一種促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)分生孢子的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)分生孢子的方法。該促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)分生孢子的方法，包括將冬蟲(chóng)夏草菌在營(yíng)養(yǎng)刺激和環(huán)境刺激的條件下進(jìn)行培養(yǎng)的步驟；所述步驟包括：1）將冬蟲(chóng)夏草菌在富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基上在黑暗條件下培養(yǎng)，得到菌絲體；2）將所述步驟1）的菌絲體轉(zhuǎn)移到次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基上進(jìn)行下述至少一種刺激培養(yǎng)，得到分生孢子：冷激培養(yǎng)、熱激培養(yǎng)、溫度周期刺激培養(yǎng)、光周期刺激培養(yǎng)、溫度光周期刺激培養(yǎng)和氧化刺激培養(yǎng)；所述富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基的氮源含量高于所述次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基，所述冬蟲(chóng)夏草菌在富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基中的菌落生長(zhǎng)速率大于所述冬蟲(chóng)夏草菌在次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基中的菌落生長(zhǎng)速率。
【專利說(shuō)明】一種促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)分生孢子的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)分生孢子的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]冬蟲(chóng)夏草菌[Ophiocordycepssinensis (Berk.) G.H.Sung, J.M.Sung, Hywel-Jones&Spatafora ( = Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc.)]是青藏高原特有的名貴藥用菌，現(xiàn)代研究表明冬蟲(chóng)夏草具有多種藥理作用，具有很好的應(yīng)用前景。盡管已經(jīng)對(duì)冬蟲(chóng)夏草做了大量研究工作，但迄今在人工栽培方面還存在明顯的技術(shù)難題。解決這些問(wèn)題需要更全面地掌握冬蟲(chóng)夏草菌的生物學(xué)性狀。因此，冬蟲(chóng)夏草菌生物學(xué)研究技術(shù)的創(chuàng)新，具有重要的理論和實(shí)踐意義。
[0003]在冬蟲(chóng)夏草菌培養(yǎng)研究中，分生孢子的研究與菌劑的制備密切相關(guān)。目前，冬蟲(chóng)夏草菌分生孢子研究中的主要困難是分生孢子產(chǎn)量少、周期長(zhǎng)，使人工培養(yǎng)獲得分生孢子，以及分生孢子懸液的制備一直沒(méi)有很好地得到解決。如何通過(guò)培養(yǎng)獲得大量分生孢子，已逐漸成為冬蟲(chóng)夏草菌生物學(xué)研究的瓶頸。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)生分生孢子的方法。
[0005]本發(fā)明所提供的促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)生分生孢子的方法，包括將冬蟲(chóng)夏草菌在營(yíng)養(yǎng)刺激和環(huán)境刺激的條件下進(jìn)行培養(yǎng)的步驟；所述步驟包括:
[0006]I)將冬蟲(chóng)夏草菌在`富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基上在黑暗條件下培養(yǎng)，得到菌絲體；
[0007]2)將所述步驟I)的菌絲體轉(zhuǎn)移到次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基上進(jìn)行下述至少一種刺激培養(yǎng)，得到分生孢子:冷激培養(yǎng)、熱激培養(yǎng)、溫度周期刺激培養(yǎng)、光周期刺激培養(yǎng)、溫度光周期刺激培養(yǎng)和氧化刺激培養(yǎng)；所述富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基的氮源含量高于所述次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基，所述冬蟲(chóng)夏草菌在富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基中的菌落生長(zhǎng)速率大于所述冬蟲(chóng)夏草菌在次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基中的菌落生長(zhǎng)速率；
