi)部存活和復(fù)制的機(jī)制（15)。此外，已 經(jīng)表明，細(xì)菌，包括假單胞菌，可以發(fā)展各種策略，允許它們逃避自由生活的變形蟲(chóng)的捕食 (12, 13, 18)。具體而言，銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa)形成生物膜是允許細(xì)菌 有效逃避自由生活的變形蟲(chóng)諸如多食棘變形蟲(chóng)（Acanthamoeba polyphaga)的捕食的機(jī)制 之一（18)。盡管已知某些自由生活的變形蟲(chóng)諸如棘變形蟲(chóng)（Acanthamoeba)能夠發(fā)展針對(duì) 假單胞菌的趨化響應(yīng)且能夠以這些細(xì)菌為食（17, 18)，但也表明，銅綠假單胞菌快速抑制 這些變形蟲(chóng)的生長(zhǎng)并通過(guò)分泌毒素誘導(dǎo)它們的胞囊形成和它們的死亡（11-13, 17, 18)。也 已經(jīng)在纖毛原生動(dòng)物上證實(shí)了假單胞菌的毒性作用（9)。
[0004] 因此，其清楚地顯示，自由生活的原生動(dòng)物和變形蟲(chóng)構(gòu)成假單胞菌的生態(tài)學(xué)的重 要因素。此外，假單胞菌感染原生動(dòng)物和在原生動(dòng)物中細(xì)胞內(nèi)存活的能力強(qiáng)烈表明，這些原 生動(dòng)物是促進(jìn)假單胞菌耐受目前使用的殺生物處理的因素，如Michel等人所指出（14)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 在這種背景下，本發(fā)明人已經(jīng)表明，完全出乎意料的是，該變形蟲(chóng)屬Willaertia magna根除假單胞菌細(xì)菌。將這種殺生物效果添加至已經(jīng)證實(shí)的Willaertia magna對(duì)其它 變形蟲(chóng)試劑的捕食的能力，這可以充當(dāng)假單胞菌的載體（3)。
[0006] 因此，本發(fā)明的一個(gè)主題首先是用于控制假單胞菌的增殖的方法，其使用 Wi 11 aert ia magna屬的原生動(dòng)物。根據(jù)本發(fā)明的方法不包括向人體或動(dòng)物體施加的處理方 法。在根據(jù)本發(fā)明的方法中，其最通常是用Willaertia屬，特別是Willaertia magna種的 原生動(dòng)物處理的氣體或液體流。
[0007] 根據(jù)本發(fā)明的方法可以特別用在衛(wèi)生用水或工業(yè)用水分配網(wǎng)絡(luò)、用于工業(yè)廠房的 冷卻回路或空調(diào)網(wǎng)絡(luò)的消毒中?？梢詫⒃鷦?dòng)物直接添加至待處理的管或網(wǎng)絡(luò)中循環(huán)的水 或液體。也可以將它們例如作為氣溶膠的水溶液形式噴霧在待消毒的工業(yè)網(wǎng)絡(luò)、煙囪和工 廠中，和待消毒的工業(yè)表面上。
[0008] 有利地，在本發(fā)明的上下文中使用的原生動(dòng)物對(duì)應(yīng)于在2006年8月21日以 編號(hào)PTA 7824保藏于ATCC的菌株，或者在2006年8月21日以編號(hào)PTA 7825保藏于 ATCC 的菌株，這兩種菌株以 Centre National de la Recherche Scientifique(CNRS) [French National Center for Scientific Research]-3rue Michel Ange-75794 Paris Cedex 16/France-和 Uinversite Lyon lClaude Bernard[Lyon lClaude Bernard University]_43Boulevard du llNovembre 1918_69622Villeurbanne Cedex/France 的名 義保藏。
[0009] 對(duì)應(yīng)于以編號(hào)PTA7824保藏于ATCC的菌株或以編號(hào)PTA7825保藏于ATCC的菌 株的屬于Willaertia屬的原生動(dòng)物是本發(fā)明的組成部分。所述保藏的菌株P(guān)TA7824和 PTA7825還描述于PCT國(guó)際申請(qǐng)W02008/043969的公布說(shuō)明書中。
[0010] 因此這種原生動(dòng)物可以用于消毒劑中，特別是用于消除假單孢菌細(xì)菌和用于控制 假單胞菌的增殖和污染。
