專(zhuān)利名稱(chēng)：一種發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物保健飼料的制備，具體地說(shuō)，是一種發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，屬于飼料技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展，抗生素等藥品的大量使用，飼料安全(食品安全)問(wèn)題已成為養(yǎng)殖業(yè)和消費(fèi)者共同關(guān)注的焦點(diǎn)。世界發(fā)達(dá)國(guó)家政府相繼下達(dá)了對(duì)抗生素使用的限令和禁令。歐洲國(guó)家近十年來(lái)全面禁止在飼料中添加抗生素，我國(guó)在飼料中批準(zhǔn)使用的抗生素種類(lèi)也在逐漸減少。面對(duì)如此形勢(shì)，我們必須從源頭做起，而發(fā)酵飼料是一條很好的途徑。
發(fā)酵飼料是指在人工控制條件下，有益微生物通過(guò)自身的代謝活動(dòng)，將植物性、動(dòng)物性和礦物性原料分解或轉(zhuǎn)化為微生物菌體蛋白、生物活性肽、氨基酸、免疫增強(qiáng)劑、益生菌、有機(jī)酸、維生素、復(fù)合酶制劑和未知生長(zhǎng)因子(⑶F)為一體的生物安全飼料。這是一個(gè)體外生物作用的過(guò)程，相當(dāng)于消化器官的體外延長(zhǎng)和消化時(shí)間的增加。經(jīng)體外預(yù)消化后的飼料氣味酸香，易于消化、吸收，從而提高了飼料的適口性和消化吸收利用率，加速了動(dòng)物的健康生長(zhǎng)，降低飼料成本。除此之外，通過(guò)發(fā)酵過(guò)程，還可消除原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子、有毒、有害物質(zhì)，還能大大減少抗生素等藥物類(lèi)添加劑的使用，從而達(dá)到安全飼喂的目的。誠(chéng)然，并非所有發(fā)酵飼料都是“安全的發(fā)酵飼料”。目前，我國(guó)發(fā)酵飼料生產(chǎn)面臨如下問(wèn)題發(fā)酵設(shè)備落后、專(zhuān)業(yè)人員缺乏；管理、衛(wèi)生條件差；危險(xiǎn)的生料發(fā)酵。所謂“生料”是指沒(méi)有進(jìn)行消毒的原料，這將導(dǎo)致原料中的毒素不能被徹底脫除。在發(fā)酵飼料中，添加免疫星(主要成分為甘露寡糖>20%，β-葡聚糖>20%)等霉菌毒素吸附劑，提高發(fā)酵飼料安全性的報(bào)道，至今未見(jiàn)有相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，對(duì)水產(chǎn)全價(jià)飼料進(jìn)行發(fā)酵，安全可靠，綠色環(huán)保水產(chǎn)動(dòng)物用發(fā)酵飼料。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，本發(fā)明包括以下步驟
(1)一級(jí)菌種制備
從產(chǎn)朊假絲酵母菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)酵母菌，接種到固體酵母菌種子培養(yǎng)基中，28 35°C培養(yǎng)箱下,培養(yǎng)24 48小時(shí)后,制得酵母菌一級(jí)菌種；從乳酸菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)乳酸菌，接種到盛有乳酸菌液體種子培養(yǎng)基三角瓶中，35 40°C下，靜置培養(yǎng)24 48小時(shí)，制得乳酸菌一級(jí)菌種；
(2)二級(jí)菌種制備
將步驟(I)中制得的酵母菌菌液按O. 5 5%體積比的接種量接入盛有液體酵母菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，通氣攪拌發(fā)酵24 72小時(shí)，溫度為28 37°C，制得酵母菌二級(jí)菌種；將步驟(I)制得的乳酸菌菌液按O. 5 5%體積比的接種量接入盛有液體乳酸菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，靜置培養(yǎng)24 48小時(shí)，溫度為35 40°C，制得乳酸菌二級(jí)菌種；
(3)三級(jí)菌種制備
按2 10%體積比的接種量將步驟(2)中制得的酵母菌菌液接入盛有酵母菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，調(diào)整PH值為6. 5 7. 5，通氣攪拌發(fā)酵24 72小時(shí)，制得酵母菌三級(jí)菌種；按2 10%體積比的接種量將步驟(2)中制得的乳酸菌菌液接入盛有乳酸菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，調(diào)整PH值為5. 5 6，攪拌發(fā)酵24 72小時(shí)，制得乳酸菌三級(jí)菌種；
(4)接種