[0008]所述冷激培養(yǎng)是將所述菌絲體先置于所述菌絲體能夠存活但不利于生長(zhǎng)的低溫中黑暗培養(yǎng)再置于適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度中黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子；
[0009]所述熱激培養(yǎng)是將所述菌絲體先置于所述菌絲體能夠存活但不利于生長(zhǎng)的高溫中黑暗培養(yǎng)再置于所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度中黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子；
[0010]所述溫度周期刺激培養(yǎng)是將所述菌絲體置于所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度和所述高溫交替的環(huán)境中黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子，或?qū)⑺鼍z體置于所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度和所述低溫交替的環(huán)境中黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子；
[0011]所述光周期刺激培養(yǎng)是將所述菌絲體置于所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度在每天既有光照又有黑暗的條件下培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子；
[0012]所述溫度光周期刺激培養(yǎng)是將所述菌絲體置于所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度和所述高溫交替的環(huán)境中在每天既有光照又有黑暗的條件下培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子，或?qū)⑺鼍z體置于所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度和低溫交替的環(huán)境中在每天既有光照又有黑暗的條件下培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子；
[0013]所述氧化刺激培養(yǎng)是將所述菌絲體先置于具有氧化脅迫的環(huán)境中培養(yǎng)再置于所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度中黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子。
[0014]本發(fā)明中，所述營(yíng)養(yǎng)刺激是指將菌絲體在所述富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基進(jìn)行菌絲體培養(yǎng)，在所述次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基中進(jìn)行產(chǎn)孢培養(yǎng)。
[0015]所述冬蟲(chóng)夏草菌的適宜生長(zhǎng)溫度可為10 - 23°C，如15 - 18°C ；
[0016]所述低溫是低于所述菌絲體生長(zhǎng)的適宜溫度且所述菌絲體能夠存活但不利于生長(zhǎng)的溫度，如-40-4°C ;所述高溫是高于所述菌絲體生長(zhǎng)的適宜溫度且所述菌絲體能夠存活但不利于生長(zhǎng)的溫度，如24 - 30°C。所述低溫具體可為-20-4°C，所述高溫具體可為28 - 30。。。
[0017]上述方法中，所述冷激培養(yǎng)可為將所述菌絲體先置于所述低溫中黑暗培養(yǎng)I天再置于所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度中黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子；
[0018]所述熱激培養(yǎng)可為將所述菌絲體先置于所述高溫中黑暗培養(yǎng)I小時(shí)再置于適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度中黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子；
[0019]所述溫度周期刺激培養(yǎng)中，所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度和所述高溫交替是第奇數(shù)天的溫度為所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度，第偶數(shù)天的溫度為所述高溫；或是第偶數(shù)天的溫度為所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度，第奇數(shù)天的溫度為所述高溫；
[0020]所述溫度周期刺激培養(yǎng)中，所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度和所述低溫交替是第奇數(shù)天的溫度為所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度，第偶數(shù)天的溫度為所述低溫；或是第偶數(shù)天的溫度為所述適宜所述 菌絲體生長(zhǎng)的溫度，第奇數(shù)天的溫度為所述低溫；