[0011] 此外，本發(fā)明的一個(gè)主題是含有Willaertia屬、特別是Willaertia magna種的 原生動(dòng)物的消毒劑。對(duì)應(yīng)于以編號(hào)PTA7824保藏于ATCC的菌株或以編號(hào)PTA7825保藏于 ATCC的菌株的原生動(dòng)物將是優(yōu)選的。有利地，根據(jù)本發(fā)明的消毒劑是例如在蒸餾水中的水 溶液或懸浮液的形式。消毒劑可以是可噴霧的形式，例如作為氣溶膠或任何其它施用方式。
[0012] 本發(fā)明人已經(jīng)通過(guò)將用作變形蟲(chóng)模型的棘變形蟲(chóng)（Acanthamoeba)屬和哈氏蟲(chóng) (Hartmannella)屬中假單胞菌的復(fù)制與Willaertia變形蟲(chóng)屬中觀察到的復(fù)制進(jìn)行比較 而證實(shí)了 Willaertia屬、特別是Willaertia magna種的原生動(dòng)物的假單胞菌增殖抑制 活性。還通過(guò)證實(shí)Willaertia magna對(duì)銅綠假單胞菌形成的生物膜的捕食作用而證實(shí) Willaertia屬、特別是Willaertia magna種的原生動(dòng)物的活性。
[0013] 本發(fā)明的一個(gè)主題還是消毒劑或如上所述的原生動(dòng)物作為對(duì)假單胞菌的殺生物 劑的用途。
[0014] 考慮到變形蟲(chóng)在外部環(huán)境中假單胞菌的增殖和維持中發(fā)揮的至關(guān)重要的作用，根 據(jù)本發(fā)明的方法和消毒劑在成本、有效性和特別是環(huán)境友好的方面具有眾多優(yōu)點(diǎn)。
[0015] 下文實(shí)施例可以說(shuō)明本發(fā)明，但不具有限性質(zhì)。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0016] 圖1顯示在以10的初始變形蟲(chóng)/細(xì)菌比率置于與假單胞菌的共培養(yǎng)后，蠕形 哈氏蟲(chóng)（Hartmannella vermiformis)( "方形"符號(hào))、卡氏棘變形蟲(chóng)（Acanthamoeba castellanii)( "菱形"符號(hào)?)和 Willaertia(Willaertia magna- "三角"符號(hào)▲)變形 蟲(chóng)的各群體的自發(fā)進(jìn)化。
[0017] 如材料和方法部分中所述，以10的比率（10個(gè)細(xì)菌/1個(gè)變形蟲(chóng)）將各種自由生 活的變形蟲(chóng)置于與假單胞菌的共培養(yǎng)中（時(shí)間〇小時(shí)=T0)。每3小時(shí)采集共培養(yǎng)懸浮液 的等分試樣：即T0，T0+3h，T0+6h?；钭冃蜗x(chóng)的百分比通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)和使用Malassez 細(xì)胞的顯微鏡觀察來(lái)測(cè)定。該數(shù)據(jù)表示為在臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)中陰性的活細(xì)胞的％。
[0018] 圖2顯示與棘變形蟲(chóng)和哈氏蟲(chóng)但不與Willaertia共培養(yǎng)的假單胞菌的生長(zhǎng)。
[0019] 將變形蟲(chóng)（5X104個(gè)）懸浮在水中并接種至孔中。1小時(shí)后，將假單胞菌添加至孔 中，以便實(shí)現(xiàn)如小圖A中所示的各種MOI。將共培養(yǎng)物在30°C孵育并在24小時(shí)和48小時(shí) 后檢查。A.注意在含有Willaertia與假單胞菌的孔中不存在細(xì)菌增殖。B.將含有100個(gè) 細(xì)菌/1個(gè)變形蟲(chóng)和10個(gè)細(xì)菌/1個(gè)變形蟲(chóng)（分別為M01100和M0110)的孔的100 yl上清 液連續(xù)稀釋（用無(wú)菌去離子水的稀釋度范圍為1〇_6至1〇_8)，并接種到TSA瓊脂上。注意， 在與Willaertia magna(W)共培養(yǎng)的上清液中不存在細(xì)菌菌落的生長(zhǎng)，以及，相反地，在哈 氏蟲(chóng)（H)存在的情況下假單胞菌的強(qiáng)烈生長(zhǎng)。
[0020] 圖3顯示在與各種變形蟲(chóng)屬包括Willaertia屬（Willaertia magna- "交叉"符 號(hào)X)共培養(yǎng)獲得的假單胞菌（"菱形"符號(hào)?)的生長(zhǎng)的比較動(dòng)力學(xué)