將豆柏60 75%，玉米粉10 20%，麩皮5 10%，脫核酵母3 10%，免疫星I 8%，植物油Γ3%,食鹽O. I O. 5%,磷酸二氫鈣O. 5 1%，水產(chǎn)多礦O. 05 O. 2%, 50%氯化膽堿O. I O. 3%混合制備基礎(chǔ)飼料，將步驟(3)所得的乳酸菌三級(jí)菌種和酵母菌三級(jí)菌種分別以O(shè). 25 27。的 質(zhì)量分?jǐn)?shù)接種至基礎(chǔ)飼料，并混合均勻，調(diào)節(jié)水分至終濃度為34 38% ；
(5)包裝
將(4)中的飼料裝入已安置單向閥的塑料袋后，密閉封裝，室溫下，自然發(fā)酵1(Γ25天，即得成品。上述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，步驟(I)中所述產(chǎn)朊假絲酵母菌斜面培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖5g/L，蛋白胨2g/L，酵母膏l(xiāng)g/L，氯化鈉O. 5g/L，瓊脂15g/L，酵母菌斜面培養(yǎng)基的pH為6. 5 7. 5，滅菌條件115°C下滅菌20min ;所述乳酸菌斜面培養(yǎng)基包括以下組分脫脂奶粉100. Og/L，酵母粉lg/L，K2HP04 5g/L，瓊脂15g/L，滅菌條件115°C下滅菌20min。上述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，步驟(2)中所述酵母菌種子培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖 10 g/L,尿素 lg/L, K2HPO4 O. lg/L, MgSO4 · 7H20 O. lg/L,玉米衆(zhòng) O. 6g,酵母菌種子培養(yǎng)基的pH為6. 5 7. 5 ;所述乳酸菌種子培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖20. Og/L，蛋白胨10.0g/L，牛肉膏10.(^/1，酵母浸膏5.(^/1，無(wú)水乙酸鈉5.(^/1，1(2即04 2. Og/L,檸檬酸氫二銨2. Og/L，MgSO4WH2O 0. 58g/L, MnSO4-H2O 0. 33g/L，乳酸菌種子培養(yǎng)基的pH為6. O 6. 5。上述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，步驟(3)中所述酵母菌基本培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖 10g/L，尿素 lg/L, K2HPO4 O. lg/L, MgSO4 · 7H20 O. 2g/L，玉米漿 0. lg/L,CaCO3 3g/L，pH為6. 5 7. 5 ;所述乳酸菌基本培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖20. 0g/L，蛋白胨10. 0g/L,牛肉膏10. 0g/L,酵母浸膏5. 0g/L,無(wú)水乙酸鈉5. 0g/L,磷酸氫二鉀2. 0g/L,檸檬酸氫二銨 2. 0g/L, MgS04*7H20 0. 58g/L, MnS04*H20 0. 33g/L, pH 為 6. 0 6. 5。上述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，步驟(3)中的PH值用質(zhì)量濃度20 30%的NaOH溶液調(diào)整罐中pH為5. 5 6。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有下述有益效果
1、本發(fā)明摒棄了傳統(tǒng)發(fā)酵對(duì)原料的低要求，特別提出對(duì)有害微生物以及霉菌毒素等的檢測(cè)，從源頭提高飼料的安全性；
2、結(jié)合了微生物發(fā)酵和免疫星的使用，使原料中可能殘留的少量有毒有害物質(zhì)，能夠被徹底脫除，進(jìn)一步鞏固了飼料安全性；
3、脫核酵母的使用，提高了水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力和成活率，增加了產(chǎn)量和養(yǎng)殖收益。4、成品中，有益微生物的大量繁殖，增加了菌體蛋白；乳酸菌產(chǎn)生的乳酸對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的腸道起到一定的調(diào)節(jié)作用；經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間、充分的發(fā)酵，微生物產(chǎn)生了大量的酶類(lèi)、多糖、酚類(lèi)物質(zhì)，既消除了的飼料抗?fàn)I養(yǎng)因子，又將飼料中的大分子被轉(zhuǎn)化為小分子，這樣，飼料中的營(yíng)養(yǎng)可被水產(chǎn)動(dòng)物充分吸收、利用，且其排泄物及排泄物中的養(yǎng)分減少，有利于降低水體環(huán)境的壓力和病原微生物的滋生；
5、所得的成品用途廣，主要用于部分替代中高檔水產(chǎn)動(dòng)物飼料。6、飼料安全可靠，綠色環(huán)保。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制。實(shí)施例I (1)一級(jí)菌種制備