[0021]所述溫度光周期刺激培養(yǎng)中，所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度和所述高溫交替是每天光照條件下的溫度為所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度，每天黑暗條件下的溫度為所述高溫；
[0022]所述溫度光周期刺激培養(yǎng)中，所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度和所述低溫交替是每天光照條件下的溫度為所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度，每天黑暗條件下的溫度為所述低溫；
[0023]所述光周期刺激培養(yǎng)和所述溫度光周期刺激培養(yǎng)中，所述每天既有光照又有黑暗的條件可為每天16小時(shí)光照8小時(shí)黑暗；
[0024]所述氧化刺激培養(yǎng)可為將所述菌絲體先置于20 - 25mM雙氧水中黑暗培養(yǎng)5分鐘再置于所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度中黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子。
[0025]上述方法中，所述步驟I)中的培養(yǎng)溫度為所述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度。
[0026]上述方法中，所述光照的強(qiáng)度可為48001UX。
[0027]上述方法中，所述冷激培養(yǎng)、熱激培養(yǎng)和氧化刺激培養(yǎng)中，所述再置于適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度中黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子的時(shí)間具體可為14天。所述溫度周期刺激培養(yǎng)、所述光周期刺激培養(yǎng)和所述溫度光周期刺激培養(yǎng)的培養(yǎng)時(shí)間均為14天。
[0028]上述方法中，I升所述富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基具體可由如下物質(zhì)制成:復(fù)合氮源
10.0 - 50.0克，土豆200.0克，單糖或雙糖20.0克，酵母提取物1.0 - 2.0克，蛋白胨1.0 -5.0克，蠶蛹粉10.0 - 25.0克，瓊脂和水；所述復(fù)合氮源為麥麩、奶粉、豆柏或玉米粉；所述單糖或雙糖為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖或乳糖。其中，所述瓊脂的質(zhì)量只要達(dá)到形成固體培養(yǎng)基的量即可，所述水用于將培養(yǎng)基體積定容至I升。
[0029]I升所述次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基具體可由如下物質(zhì)制成:土豆200.0克，單糖或雙糖
20.0克，瓊脂和水；所述單糖或雙糖為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖或乳糖。其中，所述瓊脂的質(zhì)量只要達(dá)到形成固體培養(yǎng)基的量即可，所述水用于將培養(yǎng)基體積定容至I升。
[0030]本發(fā)明還提供了只通過(guò)營(yíng)養(yǎng)刺激促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)分生孢子的方法。
[0031]該促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)分生孢子的方法，包括如下步驟:
[0032]I)將冬蟲(chóng)夏草菌在富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基上在黑暗條件下培養(yǎng)，得到菌絲體；
[0033]2)將所述步驟I)的菌絲體轉(zhuǎn)移到次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基上黑暗培養(yǎng)至產(chǎn)生分生孢子;
[0034]所述富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)元素含量高于所述次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基，所述冬蟲(chóng)夏草菌在富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基中的菌落生長(zhǎng)速率是所述冬蟲(chóng)夏草菌在次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基中的菌落生長(zhǎng)速率的1.14-1.89倍。
[0035]所述步驟I)和步驟2)中的培養(yǎng)溫度均可為上述適宜所述菌絲體生長(zhǎng)的溫度，如10-23。。或 15-18。。。