[0021] 以10的比率（10個(gè)細(xì)菌/1個(gè)變形蟲(chóng)）將各種自由生活的變形蟲(chóng)分別置于與假 單胞菌的共培養(yǎng)中（時(shí)間0小時(shí)=T0)。每3小時(shí)采集共培養(yǎng)懸浮液的等分試樣：即T0， T0+3h，T0+6h，并且如材料和方法部分中所述測(cè)定假單胞菌濃度。僅包含濃度等于共培養(yǎng)的 濃度的假單胞菌細(xì)菌的陽(yáng)性對(duì)照將充當(dāng)培養(yǎng)基中假單胞菌的生長(zhǎng)的對(duì)照。注意與卡氏棘 變形蟲(chóng)（"方形"符號(hào))和蠕形哈氏蟲(chóng)（"三角"符號(hào)▲)的共培養(yǎng)中的細(xì)菌增殖。
[0022] 圖4顯示W(wǎng)illaertia magna對(duì)假單胞菌形成的生物膜的殺生物作用。
[0023] 將假單胞菌和Willaertia magna接種至TSA瓊脂上，并在30°C孵育24小時(shí)。A.如 圖4A中的箭頭所示，假單胞菌生物膜裂解斑塊在Willaertia magna的沉積物上形成并超 出沉積物形成。B.由箭頭所示的生物膜裂解斑塊之前。注意，在右邊，在細(xì)菌膜不存在的情 況下Willaertia magna沉積物的部位。注意，在左邊，假單胞菌的層。

【具體實(shí)施方式】
[0024] 1.材料和方法
[0025] 1. 1. #用的菌株:
[0026] 假單胞菌：使用的菌株是CL5210菌株（Oxoid，F(xiàn)rance)。
[0027] -將其以每周一次亞培養(yǎng)的速度維持在TSA(胰蛋白胨大豆瓊脂）（批號(hào) P05012,0xoid，F(xiàn)rance)上。將該菌株以寬條紋接種到TSA板上，并在30°C下孵育2天。
[0028] _變形蟲(chóng)：使用的菌株屬于三種不同的變形蟲(chóng)種：
[0029] 〇 蠕形哈氏蟲(chóng)，
[0030] 〇 卡氏棘變形蟲(chóng)（ATCC30010)
[0031] 〇 Willaertia magna(以編號(hào) PTA7824 和 PTA7825 保藏于 ATCC 的菌株）
[0032] 將這三種菌株在SCGYEM培養(yǎng)基（血清酪蛋白葡萄糖酵母提取物培養(yǎng)基）上在存 在10%胎牛血清的情況下無(wú)菌培養(yǎng)，以3ml/每管的比例分布在Falcon?管（3033)中。在 維持中，將繁殖形式每8-9天亞培養(yǎng)。對(duì)于共培養(yǎng)，使用3至4天亞培養(yǎng)，以便正好在指數(shù) 生長(zhǎng)期中具有活動(dòng)體。
[0033] 如下獲得SCGYEM培養(yǎng)基：
[0034] > 酪蛋白（Merck 1.02244.010) 10 g Na2HP04 1.325 g KH2P〇4 0.8 g 葡萄糖 2.5 g 酵母提取物(Difco 0127-17-9) 5 g 蒸餾水 900 ml 胎牛血清 100 ml
[0035] 將2. 5ml NaOH(IN)，然后Na2HP04和KH2P04添加至900ml蒸餾水中。將混合物在 熱板上略加熱，然后在磁力攪拌的情況下逐漸添加酪蛋白。酪蛋白溶解后，加入葡萄糖和酵 母提取物。
[0036] 完全溶解后，將混合物依次在玻璃纖維（Sartorius SM6513400)，然后在1 y m膜 (Whatman7190004)上過(guò)濾。然后將培養(yǎng)基等分分裝到玻璃瓶中。將瓶子在120°C下在高壓 滅菌器中滅菌20分鐘。在培養(yǎng)基的最終用途和分配之前，在層流罩中以最終體積10%的比 例無(wú)菌添加胎牛血清。
[0037] 1. 2.假單朐菌的單奪形蟲(chóng)共培養(yǎng)
[0038] 1. 2. 1.細(xì)菌接種物的制各：
[0039] 從TSA上的2天培養(yǎng)物制備無(wú)菌蒸餾水中假單胞菌的懸浮液，從而獲得在550nm 處個(gè)1光密度單位，即l〇9CFU(集落形成單位）/ml的濃度。
[0040] 1. 2. 2.講行單奪形蟲(chóng)共培養(yǎng)
[0041] 在含有3ml高壓滅菌水的細(xì)胞培養(yǎng)管（Falcon K_ 3033)中進(jìn)行共培養(yǎng)。從在 Malassez血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上事先計(jì)數(shù)的無(wú)菌變形蟲(chóng)懸浮液以IX 105個(gè)變形蟲(chóng)/ml的比例進(jìn) 行管的接種。用假單胞菌侵染變形蟲(chóng)通過(guò)固定10的假單胞菌/變形蟲(chóng)比率，即1 X 106個(gè) 細(xì)菌/ml接種培養(yǎng)基而進(jìn)行。侵染后，立即將共培養(yǎng)管以低速離心（760g持續(xù)lOmin)，以促 進(jìn)變形蟲(chóng)和細(xì)菌之間的接觸。l〇min后，將管手動(dòng)重懸，并在30°C下在培養(yǎng)箱中以傾斜位置 孵育。