從酵母菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)酵母菌，接種到固體酵母菌種子培養(yǎng)基中，30°C培養(yǎng)箱下，攪拌轉(zhuǎn)速150rpm，培養(yǎng)24小時(shí)后，制得酵母菌一級(jí)菌種，活化并觀察其純度未發(fā)現(xiàn)雜菌；同理，從乳酸菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)乳酸菌，接種到盛有乳酸菌液體種子培養(yǎng)基三角瓶中，35°C下，靜置培養(yǎng)24小時(shí)，制得乳酸菌一級(jí)菌種，活化并鏡檢菌種純度未發(fā)現(xiàn)雜菌；
(2)二級(jí)菌種制備
將步驟(I)中制得的酵母菌菌液按1% (v/v)的接種量接入盛有液體酵母菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，通氣攪拌發(fā)酵24小時(shí)，溫度28°C，攪拌轉(zhuǎn)速280rpm，通氣量2lV(L *min),檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值為O. 65，無(wú)雜菌生成，制得酵母菌二級(jí)菌種；將步驟(I)制得的乳酸菌菌液按1% (v/v)的接種量接入盛有液體乳酸菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，靜置培養(yǎng)24小時(shí)，檢測(cè)菌液濃度和純度，制得乳酸菌二級(jí)菌種，0D600數(shù)值為O. 65，無(wú)雜菌生成；
(3)三級(jí)菌種制備
按2% (v/v)的接種量將步驟(2)中制得的酵母菌菌液接入盛有酵母菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，調(diào)整pH值為6. 5，通氣攪拌發(fā)酵24小時(shí)，溫度為28°C，攪拌轉(zhuǎn)速500rpm，通氣量2L/ (L*min)，檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值為O. 65，無(wú)雜菌生成，制得酵母菌三級(jí)菌種；按2% (v/v)的接種量將步驟(2)中制得的乳酸菌菌液接入盛有乳酸菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，用質(zhì)量濃度25%的NaOH溶液調(diào)整pH值為5. 5，攪拌發(fā)酵24小時(shí)，溫度37°C，攪拌轉(zhuǎn)速70rpm檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值為O. 65，無(wú)雜菌生成，制得乳酸菌三級(jí)菌種；
(4)接種
將豆柏(蛋白含量43%)65%，玉米粉15%，麩皮5%，脫核酵母7%，免疫星3%，植物油2%，食鹽O. 2%，磷酸二氫鈣O. 6%，水產(chǎn)多礦O. 1%，50%氯化膽堿O. 1%混合制備基礎(chǔ)飼料。其中，基礎(chǔ)飼料中的各個(gè)組分按飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的要求，分別檢測(cè)霉菌、細(xì)菌、沙門(mén)氏菌、黃曲霉毒素等指標(biāo)。檢測(cè)合格后，粉碎機(jī)粉碎混合制備基礎(chǔ)飼料。將步驟(3)所得的乳酸菌三級(jí)菌種和酵母菌三級(jí)菌種分別以1%的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，接種至基礎(chǔ)飼料中，并混合均勻，調(diào)節(jié)水分至終濃度為35%。(5)包裝將(4)中的飼料裝入已安置單向閥(袋內(nèi)氣體能排出，袋外氣體不能進(jìn)入，可防止空氣中有害菌的進(jìn)入)的塑料袋后，密閉封裝，30°C下，發(fā)酵15天以上，即得成品。用此飼料替代南美白對(duì)蝦飼料，5cm前，替代10%的傳統(tǒng)蝦料，5cm后替代5%傳統(tǒng)蝦料，結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，料比降低O. 15，發(fā)病率降低8. 6%，減少用藥和換水費(fèi)用146元/畝，提高產(chǎn)量7. 8%。實(shí)施例2
(1)一級(jí)菌種制備
從酵母菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)酵母菌，接種到固體酵母菌種子培養(yǎng)基中，30°C培養(yǎng)箱下，攪拌轉(zhuǎn)速260rpm，培養(yǎng)24小時(shí)后，制得酵母菌一級(jí)菌種，活化并觀察其純度，0D600數(shù)值為O. 60，無(wú)雜菌生成；同理，從乳酸菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)乳酸菌，接種到盛有乳酸菌液體種子培養(yǎng)基三角瓶中，37°C下，靜置培養(yǎng)24小時(shí)，活化并鏡檢菌 種純度，0D600數(shù)值為O. 65，制得乳酸菌一級(jí)菌種，無(wú)雜菌生成；