[0036]上述所有方法中，所述冬蟲(chóng)夏草菌具體可為冬蟲(chóng)夏草菌1621和冬蟲(chóng)夏草762 ;所述冬蟲(chóng)夏草菌1621在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCC N0.6445 ;所述冬蟲(chóng)夏草762在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCC N0.279·3。所述菌落生長(zhǎng)速率具體可為所述冬蟲(chóng)夏草菌在15°C黑暗培養(yǎng)70天內(nèi)的菌落生長(zhǎng)速率。所述冬蟲(chóng)夏草菌在富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基中的菌落生長(zhǎng)速率可為所述冬蟲(chóng)夏草菌在次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基中的菌落生長(zhǎng)速率的1.14-1.89倍，如1.66-1.84倍、1.66倍或1.84倍。
[0037]冬蟲(chóng)夏草菌(Ophiocordyceps sinensis) 1621已于2012年9月4日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC)。
[0038]上述所有方法中，為了便于所述冬蟲(chóng)夏草菌的轉(zhuǎn)移以及收集分生孢子，所述富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基和所述次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基表面上均可鋪有能截留所述冬蟲(chóng)夏草菌的分生孢子的半透膜，所述冬蟲(chóng)夏草菌接種到所述半透膜上，所述半透膜能透過(guò)培養(yǎng)基中組分但能截留所述冬蟲(chóng)夏草菌的分生孢子。
[0039]本發(fā)明的方法通過(guò)營(yíng)養(yǎng)刺激培養(yǎng)冬蟲(chóng)夏草菌，或者通過(guò)營(yíng)養(yǎng)刺激和環(huán)境刺激的雙重刺激培養(yǎng)來(lái)促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)生分生孢子。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，采用本發(fā)明提供的方法制備分生孢子，其1621產(chǎn)率為每45 - 50mg (干重)菌種得到不低于2.78X IO6個(gè)分生孢子。本發(fā)明的產(chǎn)孢方法操作簡(jiǎn)單、省時(shí)省力，對(duì)設(shè)備、試劑的要求很低，一般的實(shí)驗(yàn)室條件即可滿足要求；另一方面，冬蟲(chóng)夏草菌分生孢子與冬蟲(chóng)夏草菌對(duì)蝠蛾幼蟲(chóng)的侵染有密切關(guān)系，獲得大量分生孢子將促進(jìn)冬蟲(chóng)夏草菌生理學(xué)、冬蟲(chóng)夏草菌菌劑制備和冬蟲(chóng)夏草半人工培植的研究。
[0040]保藏說(shuō)明
[0041]菌種名稱:冬蟲(chóng)夏草菌
[0042]拉丁名:0phiocordycepssinensis
[0043]菌株編號(hào):1621[0044]保藏機(jī)構(gòu):中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心
[0045]保藏機(jī)構(gòu)簡(jiǎn)稱:CGMCC
[0046]地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)
[0047]保藏日期:2012年9月4日
[0048]保藏中心登記入冊(cè)編號(hào):CGMCC N0.6445
【具體實(shí)施方式】
[0049]下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0050]下述實(shí)施例中用于制備固體培養(yǎng)基平板的培養(yǎng)皿均相同，直徑為9.0cm0[0051 ] 下述實(shí)施例中的培養(yǎng)基如下:
[0052]每IL富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基由如下物質(zhì)制成:50.0g麥麩、200.0g 土豆、20.0g葡萄糖、5.0g魚(yú)蛋白胨、1.0g酵母提取物、25.0g蠶蛹粉、20.0g瓊脂和水。其中，用水將培養(yǎng)基定容至1000mL。
[0053]每IL次營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基由如下物質(zhì)制成:200.0g 土豆,20.0g葡萄糖,20.0g瓊脂和水。其中，用水將培養(yǎng)基定容至1000mL。
[0054]每IL水瓊脂固體培養(yǎng)基由如下物質(zhì)制成:20.0g瓊脂和水。其中，用水將培養(yǎng)基定容至lOOOmL，121°C濕熱滅菌半小時(shí)得到培養(yǎng)基。
[0055]每IL液體菌種培養(yǎng)基由如下物質(zhì)制成:50.0g麥麩,200.0g 土豆,20.0g葡萄糖，
5.0g魚(yú)蛋白胨,1.0g酵母提取物,用水`定容至1000mL。
[0056]每IL固體菌種培養(yǎng)基由如下物質(zhì)制成:50.0g麥麩,200.0g 土豆,20.0g葡萄糖，
5.0g魚(yú)蛋白胨，1.0g酵母提取物，20.0g瓊脂，用水定容至1000mL。
[0057]上述培養(yǎng)基pH自然即可。
[0058]上述富營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基的配制方法如下:將麥麩、蠶蛹粉煮沸10分鐘，加入切成小塊的去皮土豆再煮沸半小時(shí)，然后用紗布過(guò)濾，在濾液中，按上述配方加入其他成分，用水定容至lOOOmL，121°C濕熱滅菌半小時(shí)得到培養(yǎng)基。