[0042] 置于共培養(yǎng)中的變形蟲(chóng)和假單胞菌的命運(yùn)通過(guò)以下方式確定：
[0043] 共培養(yǎng)在細(xì)菌侵染后監(jiān)測(cè)6個(gè)小時(shí)。在每個(gè)時(shí)間間隔（每3小時(shí)），將共培養(yǎng)管 取樣，并在渦旋器上劇烈攪拌以便從壁分離變形蟲(chóng)后從變形蟲(chóng)觀點(diǎn)和細(xì)菌觀點(diǎn)兩者進(jìn)行檢 查。對(duì)于每個(gè)檢查的管：
[0044] _變形蟲(chóng)直接在Malassez細(xì)胞上計(jì)數(shù)。
[0045] _假單胞菌濃度通過(guò)在Eppendorf微管中在無(wú)菌蒸饋水中10倍連續(xù)稀釋后直接在 TSA上將培養(yǎng)基鋪出來(lái)測(cè)定。每個(gè)稀釋度以100 ill/每板的比例一式三份在TSA上鋪出。 然后將板在30°C下孵育最少48小時(shí)。TSA的第一個(gè)讀數(shù)在鋪出后24小時(shí)通過(guò)計(jì)數(shù)集落而 進(jìn)行；隨后在第2天第二次讀數(shù)以確認(rèn)。假單胞菌濃度以CFU/ml孵育培養(yǎng)基表示，其考慮 稀釋因子，并假設(shè)各集落對(duì)應(yīng)于稀釋的懸浮液中初始存在的一個(gè)細(xì)菌。
[0046] 對(duì)于每種變形蟲(chóng)屬，將假單胞菌生長(zhǎng)曲線表示為時(shí)間的函數(shù)。
[0047] 此外，假單胞菌對(duì)各種變形蟲(chóng)種可能的細(xì)胞毒性作用以如下方式測(cè)定：
[0048] ?通過(guò)計(jì)數(shù)在臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)中陽(yáng)性的變形蟲(chóng)的比例。該試驗(yàn)在顯微鏡下通過(guò)計(jì) 數(shù)Malassez細(xì)胞中臺(tái)盼藍(lán)陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目/總細(xì)胞的數(shù)目而進(jìn)行。
[0049] 1. 3. Willaertia magna對(duì)假單胞菌牛.物膜的影口向
[0050] 將Willaertia沉積在剛剛在TSA上鋪出的假單胞菌層上。將瓊脂在30°C下放 置24小時(shí)，以便使細(xì)菌膜在瓊脂表面上生長(zhǎng)。然后在光學(xué)顯微鏡（放大倍數(shù)X400)下觀 察瓊脂，以檢測(cè)其內(nèi)可能的細(xì)菌層裂解斑塊的形成。
[0051] 2?結(jié)果
[0052] 2. L Willaertia magna表現(xiàn)耐受假單胞菌
[0053] 假單胞菌對(duì)測(cè)試的各種變形蟲(chóng)種存活的影響通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)來(lái)測(cè)定。非常快 速地，將卡氏棘變形蟲(chóng)置于與細(xì)菌的共培養(yǎng)中后，主要的細(xì)胞毒性作用發(fā)生在這種變形蟲(chóng) 種中，其中共培養(yǎng)3小時(shí)后存活力下降?30% (參見(jiàn)圖1)。相反，當(dāng)將Willaertia magna 置于與假單胞菌的共培養(yǎng)中（包括以維持接近100%存活力孵育長(zhǎng)達(dá)9小時(shí)）時(shí)，從未觀察 到這種現(xiàn)象（圖1)。像Willaertia magna，自由生活的懦形哈氏變形蟲(chóng)在通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)排斥 測(cè)定的存活力方面沒(méi)有表現(xiàn)出任何下降（圖1)。所有這些觀察（無(wú)胞囊形成和無(wú)假單胞菌 誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性）清楚地表明，Willaertia magna和蠕形哈氏蟲(chóng)，與卡氏棘變形蟲(chóng)類型的 其它變形蟲(chóng)種相反，表現(xiàn)出抵抗假單胞菌的初始能力。
[0054] 2. 2Willaertia magna 捕食假單胞菌