(2)二級(jí)菌種制備
將步驟(I)中制得的酵母菌一級(jí)菌種按2% (v/v)的接種量接入盛有液體酵母菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，通氣攪拌發(fā)酵48小時(shí)，溫度37°C，攪拌轉(zhuǎn)速500rpm，通氣量3L/(L · min)，檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值為O. 75，無(wú)雜菌生成，制得酵母菌二級(jí)菌種；將步驟(I)制得的乳酸菌一級(jí)菌種按2% (v/v)的接種量接入盛有液體乳酸菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，靜置培養(yǎng)48小時(shí)，制得乳酸菌二級(jí)菌種，檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值為O. 71，無(wú)雜菌生成；
(3)三級(jí)菌種制備
按2% (v/v)的接種量將步驟(2)中制得的酵母菌二級(jí)菌種接入盛有酵母菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，調(diào)整pH值為7.0，通氣攪拌發(fā)酵48小時(shí)，溫度為37°C，攪拌轉(zhuǎn)速500rpm，通氣量4L/ (L*min)檢測(cè)菌液濃度和純度，制得酵母菌三級(jí)菌種；按3% (v/v)的接種量將步驟(2)中制得的乳酸菌二級(jí)菌種接入盛有乳酸菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，用質(zhì)量濃度20%的NaOH溶液調(diào)整pH值為5. 8，攪拌發(fā)酵48小時(shí)，溫度38°C，攪拌轉(zhuǎn)速I(mǎi)OOrpm ;檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值為O. 65，無(wú)雜菌生成，制得乳酸菌三級(jí)菌種；
(4)接種
將豆柏(蛋白含量43%)70%，玉米粉8%，麩皮5%，脫核酵母10%，免疫星3%，植物油1%，食鹽O. 3，磷酸二氫鈣O. 5%，水產(chǎn)多礦O. 1%，50%氯化膽堿O. 1%混合制備基礎(chǔ)飼料，其中，基礎(chǔ)飼料中的各個(gè)組分按飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的要求，分別檢測(cè)霉菌、細(xì)菌、沙門(mén)氏菌、黃曲霉毒素等指標(biāo)。檢測(cè)合格后，粉碎機(jī)粉碎混合制備基礎(chǔ)飼料。將步驟(3)所得的乳酸菌三級(jí)菌種以
O.25%的質(zhì)量分?jǐn)?shù)接種至基礎(chǔ)飼料，酵母菌三級(jí)菌種以2. 5%的質(zhì)量分?jǐn)?shù)接種至基礎(chǔ)飼料，并混合均勻，調(diào)節(jié)水分至終濃度為36%。(5)包裝
將(4)中的飼料裝入已安置單向閥(袋內(nèi)氣體能排出，袋外氣體不能進(jìn)入，可防止空氣中有害菌的進(jìn)入)的塑料袋后，密閉封裝，37°C下，發(fā)酵12天以上，即可使用。用此飼料5%取代傳統(tǒng)鰻魚(yú)料飼喂日本鰻魚(yú)，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組中，鰻魚(yú)生長(zhǎng)速度較快，提前5天上市；發(fā)病率和死亡率分別6. 3%和4. 1%，其中，腸炎發(fā)病率降低15. 6%。實(shí)施例3(1)一級(jí)菌種制備
從酵母菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)酵母菌，接種到固體酵母菌種子培養(yǎng)基中，35°C培養(yǎng)箱下，攪拌轉(zhuǎn)速200rpm，培養(yǎng)24小時(shí)后，制得酵母菌一級(jí)菌種，活化并觀察其純度，0D600數(shù)值為O. 75，無(wú)雜菌生成；同理，從乳酸菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)乳酸菌，接種到盛有乳酸菌液體種子培養(yǎng)基三角瓶中，35°C下，靜置培養(yǎng)24小時(shí)，制得乳酸菌一級(jí)菌種，活化并鏡檢菌種純度，0D600數(shù)值為O. 80，無(wú)雜菌生成；
(2)二級(jí)菌種制備
將步驟(I)中制得的酵母菌一級(jí)菌種按3% (v/v)的接種量接入盛有液體酵母菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，通氣攪拌發(fā)酵43小時(shí)，溫度30°C，攪拌轉(zhuǎn)速350rpm，通氣量2. 5L/(L · min)，檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值為O. 75，無(wú)雜菌生成，制得酵母菌二級(jí)菌種；將步驟(I)制得的乳酸菌一級(jí)菌種按3% (v/v)的接種量接入盛有液體乳酸菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，靜置培養(yǎng)43小時(shí)，制得乳酸菌二級(jí)菌種，檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值 為O. 70，無(wú)雜菌生成；