[0059]次營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基的配制方法如下:將切成小塊的去皮土豆煮沸20分鐘，然后用紗布過(guò)濾，在濾液中，按上述配方加入其他成分，用水定容至lOOOmL，121°C濕熱滅菌半小時(shí)得到
培養(yǎng)基。
[0060]液體菌種培養(yǎng)基和固體菌種培養(yǎng)基的配制方法如下:將麥麩煮沸10分鐘，加入切成小塊的去皮土豆再煮沸半小時(shí)，然后用紗布過(guò)濾，在濾液中，按上述配方加入其他成分，用水定容至lOOOmL，121°C濕熱滅菌半小時(shí)得到培養(yǎng)基。
[0061 ] 下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。
[0062]下述實(shí)施例中的冬蟲(chóng)夏草菌種液按照如下方法制備:將冬蟲(chóng)夏草菌接種于上述固體菌種培養(yǎng)基，15°C黑暗培養(yǎng)90天，獲得冬蟲(chóng)夏草菌菌種。用無(wú)菌水洗冬蟲(chóng)夏草菌菌種平板，將洗下來(lái)的菌懸液按體積比20%的接種量接種于上述液體菌種培養(yǎng)基中，裝瓶量為三角瓶容積的1/5，然后在18°C，轉(zhuǎn)速100rpm，24小時(shí)黑暗條件下進(jìn)行振蕩培養(yǎng)14天，得到冬蟲(chóng)夏草菌第一菌種液；按體積比10%的接種量，將冬蟲(chóng)夏草第一菌種液接種于新的液體菌種培養(yǎng)基中，其它培養(yǎng)條件同，得到冬蟲(chóng)夏草菌第二菌種液。
[0063]下述實(shí)施例中分生孢子的洗脫方法如下:將玻璃紙上的菌絲體轉(zhuǎn)移至含有10個(gè)玻璃珠的三角瓶中，加入0.1%吐溫80溶液，轉(zhuǎn)速200rpm，劇烈振蕩I小時(shí)洗脫分生孢子，重復(fù)洗脫三次，合并洗脫液。將洗脫液依次通過(guò)150目、300目和500目細(xì)胞篩，得到除去菌絲段的洗脫液，1000Orpm離心10分鐘，獲得分生孢子沉淀，用0.1%吐溫80重新懸浮分生孢子，血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
[0064]下述實(shí)施例中血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法如下:將分生孢子懸液置于血球計(jì)數(shù)板上，顯微鏡下觀察，在400倍放大倍數(shù)下計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)分生孢子數(shù)量，取平均值。
[0065]為了更好地理解本發(fā)明，下面以冬蟲(chóng)夏草菌1621和冬蟲(chóng)夏草762為例闡釋本發(fā)明，這些實(shí)施例用于理解而不是限制本發(fā)明。
[0066]其中，冬蟲(chóng)夏草菌1621是姚一建研究組于2008年8月從中國(guó)青海省果洛州瑪沁縣大武鄉(xiāng)采集得到，已于2012年9月4日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC)，其在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的登記入冊(cè)編號(hào)為 CGMCC N0.6445。
[0067]冬蟲(chóng)夏草菌1621的生物學(xué)特性如下:
[0068]1、形態(tài)學(xué)特性:在固體菌種培養(yǎng)基上，菌落呈雪白色，菌落表面不凸起，有一層細(xì)白致密絨毛狀菌絲體，有皺褶或沒(méi)有皺褶。邊緣有散射狀絨毛菌絲，培養(yǎng)基背面呈明顯的棕褐色。顯微觀察其菌絲體無(wú)色，有隔膜，分枝，寬2.2 - 5.4 μ m(大多數(shù)菌絲寬2.2 - 4.3 μ m)。分生孢子梗為瓶形，無(wú)色，單生或2-8個(gè)簇生，但不形成孢梗束。分生孢子無(wú)色，無(wú)隔膜，腎形或長(zhǎng)橢圓形，5.4- 14.0X3.2 - 5.4μπι (多數(shù)為 5.4 - 14.0 X 3.2 - 4.3 μ m)，單生或 2 - 6個(gè)一群(多數(shù)為2 - 4個(gè)一群)，為一檸檬形粘膜所包圍。處于生長(zhǎng)衰亡期的菌絲及分生孢子逐漸變?yōu)樯詈稚蚝谏?
[0069]2、分子生物學(xué)特性:按照文獻(xiàn)[Jiang，Y.&Yao，Y.-J.(2006) ITSsequence analysis and ascomatal development of Pseudogymnoascus roseus.Mycotaxon.94:55 - 73.]的方法，菌株培養(yǎng)物經(jīng)DNA提取、PCR擴(kuò)增核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)并測(cè)序，其ITS序列如序列表中的序列I所示，該序列與冬蟲(chóng)夏草762的序列一致。
[0070]冬蟲(chóng)夏草762已于2008年12月5日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC)，其在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCC N0.2793，該菌株已公布在中國(guó)專利
【發(fā)明者】姚一建, 任蜀豫 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院微生物研究所