[0055] 在存在屬于哈氏蟲(chóng)屬和棘變形蟲(chóng)屬的變形蟲(chóng)的情況下進(jìn)行的假單胞菌共培養(yǎng)的 結(jié)果表明在存在這兩種變形蟲(chóng)屬的情況下的相當(dāng)?shù)脑鲋?，因?yàn)樵?小時(shí)內(nèi)注意到細(xì)菌濃度 的增加（見(jiàn)圖2)。相反（盡管共培養(yǎng)在嚴(yán)格相同的條件下進(jìn)行），與僅含有假單胞菌的對(duì) 照相比，在存在Willaertia magna變形蟲(chóng)的情況下注意到可檢測(cè)的假單胞菌濃度降低約1 個(gè)對(duì)數(shù)（參見(jiàn)圖2和圖3)。所測(cè)量的假單胞菌濃度下降表明Willaertia magna針對(duì)假單 胞菌的大量捕食作用。
[0056] Willaertia magna和懦形哈氏蟲(chóng)存活，但只有Willaertia magna防止細(xì)菌增殖。 Willaertia magna對(duì)假單胞菌的這種作用在圖3和圖4中進(jìn)一步說(shuō)明。在水中孵育48小 時(shí)后，棘變形蟲(chóng)和哈氏蟲(chóng)與細(xì)菌的共培養(yǎng)表明假單胞菌的增殖（注意由于細(xì)菌的增殖導(dǎo) 致的含有假單胞菌和哈氏蟲(chóng)或棘變形蟲(chóng)的孔的渾濁外觀）（圖3,小圖A)。當(dāng)假單胞菌以10 的M0I (10個(gè)細(xì)菌/1個(gè)變形蟲(chóng)）孵育時(shí)，在共培養(yǎng)孔的上清液中測(cè)定的所述細(xì)菌濃度表明 不存在細(xì)菌與Willaertia magna(圖3,小圖B)。
[0057] 圖4還表明Willaertia magna對(duì)假單胞菌的捕食作用。事實(shí)上，在存在 Willaertia magna的情況下24小時(shí)后，其中細(xì)菌層已經(jīng)消失的瓊脂表面顯得非常清楚 (這些區(qū)域在此被稱為細(xì)菌層/生物膜裂解斑塊-圖4,小圖A)。瓊脂的顯微鏡檢查也顯 示，Willaertia magna集中在這個(gè)裂解斑塊的限度；這種效應(yīng)也顯示在圖4,小圖B，其中在 Willaertia magna作用下的細(xì)菌層的消失是清楚明顯的。所有這些數(shù)據(jù)和觀察結(jié)果清楚地 表明Willaertia magna針對(duì)已經(jīng)形成生物膜的致病細(xì)菌假單胞菌的捕食作用。
[0058] 參考文獻(xiàn)
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【權(quán)利要求】
1. 用于控制假單胞菌的增殖的方法，其中向人體或動(dòng)物體施加的處理方法除外，其特 征在于其使用Willaertia屬的原生動(dòng)物。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于氣體或液體流或固體表面用Willaertia屬， 特別是Willaertia magna種的原生動(dòng)物處理。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于這些原生動(dòng)物有利地對(duì)應(yīng)于以編號(hào) PTA7824保藏于ATCC的菌株或以編號(hào)PTA7825保藏于ATCC的菌株。
4. 如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于其實(shí)施用于衛(wèi)生用水或工業(yè)用水 分配網(wǎng)絡(luò)、用于工業(yè)廠房的冷卻回路或空調(diào)網(wǎng)絡(luò)的消毒中。
5. 如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于其實(shí)施用于控制水管，或可能與 人或動(dòng)物食品接觸的表面中生物膜的形成。
6. 含有Willaertia屬、特別是Willaertia magna種的原生動(dòng)物的消毒劑作為對(duì)假單 胞菌的殺生物劑的用途，其中向人體或動(dòng)物體施加的處理用途除外。
7. 如權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于所述原生動(dòng)物對(duì)應(yīng)于以編號(hào)PTA7824保藏于 ATCC的菌株或以編號(hào)PTA7825保藏于ATCC的菌株。
8. 如權(quán)利要求6或7所述的用途，其特征在于所述消毒劑為水溶液或懸浮液的形式。
【文檔編號(hào)】A01N63/00GK104302182SQ201280062183
【公開(kāi)日】2015年1月21日 申請(qǐng)日期:2012年12月20日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月20日
【發(fā)明者】F·普拉松, S·博德納克 申請(qǐng)人:阿莫巴