(3)三級(jí)菌種制備
按5% (v/v)的接種量將步驟(2)中制得的酵母菌二級(jí)菌種接入盛有酵母菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，調(diào)整pH值為6. 5，通氣攪拌發(fā)酵24小時(shí)，溫度為30°C，攪拌轉(zhuǎn)速400rpm，通氣量4L/ (L -min)檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值為O. 80，無(wú)雜菌生成，制得酵母菌三級(jí)菌種；按4% (v/v)的接種量將步驟(2)中制得的乳酸菌二級(jí)菌種接入盛有乳酸菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，用質(zhì)量濃度30%的NaOH溶液調(diào)整pH值為5. 5，攪拌發(fā)酵24小時(shí)，溫度40°C，攪拌轉(zhuǎn)速50rpm，檢測(cè)菌液濃度和純度，0D600數(shù)值為O. 65，無(wú)雜菌生成，制得乳酸菌三級(jí)菌種；
(4)接種
將豆柏(蛋白含量43%)65%，玉米粉10%，麩皮7%，脫核酵母8%，免疫星3%，植物油3%，食鹽O. 5，磷酸二氫鈣O. 8%，水產(chǎn)多礦O. 2%，50%氯化膽堿O. 3%混合制備基礎(chǔ)飼料，其中，基礎(chǔ)飼料中的各個(gè)組分按飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的要求，分別檢測(cè)霉菌、細(xì)菌、沙門(mén)氏菌、黃曲霉毒素等指標(biāo)。檢測(cè)合格后，粉碎機(jī)粉碎混合制備基礎(chǔ)飼料。將步驟(3)所得的乳酸菌三級(jí)菌種和酵母菌三級(jí)菌種分別以I. 1%的質(zhì)量分?jǐn)?shù)接種至基礎(chǔ)飼料中，并混合均勻，調(diào)節(jié)水分至終濃度為38%。(5)包裝
將(4)中的飼料裝入已安置單向閥(袋內(nèi)氣體能排出，袋外氣體不能進(jìn)入，可防止空氣中有害菌的進(jìn)入)的塑料袋后，密閉封裝，28°C下，發(fā)酵16天以上，即可使用。用此飼料5%替代傳統(tǒng)草蝦飼料投喂草蝦，成活率提高7. 3%，畝產(chǎn)增加9. 5%，草蝦腸炎疾病減少18. 2%，每周減少換水一次，蝦體勻稱(chēng)，活力強(qiáng)，賣(mài)相好。
權(quán)利要求
1.一種發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，其特征在于，依次包括下述步驟 (1)一級(jí)菌種制備 從產(chǎn)朊假絲酵母菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)酵母菌，接種到固體酵母菌種子培養(yǎng)基中，28 35°C培養(yǎng)箱下,培養(yǎng)24 48小時(shí)后,制得酵母菌一級(jí)菌種；從乳酸菌試管固體斜面培養(yǎng)基上挑取一環(huán)乳酸菌，接種到盛有乳酸菌液體種子培養(yǎng)基三角瓶中，35 40°C下，靜置培養(yǎng)24 48小時(shí)，制得乳酸菌一級(jí)菌種； (2)二級(jí)菌種制備 將步驟(I)中制得的酵母菌菌液按O. 5 5%體積比的接種量接入盛有液體酵母菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，通氣攪拌發(fā)酵24 72小時(shí)，溫度為28 37°C，制得酵母菌二級(jí)菌種；將步驟(I)制得的乳酸菌菌液按O. 5 5%體積比的接種量接入盛有液體乳酸菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，靜置培養(yǎng)24 48小時(shí)，溫度為35 40°C，制得乳酸菌二級(jí)菌種； (3)三級(jí)菌種制備 按2 10%體積比的接種量將步驟(2)中制得的酵母菌菌液接入盛有酵母菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，調(diào)整PH值為6. 5 7. 5，通氣攪拌發(fā)酵24 72小時(shí)，制得酵母菌三級(jí)菌種；按2 10%體積比的接種量將步驟(2)中制得的乳酸菌菌液接入盛有乳酸菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，調(diào)整PH值為5. 5 6，攪拌發(fā)酵24 72小時(shí)，制得乳酸菌三級(jí)菌種； (4)接種 將豆柏60 75%，玉米粉10 20%，麩皮5 10%，脫核酵母3 10%，免疫星I 8%，植物油Γ3%,食鹽O. I O. 5%,磷酸二氫鈣O. 5 1%，水產(chǎn)多礦O. 05 O. 2%, 50%氯化膽堿O. I O. 3%混合制備基礎(chǔ)飼料，將步驟(3)所得的乳酸菌三級(jí)菌種和酵母菌三級(jí)菌種分別以O(shè). 25 27。的質(zhì)量分?jǐn)?shù)接種至基礎(chǔ)飼料，并混合均勻，調(diào)節(jié)水分至終濃度為34 38% ； (5)包裝 將(4)中的飼料裝入已安置單向閥的塑料袋后，密閉封裝，室溫下，自然發(fā)酵1(Γ25天，即得成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述產(chǎn)朊假絲酵母菌斜面培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖5g/L，蛋白胨2g/L，酵母膏l(xiāng)g/L，氯化鈉O. 5g/L，瓊脂15g/L，酵母菌斜面培養(yǎng)基的pH為6. 5 7. 5。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述乳酸菌斜面培養(yǎng)基包括以下組分脫脂奶粉100. Og/L，酵母粉lg/L，K2HPO4 5g/L，瓊脂15g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述酵母菌種子培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖10 g/L，尿素lg/L，K2HPO4 O. lg/L，MgSO4 ·7Η20O.lg/L,玉米漿0. 6g，酵母菌種子培養(yǎng)基的pH為6. 5 7. 5。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述乳酸菌種子培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖20. Og/L，蛋白胨10. Og/L，牛肉膏10. Og/L,酵母浸膏 5. Og/L，無(wú)水乙酸鈉 5. 0g/L, K2HPO4 2. 0g/L，檸檬酸氫二銨 2. 0g/L, MgSO4·7Η200.58g/L，MnS04*H20 0. 33g/L，乳酸菌種子培養(yǎng)基的 pH 為 6. O 6. 5。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述酵母菌基本培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖10g/L，尿素lg/L，K2HPO4 0. lg/L, MgSO4 · 7H20O.2g/L,玉米漿 0. lg/L, CaCO3 3g/L, pH 為 6. 5 7. 5。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述乳酸菌基本培養(yǎng)基包括以下組分葡萄糖20. Og/L，蛋白胨10. Og/L，牛肉膏10. Og/L，酵母浸膏5. Og/L，無(wú)水乙酸鈉5. Og/L，磷酸氫二鉀2. 0g/L，檸檬酸氫二銨2. 0g/L, MgSO4·7Η200. 58g/L, MnS04.H20 0. 33g/L, pH 為 6. 0 6. 5。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，其特征在于，步驟(3)中的調(diào)節(jié)PH值采用質(zhì)量濃度20 30%的NaOH溶液調(diào)節(jié)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種發(fā)酵型水產(chǎn)保健飼料的制備方法，旨在提供一種安全可靠，綠色環(huán)保水產(chǎn)動(dòng)物用發(fā)酵飼料；其制備方法，包括下述步驟1)一級(jí)菌種制備；(2)二級(jí)菌種制備，將步驟1)中制得的酵母菌菌液和乳酸菌菌液按0.5～5%體積比的接種量接入盛有液體酵母菌種子培養(yǎng)基的種子發(fā)酵罐中，靜置培養(yǎng)；3)三級(jí)菌種制備，按2～10%體積的接種量將步驟2)中制得比酵母菌菌液和乳酸菌菌液的酵母菌菌液分別接入盛有酵母菌基本培養(yǎng)基和乳酸菌基本培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中培養(yǎng)；4)接種將步驟3)所得的乳酸菌三級(jí)菌種和酵母菌三級(jí)菌種分別以0.25~2%的質(zhì)量分?jǐn)?shù)接種至基礎(chǔ)飼料，并混合均勻，調(diào)節(jié)水分至終濃度為34~38%；屬于飼料技術(shù)領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A23K1/18GK102940145SQ20121049789
公開(kāi)日2013年2月27日 申請(qǐng)日期2012年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月29日
發(fā)明者王華榮, 惲輝, 余忠麗, 趙大偉, 程林春, 李偉霞, 張玲, 耿玉靜 申請(qǐng)人:廣東希普生物科技股份有限公司